间苯二甲酸二甲酯-5-磺酸钠制备工艺改进的HPLC分析

利用高效液相色谱法对间苯二甲酸二甲酯 - 5 -磺酸钠 (SIPM)合成工艺中的中和反应进行了研究。确定在 2 5℃下 ,中和最佳 p H=5 ,通过中和废液 SIPM及 Na2 SO4 含量测定进行了确证 ,产品收率达 83%。

吴茱萸总生物碱的提取纯化及HPLC含量测定

目的:对吴茱萸生物碱进行提取纯化,并测定其含量,为中药外用制剂提供天然透皮促进剂。方法:利用吴茱萸碱和吴茱萸次碱的溶解性,采用浓度为70%乙醇提取吴茱萸生物碱,用中性氧化铝柱层析进行纯化,采用高效液相色谱法测定其含量。结果:吴茱萸碱的回归方程:y=5501x+35.37(r=0.999 5),线性范围为0.027-1.350μg,线性关系良好;吴茱萸次碱回归方程:y=1970x-4.018(r=0.999 5),线性范围为0.021 4-1.070 0μg,线性关系良好。吴茱萸总生物碱含量可达到86.6%。结论:该提取纯化方法所得样品纯度高,达到了提取有效部位要求,可为中药外用制剂选择天然透皮促进剂提供参考。

HPLC法同时测定不同生长年限、部位西洋参中2类成分

目的建立HPLC法同时测定西洋参中丙二酰基人参皂苷、中性人参皂苷的含有量。方法西洋参80%甲醇提取液的分析采用COSMOSIL 5C18-MS-Ⅱ柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-磷酸缓冲盐,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃,检测波长203 nm。结果丙二酰基人参皂苷、中性人参皂苷在0.010~0.640 mg/mL范围内线性关系良好(r>0.9991),平均加样回收率96.2%~104.6%,RSD 0.74%~2.58%。结论该方法简便、重复性好,可用于西洋参的质量控制。

三黄片中盐酸小檗碱的HPLC含量测定方法研究

建立了三黄片中盐酸小檗C18碱含量的高效液相色谱测定方法。具体方法为:采用中性氧化铝对样品进行了前处理;采用phenomenex-C18柱(4.6 mm×250 mm)以乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾水溶液(30∶70)为流动相,检测波长:325 nm;进样量10μL。结果显示盐酸小檗碱和其它成分能获得基线分离,线性关系良好,平均加样回收率为100.59%,RSD 2.6%(n=5)。该法结果准确,分离效果好,可用于三黄片的质量控制。

HPLC法测定中性腹膜透析液(乳酸盐)中葡萄糖的含量

目的：建立高效液相色谱法测定中性腹膜透析液（乳酸盐）中葡萄糖含量的方法。方法采用 Waters Sugar ParkⅠ色谱柱（6.5 mm ＆#215;300 mm，6.5μm），流动相为水，流速：0.5 mL·min -1，柱温：80℃，示差检测器设置温度：40℃，进样量：20μL。结果葡萄糖在1.13378~6.80268 mg·mL -1范围内呈良好的线性关系（r =1.0000）。含1.5%葡萄糖的中性腹膜透析液（乳酸盐）平均回收率为99.1%，RSD =0.4%（n =9）；含2.5%葡萄糖的中性腹膜透析液（乳酸盐）平均回收率为100.1%，RSD =0.2%（n =9）；含4.25%葡萄糖的中性腹膜透析液（乳酸盐）平均回收率为100.2%，RSD =0.3%（n =9）。结论本方法简便、快速、准确，可用于中性腹膜透析液（乳酸盐）的质量控制。

溶剂浮选-HPLC法测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯

目的建立穿心莲片中脱水穿心莲内酯的溶剂浮选-HPLC测定方法。方法以脱水穿心莲内酯浮选效率为指标,单因素考察样品溶液pH、相比、氮气体积流量、浮选时间等因素对浮选效果的影响,在最优条件下对穿心莲片中的脱水穿心莲内酯进行测定,并与中性氧化铝柱色谱法进行对比。结果最佳浮选条件:浮选溶剂为醋酸乙酯,溶液pH 7,浮选时间20 min,气体体积流量100 mL/min,相比10∶8。浮选法测定的平均回收率为98.1%,RSD为3.2%,与柱色谱法测定结果未见显著差异。结论溶剂浮选处理样品耗时短、测定结果准确。所建立的方法可以快速分离、准确测定穿心莲片中的脱水穿心莲内酯。

HPLC法同时测定精氨酸、赖氨酸和组氨酸的建立与应用

目的 建立同时测定3种碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸和组氨酸)含量的HPLC法,并测定该3种碱性氨基酸是否具有肝素中和作用。方法 采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生法。色谱条件:Diamonsil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,以乙腈-乙酸钠溶液(冰醋酸调p H至6.3)为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长254 nm,进样量20μL。将氨基酸混合液与肝素进行体外中和实验,测定混合前后氨基酸浓度的变化。SD大鼠注射肝素钠注射液后随机分为3组,空白对照组、实验组和阳性对照组大鼠分别注射生理盐水、氨基酸混合液或鱼精蛋白注射液,不同时间取血测定活化部分凝血活酶时间(APTT)。结果 3种氨基酸在5~100μg·mL-1范围呈线性,稳定性、精密度、回收率结果良好。体外肝素中和试验前后氨基酸浓度无显著变化。体内凝血试验显示,实验组与空白对照组APTT相近(P> 0.05),阳性对照组与空白对照组或实验组相比APTT明显延长(P <0.05)。结论 柱前衍生HPLC方法可以同时准确测定精氨酸、赖氨酸和组氨酸的含量,体内体外研究显示3种碱性氨基酸不具备肝素中和作用。

TLC结合HPLC-DAD法检查红花及西红花中13个红色色素

目的:建立红花、西红花中13个非法添加红色色素的薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)检测方法。方法:采用TLC法,μL乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水(1∶3∶3∶1∶1);检测:日光下检视。采用HPLC-DAD梯度洗脱技术。色谱柱:Welch Ultimate^■XB-C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.05 mol·L-1乙酸铵溶液为流动相流速:1.0 mL·min^-1,柱温35℃;检测波长:508 nm。并进行TLC和HPLC检测方法的检测下限、专属性及耐用性研究。通过比对对照品的比移值、保留时间与光谱图,确定红花样品与西红花样品中非法添加的色素。结果:已建立的13个红色色素的TLC与HPLC分析法灵敏度较高,专属性强,耐用性好。在TLC与HPLC佐证一致的情况下,22批红花药材中有10批检出胭脂红,有11批检出酸性红73;5批西红花药材中1批检出胭脂红、酸性红73、新品红、罗丹明B,1批检出胭脂红、新品红,1批检出胭脂红。结论:建立的TLC及HPLC检测方法经方法学验证,可用于红花、西红花药材中13个红色色素的检查。市售红花与西红花药材严重存在色素非法添加问题,应加大对中药材、中药饮片市场的监管力度。

不同pH值提取液浸提虫草素研究

用不同pH值提取液及微波处理方法浸提样品中的虫草素,经HPLC测定,pH2.0、pH3.0的提取率比中性提取液提高了3.89%和3.99%;将浸提后的样液中和后再测定,测定值进一步提高,较中性提取液提高了7%以上。

5-磺酸钠间苯二甲酸二甲酯的高效液相色谱法分析

提出了用离子对反相高效液相色谱分析５－磺酸钠间苯二甲酸二甲酯的方法，色谱柱为ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳＣ１８，５μｍ，２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，流动相为Ｖ（甲醇）∶Ｖ（水）＝６０∶４０（甲醇中含四丁基磷酸二氢铵１０ｍｍｏｌ／Ｌ），柱温为３０℃，流速为０．８ｍＬ／ｍｉｎ，进样体积为２０μＬ，检测波长为２２０ｎｍ。用外标法进行了定量，相对标准偏差和回收率分别为０．２６％和９８．１％～９９．６％。

高效液相色谱法测定阿萨伊冻干粉中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的含量

目的:建立以HPLC-紫外检测器测定阿萨伊冻干粉中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷含量的方法。方法:分别采用水和1%盐酸水溶液为溶剂,使矢车菊素-3-O-葡萄糖苷分别呈中性醌式碱和烊阳离子构型,比较两种构型对测定波长、色谱峰分离度、供试品制备方法、响应因子和标准曲线,以及对含量测定结果的影响。结果:采用烊阳离子构型,即供试品和对照品用1%盐酸水溶液为溶剂,以DIKMA C_(18)(4.6 mm×250 mm×5μm)柱为分析柱,乙腈-0.5%磷酸溶液(12∶88,V/V)为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为520 nm。矢车菊素-3-O-葡萄糖苷烊阳离子构型在0.002419～0.077412 mg/mL范围呈线性关系,y=37029.5438x-7.6051(R^2=0.9999),回收率为98.31%(RSD%=1.44%),3批阿萨伊冻干粉中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的含量为0.1158～0.1663 mg/g。结论:采用矢车菊素-3-O-葡萄糖烊阳离子构型,以HPLC-紫外检测器测定阿萨伊冻干粉中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷含量的方法操作简便、灵敏、结果准确、重复性好。

中性氧化铝影响中药制剂含量测定结果的考察

目的:考察中性氧化铝在中药定量分析中产生的影响。方法:采用HPLC法测定经中性氧化铝处理的样品。结果:未经中性氧化铝处理的样品及经不同生产厂家中性氧化铝处理的样品,测定结果差异明显。结论:中性氧化铝应用于定量分析前处理过程中应慎用。

鱼粉生产废弃榨汁的中性蛋白酶水解技术研究初探

本研究探讨了用中性蛋白酶法酶解鱼粉榨汁蛋白质的水解工艺以及水解液氨基酸组成和相对分子量的分布范围。应用正交试验法研究了鱼粉榨汁蛋白质酶解条件。结果表明:最佳酶解条件是酶量400U/g,酶解温度55℃,酶解时间6h,pH7.5,鱼粉榨汁蛋白质水解度平均为52.3%。应用氨基酸分析仪和高效液相色谱分析了该水解液的氨基酸组成和相对分子量的分布范围,水解液中相对分子质量为132～1500的2～10肽水解物占80%,氨基酸组成平衡、必需氨基酸含量丰富。鱼粉榨汁可以作为保健食品、营养强化剂的高品质原料,同时对于解决鱼粉加工行业的废水污染具有重要意义。

固相萃取-高效液相色谱法测定植物油中的TBHQ含量

建立了植物油中TBHQ的中性氧化铝固相萃取-高效液相色谱分析法。分别用TBHQ标准溶液10、25μg/m L和50μg/m L进行加标回收率和精密度试验。结果表明:加标回收率在100.0%~103.0%之间,RSD为2.0%~6.0%,说明该方法具有良好的可靠性和重现性。研究表明,该方法操作简便,油脂净化完全,结果准确可靠。

龙芍续骨胶囊中芍药苷含量测定

目的：测定龙芍续骨胶囊中芍药苷的含量,并考察中性氧化铝层析纯化对芍药苷含量测定的影响。方法：采用高效液相色谱法测定芍药苷含量,以中性氧化铝纯化富集芍药苷。液相条件：Kromasil-C18（250mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;以甲醇-水（28∶72）为流动相,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为230 nm,柱温30℃。结果：芍药苷在0.048~1.68μg范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.9996）,精密度和稳定性试验的RSD分别为0.31%和0.86%,平均回收率为99.19%,RSD为0.97%（n=6）。结论：本方法简单,稳定易行,灵敏度高,可控性强,重复性好,可用于龙芍续骨胶囊中芍药苷的含量测定。建议在本品质量标准中规定每1 g内容物含白芍以芍药苷（C23H28O11）计,不得少于0.38 mg。

固相萃取-高效液相色谱法测定食品中痕量花粉红染料

本实验建立了测定食品中痕量花粉红色素的高效液相色谱方法。样品经正己烷等溶液提取,经过中性氧化铝柱净化,以甲醇和水溶液为流动相进行色谱分离,在激发波长550nm,发射波长580nm的荧光条件下检测。花粉红的浓度在0.5～10.0μg/L范围内与其色谱峰面积的线性关系良好(r=0.999),在1、5、10μg/kg添加水平时的回收率为56.3%～80.1%,RSD为2.8%～5.7%。方法的定量检出限为1.0μg/kg。

高效制备液相色谱法纯化生物制品的实验研究

以牛血清白蛋白和牛血清红蛋白混合物的分离和工业级枯草杆菌中性蛋白酶的纯化为实验物系，在不同的操作条件下，对自行研制的高效制备液相色谱装置的性能进行了实验研究。结果表明，在适宜的操作条件下，此装置的分离和纯化效果令人满意。

氧化铝对黄连及制剂中季铵型生物碱的影响研究

目的:考察中性氧化铝对季铵型生物碱提取纯化过程中的影响。方法:采用RP-HPLC法测定经碱性、中性氧化铝处理和未经其处理的黄连上清片、炎可宁片等含黄连的制剂中季铵型生物碱含量比较。采用峰面积相对损失率来衡量其影响大小。结果:两种制剂中季铵型生物碱经不同厂家生产的中性氧化铝处理后含量与未经处理的有明显的下降。结论:在用中性氧化铝纯化处理样品,建立季铵型生物碱分析方法时应当慎用。对于含季铵型生物碱的制剂定量宜采用碱性氧化铝纯化处理。

亚临界水提取灵芝酸性和中性三萜的工艺研究

为优化亚临界水提取灵芝酸性和中性三萜的工艺参数,采用正交试验方法,考察提取温度、压力、时间对提取结果的影响,以HPLC法测定灵芝酸性和中性三萜含量。结果表明,亚临界水提取灵芝三萜的优化条件为料液比1︰16,温度180℃,压力4 MPa,提取时间10 min。此条件下灵芝酸性三萜得率为1.132 mg/g,中性三萜得率为0.582 mg/g。结论:亚临界水提取灵芝酸性和中性三萜,较超临界CO_(2)提取方法成本低,较传统的乙醇回流方法提取时间明显缩短,且不含有机溶剂,是一种于环境友好的产业化提取技术。

陈香露白露片质量标准研究

目的:建立陈香露白露片中橙皮苷的含量测定方法及与疗效相关的制酸力检查方法。方法:采用高效液相色谱法测定陈香露白露片中橙皮苷的含量,色谱柱为 Penomencx C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-醋酸-水(35:4:61),流速1.0 mL·min^(-1),在283 nm的波长处检测;制酸力检查采用酸消耗剩余量回滴法、结果:橙皮苷进样浓度在0.03～0.40 mg·mL^(-1)的浓度范围内,与其峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999,n=5);平均回收率(n=6)为99.2%,RSD 为0.71%;制酸力要查结果显示每片酸中和量均约为15 mL。结论:建立的方法简便快速,准确可靠,可用于陈香露白露片的质量控制。