Simultaneous Determination of Baicalin, Berberine and Rhein by HPLC in Traditional Chinese Patent Medicine Sanhuang Tablets

Aim To establish a reversed phase liquid chromatographic method forsimultaneous determination of three main medicinal constituents, baicalin, berberine and rhein, inSanhuang tablets. Methods The separation was performed on a Kromasil C_(18) column with TEA-adjusted0.02 mol·L^(-1) H_3PO_4 (pH 6.78)-acetonitrile-methanol (40 : 9 : 7) as mobile phase at aflow-rate of 1.0 mL·min^(-1), with detection at 254 ran. Considering interaction between acidic andalkaline compounds, three standard markers were added respectively and the volume of samplesolution was doubled in recovery experiments. Results Three regression equations revealed excellentlinear relationship between the peak areas and concentrations and the correlation coefficients allsurpassed 0.999 8. The average recovery was 96.1% (RSD = 2.1%) baicalin, 98.5% (RSD = 2.4%) forberberine, and 101.5% (RSD =1.3%) for rhein. Conclusion The method developed can be used to controlthe quality of Sanhuang tablets comprehensively.

鱼腥草芩蓝合剂HPLC指纹图谱及8种成分含量测定

目的:建立鱼腥草芩蓝合剂的HPLC指纹图谱,并同时测定其中黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素、连翘苷、连翘酯苷A、绿原酸、芦丁和槲皮苷的含量。方法:采用SHIMSEM Ankylo C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸,梯度洗脱;检测波长210 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温40℃;进样量10μL。以黄芩苷作为参照峰,建立17批鱼腥草芩蓝合剂的指纹图谱,综合应用相似度评价、聚类分析和主成分分析评价鱼腥草芩蓝合剂批间质量差异;并同时测定其中8种成分的含量。结果:17批样品中有27个共有峰,相似度均>0.990。聚类分析可将样品分为5类,筛选出3个主成分,累计贡献率75.804%。8种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9995),平均加样回收率为96.17%~103.53%,RSD为0.50%~1.23%。结论:该试验方法稳定、可靠,可对鱼腥草芩蓝合剂进行质量控制。

RP-HPLC法同时测定复方百部止咳颗粒中橙皮苷和黄芩苷的含量

目的:建立复方百部止咳颗粒中橙皮苷和黄芩苷含量的测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,以 Nova-Pak C_(18)(300mm×3.9mm,4 μm)柱为分析柱,甲醇-水-磷酸(45:55:0.2)为流动相,流速:0.8ml·min^(-1),检测波长:283 nm,柱温:40℃,以外标法检测。结果:样品中橙皮苷和黄芩苷的平均回收率分别为99.51%和100.2%,RSD 分别为1.3%和1.5%(n=6);橙皮苷和黄芩苷分别在0.05～0.99μg(r=0.9993)和0.08～1.51μg(r=0.9995),峰面积与进样量呈良好线性关系。结论:该法快速、简便,分离度好,可同时测定复方百部止咳颗粒中橙皮苷和黄芩苷的含量。

HPLC-MS/MS法同时测定清开灵口服液中7种成分的含量

目的 建立高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法同时测定清开灵口服液中7种成分含量。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×10 mm,1.7μm);以含10 mmol·L^(-1)乙酸铵和0.1%甲酸的水溶液(A)及甲醇(B)为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,正、负离子多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果 腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸质量浓度分别在0.100 4~3.213、0.784 5~8.982、0.998~3.194、0.622 5~19.92、25.05~300.6、2.513~30.15和7.775~93.30μg·m L^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系(r≥0.999 0);平均回收率(n=6)分别为100.9%、98.74%、101.2%、100.2%、100.8%、99.97%和98.94%,RSD分别为1.58%、0.59%、1.78%、1.25%、0.65%、1.69%和1.07%。15批样品中腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸的含量范围分别为0.12~0.18、0.19~0.24、0.06~0.09、0.34~0.37、4.54~4.85、0.49~0.67和1.82~2.19 mg·m L^(-1)。15批样品测定结果较为接近。结论 该方法具有良好的灵敏度、准确性和重复性,可为清开灵口服液的质量控制和后续研究提供参考及数据支持。

黄芩苷铝HPLC检测方法的建立

为了探究测定黄芩苷铝含量的有效方法,试验先摸索了供试品前处理方法,将黄芩苷铝完全转化成黄芩苷后以黄芩苷为对照品,建立测定黄芩苷含量的高效液相色谱(HPLC)检测方法,绘制标准曲线,并考察该方法的系统适用性、准确度、精密度、重复性、耐用性和稳定性,最后利用该方法对样品含量进行检测。结果表明:供试品前处理条件为向黄芩苷铝中加入乙腈-0.05%磷酸溶液(40∶60)并超声30 min;液相色谱条件,色谱柱为Hypersil ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液(30∶70),检测波长为278 nm,流速为1.00 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL。在该条件下,黄芩苷在20~320μg/mL内线性关系良好(R^(2)=0.999 9),精密度高、重复性好,平均回收率为101.24%,供试品溶液在36 h内稳定。在测试范围内,柱温、流速和色谱柱对样品中黄芩苷的含量测定无影响。说明建立的黄芩苷铝HPLC检测方法操作简单,可靠性高,可以用作黄芩苷铝含量的测定。

HPLC法同时测定灌胃黄芩水煎剂后大鼠血浆中黄芩苷和汉黄芩苷的质量浓度及药动学研究

目的建立大鼠ig黄芩水煎剂后血浆中黄芩苷和汉黄芩苷的HPLC测定方法及药动学研究.方法大鼠ig黄芩水煎剂后,不同时间眼底静脉丛取血,制备血浆.血浆样品经甲醇沉淀蛋白,HPLC-UV测定血药浓度.色谱柱为Shim-pack ODS(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相采用梯度洗脱,体积流量:1.5 mL/min;检测波长:276nm.结果黄芩苷的线性范围为0.156～10μg/mL,汉黄芩苷的线性范围为0.109～7 μg/mL,定量下限(LLOQ)分别为0.156和0.109μg/mL,日内和日间精密度(RSD)均小于15%,准确度(RE)为-6.82%～3.26%.大鼠ig黄芩水煎剂后,血浆中黄芩苷和汉黄芩苷血药浓度-时间曲线均存在双峰:黄芩苷的tmax1和tmax2分别为(12.0±4.5)min和(7.2±1.79)h;Cmax1和Cmax2分别为(5.29±1.96)和(4.49±2.12)μg/mL,汉黄芩苷的tmax1和tmax2分别为(14.0±9.0)min和(6.8±1.1)h;Cmax1和Cmax2分别为(1.38±0.16)和(1.62±0.71)μg/mL;黄芩苷的CL/F为(4.72±1.68)L/h,汉黄芩苷的CL/F为(3.04±0.98)L/h.结论该方法经考察符合生物样品的测定要求,可应用于大鼠体内黄芩苷和汉黄芩苷血药浓度的测定和药动学研究.大鼠ig黄芩水煎剂后血浆中黄芩苷和汉黄芩苷质量浓度存在双峰现象,黄芩苷的口服清除率大于汉黄芩苷.

多波长RP-HPLC法测定双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸和连翘苷

目的:建立同时测定双黄连口服液(黄芩、金银花、连翘)中黄芩苷、绿原酸和连翘苷的分析方法。方法:采用多波长RP-HPLC法,色谱柱为Agilent Zorbax SB C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:(A)0.3%的甲酸水溶液、(B)乙腈;线性梯度洗脱依次为14%～20%/0～12 min,20%～30%/12～13 min,30%～65%/13～25 min和65%/25～35 min;柱温:30℃;流速:1.0 mL/min。结果:黄芩苷、绿原酸和连翘苷分别在0.225～3.60μg,0.032 4～0.518 4μg,0.135～2.16μg的范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.5%,102.0%,99.62%,RSD分别为0.75%,3.9%,1.1%。结论:本法简便、准确、重现性好,可用于双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸和连翘苷的同时测定。

HPLC法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量

目的考察4种不同规格并头黄芩的药用价值和黄芩苷提取条件。方法采用HPLC法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量。结果4种不同规格并头黄芩中黄芩苷含量依次为12.89%、13.82%、11.75%和10.85%,汉黄芩苷含量依次为0.28%、0.22%、0.24%和0.27%;随提取溶剂中醇浓度的增加,黄芩苷提取率先增高后降低,碱性条件降低黄芩苷提取率。结论4种不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量差异不大,且黄芩苷含量均高于《中华人民共和国药典》要求;提取条件为50%中性乙醇提取最佳。

HPLC法同时测定银翘柴桂颗粒中绿原酸、芍药苷和黄芩苷

目的为有效控制银翘柴桂颗粒(金银花,白芍,黄芩,重楼等)的质量,建立制剂中绿原酸、芍药苷和黄芩苷的HPLC定量测定方法。方法色谱柱Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%磷酸梯度洗脱;检测波长绿原酸和黄芩苷327 nm、芍药苷230 nm;体积流量1.0 mL/min。结果绿原酸、芍药苷和黄芩苷分别在0.068 88～0.688 8μg、0.066 96～0.669 6μg和0.121 6～1.216μg的范围内呈良好的线性关系,加样回收实验平均回收率103.70%、103.31%、97.92%。RSD为1.07%、2.07%和1.32%。结论此法操作简捷,结果准确可靠,精密度好,可用于银翘柴桂颗粒中绿原酸、芍药苷和黄芩苷的定量测定。

HPLC测定12种中药制剂中黄芩甙含量

本文用ＨＰＬＣ方法测定了１２种中药制剂中黄芩甙含量，所建立的色谱方法使１２种中药制剂及生药中黄芩甙与其它成分均达较好的分离。本文还对生药中黄芩甙的提取条件进行了考察，结果表明以４５％甲醇超声提取方法较佳。该法简便、快速、精密度好。适合制剂生产中多批量样品的质量控制。

HPLC法测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量

目的建立HPLC法同时测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷含量的方法。方法色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(AgilentZORBAXEclipseXDB-C18,4.6mm×150mm,5Micron)。流动相A:甲醇-水-磷酸(50∶950∶5),流动相B:甲醇。梯度洗脱程序:0～30,A:95%～35%,B:5%～65%;流速:1ml/min,检测波长327nm。结果绿原酸和黄芩苷的保留时间分别约为10.6、24min,与各自相邻峰的分离度均>1.5。以峰面积(X)对进样浓度(Y)线性回归,绿原酸回归方程:Y=0.03298X-0.09386,r=0.9999,线性范围5.040～45.36μg.ml-1。黄芩苷回归方程:Y=0.05155X-1.2864,r=0.9999线性范围:44.88～403.9μg.ml-1。绿原酸、黄芩苷回收率(n=6)分别为99.6%和100.0%、RSD分别为0.32%和1.0%。结论本方法与2005版中国药典法含量测定结果一致,准确度好且操作简便。

HPLC分析比较炮制和提取方法对黄芩活性成分的影响

目的:分析比较炮制与提取方法对黄芩药材中活性成分提取的影响。方法:以黄芩生药材和炮制药材为分析对象,比较5种不同提取方法对黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素提取的影响。色谱条件Agilent Zorb-ax Extend-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-乙腈-水-乙酸(18∶25∶57∶0.2);流速0.8 mL.min-1;检测波长275 nm;柱温30℃。结果:生药材酶法提取黄芩素、汉黄芩素得率最高,分别为5.41%,1.30%;60%乙醇回流提取黄芩苷、汉黄芩苷得率最高,分别为10.11%,3.55%。炮制药材不同提取方法的效果接近,以酶法提取效果最好,黄芩苷、汉黄芩苷和黄芩素、汉黄芩素得率分别为10.63%,3.60%和1.81%,0.59%。结论:对于黄芩生药材,不同提取方法对4种活性成分的提取影响较大;对于黄芩炮制药材,不同提取方法对4种活性成分的提取影响较小,针对不同活性成分应选择最适提取方法。

HPLC-电化学检测法用于黄芩苷和黄芩素大鼠血浆稳定性研究

目的:考察黄芩苷(BG)和黄芩素(B)在缓冲液及大鼠血浆中的稳定性,建立测定二者在大鼠血浆中含量的样品处理方法,并初步探讨二者在血浆中稳定性的影响因素。方法:采用HPLC-电化学检测法,分别考察BG,B在不同条件下的稳定性及使二者稳定的条件。结果:BG,B在大鼠血浆中较在pH7.4的缓冲液中更不稳定。在pH7.4缓冲液中加入抗氧化剂可使BG和B的稳定性明显提高,剩余百分含量达到102%和100%;在大鼠血浆中加入抗氧化剂及1 mol.L-1HCl可使BG和B的稳定性明显增加,剩余百分含量可分别达到98%和103%。结论:BG和B在pH7.4缓冲液中的稳定性主要受氧化影响,BG和B在血浆中的稳定性不仅与氧化有关,还受血浆中的内源物质影响,最终确定每1 mL大鼠血浆中加入抗氧剂及100μL1 mol.L-1HCl为血浆样品的处理条件,此条件可使样品稳定。

HPLC测定众生丸中三种苷类成分的含量

目的用HPLC法测定众生丸中三种苷类成份的含量。方法采用高效液相色谱法对众生丸中三种苷类进行含量测定,检测波长为230nm,色谱柱为Kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-0.4%磷酸为流动相梯度洗脱,流速为1.0min/mL,柱温为35℃。结果芍药苷进样量在0.1542μg～2.8384μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为97.82%,RSD为0.99%(n=6);虎杖苷进样量在0.0976μg～1.5920μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为97.44%,RSD为1.31%(n=6);黄芩苷进样量在0.7692μg～11.5380μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.79%,RSD为1.75%(n=6)。结论该法简便准确,重现性好,专属性强,可作为该制剂的质量控制。

HPLC法同时测定舒胆胶囊中4种黄酮类成分的含量

目的:建立 HPLC 法同时测定舒胆胶囊中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和黄芩苷4种黄酮类成分的含量。方法:采用 Dia—monsil C_(18)柱(5μm,200 mm×4.6 mm)柱分离,以甲醇-0.2%磷酸水溶液进行梯度洗脱,洗脱程序为:0～35 min,甲醇34%;35～44 min,甲醇38%;44～60 min,甲醇48%。在283 nm下进行测定。结果:柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和黄芩苷的线性范围分别为9.0～180.0μg·mL^(-1)(r=0.9999,n=5).0.8～16.0μg·mL^(-1)(r=0.9998,n=5),15.4～308.0μg·mL^(-1)(r=0.9998,n=5),20.0～400.0μg·mL^(-1)(r=0.9999,n=5);平均回收率分别为100.0%,99.2%,100.5%,101.2%(n=9)。结论:本方法简便、快捷,结果准确、可靠,重复性好,可作为舒胆胶囊的质量控制方法之一。

RP-HPLC同时测定功劳去火片中栀子苷、黄芩苷及盐酸小檗碱的含量

目的：建立了反相高效液相色谱法同时测定功劳去火片（功劳木，黄柏，黄芩等）中栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的含量。方法：采用KromasilC18色谱柱（250mm×4．6mm，5．0μm）；流动相组成为A：乙腈，B：乙腈-0．5％三乙胺水溶液（磷酸调pH3．1）（10：90）梯度洗脱；流速1．0mlMmin，检测波长254nm。结果：栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的线性范围分别为：3．22～206μg/mL（r=0．9999），2．95～186μg／mL（r=0．9999）和1．64～104μg／mL（r=0．9999）。平均回收率均大于98．4％。结论：该方法专属性强，结果准确可靠，重现性好，可用于功劳去火片中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的含量测定，以便更好地控制功劳去火片的质量。

HPLC测定感必灵胶囊中黄芩苷的含量

目的 :建立感必灵胶囊中黄芩苷的含量测定方法 ,有效控制该药物的质量。方法 :超声提取 ,HPLC测定感必灵胶囊中黄芩苷的含量。采用C18柱 ,甲醇 乙腈 水 冰醋酸 ( 2 5∶10∶64∶1)为流动相 ,检测波长为 2 74nm。结果 :此方法线性关系良好 ,平均加样回收率为 98.69% ,RSD为 2 .1% (n =6)。结论 :本方法简便易行、结果准确 ,可用于感必灵胶囊的质量控制。

HPLC法测定大鼠血浆中黄芩苷的浓度

目的建立测定大鼠血浆中黄芩苷浓度的HPLC方法。方法用甲醇-乙腈沉淀血浆蛋白,将上清液吹干后残渣再溶解后进行测定;色谱柱采用DiamonsilC18柱,以甲醇-0.2%磷酸(60:40,v/v)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为280nm,选取卡马西平为内标物。结果黄芩苷在0.25～10.0μg/mL范围内呈良好线性关系(r=0.9990),日内、日间RSD均小于5%;平均相对回收率与平均提取回收率分别为98.4%和69.3%。结论该方法简单快速,适用于黄芩苷的血药浓度测定及药动学研究。

RP-HPLC法测定防风通圣丸中芍药苷、栀子苷、黄芩苷和连翘苷的含量

目的建立RP-HPLC法同时测定防风通圣丸中的芍药苷、栀子苷、黄芩苷和连翘苷4种成分的含量。方法色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱;流速为1.0mL.min-1;检测波长为230和280nm;柱温28℃。结果芍药苷、栀子苷、黄芩苷和连翘苷4种成分进样量分别在0.078 5～0.785,0.049 6～0.496,0.071 3～0.713和0.043 4～0.434μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r>0.999 1);平均回收率(n=3)分别为97.5%,98.2%,98.5%和98.7%。结论该法简单、准确、重复性好,能有效地控制药品的质量。

HPLC法同时测定双黄消炎片中黄芩苷、药根碱、巴马汀及小檗碱的含量

目的:用 HPLC 法同时测定双黄消炎片中黄芩苷和3种生物碱类成分药根碱、巴马汀及小檗碱的含量。方法:色谱柱:Diamonsil^(TM)(钻石)C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.1%磷酸(加三乙胺调 pH 至2.97)-乙腈(75:25);流速:1.0 mL·min^(-1);检测波长:345 nm。结果:黄芩苷、药根碱、巴马汀和小檗碱分别在0.13～2.7μg(r=0.9998),0.0097～0.19μg(r=0.9998),0.010～0.20μg(r=0.9999),0.020～0.40μg(r=0.9998)范围内线性关系良好;4个成分的平均回收率(n=9)分别为100.4%,99.7%,100.1%,100.4%。结论:本方法快速、简便,重复性好,可作为该制剂的质量控制方法。