HPLC法同时测定杠板归不同部位中5种成分的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定杠板归不同部位(茎、叶、根)中5种成分的含量。方法采用Luna?-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为320 nm,柱温为30℃,测定杠板归不同部位中绿原酸、咖啡酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素的含量。结果绿原酸、咖啡酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素分别在0.046~4.6μg/mL,0.212~21.2μg/mL,0.055~5.5μg/mL,0.084~8.4μg/mL,0.114~11.4μg/mL范围内质量浓度与峰面积呈线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率为97.65%~102.09%,RSD为1.76%~2.44%。不同部位中5种成分含量差异较大,绿原酸和咖啡酸2个成分在叶中含量高,且远远高于根和茎中的含量;芦丁和阿魏酸主要存在于茎和根中,叶中未检测到;槲皮素在茎中含量最高,叶中次之,根中最低。结论建立的HPLC方法准确可靠、重复性好、专属性强,可用于杠板归不同部位中5个成分含量的同时测定。

HPLC-UV法测定甘花漱口液中总黄酮及绿原酸含量

目的:建立甘花漱口液中总黄酮及绿原酸的含量测定方法。方法:以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法,在510 nm处,测定甘花漱口液中总黄酮含量;以绿原酸为对照品,采用HPLC法,以乙腈-0.4%磷酸(11∶89)为流动相,检测波长327 nm,流速1.0 mL/min,柱温35℃,测定甘花漱口液中绿原酸含量。结果:芦丁在0.0101~0.0707 mg/mL范围内,呈现良好的线性关系(R 2=0.9993),平均回收率98.01%(RSD=1.80%);绿原酸在8~40μg/mL内呈良好的线性关系(R 2=0.9999),平均回收率为98.80%(RSD=0.14%)。结论:上述方法稳定、准确,重复性好,可作为甘花漱口液的质量控制方法。

HPLC法测定桑叶和金银花中绿原酸及四种黄酮类化合物

目的建立一种同时测定绿原酸和黄酮类成分的含量测定方法,并应用于桑叶和金银花试样,为中药材和天然产物的提取工艺研究、质量分析探索适应性强的新分析方法,并探索更为环保的中药材水分测定方法。方法运用HPLC法,色谱柱为Agilent extend C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸,采用梯度洗脱,325 nm和350 nm双波长检测,柱温30℃,流速1 mL·min^(-1);以色谱级甲醇为提取溶剂,采用超声辅助提取方法制备供试液,随后分别采用常压干燥法和减压干燥法测定了桑叶和金银花试样的水分含量,用于计算试样干品中绿原酸及四种黄酮类化合物的含量。结果绿原酸、木犀草苷、芦丁、槲皮素、木犀草素浓度分别在0.11~53.70μg·mL^(-1)、0.12~58.20μg·mL^(-1)、0.12~58.50μg·mL^(-1)、0.13~63.30μg·mL^(-1)、0.10~50.90μg·mL^(-1)范围内线性良好,相关系数r分别为0.9993、0.9999、0.9999、1.0000、0.9995;供试液和混合对照品溶液在24 h内稳定性良好。结论建立的HPLC梯度洗脱方法准确度高、重现性好、精密度优,可作为桑叶、金银花中绿原酸和黄酮类成分的含量测定方法;此外,桑叶、金银花样品提取方法操作简便、溶液稳定性好。

HPLC法同时测定宣木瓜中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素的含量

目的建立宣木瓜药材中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素的含量测定方法。方法采用HPLC法,Phenomenex luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.6%磷酸溶液(A)和乙腈(B),梯度洗脱,检测波长为360 nm,流速设为1.0 ml.min-1。结果绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素线性范围分别为0.035～0.56 g·L-1(r=0.997 8),0.003 2～0.051 2 g·L-1(r=0.999 3),0.004 25～0.068 g·L-1(r=0.999 7),0.003 5～0.056 g·L-1(r=0.999 7),平均加样回收率分别为102.9%(RSD=1.04%)、99.3%(RSD=2.28%)和99.2%(RSD=2.33%)、99.5%(RSD=2.52%)。结论该方法操作简单,结果准确,具有较好的重复性和稳定性,可用于宣木瓜药材的质量控制。

RP-HPLC法同时测定复方石韦胶囊中5种成分的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定复方石韦胶囊中香草酸、绿原酸、芦丁、苦参碱和氧化苦参碱的含量。方法:采用Gemini-C_(18)(250mm×4.6mm,5.0μm)色谱柱;以甲醇(A)-0.04%三乙胺(pH=6.65)(B)为流动相,采用梯度洗脱程序:0min,A-B(15:85);10min,A-B(60:40);13 min,A-B(80:20)。流速为0.8 mL·min^(-1);柱温为27℃;二极管阵列检测波长为220,270,326nm。结果:香草酸、绿原酸、芦丁、苦参碱和氧化苦参碱的线性范围分别为1.14～17.14μg·mL^(-1)(r=0.999 3),4.28～51.42μg·mL^(-1)(r=0.998 0),3.97～43.67μg·mL^(-1)(r=0.999 8),0.06～0.72mg·mL^(-1)(r=0.999 6),9.8～68.6μg·mL^(-1)(r=0.999 6);加样回收率分别为100.1%(RSD<2.4%),99.4%(RSD<1.3%),99.5%(RSD<2.4%),99.9%(RSD<72.8%),100.3%(RSD<2.2%)。结论:该检测方法为复方石韦胶囊的质量控制提供了科学依据。

HPLC法测定珍菊降压片中绿原酸、氢氯噻嗪及芦丁的含量

目的 建立高效液相色谱法测定珍菊降压片中绿原酸、氢氯噻嗪及芦丁的含量。方法 采用甲醇 水 丙酮 (4 5∶4 5∶10 )溶液超声提取 ,在LichrospherODS(5 μm ,4 .6× 15 0mm)柱上 ,以乙腈 0 .4 %磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱 ,流速 1mL·min-1,柱温 30℃ ,二极管阵列检测器 (DAD)。结果 绿原酸浓度线性范围2 .4 712 .35 μg·mL-1(r =0 .9995 ) ;平均回收率为 10 0 .3% ,RSD为 3.4 %。氢氯噻嗪浓度线性范围 4 .2 6 2 1.2 8μg·mL-1(r=0 .9997) ;平均回收率为 99.4 % ,RSD为 2 .5 %。芦丁浓度线性范围 10 .885 4 .4 μg·mL-1(r=0 .9996 ) ;平均回收率为 99.3% ,RSD为 1.8%。结论 该法准确、精密度高、重现性好 ,可作为珍菊降压片中野菊花浸膏粉、氢氯噻嗪。

HPLC测定不同树龄杜仲叶中黄酮类成分的含量

[目的]建立高效液相色谱同时测定不同树龄杜仲叶中绿原酸、芦丁、槲皮素和山萘酚含量的方法。[方法]采用Shim-pack VP-ODS(4.6×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.4%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流量1.0 ml/min,用二极管阵列检测器扫描检测,以保留时间结合待测物质的紫外吸收光谱进行定性分析。采用外标法进行定量分析,检测波长为360 nm,柱箱温度为40℃。[结果]绿原酸的线性范围为4.63～92.65μg/ml,r=0.999 8,回收率为98%～101.5%;芦丁的线性范围为0.714～14.285μg/ml,r=0.999 9,回收率为96%～98.4%;槲皮素的线性范围为0.101～2.066μg/ml,r=0.997 0,回收率为94%～101%;山萘酚的线性范围为0.043～0.886μg/ml,r=0.998 0,回收率92%～96%。[结论]对不同树龄杜仲叶中4种有效成分含量用方差分析进行多重比较,从绿原酸含量方面考虑,三年树龄杜仲叶采收最佳。

HPLC法同时测定杜仲叶中绿原酸和芦丁含量

目的:建立HPLC同时测定杜仲叶中绿原酸和芦丁的质量控制方法。方法:采用Dikma Diamonsil C18柱,梯度洗脱,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(0 min→40 min,乙腈10%→22%),检测波长为355 nm,流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃。结果:色谱峰分离情况良好,绿原酸和芦丁线性范围分别为1.3875～22.2000μg(r=0.9999),0.10～1.60μg(r=0.9999),平均加样回收率分别为99.00%(RSD=0.67%),98.55%(RSD=2.15%)。结论:所选方法简便、准确、重现性好,可用于杜仲叶的质量控制。

雪莲中绿原酸、芦丁、木犀草素含量的HPLC法测定

建立测定雪莲（Saussurea involucrata）中绿原酸、芦丁和木犀草素含量的方法,采用HPLC法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,乙腈-0.8%磷酸水溶液进行梯度洗脱,流速1.0m L/min,检测波长360 nm,柱温30℃。绿原酸、芦丁、木犀草素的线性范围分别为0.081-0.408μg/m L、0.090-0.449μg/m L、0.045-0.224μg/m L;平均加样回收率分别为99.78%、99.89%、100.70%,其中绿原酸、芦丁在天山雪莲中含量最高,木犀草素在苞叶雪莲中含量最高。

HPLC法同时测定银黄颗粒中6种成分

目的建立HPLC法同时测定银黄颗粒(金银花、黄芩提取物)中绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、黄芩苷、木犀草素、芦丁的含有量。方法该药物80%甲醇提取液的分析采用Sun Fire-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.4%磷酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长239 nm。结果 6种成分在各自线性范围均呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率94.56%~98.38%,RSD 0.49%~2.89%。14批样品中黄芩苷含有量差异较小,其他5种成分含有量差异较大。结论不同厂家银黄颗粒和金银花提取物的质量参差不齐,应加强监管。

HPLC法同时测定烟叶中6种多酚类物质

本文建立了一种可同时测定烤烟叶片中绿原酸、咖啡酸、芦丁、莨菪亭、槲皮素和山奈酚的高效液相色谱(HPLC)检测方法,并分析了不同烟草杂种F1及其亲本中上述多酚的含量。采用甲醇:水=7∶3为提取液,超声提取30 min,色谱柱为Agilent 5 TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);2%冰乙酸水溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速1 ml/min;柱温30℃;进样体积10μl。结果显示:6种多酚类物质分离效果良好,加样回收率范围在95.53%~100.622%(RSD为0.95%~2.285%),稳定性RSD(n=3)为0.13%~1.73%。绿原酸、咖啡酸、芦丁、莨菪亭、槲皮素和山奈酚的线性范围在10~600μg/ml之间,各多酚类物质线性方程相关系数在0.99996~0.99999之间。各材料的绿原酸和芦丁含量较高,为多酚类物质主要成分,其他多酚物质含量则比较低。杂种F1相对其亲本材料在某种多酚含量中表现出一定优势,VA116×GDH88绿原酸含量远远高于其两个亲本材料,VA116×TN90芦丁含量也超越其双亲,而绿原酸含量则低于其亲本VA116,Florida301×GDH94芦丁含量超越双亲,绿原酸含量则低于其亲本GDH94。

桑叶中绿原酸和主要黄酮苷含量的RP-HPLC测定

目的:考察不同品种、不同采摘时间和不同种植基地桑叶中绿原酸、芦丁和异槲皮苷的含量差异。方法:采用反相高效液相色谱法,以 Zorbax SB C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为分离柱,90%乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱[0 min,A-B(12:88);10 min,A-B(16:84);20 min,A-B(20:80);30 min,A-B(25:75)],流速1.0 mL·min^(-1),检测波长358 nm。结果:不同种植基地的桑叶中绿原酸、芦丁和异槲皮苷的含最有一定的差异;不同品种和采摘时间的桑叶中上述三成分含量差异较大。结论:桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷的含量与种植基地、采摘季节、品种等有关,其中尤以季节和品种影响较大。

HPLC法测定杜仲中绿原酸和芦丁

采用phenomenex C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-冰醋酸(pH=3.10)(45∶55)为流动相洗脱,体积流量为0.8 mL/min,紫外检测波长为327 nm,采用外标法测定不同产地杜仲中绿原酸和芦丁的含量.建立了HPLC法测定杜仲中绿原酸和芦丁含量,并对不同产地杜仲中绿原酸和芦丁含量进行测定.结果表明,绿原酸和芦丁分别在0.127 5～24.000 0μg(r=0.999 6),0.125 0～25.000 0μg(r=0.999 6)线性关系良好,平均回收率分别为98.73%和97.26%,相对标准偏差为1.85%和1.32%.

HPLC-DAD法测定“武当三号金银花”藤中4种有效成分含量

目的：建立HPLC-DAD法测定“武当三号金银花”藤中4种有效成分的含量。方法采用Fortis Xi Phenyl柱（250 mm×4.6 mm,5μm）；流动相为乙腈（A）-0.5%冰醋酸溶液（B）进行线性梯度洗脱；马钱苷、绿原酸、芦丁、木犀草苷检测波长分别为236、327、354、348 nm；柱温：30℃。结果马钱苷、绿原酸、芦丁、木犀草苷4个化合物在各自测定的范围内均呈良好的线性关系（r≥0.9994）,平均回收率为98.9%-99.9%。结论该法操作简单,灵敏度高,重现性好,为较全面控制“武当三号金银花”藤的质量提供了一种可靠的方法。

HPLC法测定雪莲浸膏粉中绿原酸、芦丁、槲皮苷的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定雪莲浸膏粉中绿原酸、芦丁、槲皮苷含量测定方法。方法采用LC-2010AHT型高效液相色谱仪,SunFire^(TM)-C18液相色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相:乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B)梯度洗脱[0～30min,6%A(94%B)～28%A(72%B)],流速1.0mL/min,检测波长330nm,柱温40℃,进样量10μL。用甲醇制成每1毫升含绿原酸10μg、芦丁28μg、槲皮苷13μg的混合对照品溶液。称取雪莲浸膏粉40mg(过80目筛),置具塞锥形瓶中,加入25mL甲醇,称重,超声10min,放至室温,补重,滤过,即得供试液。结果绿原酸、芦丁和槲皮苷分别在1.06～21.12μg/mL、2.81～56.17μg/mL和1.38～27.54μg/mL浓度范围内线性关系良好,r均为0.999 9。测得绿原酸平均回收率99.13%(n=6,RSD 1.9%);芦丁平均回收率99.20%(n=6,RSD 1.3%);槲皮苷平均回收率96.23%(n=6,RSD 2.6%)。3批次雪莲浸膏粉中绿原酸平均含量为6.14、3.79和3.61mg/g;芦丁平均含量为16.11、10.05和9.62mg/g;槲皮苷平均含量为9.24、6.34和6.16mg/g。结论本方法简便、快捷、重复性好,适用于雪莲浸膏粉中绿原酸、芦丁、槲皮苷的含量测定。

HPLC法同时测定杜仲叶中8种成分的含量

目的:建立同时测定杜仲叶中桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、儿茶素、绿原酸、车叶草苷、芦丁、异槲皮苷和紫云英苷等8种成分的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为203 nm(桃叶珊瑚苷、儿茶素)、239 nm(京尼平苷酸、车叶草苷)、220 nm(绿原酸)、354 nm(芦丁、异槲皮苷)、266 nm(紫云英苷),进样量为5μL。结果:桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、儿茶素、绿原酸、车叶草苷、芦丁、异槲皮苷和紫云英苷的线性范围分别为0.812~6.090μg(r=0.9993)、0.438~3.285μg(r=0.9992)、0.045~0.336μg(r=0.9992)、0.882~6.615μg(r=0.9993)、0.097~0.726μg(r=0.9991)、0.064~0.483μg(r=0.9993)、0.048~0.360μg(r=0.9991)、0.014~0.108μg(r=0.9997);精密度、重复性和稳定性试验的RSD均小于3.5%(n=6);平均加样回收率分别为101.60%、103.06%、99.77%、96.93%、98.17%、96.75%、98.97%、99.60%,RSD分别为1.42%、2.65%、2.78%、2.05%、2.26%、0.93%、2.79%、3.08%(n=6)。不同采集时间、不同种植品种的12批杜仲叶样品中桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、儿茶素、绿原酸、车叶草苷、芦丁、异槲皮苷和紫云英苷的含量范围分别为10.903~17.245、5.578~7.892、0.198~0.440、13.890~19.782、1.008~1.547、1.102~2.396、0.267~0.701、0.150~0.412 mg/g,含量波动较大;杜仲皮样品中桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、儿茶素、绿原酸、芦丁、松脂醇二葡萄糖苷的含量分别为0.299、0.123、0.580、0.112、0.026、1.961 mg/g。结论:本方法操作简便、重复性好、准确度高,可用于评价杜仲叶的质量;不同采集时间、不同种植品种的杜仲的不同药用部位(皮、叶)中的成分组成及含量存在明显的差异。

HPLC法同时测定白英叶中绿原酸、咖啡酸及芦丁的含量

目的:建立HPLC法同时测定白英叶中绿原酸、咖啡酸及芦丁含量的方法。方法:采用HPLC法,Angilent ZorbaxODS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱前加保护柱;流动相为乙腈-1%冰醋酸溶液,梯度洗脱;流速:0.6 ml·min^(-1);柱温:25℃;检测波长327 nm。结果:绿原酸质量浓度在2.16～43.20μg.·ml^(-1)(r=0.999 5)内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.05%,RSD=1.29%;咖啡酸质量浓度在2.15～43.04μg·ml^(-1)(r=0.999 8)内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为100.04%,RSD=1.65%;芦丁质量浓度在5.24～104.74μg·ml^(-1)内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率99.60%,RSD=1.74%。结论:该方法准确、重复性良好,能同时测定白英叶中的3种有效成分,可用于白英药材及饮片的质量控制。

HPLC分析烤烟绿原酸和芸香苷研究初报

探索了高效液相色谱法分离绿原酸和芸香苷的试验条件。研究结果表明，采用沸程60～90℃石油醚抽提，用磷酸二氢钾和甲醇溶液作为流动相进行梯度洗脱，可以较好地分离测定烤烟叶中绿原酸和芸香苷的含量。该法不仅具有良好的线性（相关系数为0．9984～0．9986）和重复性（相对偏差小于3．11％），而且绿原酸和芸香苷的平均回收率可达到97．99％和97．29％。对国内外烤烟叶分析的结果表明，湖南郴州、巴西和赞比亚烟叶中绿原酸含量较高；美国烟叶中的芸香苷含量较低；南非烤烟绿原酸和芸香苷含量的比值最低。

HPLC法同时测定天山雪莲中紫丁香苷、绿原酸和芦丁的含量

目的:采用液相色谱法同时测定天山雪莲中紫丁香苷、绿原酸和芦丁的含量。方法:Kromasil ODS-1色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为35℃;以乙腈(A)-0.4%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱(0 min,13%A;15 min,13%A;16 min,15%A;40 min11,15%A),流速1 mL·min^(-1);双波长检测:257 nm(检测紫丁香苷、芦丁),327 nm(检测绿原酸)。结果:紫丁香苷存5.104～51.04 μg·mL^(-1)(r=0.9998)、绿原酸在38.82～258.8μg·mL^(-1)(r=0.9991)、芦丁在39.42～262.8μg·mL^(-1)(r=0.9997)范围内都呈良好线性关系;紫丁香苷、绿原酸和芦丁的回收率分别为99.7%(RSD=1.0%),102.9%(RSD=1.5%),101.7%(RSD=1.2%);供试品溶液在12 h 内稳定。结论:该方法快速简单,线性关系良好。

HPLC波长切换法测定尤力克柠檬叶中4种活性成分的含量

目的建立高效液相色谱波长切换技术同时测定尤力克柠檬叶中绿原酸、圣草次苷、芦丁、地奥司明4种活性成分含量的方法。方法使用SepaxAmethyst C1-H8柱（250mm×4．60mm，5μm），以乙腈（A）-0．1％甲酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱，流速1．0mL·min-1。检测波长为324nm（0～20min，绿原酸），284nm（20～68min，圣草次苷），256nm（68～80min，芦丁），346nm（80～125min，地奥司明）。柱温25℃，进样量20μL。结果4种化合物在测定的范围内峰面积与浓度之间均表现出良好的线性关系，平均加样回收率分别为98．55％（RSD=I．75％）、98.34％（RSD=2．36％）、101．41％（RSD=1．91％）、99．83％（RSD=2．08％）。结论该方法简便、准确，重复性好，可用于尤力克柠檬叶的质量控制。