HPLC-MS(TOF)法同时测定人血浆中螺旋霉素Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的浓度

目的:建立同时测定人血浆中螺旋霉素Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的方法。方法:采用 HPLC-MS(TOF)联用技术,罗红霉素为内标,选择螺旋霉素Ⅰ的准分子离子([M+H]^+,m/z 843)、螺旋霉素Ⅱ的准分子离子([M+H]^+,m/z 885)、螺旋霉素Ⅲ的准分子离子([M+H]^+,m/z 899)和罗红霉素的准分子离子([M+H]^+,m/z 837)作为测定离子,测定人血浆中螺旋霉素Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的浓度。结果:螺旋霉素Ⅰ的线性范围为5～2000ng·mL(-1),螺旋霉素Ⅱ、Ⅲ的线性范围为2.5～640ng·mL(-1);日内精密度与日间精密度均小于15%。结论:该测定方法具有灵敏、专一和快速的优点,可满足螺旋霉素胶囊在人体内药动学研究的要求。

HPLC-MS(TOF)法测定人血浆中多奈哌齐的浓度

目的 建立测定人血浆中多奈哌齐的HPLC MS(TOF)法。方法 血浆中加入内标氯雷他定后经碱化以异丙醇 正己烷 (3∶97)提取血浆样品 ,用LC MS(TOF)联用技术 ,以电喷雾 (ESI)作为接口技术 ,选择多奈哌齐的准分子离子 ([M +H]+ ,m z 380 )和内标氯雷他定的准分子离子 ([M +H]+ ,m z 383)作为测定离子 ,测定人血浆中多奈哌齐的浓度。结果 多奈哌齐的回归方程 :As Ai=0 0 137+0 10 5 6C ,r =0 9998;线性范围为 0 1～ 15 μg·L- 1 ,定量限为 0 1μg·L- 1 ,方法回收率和提取回收率均大于 90 %。结论 该测定方法灵敏度高、专属性好、快速 。

HPLC-MS(TOF)法测定家兔血浆中黄芪甲苷的浓度

目的建立测定家兔血浆中黄芪甲苷的HPLCMS(TOF)法。方法含药血浆用C18固相萃取小柱纯化样品,用LC/MS(TOF)联用技术,以电喷雾(ESI)作为接口技术,选择黄芪甲苷的离子([M+Na]+807)和内标人参皂甘Rg1的离子([M+Na]+823)作为测定离子,测定血浆中黄芪甲苷的浓度。结果黄芪甲苷的回归方程AsAi=1.2668×103C+0.096557,r=0.999;线性范围为10～5000ng·mL-1,定量限为5ng·mL-1,回收率大于90%。结论该测定方法灵敏度高、专属性好、快速,可满足黄芪甲苷药代动力学研究要求。

固相萃取HPLC-MS(TOF)法测定人血浆中雷米普利拉的浓度

目的:建立测定人血浆中雷米普利拉的 HPLC-MS(TOF)法。方法:以喹那普利为内标,血浆样品经固相萃取小柱提取后,采用 HPLC-MS(TOF)联用技术,以电喷雾(ESI)作为接口技术,选择雷米普利拉的准分子离子([M+H]^+,m/z 389)和内标喹那普利的准分子离子([M+H]^+,m/z 439)作为测定离子,测定人血浆中雷米普利拉的浓度。结果:雷米普利拉的线性范围为0.5～40ng·mL^(-1),日内精密度与日间精密度均小于10%。结论:该测定方法具有灵敏、专一和快速的优点,可满足雷米普利在人体内药代动力学研究的要求。

HPLC-MS法同时测定大鼠血浆中苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱的浓度及其药代动力学

建立同时测定大鼠灌胃给予三物黄芩汤后血浆中苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱含量的HPLC-MS分析方法,并计算了3种生物碱在大鼠体内的药代动力学参数。血浆样品经氯仿液-液萃取后,以乙腈-0.1%甲酸水溶液(10∶90)为流动相,用KromasilC18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)分离,采用电喷雾离子化源(ESI)单重四极杆串联质谱,以选择离子检测(SIM)方式进行检测。苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱分别在10～5000ng.mL-1、2～1000ng.mL-1和2～1000ng.mL-1呈良好线性关系,提取回收率分别为89.1%～93.5%、83.9%～91.3%、85.4%～88.0%。日内及日间精密度均<15%。该法快速,灵敏,专属,适用于同时测定生物样本中苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱的血药浓度。

HPLC-UV法测定人血浆中青霉胺浓度

目的建立人血浆中青霉胺浓度的HPLC测定方法,并用于人体药动学试验中青霉胺血药浓度测定。方法取血浆样品加入衍生化试剂DTNB,室温反应5 min,10%的高氯酸溶液沉淀蛋白,上清液进样分析。色谱柱:岛津VP-ODS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠缓冲溶液(12:88),流速1.0 ml.min-1,检测波长320 nm,柱温25℃,进样量20μl。结果血浆中青霉胺在0.1～10.0 mg.L-1浓度范围内线性关系良好,定量下限为0.1 mg.L-1(S/N>10,n=5;RSD=6.4%,准确度为94.2%),在低、中、高浓度血浆样品日内、日间RSD均小于6%,准确度在92%～96%范围内,提取回收率>60%,且稳定(RSD<10%),符合生物样品分析要求。结论所建立的HPLC法样品前处理简便、操作简便、能满足青霉胺在人体内的药代动力学研究。

RP-HPLC法测定人体血浆中吉西他滨的浓度

目的:建立一种测定人体血浆中吉西他滨血药浓度的高效液相色谱方法。方法:取血浆样品1 mL,加内标100μL(含氟脲苷0.8μg·mL-1),混匀,加甲醇-乙腈(1:9)3 mL混匀,放置5 min,离心(3500 r·min-1,10 min),取上清液于60℃水浴放置,氮气吹干,残渣用0.5 mL流动相溶解,离心(15000 r·min～1,10 min),取上清液,进样50μL。色谱柱:Lichrospher 5-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:40 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(用醋酸调节pH=5.5)-乙腈(97.5:2.5),流速:0.8 mL·min～1,检测波长:268 nm,柱温:25℃。结果:本方法线性范围0.20—10.0μg·mL～1,r=0.9999,方法检测限为0.10μg·mL-1(S/N>4),定量限为(0.21±0.02)μg·mL-1(S/N>10);方法回收率为100.1%-106.6%(n=21),日内RSD为2.3%-4.0%(n=21),日间RSD为3.2%-5.2%(n=21)。结论:本方法灵敏度高,操作简便、准确,可用于人体血浆中吉西他滨浓度的测定及药动学研究。

HPLC-MS法测定人血浆中替米沙坦及药代动力学研究

目的建立人血浆中替米沙坦浓度的HPLCMS分析方法,用以测定健康受试者口服替米沙坦制剂后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药代动力学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度。方法血浆中加入内标地西泮后,乙酸乙酯提取,HPLCMS分离、分析。色谱系统ShimadzuODS柱(150mm×46mm),流动相甲醇001mol/L醋酸铵溶液(70∶30,v/v),流速10ml/min,柱温30℃。质谱检测方式SIM。结果替米沙坦的线性范围为05～400ng/ml(r=09998),最低检测浓度达01ng/ml,提取回收率大于80%。受试制剂及参比制剂的生物半衰期分别为(197±30)h和(202±36)h,达峰时间分别为(14±04)h和(16±06)h,峰浓度分别为(1739±304)ng/ml和(1782±355)ng/ml。受试制剂的相对生物利用度为(1012±130)%。结论本法适用于替米沙坦的含量测定,统计学结果表明两种制剂具有生物等效性。

HPLC法测定犬血浆中葛根素含量

目的:建立血浆中葛根素含量测定方法。方法:色谱柱:Waters Symmetry C18柱(150 mm×3.9 mm,5μm);流动相:乙腈-0.0075 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH 2.7)(10:90);测定波长:248 nm;柱温:40℃;流速:1 mL·min-1。血浆样品采用固相萃取处理。并用健康家犬6只,单剂量给予葛根总黄酮片600 mg,进行了血药浓度测定。结果:血浆样品中葛根素无干扰,最低检测限为0.1 ng·mL-1,葛根素在0.0175-2.2μg·mL-1范围内血浆药物浓度与峰面积线性关系良好,r=0.9995,回收率为85.0%-117.1%,日内、日间RSD分别为7.5%-11.6%和4.7%-8.7%。结论:本法样品处理方法简单,无干扰,提取完全,灵敏度高,重现性好,可用于葛根素生物样本分析。

RP-HPLC法测定肾移植病人血浆中霉酚酸浓度及其应用

目的:建立反相高效液相色谱法测定血浆中霉酚酸浓度的方法。方法:采用美国Waters高效液相色谱仪,Symmetry C18(150mm×3.9mm,5μm)色谱柱,乙腈-0,05%磷酸(34:66)为流动相,流速1.0 mL·min-1,萘普生作内标。样品在酸性条件下用氯仿漩涡混合萃取浓集后手动进样,在254 nm波长下检测,按内标法定量。结果:标准曲线在0.1-40 mg·L-1范围内有良好线性,最低检测浓度为0.1 mg·L-1,方法回收率为98.3%-100.4%,萃取回收率为88.1%-92.4%,日内测定RSD为0.98%-1.5%,日间测定RSD为1.0%-4.4%。结论:本方法可用于肾移植患者霉酚酸的血药浓度测定和药动学研究。

HPLC法测定白血病患者血浆中阿糖胞苷及其代谢物浓度

目的：建立测定阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）及其代谢产物阿糖尿苷（Ａｒａ－Ｕ）血药浓度的方法，并用于５例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）患者血药浓度监测。方法：采用反相离子对高效液相色谱法，色谱柱： Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｃ１８柱（５ｍ，２５０ｍｍ × ４．６ｍｍ）；流动相：乙腈－甲醇－０．０１ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸盐缓冲液（ｐＨ４．０，含０．０１ ｍｏｌ·Ｌ－１戊烷磺酸钠）（４．５：１．５：９４，ｖ／ｖ／ｖ）；流速：１．0ｍｌ·ｍｉｎ－１；检测波长：２８０ｎｍ．结果：以峰面积外标法定量，线性范围：阿糖胞苷为０．２５-２５ｍｇ·Ｌ－１，阿糖尿苷为１－１００ｍｇ·Ｌ－１。最低检测浓度阿糖胞苷为０．１ｍｇ·Ｌ－１，阿糖尿苷为０．２ｍｇ·Ｌ－１。日内、日间差阿糖胞苷小于９％和１１％，阿糖尿苷小于１％和３％。绝对回收率为９９-１０５％。结论：该方法简便，快速，灵敏度和准确度较高。

RP-HPLC测定人血浆中洛伐他汀浓度及药动学研究

用ＲＰ－ＨＰＬＣ测定人血浆中洛伐他汀浓度。以甲醇－水（８３∶１７，Ｖ／Ｖ）为流动相，色谱柱采用ＨＹＰＥＲＳＩＬＢＤＳ－Ｃ１８（５μｍ）不锈钢柱，紫外２３７ｎｍ波长检测。血浆样品经环己烷－异丙醇（９５∶５）萃取浓缩后进样测定。洛伐他汀浓度在２．５～８０ｎｇ／ｍｌ范围内线性良好，ｒ＝０．９９６８。测定含洛伐他汀２０．０ｎｇ／ｍｌ的血浆样品，其日内（ｎ＝７）及日间（ｎ＝７）的ＲＳＤ分别为９．８％和８．５％。回收率平均为（１０１．３±５．５）％。测定了１０名健康志愿者单次ｐｏ洛伐他汀片剂８０ｍｇ后不同时间的血药浓度，计算了相应的药动学参数。

HPLC-MS和HPLC-UV同时测定人血浆中阿斯匹林和水杨酸的浓度

目的 :同时测定人血浆中阿斯匹林和水杨酸的浓度。方法 :用 HPLC-MS法测定人血浆中阿斯匹林 ,同时用 HPLC-UV法测定人血浆中水杨酸的浓度。结果 :阿斯匹林 ,水杨酸的线性范围分别为 2 0～ 1 0 0 0 ng/ml和 0 .1～ 2 0μg/ ml,最低检测浓度分别为 5.0 ng/ ml和 0 .1μg/ ml。方法的绝对回收率均大于 90 % ,高、中、低浓度的日内和日间变异系数均小于 1 0 %。结论 :该方法符合生物样品分析要求 ,可用于人体内药代动力学研究。

HPLC-MS同时测定人血浆中阿莫西林和克拉维酸的浓度

目的 :同时测定人血浆中阿莫西林及克拉维酸的浓度 ,并用本法研究 Augmentin(阿莫西林∶克拉维酸钾 =7∶ 1 )干混悬剂的人体相对生物利用度。方法 :色谱柱为 Kromasil ODS 1 5 0 mm× 4 .6 mm ID,5μm,检测器为四极质谱检测器。内标为头孢羟氨苄 ,血浆样品通过 Microcon YM-1 0超滤膜超滤制备。结果 :阿莫西林、克拉维酸的线性范围分别为 0 .0 4～ 4 0 μg/ ml和 0 .0 2～ 2 μg/ ml,方法的回收率大于 80 %。 2 0名志愿者随机交叉口服单剂量 Augmentin的干混悬剂和分散片后 ,以本法测定其体内血药浓度经时过程。两种制剂的 AUC0→ 8,Cmax,Tmax均无显著性差异。结论 :阿莫西林和克拉维酸血药浓度的同时测定结果表明两种制剂生物等效 ,干混悬剂对分散片两成分的相对生物利用度分别为 1 0 1 .7%和 99.2 %。

液-液萃取RP-HPLC法测定人血浆中佐米曲普坦的浓度

目的:建立RP-HPLC法测定人血浆中佐米曲普坦浓度。方法:以替硝唑为内标,血浆样品经液-液萃取前处理后,选用Hypersil C_(18)色谱柱(5μm,200mm×5.0mm),乙腈-磷酸盐缓冲液(0.05mol·L^(-1)磷酸二氢钠,用磷酸调pH至5.0)(15∶85)为流动相,室温下在223nm处进行测定。结果:测定佐米曲普坦血药浓度线性范围为1.92-66.14ng·mL^(-1),最低定量浓度1.92ng·mL^(-1);方法回收率为90.62%-105.7%,萃取回收率为71.70%-114.75%。结论:本法分离效果良好,灵敏度高,回收率高,日内、日间误差小,能满足于人体药代动力学及生物利用度研究。

RP-HPLC法测定人血中伏立康唑血药浓度

目的建立一种快速、简便、准确的RP-HPLC法测定人血中伏立康唑血药浓度的方法,以便于监测伏立康唑的血药浓度,指导患者个体化治疗。方法采用2倍体积乙腈沉淀血浆蛋白,采用RP-HPLC法,以卡马西平为内标,色谱条件如下:色谱柱为Agilent TC-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(40∶60,V/V),流速1.0 ml·min^(-1),紫外检测波长为255 nm,进样量10μl。结果伏立康唑与卡马西平的保留时间分别为10.1和6.52 min。伏立康唑在0.2256~22.56μg·ml^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9998);定量下限为0.2256μg·ml^(-1);相对标准偏差分别批内≤4.30%,批间≤3.94%;伏立康唑高、中、低三个浓度的绝对回收率为80.51%~95.44%。结论该方法灵敏度高,操作简便,结果准确,检测成本低,更适用于临床实践中常规的伏立康唑血药浓度监测及基础药代动力学研究。

HPLC法测定大鼠血浆中色胺酮的浓度及药代动力学参数

目的建立测定血浆中色胺酮含量的HPLC法,并用于色胺酮在大鼠体内的药代动力学研究。方法采用ODSC18色谱柱(4.6 mm×250 mm),流动相为乙腈∶水(47∶53),流速为1.0 ml.min-1,检测波长为251 nm,柱温30℃,进样量20μl,内标物为桂皮醛。按56 mg.kg-1剂量给大鼠灌胃后,用HPLC法测定给药后不同时刻大鼠血浆中色胺酮的浓度。采用DAS 2.1.1软件分析,计算药动学参数。结果色胺酮在0.0183～1.1712 mg.L-1范围内线性关系良好(r2=0.999),最低定量限为0.02 mg.L-1。回收率大于95.0%,其日内、日间RSD均小于8%。大鼠灌胃色胺酮56mg.kg-1后,♀和♂T12分别为4.314和5.597 h,Tmax分别为5.2和4.6 h,Cmax分别为1.887和2.620 mg.L-1,AUC0→t分别为12.1和14.70 mg.h.L-1。结论本方法操作简便,准确,灵敏度高、重复性好,可用于色胺酮血药浓度检测及药代动力学研究。

HPLC法测定人血浆中劳拉西泮的浓度

目的:建立测定人血浆中劳拉西泮浓度的HPLC法。方法:采用美国Dikma公司Diamonsil^(TM)C_(18)(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-水(75:25,V/V),流速为0.8mL·min^(-1),检测波长232mm,以乙酸乙酯为提取溶剂。结果:劳拉西泮高(20.00μg·mL^(-1))、中(6.00μg·mL^(-1))、低(0.60μg·mL^(-1))3个浓度的平均回收率分别为101.67％,98.17％,91.20％,日内、日间RSD均<5％(n=5);分析方法的定量测定下限为0.O05μg·mL^(-1)。线性范围为0.01～20.00μg·mL^(-1),回归方程为Y=2.16×10^(-2)X-3.33×10^(-3),r=0.9999(n=10)。结论:该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于劳拉西泮临床血药浓度监测和药动学研究。

HPLC法同时测定人血浆中氯氮平和奥氮平浓度

目的建立HPLC法同时检测人血浆中氯氮平和奥氮平的浓度。方法采用Lichrospher C_(18)(150 mm×4.6mm,5μm)色谱柱;流动相:0.03 mol·L^(-1)醋酸铵-甲醇-乙腈(40:35:25);流速:1.0 ml·min^(-1);柱温:30℃;检测波长:270nm。以乙醚为提取剂。结果氯氮平血药浓度在5.0~1000.0 ng·ml^(-1)范围内峰面积与其浓度呈良好线性关系;线性方程为Y=0.0096 X-0.0623,r=0.9992(n=8);平均回收率为99.03%,奥氮平血药浓度在5.0~1000.0 ng·ml^(-1)范围内峰面积与其浓度呈良好线性关系;线性方程为Y=0.0121 X-0.054,r=0.9994(n=8);平均回收率为96.18%;日内、日司精密度均小于15%。结论该方法灵敏、简单、快速、准确,可用于临床氯氮平和奥氮平血药浓度监测和药代动力学研究。

HPLC法测定人血浆中维拉帕米浓度

建立了高效液相色谱测定维拉帕米血药浓度的新方法。血浆样品用正己烷－乙醚（１：１，Ｖ／Ｖ）提取，以ＺｏｒｂａｘＳｉｌｉｃａ为固定相，０.０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢铵－乙腈－甲醇－三乙胺（５０：２５：２５：０.２５，Ｖ／Ｖ）为流动相，紫外２３２ｎｍ处测定。采用外标法峰高定量。血药浓度在２.５～４００，ｎｇ／ｍｌ线性关系良好，ｒ＝０.９９９６。最低检测浓度为２.０ｎｇ／ｍｌ。回收率达９５.１１％～１０１.９９％，日内、日间ＲＳＤ分别为３.７６％～６.４５％和６.０６％～７.４６％。