HPLC/DAD测定柴胡疏肝散中4种活性成分的含量

目的:建立HPLC法测定柴胡疏肝散(陈皮、柴胡、川芎、枳壳、芍药等)中柴胡皂苷a、芍药苷、橙皮苷和阿魏酸含量的方法。方法:采用Hypersil BDS C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;柴胡皂苷a流动相为水-乙腈(57∶43),其他成分流动相为甲醇-0.5%冰醋酸(40∶60)洗脱;流速:0.8mL/min;柱温:30℃;检测波长范围:200～400nm,分段变波长测定。结果:4种活性成分在15min内实现良好分离,柴胡皂苷a、芍药苷、橙皮苷和阿魏酸的线性范围分别为38.5～166.7μg/mL(r=0.9996)、15.9～254.5μg/mL(r=0.9999)、22.1～353μg/mL(r=0.9993)、6.30～201.5μg/mL(r=0.9999),平均回收率分别为97.57%、97.40%、98.86%、96.37%,RSD分别为2.1%、1.1%、0.70%、1.3%。结论:该方法简便快捷,准确可靠,为柴胡疏肝散的质量控制提供依据。

基于HPLC/DAD/MS的降压复方决明提取物入血成分研究

目的:研究复方决明提取物(由决明子、野菊花、夏枯草组成)的入血成分,为其药效物质基础研究提供参考。方法:选取雄性SD大鼠为实验对象,以40 g(生药)/kg剂量灌胃给予复方决明提取物及单味药材。给药血浆首先采用直接蛋白沉淀法考察复方决明提取物入血成分及存在形式;后对其进行盐酸水解,并在280 nm和360 nm下分析吸收入血的主要苷元,进行来源归属和定性研究。结果:直接沉淀法制备的给药血浆与空白血浆比,新增成分主要为葡萄糖醛酸结合产物。酸解后,在280 nm波长下有11个入血成分,此类成分多来源于决明子,其中3号峰为橙黄决明素,7为黄决明素,10为大黄素,11号为大黄酚。360 nm下新增4个峰,主要来源于野菊花,其中12号峰为木犀草素,13为芹菜素,15为合金欢素。结论:本研究主要对复方决明提取物的入血成分进行了初探,并对其来源进行归属。此研究的开展有利于阐明复方决明提取物的药效物质基础,为其临床用药及后续进一步开发提供参考。

GC-MS与HPLC/DAD联用对纺织品中4-氨基偶氮苯的测定

从化学反应条件的控制及气相色谱一质谱（GC—Ms）和高效液相色谱／二极管阵列检测器（HPLC／DAD）联用方面，探讨了4-氨基偶氮苯的检测方法。实验表明，在样品中加入氢氧化钠，样品中的4-氨基偶氮苯和新鲜配制的连二亚硫酸钠发生反应，使4-氨基偶氮苯的碳碳双键断裂。释放的4-氨基偶氮苯在氯化钠存在的混合物中与叔丁基甲醚进行液液萃取。取叔丁基甲醚层进行分析，通过GC-Ms的保留时间及特征离子碎片并结合HPLC／DAl3紫外法对4一氨基偶氮苯进行定性和定量分析。4一氨基偶氮苯在2．5～30mg／kg范围内呈良好的线性关系，其线性方程为：y=91．23x＋5．272，相关系数，r=1．000，检出限为3．20mg／kg，平均回收率不低于90％。

HPLC/DAD/MS法同时测定苗药头花蓼中3种有效成分的含量

目的:建立HPLC法测定头花蓼中没食子酸、davidiin和槲皮苷的含量。方法:采用 Alltima C_(18)色谱柱(150 mnm×4.6mm,5μm),以A:2.5%醋酸水溶液,B:水-四氢呋喃-甲醇(40:10:50)为流动相进行梯度洗脱,梯度条件如下:0 min,80:20;15 min,10:90;20 min,10:90;25 min,80:20;30 min,80:20。流速为0.6 mL·min^(-1),紫外检测波长为270 nm。离子源APCI,扫描模式负离子。结果:没食子酸、davidiin和槲皮苷的线性范围(n=6)分别为0.017～2.28 μg(r=0.9999),0.05～2.50μg(r=0.9999),0.16～5.10 μg(r=0.9999);平均回收率(n=9)分别为98.0%,99.6%,98.5%。提取方法为80%乙醇冷浸12 h后超声30 min。结论:本方法简便、准确,可为评价不同产地的头花蓼质量提供依据。

Characterization of flavonoids in Millettia nitida var. hirsutissima by HPLC/DAD/ESI-MS^n

Millettia nitida var. hirsutissima is a Chinese herbal medicine used for the treatment of gynecological diseases. An HPLC/DAD/ESI-MSn method was established for the rapid separation and characterization of bioactive flavonoids in M. nitida var. hirsutissima. A total of 32 flavonoids were detected, of which 14 compounds were unambiguously characterized by comparing their retention time, UV, and MS spectra with those of the reference standards, and the others were tentatively identified based on their tandem mass spectrometry fragmentation data obtained in the negative ionization mode on line. Nineteen of these compounds characterized were reported from this plant for the first time.

丹芪偏瘫胶囊中间体的HPLC/DAD/ELSD指纹图谱研究

[目的]建立丹芪偏瘫胶囊中间体的高效液相色谱仪/二极管阵列检测器/蒸发光散射检测器(HPLC/DAD/ELSD)指纹图谱,为全面科学控制丹芪偏瘫胶囊的质量提供新方法。[方法]采用HPLC/DAD/ELSD串联技术,色谱柱:WatersBridge柱,RP18(4.6mm×250mm,5.0μm)。流动相A:10%乙腈—冰醋酸(500∶2.2,v/v),B:90%乙腈—冰醋酸(500∶2.2,v/v),柱温:35℃,进样量:20μL,流速:1mL/min,检测波长:254nm;漂移管温度:50℃,加热器级别:68%,载气压力:35PSI,增益值:60。[结果]建立的方法对丹芪偏瘫胶囊中紫外吸收的成分和无紫外吸收的成分均有良好的分离,一次进样同时测定了两类不同成分的指纹图谱,不同批次间的相似度符合相关规定。[结论]该方法可用于丹芪偏瘫胶囊中间体中两类不同成分指纹图谱的同时测定。

食品中苏丹红的HPLC/DAD/MS分离分析方法研究

本实验研究了一种针对食品中非法添加苏丹红的分析方法,采用固相萃取技术对样品进行前处理,然后用HPLC对苏丹红样品进行分离,DAD和MS进行串联检测。提高了分析检测的准确性、可靠性。本方法灵敏度高,具有较高且稳定的回收率,精密度较好。分析应用结果令人满意。

HPLC/DAD内标法测定纺织品中芦荟成分的含量

采用内标法定量,建立高效液相色谱二极管阵列检测器测定纺织品中芦荟成分含量的方法。本方法操作简单、准确、可靠、重复性好,可作为纺织品质量控制的参考方法。

HPLC-DAD法测定康复新液中10种抑菌剂含量

目的:建立同时测定康复新液中10种抑菌剂的高效液相色谱分析方法。方法:采用Thermo Acclaim TM 120(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.1%冰醋酸-0.02 mol·L^(-1)乙酸铵溶液和甲醇,梯度洗脱,流速为1 mL·min^(-1),扫描波长为200~700 nm。结果:在相应的浓度范围内,10种抑菌剂质量浓度与峰面积的线性关系良好,r≥0.9998;精密度试验良好,RSD在0.33%~0.38%;重复性试验与稳定性试验的RSD<0.5%,加标回收范围为97.4%~101.1%,RSD在0.4%~1.8%之间。按拟定方法测试样品苯甲酸含量在0.15%~0.34%范围,山梨酸含量在0~0.48%范围,羟苯乙酯含量在0~0.02%范围、羟苯丙酯含量再0~0.02%范围。结论:该方法灵敏快速、专属性强、准确度高,可用于康复新液中抑菌剂的含量测定。

HPLC-DAD测定饲用酸化剂苯甲酸中7种邻苯二甲酸类杂质

为了建立高效液相色谱法测定饲用酸化剂苯甲酸中邻苯二甲酸、2-羟基苯甲酸、3-羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、2-甲基苯甲酸、3-甲基苯甲酸和4-甲基苯甲酸共7种邻苯二甲酸类杂质的方法。本试验将酸化剂样品溶于甲醇和初始流动相的混合溶液中,采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm)分离7种邻苯二甲酸类杂质,以水-乙腈-甲基磺酸(85-15-0.1)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为1.2 mL/min,采用二极管阵列检测器(DAD),采集波长范围为210~400 nm,记录扫描光谱图和235 nm波长处的色谱图。用外标法定量邻苯二甲酸类杂质的含量。结果显示,7种邻苯二甲酸类杂质的浓度在0.10~40.00μg/mL范围内的线性良好,平均加标回收率在98.5%~102.7%范围内,相对标准偏差(RSD,n=5)介于0.3%~1.5%,检测限和定量限均为4 mg/kg。本试验建立的酸化剂苯甲酸中7种邻苯二甲酸类杂质的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)检测方法快速且准确,可用于苯甲酸中7种邻苯二甲酸类杂质的定性和定量检测。

HPLC-DAD法测定草鱼肉质中的维生素B_(1)和维生素B_(12)的含量

本文建立了高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)同时分离检测草鱼肉质中维生素B_(1)和维生素B_(12)的方法。草鱼样品经过酸消化和酶提取后释放出样品中蛋白结合和磷酸化的维生素B_(1)和维生素B_(12),再经固相萃取净化,结合HPLC-DAD对两种目标物进行检测。考察了高效液相色谱条件中流动相组成对分离效果的影响及固相萃取条件中样品溶液pH和洗脱剂对样品回收率的影响。采用HLB固相萃取柱对草鱼样品进行净化,甲醇/水(v/v=1/1)混合液洗脱维生素B_(1)和维生素B_(12)。色谱流动相分别为85%甲醇和50 mmol/L磷酸二氢钠(pH 3.00,含5 mmol/L己烷磺酸),进行梯度洗脱,柱温为40℃,检测波长为255 nm,进样体积为20µL,维生素B_(1)和B_(12)可在15 min内分离。在最佳分离检测条件下,维生素B_(1)和B_(12)的检出限(S/N=3)为0.21~0.36µg/mL,加标回收率为83.9%~95.1%。本文建立的方法可对草鱼肉质中维生素B_(1)和维生素B_(12)含量进行准确定量。

HPLC-DAD法测定铁筷子中香草酸和阿魏酸的含量

本研究旨在建立高效液相色谱法(HPLC)-二极管阵列检测器(DAD)测定铁筷子药材中香草酸和阿魏酸的含量。采用ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(4.6mm×25.0 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸水(B),梯度洗脱,流速1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长(0~15 min,280 nm,香草酸;15~70 min,327 nm,阿魏酸);进样量10μL。香草酸、阿魏酸的分离度均>1.5,分离效果好,分别在22.72~727.00μg/mL、9.69~310.00μg/mL范围内呈良好线性关系,r> 0.999;平均回收率(RSD)分别为101.08%(3.09%)、98.98%(3.11%),铁筷子样品S1中阿魏酸和香草酸的含量最高,S1中香草酸含量为(0.77±1.42) mg/g,阿魏酸含量为(0.36±1.32)mg/g。本研究建立的HPLC-DAD波长切换法灵敏、准确,重复性好,可用于铁筷子药材中香草酸和阿魏酸含量的测定。

Characterization of chemical constituents and in vivo metabolites of Kai-Xin-San prescription by HPLC/DAD/ESI-MS^n

This work aims to elucidate the chemical constituents of Kai-Xin-San（KXS） and its metabolites in rat plasma.KXS extracts were separated on an Agilent HPLC SB-C 18 column,analyzed by ion-trap tandem mass spectrometry and high-accuracy qTOF mass spectrometry in negative ion mode.A total of 39 compounds,including 11 ginsenosides,14 Polygala saponins,5 sucrose esters,8 oligosaccharide esters and 1 xanthone were characterized from KXS.Fifteen of them were confirmed by reference standards.No constituents were detected from Poria or Acori Tatarinowii Rhizoma.After oral administration of KXS（7 g/kg）,10 ginsenosides and 18 Polygala compounds were detected in rat plasma.This study indicates that ginseng saponins,Polygala saponins and saccharide esters could be the major effective components of KXS prescription.

抗菌消炎片(胶囊)的HPLC-DAD-CAD指纹图谱研究

目的建立抗菌消炎片(胶囊)的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法采用CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃,进样量为10μL,DAD检测器采集波长为254 nm,CAD检测器雾化温度为50℃,建立抗菌消炎片(胶囊)的HPLC-DADCAD指纹图谱,并采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)计算11批样品的相似度。结果11批次抗菌消炎片(胶囊)的DAD(254 nm)指纹图谱与对照指纹图谱的相似度在0.900~0.992,CAD指纹图谱与对照指纹图谱的相似度在0.831~0.985,在DAD(254 nm)和CAD下分别标定了34个和21个共有峰,通过对照品比对法指认了其中12个共有峰,分别为绿原酸、芒果苷、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、黄芩苷、槲皮素、黄芩素、大黄酸、汉黄芩素、大黄素和知母皂苷BⅡ。结论建立的HPLC-DAD-CAD指纹图谱分析方法为更加全面、快捷、准确地评价抗菌消炎片(胶囊)的质量提供了强有力的工具。

HPLC/DAD/MS法测定盐酸昂丹司琼及其3种微量杂质

目的:建立HPLC/DAD/MS法同时测定盐酸昂丹司琼及其3种微量杂质,即1,2,3,4-四氢-9-甲基-4H-咔唑酮(中间体Ⅰ)、9-甲基-3-(二甲胺基)甲基-1,2,3,9-四氢-4H-咔唑-4-酮盐酸盐(中间体Ⅱ)、1,2,3,9-四氢-9-甲基-3-亚甲咔唑酮(杂质Ⅲ)。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Allsphere Cyano(CN)柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.02mol·L-1磷酸二氢钠水溶液(用1mol·L-1氢氧化钠调节pH5.4)梯度洗脱,梯度条件如下:0.01min,25∶75;10.0min,75∶25;15.0min,75∶25;15.10min,25∶75;20.0min,25∶75;流速:1mL·min-1;柱温:25℃;进样量:10μL,检测波长248nm,离子源:ESI,扫描模式正离子。结果:盐酸昂丹司琼、中间体Ⅰ、中间体Ⅱ、杂质Ⅲ的线性范围分别为:0.01～2.53μg(r=0.9999),0.01～2.52μg(r=0.9999),0.01～2.53μg(r=0.9999),0.01～2.48μg(r=0.9999);最低检测限分别为0.125,0.125,0.25,0.125ng;定量限分别0.375,0.375,0.75,0.375ng。结论:盐酸昂丹司琼及其3种微量杂质分离良好;其原料药中检出杂质Ⅲ,含量为0.10%。该方法简单、准确、可靠、重现性好,可以作为盐酸昂丹司琼及其3种可能的微量杂质的质量控制方法。

HPLC-DAD法测定苗药银丹心泰滴丸中原儿茶醛

目的:建立测定银丹心泰滴丸中原儿茶醛含量的方法。方法:采用HPLC-DAD法,色谱柱:Eclipse Plus C18(5μm, 250 mm×?4.6 mm),Agilent;流动相:0.1%磷酸溶液-甲醇(体积比85∶15);流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;检测波长:278 nm;进样量:10μL。结果:原儿茶醛质量浓度在8.2995~41.4973μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为101.1%(RSD:1.5%,n=6)。结论:该定量方法准确可靠,重现性好,可用于银丹心泰滴丸的质量控制。

基于HPLC-DAD数据库快速筛查降血脂类产品中非法添加的10种化学药物

目的建立一种能同时检测10种有降血脂作用化学药物的HPLC-DAD分析方法,建立各物质保留时间和紫外吸收光谱的二维定性数据库,并将此数据库用于降血脂药物非法添加的快速筛查。方法采用迪马Platisil ODS色谱柱;以0.5%甲酸为流动相A,以乙腈为流动性B,进行梯度洗脱。采集HPLC-DAD检测结果中的对照品的保留时间紫外吸收光谱信息,建立10种常见降血脂化学药物的二维定性数据库。结果本实验基于HPLC-DAD方法新建立了一个快速筛查降血脂类产品中非法添加的数据库,通过对市场抽检样品和模拟阳性样品的检测,结果准确可靠。结论本实验建立的HPLC-DAD数据库可快速筛查产品中是否添加了降血脂类化学药物,具有操作简便、快速的特点,为基层监督检验机构提供了一个可靠的方法学参考。

HPLC-DAD波长切换法测定阿司匹林双嘧达莫片的含量及游离水杨酸

目的:建立HPLC-DAD波长切换法测定阿司匹林双嘧达莫片的含量及游离水杨酸的方法。方法:采用Agilent ZORBAX SB C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水(20∶5∶5∶70)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长276 nm(阿司匹林)、284 nm(双嘧达莫)和303 nm(水杨酸)。结果:阿司匹林、双嘧达莫和游离水杨酸分别在38.37~383.71、9.60~96.05和1.02~10.21μg·mL^(-1)范围内线性关系良好。平均回收率分别为99.88%(RSD=0.23%)、99.01%(RSD=0.46%)和100.99%(RSD=0.75%)。本法与标准方法含量测定结果无明显差异。含量均匀度A+2.2S在4.7~6.4。结论:建立的含量测定方法,操作简单,更适用于阿司匹林双嘧达莫片的质量控制。

固相萃取HPLC/DAD法测定大鼠尿样中的延胡索乙素

目的:建立能同时分离分析大鼠尿样中延胡索乙素(THP)及其代谢产物的HPLC/DAD方法。方法:尿样经Oasis HLBC18固相萃取小柱提取,采用HPLC/DAD法检测,色谱柱:Ultimate XB-C18(4.6mm×200mm,5μm);流动相:A相为0.1%醋酸水溶液(三乙胺调节pH5.5),B相为乙腈,梯度洗脱;流速为1.0mL·min-1;检测波长230nm;大鼠给药THP后,收集其尿样分析。结果:THP在0.10～50.0μg·mL-1的范围内有良好的线性关系(r=0.9999),最低定量限为0.10μg·mL-1,平均方法回收率为99.5%,提取回收率为73.6%;日内和日间RSD小于9%。结论:所建立的方法准确可靠,可用于THP尿样浓度测定及其排泄动力学研究。

应用HPLC-DAD-MS联用技术研究中药川芎指纹图谱

目的 研究川芎药材的高效液相色谱指纹谱 ,为科学评价和有效控制其内在质量提供可靠方法。方法应用HPLC DAD MS联用技术测定四川GAP示范基地 3个公司的 9个川芎样品 ,鉴定共有峰和特征峰 ,指定参照峰 ,计算共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果 9个样品的色谱指纹图谱有 2 1个共有峰。色谱图分为 4个区 ,第1区 (0 12min)主要分布酚酸类和生物碱类化合物 ,有 3个共有峰 ,峰 3被确证为ferulicacid ;第 2区 (12 2 4min)主要分布羟基化苯酞类化合物 ,有 4个共有峰 ,特征峰 4和 5被确证为senkyunolideI和senkyunolideH ;第 3区 (2 4 32min)主要分布烷基化苯酞类化合物 ,有 7个共有峰 ,特征峰 9,11,13和 14分别被确证为senkyunolideA ,coniferylferulate ,Z ligustilide和 3 butylidenephthalide。峰 13Z ligustilide被指定为参照峰 ;第 4区 (32 5 0min)分布苯酞二聚体化合物 ,有 7个共有峰 ,峰 15和 17分别被确证为riligustilide和levistolideA。所有样品中 2 1个共有峰的相对保留时间稳定 (RSD≤1% ) ,同一公司同一年采收的样品 13个主要共有峰 (归一化法峰面积≤ 1% )的相对峰面积稳定 ,而不同公司同一年采收的样品 13个主要共有峰的相对峰面积差异非常显著 (P <0 0 0 1)。