HPLC双波长切换法同时测定仙桃草中木犀草素、芹菜素、金圣草素的含量

目的:测定仙桃草中木犀草素、芹菜素、金圣草素等3种黄酮类成分的含量。方法:以甲醇提取制备分析样品,采用纳谱ChromeCore C 18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(23:77)为流动相,流速1 mL/min,检测波长为350 nm(木犀草素、金圣草素)和337 nm(芹菜素),柱温35℃。结果:木犀草素、芹菜素、金圣草素在各自范围内线性关系良好(r≥0.9996),平均加样回收率分别为97.79%、98.77%、97.28%,RSD分别为0.94%、0.91%、0.77%。13批样品的木犀草素含量在0.0391~0.7979 mg/g之间,平均值为0.5503 mg/g;芹菜素含量在0.0556~0.2655 mg/g,平均值为0.1938 mg/g;金圣草素含量在0.0575~0.2484 mg/g,平均值为0.1711 mg/g。结论:该方法准确、可靠、重现性好,可用于仙桃草质量控制。

HPLC双波长法测定四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

建立HPLC双波长法同时测定四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。采用XBridge C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇-水(52∶48)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1);柱温25℃;进样量10μL,检测波长分别为225 nm(穿心莲内酯)和254 nm(脱水穿心莲内酯)。穿心莲内酯浓度在12.7375μg·mL^(-1)~509.5μg·mL^(-1)范围内,线性良好(r^(2)=0.9996);脱水穿心莲内酯浓度在3.4μg·mL^(-1)~136μg·mL^(-1)范围内,线性关系良好(r^(2)=0.9997)。穿心莲内酯加样回收率平均为98.8%,RSD为1.0%;脱水穿心莲内酯回收率平均为99.9%,RSD为08%。该方法快捷、灵敏、准确、可靠,可用于四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯2个有效成分的同步测定,为四味穿心莲散的质量控制和评价提供科学依据。

HPLC波长切换法同时测定香砂平胃丸中4种有效成分的含量

探究HPLC(高效液相色谱)波长切换法同时测定香砂平胃丸中4种有效成分的含量。方法 使用SyncronisC18色谱柱,检测波长分别为:40~60min时335nm检测苍术素、0~19min时283nm检测橙皮苷、19~29min时250nm检测甘草酸、29~40min时294nm检测和厚朴酚, 柱温为35℃。结果 苍术素、橙皮苷、和厚朴酚以及甘草酸质量浓度分别为5.135-82.001g/L(r=0.9991,n=6)、19.65-319.76g/L(r=0.9995,n=6)、12.69-200.54g/L(r=0.9999,n=6)、15.46-240.85g/L(r=0.9999,n=6),平均加样回收率均高于95.00%。结论 针对香砂平胃丸使用HPLC波长切换法能够实现质量评估与质量控制,为该药物的广泛推广提供有力支撑。

HPLC双波长切换法同时测定加味益母草膏中5个成分的含量

目的:建立HPLC双波长切换法同时测定加味益母草膏中益母草碱、芍药苷、芦丁、阿魏酸和毛蕊花糖苷5个成分含量。方法:采用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱(0~8 min,12%A→23%A;8~25 min,23%A→38%A;25~50 min,38%A→50%A),流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长为230 nm(益母草碱、芍药苷、芦丁)和322 nm(阿魏酸、毛蕊花糖苷),进样量为20μL,柱温为30℃。结果:益母草碱、芍药苷、芦丁、阿魏酸和毛蕊花糖苷的平均含量分别为1.586、0.348、0.186、0.036、0.034 mg·g^(-1),5个成分线性关系良好(r>0.9995),平均加样回收率为98.8%~101.3%,RSD为1.1%~2.0%。结论:此方法高效、简便,易操作,可同时测定加味益母草膏中5个成分的含量,检测结果准确度高,精密度好,可用于加味益母草膏的质量控制,也可为加味益母草膏的进一步研究及临床应用提供科学依据。

HPLC双波长法同时测定黄连上清片中栀子苷和盐酸小檗碱的含量

研究开发同时测定黄连上清片中栀子苷和盐酸小檗碱两种有效成分的定量方法。采用ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱,流动相:A泵为乙腈,B泵为0.2%磷酸,切换波长检测:0~10分钟检测栀子苷(λ=238nm)、10~50分钟检测盐酸小檗碱(λ=345nm),流速为1.0ml/min,梯度洗脱,柱温为30℃,进样10μL。可使各组分有效分离,栀子苷的回归方程:y=43651x-1027(r=0.9996)、加样回收率的平均值为98.95%(RSD=1.5%);盐酸小檗碱的回归方程:y=27519x-2836(r=0.9995)、加样回收率的平均值为99.07%(RSD=1.7%)。结果说明此法快速、专属性高,可用于对黄连上清片的质量控制。

HPLC-双波长切换法同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱、丹酚酸B的含量

目的:建立同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱和丹酚酸B含量的方法。方法:采用HPLC-双波长切换法。色谱柱为Waters symmetry C18,以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为286 nm(丹酚酸B)、336 nm(脱氢紫堇碱),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL。结果:在建立的检测条件下,脱氢紫堇碱和丹酚酸B均能达到基线分离,二者进样量线性范围分别为0.157～1.259μg、0.391～3.131μg(r均为0.999 9);精密度、重复性和稳定性试验(24 h内)的RSD均小于2.00%(n=6～10);平均加样回收率分别为101.61%、102.85%(RSD分别为3.59%、2.85%,n=6)。结论:建立的HPLC-双波长切换法可同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱和丹酚酸B含量,且方法操作简便、快速,可用于双参通冠胶囊的质量控制。

HPLC双波长切换法测定二妙丸中盐酸小檗碱、苍术素含量

目的:建立HPLC双波长切换法对二妙丸中盐酸小檗碱、苍术素的含量测定,该方法有利于二妙丸的含量测定及质量控制。方法:采用反相高效液相色谱法;以0.02mol/L磷酸二氢钾(用磷酸调PH3.0)-乙腈(色谱纯)流动相梯度洗脱;流速:1.0m L/min;柱温:30℃;检测波长:270nm(0~10min,盐酸小檗碱)、340nm(10~20min,苍术素);结果:HPLC双波长切换法可同时测定二妙丸中盐酸小檗碱、苍术素的含量,盐酸小檗碱和苍术素分别在14.63~292.5μg/m L、0.54~10.75μg/m L和峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率(N=6)分别为99.8196%、99.2808%。RSD分别为0.6163%、2.1763%。结论:该方法准确、可靠、专属性强,为二妙丸的质量控制提供参考。

双波长HPLC法同时测定丹皮药材中的3个指标成分

目的:同时测定不同产地丹皮药材中丹皮酚、芍药苷和没食子酸的含量。方法:采用双波长高效液相色谱法。Altima C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为0.4%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱:洗脱条件为0min→50min→60min,乙腈0%→40%→85%,流速1.0mL·min^(-1);检测波长为274nm和245nm;柱温为室温。结果:丹皮酚、芍药苷和没食子酸分别在1.3～255.0,0.4～75.0,0.9～175.0μg·mL^(-1)范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为(99.3±3.34)%,(102.2±1.55)%,(99.0±1.64)%;最低检测浓度分别为24.0,36.8,71.0ng·mL^(-1)。结论:该方法准确可靠、操作简便,为丹皮药材提供更合理、可靠的质量控制方法。

HPLC波长切换法测定蓝芩口服液中4种成分的含量

目的建立HPLC波长切换法同时测定蓝芩口服液中(R,S)-告依春、黄芩苷、栀子苷、盐酸小檗碱4种成分的含量。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6mm×50mm,3.5μm)色谱柱,以乙腈(A)-磷酸盐缓冲液(B)(磷酸氢二钠2.3996g溶解于1000ml水中,用磷酸调pH值至3.0)为流动相,梯度洗脱(0~3min,2%A;3~13min,2%~20%A;13~20min,20%~45%A);波长:0~5min,245nm;5~12min,238nm;12~20min,265nm;流速:1.0ml·min^(-1);柱温:30℃;进样量:10μl。结果(R,S)-告依春、栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的线性范围分别是0.005 780~0.1156μg(r=0.9997)、0.2251~4.502μg(r=0.9999)、0.1070~2.139μg(r=0.9994)、0.027 29~0.5458μg(r=0.9994);平均加样回收率(n=6)分别为98.53%、97.79%、97.05%、98.78%,RSD分别为1.31%、1.13%、1.23%、0.67%。结论该方法操作简单,快速,重复性好,可用于蓝芩口服液的质量控制。

双波长HPLC法建立栀子药材的指纹图谱

目的采用双波长HPLC法建立栀子药材指纹图谱。方法采用Waters Symmetry C_(18)(250mm×4.6mm,5"m)色谱柱;乙腈-水梯度洗脱;流速:0.8mL·min^(-1);柱温:30℃。结果以栀子苷为参照物,用HPLC法测定不同产地10批栀子药材的指纹图谱,分离度达到1.5,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统,计算出10批栀子指纹图谱的相似度,均在0.940~1.000。结论该方法具有良好的精密度、稳定性和重复性,可更好地控制栀子药材的内在质量。

HPLC双波长法研究八角莲饮片的质量

目的研究八角莲饮片的质量控制新标准。方法用HPLC双波长法同时检测八角莲饮片中鬼臼毒素、4′-去甲基鬼臼毒素、山柰酚和槲皮素。确定了360 nm作为槲皮素和山柰酚的定量波长,290 nm作为鬼臼毒素与4′-去甲基鬼臼毒素的定量波长;柱温:30℃;流速:1.0 mL·min^-1;进样量:10μL。结果HPLC双波长法可以同时测定八角莲饮片中的4种成分。鬼臼毒素、4′-去甲基鬼臼毒素、山柰酚和槲皮素的线性范围分别为0.74~3.68,2.40~12.02,0.21~1.08和0.26~1.28μg;回收率分别为99.56%,100.22%,100.67%和100.44%;含量分别为9.46~31.53,0.64~12.08,1.78~2.55和1.10~2.45 mg·g^-1。结论该方法快速、简捷、稳定可靠,适用于八角莲中木脂素类和黄酮类化学成分的测定。同时,该结果也表明各批次间黄酮类成分的差异较木脂素类成分小。

基于双波长HPLC指纹谱和其融合谱的系统指纹定量法鉴定甘草质量

目的建立甘草双波长HPLC指纹图谱及其融合谱,用系统指纹定量法鉴定其质量。方法采用RP-HPLC法,运用双波长融合谱技术分别对10批产地甘草提取具有代表性和互补性的203和254 nm的局部色谱图,融合生成对照指纹图谱(RFP)。用系统指纹定量法通过对双波长谱及其融合谱的评价,实现对10批不同产地甘草真实质量的鉴别。并对甘草化学指纹进行破坏性试验考察。结果基于203 nm HPLC指纹谱与融合谱的系统指纹定量法评价结果基本一致,用主成分分析和F值证明了融合谱优于此双波长HPLC指纹图谱可用于甘草药材质量控制。结论203和254 nm及融合谱的含量相似度Pm有一定波动是由于不同波长谱反映的化学成分的信号大小有一定的差异,导致评价的结果有出入。基于此双波长融合谱的系统指纹定量法的评价结果反映化学指纹信息全面、真实可靠,可清晰准确鉴别甘草真实质量。

HPLC波长切换联合梯度洗脱法测定补肾益精丸中的异去甲基蟛蜞菊内酯、蟛蜞菊内酯、金丝桃苷、紫云英苷和异鼠李素

目的：建立HPLC波长切换联合梯度洗脱法测定补肾益精丸中的异去甲基蟛蜞菊内酯、蟛蜞菊内酯、金丝桃苷、紫云英苷和异鼠李素。方法：采用kromasilC18（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱；流动相：乙腈（A）和0．4％磷酸溶液（B），进行梯度洗脱；流速：0．9mL／min；柱温：30℃；进样量为20汕。异去甲基蟛蜞菊内酯和蟛蜞菊内酯的检测波长为351nm，金丝桃苷、紫云英苷和畀鼠李素的检测波长为360nm。结果：异去甲基蟛蜞菊内酯、蟛蜞菊内酯、金丝桃苷、紫云英苷和异鼠李素分别在5．15-103．00μg/mL（r=0．9992）、4．58-91．60μg／mL（r=0．9998）、9．95-199．00μg／mL（r=0．9996）、8．27-165．40μg／mL（r=0．9999）、4．55-91．00μg／mL（r=0．9994）范围内与峰面积具有较好的线性关系，平均加样回收率和相应的RSD（n=6）分别为97．59％（1．06％）、99．33％（1．17％）、98．18％（0．92％）、98．95％（1．11％）、97．05％（0．77％）。结论：本文建立的HPLC波长切换梯度洗脱法同时测定补肾益精丸中的5个成分：异去甲基蟛蜞菊内酯、蟛蜞菊内酯、金丝桃苷、紫云英苷和异鼠李素，方法操作简便、快速，可作为补肾益精丸全面可靠的质量控制方法。

双波长HPLC法同时测定穿心莲浸膏中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

目的建立双波长高效液相色谱法同时检测穿心莲浸膏中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定方法。方法采用Intersil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇—水（60∶40）为流动相；检测波长穿心莲内酯为225 nm,脱水穿心莲内酯为254 nm；柱温为35℃；流速为1.0 mL·min-1。结果穿心莲内酯进样量在0.1043～1.0430μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=1.000 0,n=5）,脱水穿心莲内酯进样量在0.099 9～0.999 0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=1.000 0,n=5）；穿心莲内酯的平均加样回收率为98.53%（RSD=1.27%,n=6）,脱水穿心莲内酯的平均加样回收率为101.51%（RSD=1.10%,n=6）。结论该方法灵敏度高,重现性好,能准确测定穿心莲浸膏中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。

HPLC波长切换法同时测定强肝颗粒中8种活性成分的含量

目的:建立HPLC波长切换法同时测定强肝颗粒中(R,S)-告依春、绿原酸、芍药苷、阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、藁本内酯、丹酚酸B、丹参酮ⅡA8个成分的含量。方法:采用Phenomenex Kinetex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.05%磷酸溶液(B),梯度洗脱,检测波长为245 nm[0~18 min检测(R,S)-告伊春]、320 nm(18~24 min检测绿原酸)、230 nm(24~28 min检测芍药苷)、286 nm(28~70 min检测阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、藁本内酯、丹酚酸B和丹参酮ⅡA),流速1.0 ml·min^-1,柱温35℃,进样量10μl。结果:(R,S)-告依春、绿原酸、芍药苷、阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、藁本内酯、丹酚酸B、丹参酮ⅡA质量浓度分别在9.04~180.80μg·ml^-1(r=0.9983)、20.40~408.00μg·ml^-1(r=0.9998)、13.06~261.20μg·ml^-1(r=0.9997)、10.90~218.00μg·ml^-1(r=0.9999)、7.68~153.60μg·ml^-1(r=0.9992)、11.24~224.80μg·ml^-1(r=0.9986)、4.02~80.40μg·ml^-1(r=0.9988)、7.60~152.00μg·ml^-1(r=0.9990)范围内与峰面积呈良好线性关系;平均加样回收率分别为97.6%,98.2%,99.1%,98.7%,96.4%,96.2%,97.3%,97.0%,其RSD分别为1.4%,1.0%,0.7%,1.0%,1.0%,1.5%,1.1%,1.9%。结论:该方法准确、简单、有效,可用于同时测定强肝颗粒中上述8种活性成分的含量。

HPLC双波长法测定小柄马勃子实体、液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮含量

建立HPLC双波长法同时测定小柄马勃(Lycoperdon pedicellatus)子实体与液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的含量,并比较2种不同药用部位中麦角甾醇和麦角甾酮的含量差异。采用岛津InertsilODS-SP C18柱(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱,流动相为甲醇,流速为0.8 mL·min^(-1),检测波长分别为282 nm、 349 nm,柱温为30℃。结果表明,子实体中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.02μg^0.20μg (r=1)、 6.54 ng^65.40 ng(r=1)范围内线性关系良好。液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.305μg^3.05μg (r=1)、6.54 ng^65.40 ng (r=1)范围内线性关系良好。因此所建立的双波长测定法准确可靠、重复性良好,可用于小柄马勃及其液体发酵菌丝中麦角甾醇、麦角甾酮化学成分的含量测定,为控制其质量提供参考依据。

HPLC双波长切换同时测定玄参药材中哈巴苷和哈巴俄苷的含量

目的:建立以双波长切换方式同时测定玄参药材中哈巴苷和哈巴俄苷的含量的方法。方法:采用Shimpack VP-ODS C_(18)柱(250 mm×4.6,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-磷酸(0.03%)(B)为流动相进行梯度洗脱:0-10 min,3%-10%(A);10-20 min,10%-33%(A);20-25 min,33%-50%(A);25-30 min,50%-80%(A);30-35 min,80%(A);35-37min,80%-3%(A);检测波长:前10 min为278 nm,10-15 min为210 nm,15 min后为278 nm,柱温为30℃,进样量为10μL,流速为1 mL·min^(-1)。结果:哈巴苷在0.011824-0.11824 mg·mL^(-1)范围内与哈巴俄苷在0.00416-0.0416 mg﹒mL^(-1)范围内线性关系良好。结论:该检测方法稳定可行,可用于同时测定玄参药材中哈巴苷和哈巴俄苷的含量。

基于HPLC-DAD波长切换法同时测定祛风止痛胶囊中5种成分的含量

目的:建立祛风止痛胶囊中羟基红花黄色素A、山柰素、川续断皂苷Ⅵ、没食子酸、原儿茶酸5种成分的含量测定方法。方法:采用HPLC波长切换法同时测定祛风止痛胶囊中羟基红花黄色素A、山柰素、川续断皂苷Ⅵ、没食子酸、原儿茶酸5种化学成分的含量,色谱柱为Waters XBridge TM C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇-0.5%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;柱温为30℃;检测波长分别为λ_(1)=212 nm、λ_(2)=280 nm、λ_(3)=367 nm。结果:羟基红花黄色素A、山柰素、川续断皂苷Ⅵ、没食子酸、原儿茶酸分离度良好;分别在0.809~16.170μg/mL(r=0.999 8)、3.469~69.380μg/mL(r=0.999 9)、3.420~68.400μg/mL(r=0.999 7)、0.907~18.130μg/mL(r=0.999 9)、1.250~24.990μg/mL(r=0.999 8)的范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为99.99%(RSD=0.65%)、102.43%(RSD=2.48%)、103.88%(RSD=1.54%)、99.85%(RSD=0.44%)、103.40%(RSD=0.73%)。结论:本研究建立了同时测定祛风止痛胶囊中5种指标性成分的含量方法,该法操作准确、重复性好,可客观、全面地对祛风止痛胶囊的内在质量进行有效评价。

HPLC双波长法同时测定白鲜皮中5种成分的含量

目的:采用HPLC双波长法同时测定白鲜皮中γ-崖椒碱、柠檬苦素、白鲜碱、黄柏酮和梣酮的含量。方法:采用Waters Symmetry~? C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;分别于210和236 nm测定5种成分的含量。结果:γ-崖椒碱、柠檬苦素、白鲜碱、黄柏酮和梣酮分别在2.5～200μg/mL(r=0.9999)、40～200μg/mL(r=0.9998)、40～200μg/mL(r=0.9990)、110～550μg/mL(r=0.9997)和100～500μg/mL(r=0.9998)范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为94.98%、96.88%、96.71%、96.12%和95.79%,RSD分别为3.43%、2.99%、2.71%、2.79%和3.09%。结论:所建立的HPLC双波长法操作简便,结果准确,重复性好,适用于白鲜皮中γ-崖椒碱、柠檬苦素、白鲜碱、黄柏酮和梣酮5种成分的含量测定。

HPLC波长切换法测定牛黄清感胶囊中3个成分的含量

目的建立HPLC波长切换法测定牛黄清感胶囊中绿原酸、黄芩苷、连翘苷3个成分的含量。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~5min,5%A;5~15min,5%~18%A;15~25 min,18%~28%A);波长:0~10.0 min,327nm;10.0~16.5 min,280nm;16.5~25.0min,277nm;流速:1.0 ml·min-1;柱温:30℃;进样量:10μl。结果绿原酸、黄芩苷、连翘苷的线性范围分别是0.1063~2.126μg(r=0.9998)、0.3007~6.013μg(r=0.9999)、0.05180~1.036μg(r=0.9996);平均加样回收率(n=6)分别为98.01%、98.83%、98.04%,RSD分别为1.31%、0.77%、1.29%。结论该方法操作简单,重复性好,可用于牛黄清感胶囊的质量控制。