HPLC柱前衍生化法测定硫酸依替米星的含量

目的 :采用反相高效液相色谱柱前衍生化法测定硫酸依替米星的含量。方法 :衍生化条件 :衍生化试剂为邻苯二醛 ,反应温度为 6 0℃ ,反应时间为 15min。色谱条件 :色谱柱为KromasilC1 8柱 (5 μm ,2 0 0mm× 4 6mm) ;流动相为水 冰醋酸 甲醇 (2 0∶5∶75 )配制的 0 0 2mol L的庚烷磺酸钠溶液 ;检测波长为 330nm ;流速为 1ml min。结果 :线性范围 :0 1～ 1 0mg ml,r=0 9999;该方法与微生物法测定结果基本一致 ,衍生化产物稳定。结论 :所建立的反相高效液相色谱柱前衍生化法能准确测定硫酸依替米星的含量 。

HPLC柱前衍生法2-氨基乙磺酸制备工艺还原阶段流程诊断

建立了利用HPLC柱前衍生对2-氨基乙磺酸制备工艺还原阶段的流程诊断方法,2-氨基乙磺酸工艺中还原阶段中2-氨基乙磺酸的产率可达91％,流程分析诊断结果表明HPLC可靠易行,便于对工艺流程的监控。

HPLC柱前衍生法测定兔血浆中海星甾醇(A1998)浓度

目的:建立高效液相色谱柱前衍生法测定兔血浆中海星甾醇(A1998)浓度。方法:用2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)将A1998 C-17位上的2个羰基衍生化,形成双腙,以提高检测灵敏度。选用A1998的同系物3β-羟基雄甾-5烯-17酮己二酸酯(C6)作为内标。色谱条件:采用Agilent Zorbax Exend C18反相色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为100%甲醇,流速2.0 mL·min-1,检测波长为360 nm。结果:血样中A1998浓度在0.05-10μg·mL-1范围内具有良好的线性关系(r=0.9998),最低检测浓度为0.05μg·mL-1。回收率大于80%,日内及日间精密度RSD分别为3.2%-15%和6.7%-11%。结论:本方法灵敏、准确、实用,能够满足动物药物代谢动力学研究的要求。

谈有关HPLC柱效的问题

目的 :分析影响HPLC柱效的若干主要因素。方法 :列举典型例子分析说明实测时导致柱效变化之因素。结果 :证明柱类型、柱填充、PH值、缓冲液种类及浓度、温度、流动相等因素对柱效的影响。结论 :柱类型、柱填充即内在塔板数是柱效的内在先决因素 ;分析条件与方法即方法塔板数是柱效的外在影响因素。

HPLC柱后衍生法测定黄曲霉毒素B_1质量控制图的应用

研究高效液相色谱柱后衍生法测定黄曲霉毒素B1的质量控制图的应用。通过加标样品的测试,用数理统计的方法求出相关技术指标,作出黄曲霉毒素B1质量控制图,得出AFB1的控制限为73.78%～90.24%,警戒线为76.52%～87.50%。试验结果表明,质量控制图能直观有效地控制高效液相色谱柱后衍生法测定黄曲霉毒素B1的分析质量,确保检测结果准确可靠。

HPLC柱子换向使用的效率分析

本文探讨了柱压、重现性这二个重要因素与柱效之间的关系。采用柱的“换向法”,降低了柱的一般性堵塞和渗漏问题,明显地延长了柱的使用寿命。

HPLC柱前酸化法测定柴胡中柴胡皂苷a和d的条件优化研究

目的优选HPLC柱前酸化法测定柴胡中柴胡皂苷a、d的酸化条件,通过对相关分析方法的评价,筛选优化的测定方法。方法采用单因素及正交试验优选柴胡皂苷a、d前处理的酸化条件和最佳提取条件,并对相关分析方法进行比较。结果优选柴胡皂苷a、d的前处理酸化条件为:8%盐酸,30℃反应18 h,反应结束用8%KOH溶液调pH至中性;样品最佳提取条件为:取药材粉末0.5 g,加8%氨甲醇溶液25 mL,超声提取3次,每次45 min;与相关文献方法比较表明本方法灵敏度高、分离度好、色谱图杂质峰较小、目标峰面积较大。结论本实验建立的定量测定方法优于相关文献报道的其他方法,可作为柴胡质量控制的方法。

柱前衍生HPLC法测定薏苡仁油中的脂肪酸含量

目的:建立以高相液相色谱法测定药用植物油——薏苡仁油中的脂肪酸的方法。方法:以2,4’-二溴苯乙酮为衍生化试剂,18-冠-6醚为相转移催化剂,采用HiQ sil C8(250 mm×4 mm,5μm)反相柱,波长254 nm。以乙腈-水(85:15)为流动相等度洗脱,柱温30℃,设定流速为1.5 mL·min-1。正十七烷酸为内标,一次基线分离5种脂肪酸。结果:亚油酸的线性范围为0.026-0.387μg,软脂酸的线性范围为0.014-0.207μg,油酸线性范围为0.027-0.404μg,硬脂酸的线性范围为0.011-0.160μg,相关系数均为0.9999。平均回收率分别为100.4%,102.2%,99.4%,104.5%,RSD分别为1.0%,1.9%,0.7%,2.4%。结论:本方法重现性好,定量准确,可作为薏苡仁油中脂肪酸测定的定量方法。

板蓝根颗粒中精氨酸的柱前衍生化HPLC测定

目的 建立一种定量分析方法评价板蓝根颗粒的质量。方法 柱前衍生化 HPL C法 ,以 Phenom enODS C1 8柱 (10μm,4 .6 mm× 2 5 0 mm )分析柱 ;0 .1m ol/ L醋酸钠缓冲液 (p H6 .4 ) -乙腈 (86∶ 14 )为流动相 ,流速 1.0 ml/ m in;36 0 nm下进行检测 ,分析了不同来源的板蓝根颗粒中精氨酸的含量。结果 通过该法 ,成功地测定了板蓝根颗粒中精氨酸的含量 ,并且发现 ,不同来源的板蓝根颗粒中精氨酸的含量差别很大。结论 该法操作简单 ,重复性好 ,准确可靠 。

柱切换HPLC技术及其在体内药物分析中的应用

综述了柱切换HPLC技术及其与在线透析、在线衍生化等联合应用于体内药物分析 ,以及在在线去蛋白、全血直接进样、在线浓缩净化等方面的应用情况。由于该技术最显著的特点是在线分离 ,增强了色谱的选择性 ,使之成为药物分析的强有力的工具 。

HPLC/MS法与柱前衍生化HPLC/UV法测定环维黄杨星D有关物质比较

目的:验证柱前衍生化HPLC/UV测定环维黄杨星D有关物质的可行性。方法:环维黄杨星D同异氰酸苯酯反应后,柱前衍生化HPLC/UV测定环维黄杨星D有关物质并与HPLC/MS直接测定环维黄杨星D有关物质比较。结果:衍生化反应后,主峰与有关物质分离好,所测得的有关物质与HPLC/MS直接测定的环维黄杨星D有关物质一一对应。结论:环维黄杨星D中含分子量为386,388的杂质,每分子环维黄杨星D及有关物质均同2分子异氰酸苯酯定量反应,柱前衍生化HPLC/UV可测定环维黄杨星D有关物质,与HPLC/MS直接测定法相比,本法简单、准确。

板蓝根中L-精氨酸的柱前衍生法HPLC分析

目的 建立板蓝根药材中 L-精氨酸的含量测定方法。方法 2 ,4 -二硝基氟苯 (DNFB)柱前衍生化 HPL C方法 ,以 Phenomen ODSC18柱 (4.6 mm× 2 5 0 mm,10μm)为分析柱 ,0 .1mol.L-1醋酸钠缓冲液 (p H 6 .4 ) -乙腈(86 :14 )为流动相 ,流速 1.0 m L .min-1,波长 36 0 nm下检测 ,分析了板蓝根药材中 L -精氨酸的含量。结果 本法操作简单 ,重复性好 ,并以该法分析了板蓝根药材中 L-精氨酸的含量。结论 本文建立的柱前衍生化 HPL C方法适合于板蓝根药材中 L -精氨酸的含量测定 ,结果表明 ,不同产地来源的板蓝根药材 L -精氨酸的含量存在着差别。

柱前衍生化HPLC法测定柊叶游离氨基酸成分及风味评价

建立柱前衍生化HPLC法测定柊叶游离氨基酸的方法,对其营养价值和风味进行评价。柱前衍生化HPLC法以异硫氰酸苯酯为衍生试剂,色谱条件为:C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),醋酸钠缓冲液-乙腈(93∶7)和乙腈-水(4∶1)为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温40℃,检测波长为254 nm。结果表明,18种氨基酸均呈现良好的线性关系(R^(2)>0.9990),柊叶游离氨基酸的平均回收率分别为98.3%~105.6%(RSD为0.63%~3.11%,n=6)。所建立的方法稳定、灵敏、重现性好,可用于柊叶游离氨基酸的定量分析。柊叶含有18种氨基酸及8种人体必需氨基酸,必需氨基酸总量为38.85%,接近于WHO/FAO模式值(40.0%),各种必需氨基酸组分达到WHO/FAO氨基酸成人模式的需求;鲜味氨基酸和甜味氨基酸的含量分别为10.73和5.20 mg/g,占呈味氨基酸总含量的22.58%和46.59%;鲜味氨基酸Asp和甜味氨基酸Thr的含量较高,分别为3.75 mg/g和3.33 mg/g,鲜味氨基酸Asp和芳香族氨基酸Cys的RCT值分别为125.00和20.50,对风味贡献最高。总之柊叶氨基酸种类齐全,比例合理,呈味氨基酸含量丰富,具有极大开发价值。

柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中精氨酸的含量

目的建立柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中精氨酸的含量。方法采用Waters Symmetry-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾2.0 g,加水1 000 ml溶解后,加磷酸0.45 ml,三乙胺3.0 ml,摇匀,经0.45μm滤膜过滤）-四氢呋喃（995∶5）-乙腈-甲醇=747.5∶2.5∶75∶175为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为330 nm。结果精氨酸浓度在50~200μg/ml范围内,色谱线性响应良好（r=0.9998）,缓释胶囊中精氨酸含量测定的平均回收率为100.61%,精密度良好（RSD=2.01）。结论柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中的精氨酸含量结果准确、可靠、重现性好。

柱前衍生化-HPLC测定马氏珠母贝肉中氨基酸的含量

以邻苯二甲醛-9-芴甲基氯甲酸酯为衍生化试剂，对氨基酸进行柱前衍生，建立了35℃下，醋酸钠缓冲液、甲醇及乙腈为流动相，用EclipseAAA氨基酸分析柱和二极管阵列检测器的氨基酸色谱分析方法，18种氨基酸在36min内获得了较好的分离，在一定浓度范围内，氨基酸的峰面积与浓度的线性相关系数在0．9906～0．9998之间，相对标准偏差为1．96％～5．45％（n=5）。并测定了马氏珠母贝肉蛋白中氨基酸的组成和含量。结果表明，马氏珠母贝肉蛋白中含有至少18种氨基酸，其中8种必须氨基酸总含量达39％以上，是一种优质的功能食品原料。

柱前衍生HPLC法测定硫酸阿米卡星及其制剂中基因毒性杂质肼的研究

目的 建立柱前衍生HPLC法测定硫酸阿米卡星及其制剂中基因毒性杂质肼的含量。方法 以5%苯甲醛甲醇溶液为衍生化试剂,采用Agilent Zobax Eclipse XDB-C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相A为0.1%甲酸溶液,流动相B为乙腈,进行线性梯度洗脱,流速1.0 mL/min,DAD紫外检测器,检测波长300 nm,柱温25℃,进样量20μL。结果 肼在0.5022~12.5543μg/mL浓度范围与峰面积的线性关系良好(r=0.9994),硫酸阿米卡星、注射用硫酸阿米卡星、硫酸阿米卡星注射液的平均回收率分别为94.8%、94.1%和94.3%。国内企业硫酸阿米卡星、注射用硫酸阿米卡星、硫酸阿米卡星注射液中的肼分别为未检出~1.8μg/g、未检出~0.2μg/g、未检出~3.1μg/g;日本Nichiiko公司的注射用硫酸阿米卡星和硫酸阿米卡星注射液均未检出肼。结论 新建柱前衍生HPLC法准确简便,专属性良好,可用于硫酸阿米卡星及其制剂中基因毒性杂质肼的控制。