HPLC柱前衍生法测定兔血浆中海星甾醇(A1998)浓度

目的:建立高效液相色谱柱前衍生法测定兔血浆中海星甾醇(A1998)浓度。方法:用2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)将A1998 C-17位上的2个羰基衍生化,形成双腙,以提高检测灵敏度。选用A1998的同系物3β-羟基雄甾-5烯-17酮己二酸酯(C6)作为内标。色谱条件:采用Agilent Zorbax Exend C18反相色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为100%甲醇,流速2.0 mL·min-1,检测波长为360 nm。结果:血样中A1998浓度在0.05-10μg·mL-1范围内具有良好的线性关系(r=0.9998),最低检测浓度为0.05μg·mL-1。回收率大于80%,日内及日间精密度RSD分别为3.2%-15%和6.7%-11%。结论:本方法灵敏、准确、实用,能够满足动物药物代谢动力学研究的要求。

HPLC柱前衍生法2-氨基乙磺酸制备工艺还原阶段流程诊断

建立了利用HPLC柱前衍生对2-氨基乙磺酸制备工艺还原阶段的流程诊断方法,2-氨基乙磺酸工艺中还原阶段中2-氨基乙磺酸的产率可达91％,流程分析诊断结果表明HPLC可靠易行,便于对工艺流程的监控。

柱前衍生HPLC法测定薏苡仁油中的脂肪酸含量

目的:建立以高相液相色谱法测定药用植物油——薏苡仁油中的脂肪酸的方法。方法:以2,4’-二溴苯乙酮为衍生化试剂,18-冠-6醚为相转移催化剂,采用HiQ sil C8(250 mm×4 mm,5μm)反相柱,波长254 nm。以乙腈-水(85:15)为流动相等度洗脱,柱温30℃,设定流速为1.5 mL·min-1。正十七烷酸为内标,一次基线分离5种脂肪酸。结果:亚油酸的线性范围为0.026-0.387μg,软脂酸的线性范围为0.014-0.207μg,油酸线性范围为0.027-0.404μg,硬脂酸的线性范围为0.011-0.160μg,相关系数均为0.9999。平均回收率分别为100.4%,102.2%,99.4%,104.5%,RSD分别为1.0%,1.9%,0.7%,2.4%。结论:本方法重现性好,定量准确,可作为薏苡仁油中脂肪酸测定的定量方法。

HPLC/MS法与柱前衍生化HPLC/UV法测定环维黄杨星D有关物质比较

目的:验证柱前衍生化HPLC/UV测定环维黄杨星D有关物质的可行性。方法:环维黄杨星D同异氰酸苯酯反应后,柱前衍生化HPLC/UV测定环维黄杨星D有关物质并与HPLC/MS直接测定环维黄杨星D有关物质比较。结果:衍生化反应后,主峰与有关物质分离好,所测得的有关物质与HPLC/MS直接测定的环维黄杨星D有关物质一一对应。结论:环维黄杨星D中含分子量为386,388的杂质,每分子环维黄杨星D及有关物质均同2分子异氰酸苯酯定量反应,柱前衍生化HPLC/UV可测定环维黄杨星D有关物质,与HPLC/MS直接测定法相比,本法简单、准确。

板蓝根中L-精氨酸的柱前衍生法HPLC分析

目的 建立板蓝根药材中 L-精氨酸的含量测定方法。方法 2 ,4 -二硝基氟苯 (DNFB)柱前衍生化 HPL C方法 ,以 Phenomen ODSC18柱 (4.6 mm× 2 5 0 mm,10μm)为分析柱 ,0 .1mol.L-1醋酸钠缓冲液 (p H 6 .4 ) -乙腈(86 :14 )为流动相 ,流速 1.0 m L .min-1,波长 36 0 nm下检测 ,分析了板蓝根药材中 L -精氨酸的含量。结果 本法操作简单 ,重复性好 ,并以该法分析了板蓝根药材中 L-精氨酸的含量。结论 本文建立的柱前衍生化 HPL C方法适合于板蓝根药材中 L -精氨酸的含量测定 ,结果表明 ,不同产地来源的板蓝根药材 L -精氨酸的含量存在着差别。

柱前衍生HPLC法测定硫酸阿米卡星及其制剂中基因毒性杂质肼的研究

目的 建立柱前衍生HPLC法测定硫酸阿米卡星及其制剂中基因毒性杂质肼的含量。方法 以5%苯甲醛甲醇溶液为衍生化试剂,采用Agilent Zobax Eclipse XDB-C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相A为0.1%甲酸溶液,流动相B为乙腈,进行线性梯度洗脱,流速1.0 mL/min,DAD紫外检测器,检测波长300 nm,柱温25℃,进样量20μL。结果 肼在0.5022~12.5543μg/mL浓度范围与峰面积的线性关系良好(r=0.9994),硫酸阿米卡星、注射用硫酸阿米卡星、硫酸阿米卡星注射液的平均回收率分别为94.8%、94.1%和94.3%。国内企业硫酸阿米卡星、注射用硫酸阿米卡星、硫酸阿米卡星注射液中的肼分别为未检出~1.8μg/g、未检出~0.2μg/g、未检出~3.1μg/g;日本Nichiiko公司的注射用硫酸阿米卡星和硫酸阿米卡星注射液均未检出肼。结论 新建柱前衍生HPLC法准确简便,专属性良好,可用于硫酸阿米卡星及其制剂中基因毒性杂质肼的控制。

柱前衍生HPLC法测定保山透心绿蚕豆中氨基酸的含量

建立了柱前衍生高效液相色谱法同时测定保山透心绿蚕豆中16种氨基酸的方法。方法以异硫氰酸笨酯（PITC）为柱前衍生试剂，采用Diamonsil AAA氨基酸分析柱用二元梯度洗脱，于UV254nm波长下检测，60min内16种氨基酸得到良好的分离、氨基酸浓度在0．1-0．5umol／mL范围内其浓度与响应值具有良好的线性关系．相关系数均大于0．9997，样品的相对标准偏差在1．36-5．43％之间，检出限为0．05umol／mL。相对其他柱前衍生测定氨基酸的方法而言，该方法快速、灵敏、；住确，样品处理简便易行，可用于保山透心绿蚕豆及其他豆类中氨基酸的分析测定。

建立HPLC法测定妥布霉素滴眼液含量

目的：建立HPLC法对其含量进行测定。方法：选用Kromasil C18，4．6×250mm色谱柱，2.4-二硝基氟苯柱前衍生，流动相为乙腈：0．25％三羟甲基氨基甲烷（67：33），检测波长为365nm，流速为1．0ml／min，进样量为20μl，柱温为30℃。结果：妥布霉素保留时间处，辅料峰无干扰；标准曲线浓度范围0．002399mg／ml-0．01439mg／ml，R=0.9990；平均回收率=99．6％，RSD=0．88％；精密度RSD=0．29％；在24小时内，任取6个时间点。RSD=0．35％；50分钟为最佳处理时间。结论：该方法准确、可靠，便捷、快速，完全适合妥布霉素滴眼液（中间体）进行质量评价。

柱前衍生高效液相色谱法检测8种枣水溶性多糖的单糖组成

建立了柱前衍生高效液相色谱法,对金丝小枣、大荔龙枣、晋枣、赞皇大枣、宣城圆枣、梨枣、无核小枣和骏枣中水溶性多糖的单糖组成及其比例进行分析比较。样品经清洗、烘干、粉碎、石油醚脱脂后,采用水提醇沉法得到水溶性多糖,经低温干燥后备用。水溶性多糖经三氟乙酸充分水解后,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）作为衍生剂,HPLC法分析枣水溶性多糖的单糖组成。结果表明：柱前衍生高效液相色谱法检测水溶性多糖的单糖组成衍生方法简单、线性关系好,检测灵敏度高,单糖的最低检出限为0.14~0.33 nmol。8种枣多糖均由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖6种单糖组成,其单糖组成比例存在很大差异。其中,甘露糖在各多糖中含量均较低,半乳糖醛酸含量普遍较高,葡萄糖除了在赞皇大枣和金丝小枣两种制干型枣中含量较低以外,在其余6个品种中含量较高。

HPLC Determination of Captopril in Human Plasma with Pre-column Derivation and Solid-phase Extraction and Studies on Its Pharmacokinetic and Relative Bioavailability

A new pre-column derivation HPLC method with solid-phase extraction to determine captopril in human plasma was established. Derivation products were extracted by a solid-phase extraction method after the reagent, p-a-dibromoacetophenone(p-BPB), was added in the plasma samples. The samples were analyzed in a VP-ODS column with UV-detector. The calibration curve of captopril was linear within the range of 5~1000 ngmL-1 with r=0.9987, the recovery of this method was 98.652.04%, within day and between day RSD were no more than 3.4% and 8.4% respectively. To study the pharmacokinetics and the relative bioavailability of captopril tablets, two formulations of captopril tablets were given to 18 healthy male volunteers according to a randomized 2-way cross-over design with a 1-week washout period. The respective AUC0~6 , Cmax and Tmax values of the two formulations were 424.5125.7 and 439.4113.3 mghL-1; 505.9244.6 and 504.8172.2 mgL-1; 0.6620.181 and 0.5280.176 h. Results from statistics analysis showed that there were no significant difference between the AUC0~6 , Cmax and Tmax values of the two formulations, The relative bioavailability of tablets I with respect to II was 96.114.6% from AUC0~6 measurement. Bioequivalance was observed between the two tablets.

海星甾醇琥珀酸酯(A1998)脂肪乳静脉给药后在大鼠体内的组织分布

目的:研究海星甾醇琥珀酸酯(3β-羟基雄甾-5烯-17酮琥珀酸酯,A1998)脂肪乳经静脉给药后在大鼠体内的组织分布经时变化规律。方法:大鼠单次静脉注射20 mg.kg-1A1998脂肪乳后,分别于不同时间点剖取各组织脏器,采用HPLC柱前衍生法测定大鼠各组织脏器药物含量。结果:A1998在大鼠体内主要分布于肺、肝、脾等器官,给药后15 min,测得肺脏药物含量最高(32.73±3.87)μg.g-1,脾脏(23.47±8.04)μg.g-1及肝脏(14.87±1.63)μg.g-1次之,均远高于同时间点大鼠血药浓度。A1998在上述3脏器中药物浓度维持时间亦久,至给药36 h后仍能检测出较高浓度,分别为(4.37±2.74),(4.69±2.37)及(8.30±5.96)μg.g-1。静注A1998后心脏及肾脏中药物浓度的经时变化与同时间点血药浓度相似。在胃、小肠、子宫、卵巢、体脂中未检测到药物分布。结论:大鼠单次静脉注射20 mg.kg-1A1998脂肪乳后,药物在血浆中消除迅速,并快速分布于各组织。A1998在大鼠体内的组织分布具有较强的选择性,各组织中药物浓度经时变化结果提示对肺、肝、脾等脏器具有高度的亲和力。

江苏栽培明党参中γ-氨基丁酸累积规律研究

目的用OPA柱前衍生HPLC法测定明党参中γ-氨基丁酸的含量，探寻γ-氨基丁酸含量与明党参生长时间的关系。方法取样品试液1mL，OPA衍生试剂1mL，硼酸缓冲液（0．2mol／L，pH8．5）5mL，定容至10mL，反应时间45min；流动相：流动相A为1．35％醋酸钠缓冲液（pH7．3），流动相B为135％醋酸钠（pH7．2）：甲醇（100：400），洗脱梯度及流速：0-20minB相30％，20—25minB相增至100％，维持8min；检测波长：336nm。柱温：40℃。结果在10-50μg／mL范围内对不同月份采收的样品在实验条件下测定，其平均含量为0．034％-0．116％。结论γ-氨基丁酸含量在1月、5月、8月相对较高，9月、10月和次年3月相对较低。