HPLC荧光检测法测定SO_2吸入后小鼠脑、心和肺亚硫酸盐水平

为了探讨二氧化硫 (SO2 )吸入后是否可进入小鼠不同组织器官 ,运用高效液相色谱 (HPLC)荧光检测 (FD)法测定了SO2 动式吸入后雄性小鼠脑、心和肺组织中SO2 在体内的衍生物———亚硫酸盐含量 .组织匀浆液经还原、衍生和沉淀蛋白 ,取上清液进入色谱仪检测 .亚硫酸盐测定标准曲线在 0 12 6μg·mL- 1 ～ 12 6μg·mL- 1 有良好的线性关系 ,检测限为 0 0 4μg·mL- 1 (S N =3 ) ,测定方法的回收率在 97%～ 10 1%之间 ,日内和日间的精密度RSD低于 9% .分析结果表明 ,SO2 吸入后小鼠 3种器官组织中亚硫酸盐含量比对照组显著增加 (P <0 0 5 ) ,且与SO2 浓度呈明确的剂量效应关系 (r>0 92 ) .这说明SO2 被小鼠吸入后转化为亚硫酸盐并可分布到肺和其它器官如脑和心等 ,从而为SO2 是一种全身性毒物的观点提供支持 .此外 ,本文对HPLC荧光检测亚硫酸盐的方法作了改进 ,为研究SO2

花椒游离脂肪酸的微波快速提取与衍生化HPLC荧光检测方法研究

建立了花椒中游离脂肪酸的微波快速提取技术,并采用苯并[b]吖啶酮-5-乙基对甲苯磺酸酯(BAETS)作为柱前衍生试剂,建立了19种长链饱和与不饱和游离脂肪酸的衍生化HPLC荧光检测分析方法。微波提取功率700W,溶剂为体积比1∶1的氯仿/甲醇,70℃提取10min,可达近100%提取率。采用色谱柱Eclipse XDB-C8(4.6mm×150mm,5μm),酸性乙腈/水流动相进行梯度洗脱,HPLC荧光激发和发射波长分别为273nm和505nm。同时进行在线质谱辅助鉴定(APCI-MS),更提高了HPLC荧光定量的准确度。结果表明,微波提取快速高效,分析方法线性良好,线性范围14.286～0.0139μmol/L,最低检出限为0.636nmol/L,回收率在87.60%～106.59%之间。本方法快速、准确、高灵敏,可作为花椒相关样品的标准化检测方法。

RP-HPLC荧光法测定兔血浆中秦皮甲素的浓度

目的建立测定兔血浆中秦皮甲素浓度的RP-HPLC-FLD方法。方法以C18柱(150mm×4.6mm,5μm)分离;流动相为甲醇-水(76∶24);流速:1ml.min-1;柱温:30℃;荧光检测器,激发波长230nm,发射波长460nm。结果秦皮甲素的保留时间为(3.620±0.05)min;血药浓度在0.1～100mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.997);绝对回收率为74.0%～82.6%,日内、日间精密度(RSD)均<9.0%,最低检测限为0.05ng。兔单次静脉注射秦皮甲素5mg·kg-1后,T12a、T21β分别为(0.196±0.008).h-1,(6.70±0.645).h-1。结论该法快速、灵敏、准确,可用于秦皮甲素的体内分析。

RP-HPLC荧光法测定兔血浆中BWYJ的浓度及药代动力学参数测定

目的建立了RP-HPLC-荧光法检测兔血浆中BWYJ浓度。方法以C18色谱柱(150mm×416mm,5μm)分离;以盐酸普萘洛尔为内标,流动相为以甲醇-乙腈-磷酸缓冲液(28.5:28.5:43);流速:1ml.min-1,柱温:37℃;荧光检测器,激发波长229nm,发射波长335nm。结果日间RSD≤3.26%,日内RSD≤2.14%,平均相对回收率为101.50%±5.72%;BWYJ的保留时间为10.65±0.50min,内标的保留时间为3.87±0.31min。血药浓度在0.05～20μg.ml-1范围内关系良好(r=0.99),最低检测限为5ng。兔单次静脉注射BWYJ5mg.kg-1后,T1/2α、T1/2β分别为1.24±0.21min,42.70±9.43min。结论该法快速、灵敏、准确,可用于BWYJ的体内分析。

高效液相色谱-荧光检测器法测定黄酒中尿素含量

建立了柱前衍生高效液相色谱荧光检测器(HPLC-FLD)测定黄酒中尿素含量的检测方法。采用9-羟基吨为柱前衍生试剂,尿素在酸性环境下与其反应产生具有荧光特性的吨基脲(N-9H-xanthen-9-ylurea),经HPLC分离后在λex=213nm,λem=308nm下荧光检测。方法学指标检测结果表明,方法线性良好(R^2>0.999)、重复性好(RSD=1.5%,n=5)、日间变异试验良好(RSD<5%,n=3),回收率高(平均回收率>90%,n=3);尿素检出限为0.024mg/L,定量限为0.086mg/L。

口腔癌患者尿液萘酚反应物的高效液相色谱荧光检测法筛查

利用高效液相色谱荧光检测法(HPLC/FLD)对口腔癌患者尿液中的萘酚反应物(NNR)进行分离分析,通过对34例口腔癌患者和18例健康人尿液的NNR进行分析,比较了癌症患者及健康人尿液中的成分含量差异,提出了一种可用于口腔癌辅助诊断的新方法。结果表明,在健康人及口腔癌患者尿液的萘酚反应物(NNR)中可检出一种标记物,其激发波长为440 nm,发射波长为539 nm。该标记物含量在口腔癌患者中较低,而在健康人群中显著偏高,这与通常的鉴定结果不同。通过采用非参数检验(Mann-Whitney U检验),该标记物含量在健康人群与口腔癌症患者中存在显著性差异(P<0.01),其特异度为94.1%,敏感度为94.4%,ROC曲线下面积(AUC)为0.989。该模型具有较高的诊断价值,能够用于口腔癌的辅助鉴定。

高效液相荧光法测定“北京烤鸭”鸭皮中的多环芳烃

采用气体射流冲击加热新技术烤制"北京烤鸭",对其烤制过程中可能产生的三种多环芳烃(PAHs)含量进行检测,建立一套适合于烤鸭类高脂肪、高蛋白食品中PAHs的提取与检测的方法。方法:匀浆鸭皮样品前处理采用2mol/LKOH甲醇-水(8:2,V/V)皂化,异辛烷萃取,甲醇-水(1:1,V/V)洗涤,N,N-二甲基甲酰胺-水-异辛烷(1:1:1,V/V)反萃取和Florisil固相萃取小柱净化,最后进行HPLC分析。结果:标品实验回收率在83.59%～92.97%,当样品加标水平分别为1、2、2μg/kg时,回收率在73.85%～80.31%,RSD<10%,三种PAHs检测量在0.56～3.19μg/kg。结论:该方法净化效果较好,重现性高,检测灵敏度和准确度均满足分析要求,样品中苯并[a]芘的含量远远低于国家规定对烟熏烧烤类食品不能超过5μg/kg的标准。

氯沙坦及其代谢物在朝鲜族和汉族健康人体内的药代动力学

目的:研究朝鲜族和汉族健康受试者口服单剂量氯沙坦钾片的药代动力学。方法:健康受试者20名(朝鲜族10名,汉族10名,男女各半),口服单剂量氯沙坦钾片剂50 mg;用HPLC-荧光法测定氯沙坦及其代谢物E-3174血药浓度,采用DAS软件和SPSS软件进行数据处理和统计学分析。结果:单剂量口服50 mg氯沙坦钾片后,朝鲜族受试者的氯沙坦和E-3174的主要药动学参数如下:Cmax分别为(524±349),(493±188)ng.mL-1;tmax分别为(0.9±0.4),(2.4±0.8)h;t1/2(1.5±0.4),(3.1±0.7)h;AUC0-24分别为(682±319),(2563±752)ng.h.mL-1;AUC0-∞分别为(752±331),(2608±766)ng.h.mL-1。汉族受试者的氯沙坦和E-3174的主要药动学参数如下:Cmax分别为(351±168),(242±60)ng.mL-1;tmax分别为(1.4±1.1),(3.6±1.7)h;t1/2分别为(0.8±0.4),(4.7±1.1)h;AUC0-24分别为(498±172),(1853±194)ng.h.mL-1;AUC0-∞分别为(523±184),(1960±182)ng.h.mL-1。结论:氯沙坦钾片在朝鲜族和汉族健康受试者体内药动学参数差异存在统计学意义,在不同性别间药动学参数差异无统计学意义,个体间药动学参数存在较大差异,临床治疗中应实行个体化给药方案。

气体射流冲击烤制“北京烤鸭”不同加工技术与鸭皮中多环芳烃含量变化的研究

采用气体射流冲击加热新技术烤制“北京烤鸭”，在保证烤鸭品质的前提下，改变烤制温度，运用高效液相荧光检测技术研究不同烤制温度的烤鸭鸭皮中高致癌性多环芳烃（PAHs）含量的变化。结果显示，在170、190、210℃三种不同烤制温度下，苯并[a]芘含量在0．13～0．45μg／kg，二苯并[a，h]蒽含量在0．48-2．01μg／kg，7，12-二甲基苯并[a]蒽含量为1．28～3．19μg／kg，苯并[a]芘含量远远低于国家标准5μg／kg、高烤制温度下（210℃）各PAHs的产生量要显著高于低温（170、190℃）烤制产生的量，在此技术下低温烤制产品安全性更高于高温烤制产品。