Compound Danshen tablets downregulate amyloid protein precursor mRNA expression in a transgenic cell model of Alzheimer's disease Effects and a comparison with donepezil

After gene mutation, the pcDNA3.1/APP595/596 plasmid was transfected into HEK293 cells to establish a cell model of Alzheimer＇s disease. The cell model was treated with donepezil or compound Danshen tablets after culture for 72 hours. Reverse transcription-PCR showed that the mRNA expression of amyloid protein precursor decreased in all groups following culture for 24 hours, and that there was no significant difference in the amount of decrease between donepezil and compound Danshen tablets. Our results suggest that compound Danshen tablets can reduce expression of the mRNA for amyloid protein precursor in a transgenic cell model of Alzheimer＇s disease, with similar effects to donepezil.

Simultaneous Determination of Four Ingredients in Guanxin Danshen Tablets by RP-HPLC

[Objectives]This study aimed to establish a method for simultaneous determination of four ingredients in Guanxin Danshen tablets by RP-HPLC.[Methods]HPLC chromatography was adopted with column of Thermo Hypersil-Keystone C 18 column(4.6 mm×250 mm,5μm),mobile phase of acetonitrile(A)-0.03 mol/L ammonium acetate(pH adjusted to 2.4 with formic acid)(B),gradient elution(0-5 min,5%A;5-10 min,5%A→19%A;10-40 min,19%A;40-68 min,19%A→36%A;68-90 min,36%A→95%A),flow rate of 1.0 mL/min and column temperature of 25℃.[Results]The content of salvianic acid A sodium,protocatechuic aldehyde,salvianolic acid B and tanshinone II A showed good linear relationship with chromatographic peak area in the range of 3.310-18.66,0.03950-0.2370,0.7500-4.500,0.05920-0.3550μg,respectively.The recovery rate(n=6)was 101.75%,96.86%,104.15%and 99.03%,respectively,and the RSD was 1.52%,2.81%,1.80%,and 1.37%respectively.The established method has good precision,reproducibility and stability.[Conclusions]This method can be used for the quality control of multiple ingredients of Guanxin Danshen tablets.

Study on Determination of Tanshinones in Compound Danshen Tablets

[ Objective ] This study was conducted to improve quality standard of Compound Danshen tablets. [ Method] Tanshinones in Compound Danshen tab- lets were determined by HPLC method. [ Result] A good linear relationship was found in the range of 0.10 -0.50 μg, and the average recovery rate was 100.59% （RSD = 1.38% ）. [ Conclusion] The method is simple, rapid and reproducible, and could be used as a method for quality control of Compound Danshen Tablets.

基于网络药理学和HPLC法建立宠物用复方石淋通片中多指标成分的质量控制方法

建立宠物用复方石淋通片多指标成分含量测定方法。利用网络药理学方法筛选复方石淋通片治疗尿石症、膀胱炎的关键活性成分,结合相关文献及《中国药典》相关要求,确定指标性成分。利用HPLC分析方法,使用CAPCELL PAK C18 MG(S-5)4.6×250 mm色谱柱,柱温30℃,进样量10μL,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长335 nm,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相,梯度洗脱,建立指标性成分含量测定的方法。通过网络药理学筛选出槲皮素、咖啡酸、绿原酸等十个关键成分。结合《中国药典》及相关文献选出新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、夏佛塔苷、异夏佛塔苷六种指标性成分。含量测定方法学结果表明:各成分线性关系良好(r≥0.999);精密度良好,RSD为0.03%~0.21%;重复性良好,RSD为0.70%~2.02%;供试品在24h内稳定性良好,RSD为0.30%~2.02%;平均加样回收率(RSD)在98.31%~104.31%(0.36%~2.28%);三批样品中六种成分的含量分别在0.990~1.434 mg·g^(-1)、1.533~2.083 mg·g^(-1)、1.311~2.023 mg·g^(-1)、0.332~0.353 mg·g^(-1)、1.594~1.768 mg·g^(-1)、0.787~1.057 mg·g^(-1)之间。该含量测定方法有较好的重复性和稳定性,可用于宠物用复方石淋通片的质量分析。

HPLC法同时测定复方降脂片中5种成分

目的建立HPLC法同时测定复方降脂片中紫丁香苷、菊苣酸、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Diamonsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.2%磷酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温35℃;检测波长220、264、327 nm。结果5种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9990),平均加样回收率97.71%~99.66%,RSD 1.53%~2.10%。结论该方法简便可靠,重复性好,可用于复方降脂片的质量控制。

HPLC测定不同厂家复方丹参片中三七皂苷R_1和人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1含量

目的：建立复方丹参片（丹参，三七，冰片）中三七有效成分的高效液相色谱测定方法。方法：采用Kromasil C18（5μm，250mm×4．60mm）色谱柱；流动相：乙腈-0．05％磷酸水溶液梯度洗脱（0～12min：乙腈浓度为22％；12～20min：乙腈的浓度由22％递升至28％；20～60min：乙腈的浓度由28％递升至43％）；流速为1mL／min，检测波长为203nm。结果：三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、Re、Rb1的线性范围分别为0．326～3．260μg（r=0．9997），0．890～8．900μg（r=0．9998），0．144～1．440μg（r=0．9996），0．940～9．400μg（r=0．9998）；平均加样回收率（n=6）分别为99．08％，98．36％，97．54％，96．07％，RSD分别为4．41％，1．64％，2．77％，1．12％。结论：本测定方法简便可行、重复性好，可用于本制剂中三七多种有效成分的含量测定。

HPLC法结合统计学方法研究复方丹参片中皂苷类成分

目的:建立复方丹参片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量测定方法,并采用PCA和HCA法进行分析。方法:采用高效液相色谱法,采用AlltimaTM C_(18)(4.6mm×250mm,5μm)Serial No 209050188色谱柱;流动相:乙腈-水;梯度洗脱;检测波长203nm;柱温:30℃;流速:1mL/min;进样量:5μL。结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.106～1.06μg(r=0.9994),0.533～5.33μg(r=0.9998),0.0524～0.524μg(r=0.9997),0.582～5.82μg(r=0.9999);平均加样回收率(n=9)分别为98.02%,98.29%,98.72%,99.77%,RSD分别为2.82%,3.59%,2.43%,2.95%。结论:PCA和HCA较全面的反映了复方丹参片样本的信息,评价结果具有一定的客观性,可为复方丹参片的质量控制提供参考。

HPLC测定复方穿心莲片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

目的 建立测定复方穿心莲片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量的方法。方法 采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil-C18柱,甲醇-水(70∶30)为流动相,流速1.0 ml·min-1,检测波长225 nm,柱温为室温。结果 穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的平均回收率分别为96.6％、96.8％,分析方法精密度(RSD)分别为1.83％和1.50％(n=6)。结论 所用方法简便、准确,能有效地控制该制剂的质量。

复方丹参片中三七皂苷成分组成的SPE-HPLC-MS法测定

目的研究复方丹参片中的三七皂苷类成分组成,并建立主要成分的含量测定方法。方法采用HPLC-MS分析技术,通过对CID质谱图的解析以及与对照品比较,确定主要的三七皂苷类成分。采用C18SPE预处理方法,分别以水和甲醇为淋洗剂和洗脱剂,甲醇洗脱物用于HPLC含量测定。采用Agela-Venusil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm5,μm),以乙腈-水-乙酸为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml.min-1,检测波长为202 nm。结果鉴定了7种皂苷成分,其中3种成分首次在复方丹参片中报道。建立了4种主要成分(三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Rd)的SPE-HPLC含量测定方法。方法的平均回收率为95.8%～101.3%,RSD小于3.0%。结论该方法操作简便快速,环境良好,结果准确可靠,可为提高复方丹参片质量控制标准的提供有效依据。

RP-HPLC法测定复方丹参片中的隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA

建立了反相高效液相色谱法测定复方丹参片（丹参、三七、冰片）中的隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA。采用Diamonsil^TM C18（250×4．6mm，5μm）色谱柱，以V（甲醇）：V（水）=75：25为流动相，流速为0．8mL／min，检测波长270nm。隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA分别在1．456～10．19μg／mL、2．160～15．12μg／mL和3．152～22．06μg／mL的范围内呈良好线性关系，平均回收率分别为99．21％（RSD=0．63％）、100．3％（RSD=1．0％）、99．87％（RSD=0．63％）。可用于复方丹参片的质量控制。

RP-HPLC法测定不同厂家芦丁片和复方芦丁片中芦丁的含量

采用RP-HPLC法测定芦丁片和复方芦丁片中芦丁的含量,并与UV法进行比较以考察其质量.色谱条件为：色谱柱AT Lichrom ODS-BP C18柱（4.60×250 mm,5μm）;流动相V（甲醇）∶V（0.1%冰醋酸）=60∶40;检测波长362 nm;流速0.8 mL.min-1;柱温35℃;进样量20μL.芦丁在10~200μg.mL-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=1.3514X-0.9158,相关系数R=0.999 5;平均回收率为98.92%~99.13%,RSD为1.77%~1.93%（n=6）.所检测芦丁片和复方芦丁片中芦丁的含量均符合部颁标准,测定值UV法较RP-HPLC法略高.RP-HPLC法准确度、精密度、稳定性、重现性好,可用于芦丁片和复方芦丁片的质量控制.

RP-HPLC测定复方丹参片中丹参酮Ⅱ_A和隐丹参酮的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定复方丹参片(丹参,三七、冰片)中丹参酮ⅡA和隐丹参酮的含量。方法采用YWGC18色谱柱,以甲醇水(75∶25)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长270nm,柱温为室温。结果丹参酮ⅡA和隐丹参酮分别在2.5～50.0μg·mL-1、0.625～12.5μg·mL-1的范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为99.76%(RSD=0.92%)、98.34%(RSD=0.71%)。结论本法操作简单,准确,重复性好,可用于复方丹参片的质量控制。

HPLC法测定复方氨酚苯海拉明片中对乙酰氨基酚、咖啡因、盐酸麻黄碱和盐酸苯海拉明的含量

目的建立同一色谱条件测定复方氨酚苯海拉明片中的对乙酰氨基酚、咖啡因、盐酸麻黄碱和盐酸苯海拉明含量的HPLC法。方法采用苯基柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-pH 3.5的10 mmol.L-1乙酸铵溶液(体积比85∶15),检测波长为225 nm。结果对乙酰氨基酚、咖啡因、盐酸麻黄碱和盐酸苯海拉明的分离度好,对乙酰氨基酚、咖啡因、盐酸麻黄碱和盐酸苯海拉明的回收率分别为100.1%、100.0%、100.2%和100.6%(n=9)。结论本方法操作简单,结果准确,可以有效地控制复方氨酚苯海拉明片的质量。

RP-HPLC法测定复方红景天片剂中红景天苷的含量

目的建立复方红景天片剂中红景天苷的含量测定方法。方法采用KromasilC18色谱柱(4 6mm× 2 0 0mm ,5 μm) ,以水 乙腈 磷酸 (V∶V∶V =93 0∶7 0∶0 2 )为流动相 ,流速为 0 90mL·min-1;柱温为 4 0℃ ,检测波长为 2 2 3nm ,进样 15 μL ,外标法计算含量。 结果红景天苷在 12～6 0mg·L-1内峰面积与对照品的质量浓度呈良好线性关系 ,其回归方程为Y =12 84 6 ρ+76 5 6 ,r =0 9998,平均回收率为 96 7% ,RSD为 1 2 % (n =6 )。结论方法简便、准确、重现性好 。

HPLC法测定复方硫酸氢氯吡格雷片中硫酸氢氯吡格雷和阿司匹林的含量

目的建立复方硫酸氢氯吡格雷片中硫酸氢氯吡格雷和阿司匹林含量测定的HPLC法。方法色谱柱为氰基柱，流动相为甲醇-水-三乙胺（体积比为500-500：2，磷酸调节pH值至3．8），流速为1mL·min^-1，检测波长为235nm，柱温为35℃，进样量为20μL。结果在该色谱条件下，硫酸氢氯吡格雷与阿司匹林可达到较好分离，硫酸氢氯吡格雷在12．0～100．0mg·L^-1内质量浓度与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9995）。阿司匹林在38．4～320．0mg·L^-1内质量浓度与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9997）。硫酸氢氯吡格雷与阿司匹林的平均回收率分别为（99．7±1．80）％（72=9）和（100．3±0．53）％（n=9）。结论HPLC法适用于复方硫酸氢氯吡格雷片中硫酸氢氯吡格雷和阿司匹林的含量测定。

HPLC测定复方丹参方中三七皂苷类成分的含量

目的 建立复方丹参方中三七皂苷类成分的含量测定方法,并初步考察复方丹参方溶液的稳定性。方法采用高效液相色谱法,分别以乙腈-0.05％磷酸(19:81)为流动相,于203 nm处检测三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re;以乙腈-水(33:67)为流动相,于203 nm处检测人参皂苷Rb1。结果 三七皂苷R1进样量在0.24～3.6μg范围时,相关系数r=0.9997;人参皂苷Rg1进样量在1.2～18μg范围时,相关系数r=0.9994;人参皂苷Re进样量在0.08～1.2μg范围时,相关系数r=0.9997;人参皂苷Rb1进样量在0.25～3.72μg范围时,相关系数r=0.9998。复方丹参方溶液于4℃放置4个月后三七皂苷类成分的含量无明显变化。结论 本法简便,快速,准确,重现性好,可作为复方丹参方的质量控制标准。复方丹参方中三七皂苷类成分的稳定性良好。

HPLC法测定复方利血平片中氢氯噻嗪、硫酸双肼屈嗪、维生素B_1和维生素B_6的含量

采用HPLC法测定复方利血平片中氢氯噻嗪、硫酸双肼屈嗪、维生素B1和维生素B6的含量。Kromasil C-18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长210 nm,以0.2%己烷磺酸钠(用冰醋酸调节pH=3.5)-甲醇-乙腈(75∶20∶5)为流动相,流速1.0 mL/min,进样量20μL,柱温30℃。结果表明,氢氯噻嗪的线性范围为49.6～496.0μg/mL(R2=0.999 4),精密度RSD为0.12%(n=6),重复性RSD为0.45%(n=6),平均回收率为99.74%(RSD=0.78%,n=9);硫酸双肼屈嗪的线性范围为16.8～336.0μg/mL(R2=0.999 3),精密度RSD为0.06%(n=6),重复性RSD为0.21%(n=6),平均回收率为99.83%(RSD=0.08%,n=9);维生素B1的线性范围为4.0～80.0μg/mL(R2=0.998 7),精密度RSD为0.56%(n=6),重复性RSD为0.96%(n=6),平均回收率为99.02%(RSD=1.13%,n=9);维生素B6的线性范围为4.0～80.0μg/mL(R2=0.999 1),精密度RSD为0.23%(n=6),重复性RSD为0.78%(n=6),平均回收率为99.56%(RSD=0.48%,n=9)。此法分离度好,峰形对称,分析周期短,重复性好,简单易行,可同时测定复方利血平片中氢氯噻嗪、硫酸双肼屈嗪、维生素B1和维生素B6的含量。

HPLC-ELSD法同时测定复方丹参片中4种皂苷的含量

目的:建立复方丹参片中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rb_1、人参皂苷Rd的含量测定方法。方法:采用HPLC-ELSD法,使用C_18色谱柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1.0mL·min^-1,柱温25℃,蒸发光散射检测器漂移管温度50℃,载气流速1.5L·min^-1。结果:目标峰分离良好,三七皂苷R1、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rb_1、人参皂苷Rd的线性范围分别为5.14～102.80μg·mL^-1、20.16～322.56μg·mL^-1、40.24～402.40μg·mL^-1、10.06～100.60μg·~mL-1,平均回收率分别为98.1%、96.7%、101.5%和98.1%。结论:该方法简便、准确、耐用性好,可用于复方丹参片中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd含量的测定。

HPLC测定阿司达莫缓释片的含量

目的建立测定阿司达莫缓释片含量的方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18（200 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液（52：48）,检测波长275 nm,柱温35℃,流速1.0 ml·min^-1,以内标法计算阿司达莫缓释片的含量。结果阿司匹林的线性范围为6-16μg·ml^-1（r=0.9999）,低、中、高3种浓度的平均回收率分别为101.4%±1.1%、97.1%±1.3%、94.2%±1.5%（n=3）;双嘧达莫的线性范围为20-120μg·ml^-1（r=0.9998）,低、中、高3种浓度的平均回收率分别为98.6%±2.3%、99.0%±1.6%、101.4%±2.3%（n=3）。结论所建方法简便、准确、专属性强,可用于阿司达莫缓释片的质量控制。

复方厄贝沙坦片中厄贝沙坦和氢氯噻嗪的HPLC测定

建立同时测定复方厄贝沙坦片中厄贝沙坦和氢氯噻嗪含量的 HPL C方法。用 Inertsil ODS- 3色谱柱 ,流动相为乙腈 - 0 .0 8m ol/ L 磷酸溶液 (用三乙胺调至 p H5 .0 ) (40∶ 6 0 ) ,检测波长 2 2 5 nm。厄贝沙坦和氢氯噻嗪分别在15～ 135 μg/ m l(r=0 .9999)和 1.2～ 10 .8μg/ ml(r=0 .9999)浓度范围内线性关系良好 ,方法平均回收率分别为10 0 .0 % (RSD=0 .4 6 % )和 10 0 .5 % (RSD=0 .4 9% )。