HPLC-法测定颈宁胶囊中天麻素的含量

应用HPLC-法测定我院制剂颈宁胶囊中天麻素的含量,结果天麻素在质量浓度0.4209-0.8512mg/ml范围内保持着良好线性关系,平均回收率为98.11%,证实高效液相色谱法测定颈宁胶囊内天麻素含量快速高效稳定可靠,重复性好。

HPLC-紫外法测定人血浆中芬太尼浓度

目的 :建立高效液相色谱法 -紫外检测器测定人血浆中芬太尼浓度的方法。方法 :本实验采用外标法 ,以Shim -PackCLC -ODS(6 0mm×150mm ,5μm )为固定相 ,含0 015mol/LNaH2PO4 的乙腈 -水溶液 (30∶70 ,v/v)为流动相 ,流速1 5ml/min ,紫外检测波长195nm。结果 :标准曲线在2 0～100ng/ml范围内线性关系良好 (r=0 999) ,最低检测浓度为1ng/ml,方法回收率为(91 70±4 70) % ,提取回收率为 (97 38±3 69) % ,日内变异RSD (6 50±2 79) % ,日间变异RSD (6 70±3 04) %。结论 :本方法简便 ,准确 ,检测浓度低 ,能够满足血浆中低浓度芬太尼的测定及临床药代动力学研究的要求。

HPLC-双波长切换法同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱、丹酚酸B的含量

目的:建立同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱和丹酚酸B含量的方法。方法:采用HPLC-双波长切换法。色谱柱为Waters symmetry C18,以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为286 nm(丹酚酸B)、336 nm(脱氢紫堇碱),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL。结果:在建立的检测条件下,脱氢紫堇碱和丹酚酸B均能达到基线分离,二者进样量线性范围分别为0.157～1.259μg、0.391～3.131μg(r均为0.999 9);精密度、重复性和稳定性试验(24 h内)的RSD均小于2.00%(n=6～10);平均加样回收率分别为101.61%、102.85%(RSD分别为3.59%、2.85%,n=6)。结论:建立的HPLC-双波长切换法可同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱和丹酚酸B含量,且方法操作简便、快速,可用于双参通冠胶囊的质量控制。

HPLC-光化学衍生法测定滋阴清热降糖丸中的黄曲霉毒素

建立高效液相色谱-柱后光化学衍生法测定滋阴清热降糖丸中黄曲霉毒素AFG2、AFG1、AFB2、AFB1的含量。以Avantor Apollo C18(250.0 mm×4.6 mm, 5μm)为色谱柱,以甲醇-乙腈-水(45∶5∶50)为流动相,流速0.8 mL/min,柱温30℃,进样体积20μL。采用柱后光化学衍生-荧光检测器测定黄曲霉毒素,FLD激发波长360 nm,发射波长450 nm。结果显示,AFG2、AFG1、AFB2、AFB1进样量分别在0.76~30.40 pg、2.16~86.40 pg、0.76~30.40 pg、2.08~83.20 pg范围内与响应值线性关系良好,相关系数(r)均在0.995以上,加标回收率为80.6%~108.1%。该法可用于滋阴清热降糖丸中残留黄曲霉毒素的测定,方法快速准确、重复性好,可为滋阴清热降糖丸的安全性评价提供数据支持。

HPLC-超滤法测定红景天苷与常氧及缺氧大鼠血浆蛋白的结合率

目的建立红景天苷血浆蛋白结合率测定方法,比较常氧及缺氧大鼠血浆中红景天苷蛋白结合率的差异。方法采用低压低氧动物实验舱(海拔7500 m)制备缺氧大鼠模型,采用超滤法分离血浆中游离型药物,高效液相色谱法分别测定常氧及缺氧大鼠血浆中药物浓度,并计算常氧及缺氧大鼠血浆中红景天苷的蛋白结合率。色谱柱为Thermo C18,流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水(B),梯度洗脱:0~16 min,5%~8%A,16~20 min,5%A,流速:1.0 ml·min^(-1),检测波长:275 nm,柱温:30℃,进样量:15μl。结果当大鼠血浆中红景天苷浓度为3、6、12μg·ml^(-1)时,红景天苷与常氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为(18.34±4.33)%、(18.84±4.45)%和(19.25±2.98)%;与缺氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为(12.19±2.78)%、(11.74±4.34)%和(11.47±1.50)%,其平均血浆蛋白结合率降低7.01%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论红景天苷与常氧大鼠血浆蛋白属于低强度结合,在本研究的浓度范围内,不具浓度依赖性。相比于常氧大鼠,红景天苷与缺氧大鼠血浆蛋白的结合强度有小幅度的降低。

HPLC-超滤法测定羟基酪醇与常氧及缺氧大鼠血浆蛋白的结合率

目的建立羟基酪醇血浆蛋白结合率的测定方法,比较常氧及缺氧大鼠血浆中羟基酪醇蛋白结合率的异同。方法采用HPLC-超滤法测定羟基酪醇与常氧及缺氧大鼠血浆的蛋白结合率。结果当大鼠血浆中羟基酪醇浓度为3,6,12μg·mL^(–1)时,羟基酪醇与常氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为(17.23±1.11)%,(16.88±1.37)%和(16.70±0.98)%,与缺氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为(12.31±1.79)%,(12.75±1.20)%和(13.42±1.98)%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论羟基酪醇与常氧大鼠血浆蛋白属于低强度结合,且在3~12μg·mL^(–1)内,不具浓度依赖性,而羟基酪醇与缺氧大鼠血浆蛋白结合强度明显低于与常氧大鼠血浆蛋白的结合。

炮制前后刺蒺藜果实中槲皮素和山柰素含量的比较

目的:验证传统清炒法对刺蒺藜果实中槲皮素和山柰素的影响。方法:采用Kromasi L -C_(18)(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇∶0.4%磷酸水溶液,梯度洗脱(甲醇37%~50%,0~40min),流速1.0ml·min^(-1),检测波长:360nm,柱温:35℃,进样量:15μl。结果:生蒺藜中槲皮素含量为0.259mg/g,山柰素含量为0.036mg/g;制蒺藜中槲皮素含量为0.211mg/g,山柰素含量为0.025mg/g。结论:炮制前后刺蒺藜中槲皮素和山柰素含量无显著差异,即炮制对蒺藜强壮和抗衰老作用的槲皮素和山柰素含量无影响。

HPLC-柱后光化学衍生法测定蛤蚧定喘丸中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1的含量及LC-MS/MS确证

目的:建立HPLC-柱后光化学衍生法测定蛤蚧定喘丸中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1的含量,并建立LC-MS/MS确证方法。方法:采用SPOLAR C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-乙腈(B)-水(C)为梯度洗脱流动相进行洗脱,流速1.1 mL·min^(-1),柱温35℃;采用柱后光化学衍生法,柱后光化学衍生器波长为254 nm;荧光检测器激发波长为365 nm,发射波长为450 nm,增益值为15。用LC-MS/MS进行确证,流动相为水(0.1%甲酸+5 mmol·L^(-1)甲酸铵)-乙腈,离子源:电喷雾电离源(ESI),扫描模式:多反应监测(MRM)。结果:黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1分别在0.001 18~0.029 6 ng(r=0.999 8)、0.004 18~0.104 6 ng(r=0.999 9)、0.001 23~0.030 8 ng(r=1.0000)、0.004 267~0.106 7 ng(r=1.0000)范围内线性关系良好;黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1回收率(n=9)分别为101.2%(RSD=7.10%)、103.2%(RSD=3.91%)、92.5%%(RSD=2.91%)和93.5%(RSD=7.95%)。结论:所建立的HPLC-柱后光化学衍生法操作简便、可靠,结果准确,灵敏度高,重现性好,可作为该产品中黄曲霉毒素检测质量控制的方法。