叠鞘石斛茎叶花HPLC-DAD-ELSD对比研究

目的对叠鞘石斛不同部位进行指纹图谱对比研究。方法采用Dikma C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.5%冰醋酸水溶液梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1 ml/min;DAD串联蒸发光散射检测器检测。结果首次建立了叠鞘石斛茎、叶、花HPLC-DAD-ELSD指纹图谱鉴别方法,叶、花均具有与茎相同的化学成分,且叶与花中所含化学成分较茎更为丰富。结论建立的方法稳定、可靠、重现性好,可直接了解叠鞘石斛茎、叶、花化学成分变化的关系。

复方瓜子金颗粒中秦皮乙素、蒙花苷和polygalasaponin ⅩⅪ的HPLC-DAD-ELSD法测定

目的:建立一种同时测定复方瓜子金颗粒中秦皮乙素、蒙花苷和 polygalasaponin XXI 含量的 HPLC-DAD-ELSD 方法。方法:采用 HPLC-DAD—ELSD 法,以 Diamonsil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,乙腈(A)-0.05%三氟醋酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱[0～10 min(15%A),10～30 min(15%A→28%A),30～40 min(28%A),40～50 min(28%A→32%A)],流速为1.0 mL·min^(-1),二极管阵列检测器的检测波长为340 nm,蒸发光散射检测器的漂移管温度为105℃、载气流速为2.6 L·min^(-1)。结果:秦皮乙素、蒙花苷和 polygalasaponin XXI 的线性范围分别为4.75～118.75μg·mL^(-1)(r=0.9998),4.02～100.50μg·mL^(-1)(r=0.9999),19.62～157.00μg·mL^(-1)(r=0.9993);加样回收率(n=9)分别为102.7%,100.9%,97.3%。结论:测定方法准确、重现,可为复方瓜子金颗粒的质量控制提供借鉴。

HPLC-DAD-ELSD法同时测定牛膝中β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa的含量

目的:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器(HPLC-DAD-ELSD)法同时测定牛膝中3种化合物β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa的含量。方法:采用Agilent 5 TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.08%甲酸(A),水-2.5%异丙醇-0.08%甲酸(B)不同比例进行梯度洗脱;流速为0.9 mL/min,运行时间80 min,β-蜕皮甾酮采用DAD进行检测,检测波长为248 nm;人参皂苷R0和竹节参皂苷Ⅳa采用ELSD进行检测,漂移管温度为110℃,载气流速3.2 L/min。结果:β-蜕皮甾酮在0.001 9~0.096 3 mg/mL浓度范围内浓度与峰面积间呈良好的线性关系(r^2=0.999 9);人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa分别在0.002 2~0.469 5 mg/mL和0.004 7~0.483 0 mg/mL浓度范围内浓度的对数与峰面积的对数间呈良好的线性关系(r^2=0.999 5,r^2=0.999 4)。牛膝中三种化合物(β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa)的平均加样回收率分别为99.29%(RSD为2.14%)、99.13%(RSD为2.04%)和98.30%(RSD为2.11%)。结论:本研究所建立的方法简便,快速,且稳定性、精密度、重复性良好,适用于牛膝中甾酮类和皂苷类成分的同时测定,也可用于牛膝药材的质量控制。

不同品种石斛的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱研究

目的:采用HPLC-DAD-ELSD建立石斛指纹图谱,并对金钗、鼓槌、叠鞘、细茎和反瓣等5种石斛的指纹图谱进行对比研究。方法:采用Dikma C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.5%冰乙酸水溶液,梯度洗脱,柱温30℃,流速1 mL·min-1,DAD串联蒸发光散射检测器检测。结果:建立5种石斛的HPLC指纹图谱,并标定9个指纹峰,5种石斛相似度较低。结论:建立的指纹图谱方法稳定、可靠、重现性好,可直接反映石斛品种与化学成分变化的关系。

HPLC-DAD-ELSD法测定伤痛酊中氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱、岩白菜素和百两金皂苷A的含量

采用HPLC-DAD-ELSD法测定伤痛酊（STD）中氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱、岩白菜素和百两金皂苷A的含量。方法：采用HypersilC，。色谱柱（200mm×4．6mm，5μm）；流速：0．8ml·min^-1；氯化两面针碱和乙氧基白屈菜红碱：流动相A为乙腈，流动相B为0．1％甲酸一三乙胺（pH4．5），检测波长为273nm。岩白菜素和百两金皂苷A：甲醇一水（25：75）为流动相；漂移管温度：95℃，载气（N2）流速：2．5SLPM·min^-1。结果：氯化两面针碱与乙氧基白屈莱红碱进样量分别在0．021—0．426μg（r=0．9995）、0．075—1．494μg（r=0．9998）与峰面积呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为99．22％、98．61％，RsD分别为0．64％、0．46％（n=9）；岩白菜素和百两金皂苷A分别在0．215～4．304（r=0．9993）、0．286—5。728μg（r=0．9997）进样量的自然对数值与峰面积的自然对数值良好的线性关系，平均加样回收率分别为99．15％、99．25％，RSD分别为0．77％、0．56％（n=9）。结论：该测定方法结果准确、灵敏度高、重复性好，可用于伤痛酊中氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱、岩白菜素和百两金皂苷A的含量测定。

基于HPLC-DAD-ELSD串联法同时测定麝香保心丸中8种成分的含量

目的:建立麝香保心丸中苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基8种成分的含量测定方法,为麝香保心丸的质量评价提供实验参考。方法:采用HPLC-DADELSD串联法同时测定麝香保心丸中苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基8种化学成分的含量,色谱柱为Waters XBridgeTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液,梯度洗脱;检测波长为280 nm,柱温为30℃;蒸发光散射检测器(ELSD)漂移管温度为40℃;载气流量1.5 L/min。结果:苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基分离度良好,分别在2.769~55.370μg/mL(r=0.9998)、2.285~45.700μg/mL(r=0.9999)、2.251~45.021μg/mL(r=0.9997)、2.445~48.902μg/mL(r=0.9998)、1.912~38.230μg/mL(r=0.9999)、2.350~46.990μg/mL(r=0.9998)、2.275~45.500μg/mL(r=0.9999)、2.335~46.700μg/mL(r=0.9998)的范围内线性关系良好;平均回收率分别为99.98%(RSD=0.86%)、100.09%(RSD=0.65%)、99.98%(RSD=0.66%)、101.95%(RSD=0.92%)、99.50%(RSD=0.40%)、100.09%(RSD=0.69%)、99.89%(RSD=0.66%)、99.99%(RSD=0.62%)。结论:该法操作方便、准确、重复性好,可客观、全面地对麝香保心丸的内在质量进行有效评价。

基于HPLC-DAD-ELSD指纹谱的系统指纹定量法评价清热解毒注射液质量

目的建立自制清热解毒注射液HPLC-DAD-ELSD指纹图谱,以系统指纹定量法评价其质量。方法采用DAD-ELSD串联技术,以1%HAc溶液和1%HAc乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温(30±0.5)℃,进样量5μL;漂移管温度110℃,雾化室温度40℃,载气压力50 psi。结果以黄芩苷为参照物峰,确定DAD图谱中有60个共有峰;以绿原酸为参照物峰,确定ELSD图谱中有37个共有峰。采用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"软件,按平均值法计算,生成对照指纹图谱(RFP),以此RFP为标准,采用系统指纹定量法表征其质量,并与市售制剂和混合药材模拟样进行比较,初步确定了市售制剂含量低的原因为药材投料量不足或制剂被稀释。结论采用DAD-ELSD联用可以获得中药复方制剂真实质量重要信息,结合系统指纹定量法从整体定性分析和整体定量分析出发实现了对中药质量有效评价。

HPLC-DAD-ELSD法同时测定不同厂家前列癃闭通片中3种成分的含量

目的：建立HPLC-DAD-ELSD法同时测定前列癃闭通片中3种成分（芒柄花素、黄芪甲苷和齐墩果酸）的含量,比较8个不同生产厂家的18批前列癃闭通片中3种成分的含量差异。方法：采用SHISEIDO-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈-水,梯度洗脱;DAD检测器检测波长为248 nm;蒸发光散射检测器（ELSD）;漂移管温度：60℃;载气流速：3.5 L/min;流速：1.0 m L/min;柱温：35℃。结果：芒柄花素、黄芪甲苷和齐墩果酸进样量分别在0.03908~0.3908μg、1.11840~5.5920μg、0.40448~2.0224μg范围内线性关系良好,加样回收率分别为101.24%、101.51%、102.56%;RSD分别为1.19%、1.51%、2.01%。沈阳神龙、吉林百琦、武汉健民各成分含量较高,江苏颐海黄芪甲苷含量较低,吉林吉尔吉和药圣堂（湖南）齐墩果酸含量较低。结论：不同生产企业由于原药材产地、采收季节、生产工艺等的不同,导致了各成分含量差异较大。

HPLC-DAD-ELSD测定不同产地黄芪中2种成分的含量

目的:采用HPLC-DAD-ELSD同时测定不同产地黄英中黄英甲甘、芒柄花素含量。方法:采用HPLC-DAD-ELSD串联技术,检测波长:265nm;流动相:A水,B乙睛;流速JmL·min^-1;柱温:35℃;进样量:20μL;增益值:20;漂移管温度:60℃;加热器级别:60%,载气压力:35PSI。结果:黄英甲甘在峰面积对数和浓度对数呈良好的线性关系;芒柄花素在0.02~0.32mg·mL^-1,峰面积和浓度呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9997,0.9999,各方法学指标和加样回收率均符合要求。结论:本方法重复性良好,结果准确可靠,可用于黄英中两种不同类型成分的含量测定。

HPLC-DAD-ELSD法同时测定黄芪中10个成分的含量

目的建立HPLC-DAD-ELSD同时测定黄芪药材中4个黄酮类成分(毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素)和6个皂苷类成分(黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪皂苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅰ、异黄芪皂苷Ⅰ)含量的方法,比较7批不同产地的黄芪药材中各有效成分的含量。方法采用HPLC-DAD-ELSD联用法,色谱柱Waters Symmetry C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.3%冰醋酸(A)-乙腈(B),梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0 m L·min^(-1),检测波长260 nm;蒸发光散射检测器(ELSD)漂移管温度60℃,供气压力为25 psi。结果该条件下10个成分的分离度良好,在对应线性范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9993~0.9999),平均加样回收率为95.6%~103.3%,RSD为1.1%~2.9%。结论建立的含量测定方法简便,结果准确可靠,重现性好,适用于黄芪中10个成分含量的同时测定,为黄芪药材的全面质量控制奠定了实验基础。

肾康颗粒HPLC-DAD-ELSD指纹图谱的建立及质量评价

目的建立肾康颗粒HPLC-DAD-ELSD联用的分析方法,科学评价其质量。方法采用Diamonsil·C_(18)色谱柱,以0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相梯度洗脱;检测波长为:大黄素和大黄酚254nm,丹酚酸B 288 nm,羟基红花黄色素A 403 nm,将不同波长下数据进行融合得到10批肾康颗粒的多波长融合指纹图谱。黄芪甲苷采用ELSD检测,参数为漂移管温度90℃,气压1.5 Bar。结果所建立的肾康颗粒的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱方法的专属性、精密度、重现性和稳定性均良好;采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A对10批肾康颗粒进行相似度评价,结果表明:DAD检测器下10批肾康颗粒融合指纹图谱共获得15个共有峰并与对照指纹图谱的相似度均大于0.957;ELSD检测共获得6个共有峰且与对照指纹图谱的相似度均大于0.855,批间差异较小;颗粒样品的定量分析表明5种指标成分在10批肾康颗粒中的含量基本一致。结论所建立的HPLC-DAD-ELSD方法可用于肾康颗粒的质量控制,并提供了一种既能整体定性,又可指标成分定量的简便易行的质量评价模式。

HPLC-DAD-ELSD法同时测定22个产地通关藤中3种皂苷

目的建立HPLC-DAD-ELSD法同时测定22个产地通关藤Marsdenia tenacissima(Roxb.)Wight et Arn.中3种皂苷的含有量。方法通关藤70%乙醇提取物的分析采用Agilent Zorbax SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-水(45∶55);检测波长235 nm;体积流量1.0 mL/min;漂移管温度80℃;载气压力3.5 bar(1 bar=100 kPa)。结果通关藤苷G、H、I分别在1.768～5.305μg(r=0.999 2)、3.842～11.526μg(r=0.999 0)、3.026～9.078μg(r=0.999 1)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.60%(RSD=1.86%)、99.88%(RSD=2.49%)、99.08%(RSD=1.14%),不同产地样品中三者含有量有明显差异。结论该方法稳定可靠,可用于通关藤的质量控制。

金匮肾气丸总苷类成分HPLC-DAD-ELSD指纹图谱的建立

目的以马钱苷为参照物建立金匮肾气丸总苷类成分的指纹图谱。方法采用二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器(DAD-ELSD)串联技术,乙腈-1%冰醋酸为流动相(梯度洗脱),流速0.5 mL·min^(-1),柱温30℃,漂移管温度90℃,气体压力为207 kPa。结果DAD图谱中有12个共有峰,ELSD图谱中有16个共有峰,确定其为指纹峰。采用国家药典委员会指纹图谱自动处理系统,10批样品的相似度均大于0.90。结论该方法简便,稳定,重现性好。适用于金匮肾气丸总苷类的指纹图谱检测。

山西产酸枣仁药材HPLC-DAD-ELSD指纹图谱及聚类分析

目的建立山西产酸枣仁药材HPLC-DAD-ELSD指纹图谱并进行聚类分析,为科学评价和有效控制其质量提供可靠的方法。方法采用HPLC-DAD-ELSD串联技术,建立12批山西不同产地的酸枣仁药材中黄酮类和皂苷类化合物指纹图谱共有模式,并采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"软件进行数据处理,以共有峰与对照峰的比值进行聚类分析。结果该方法对酸枣仁药材中黄酮类、皂苷类成分均有良好的分离,一次进样同时测定了两类不同成分的指纹图谱。结论该指纹图谱研究及聚类分析方法可用于控制酸枣仁药材质量。

HPLC-DAD-ELSD法同时测定复方吐温软膏中硫酸新霉素与盐酸达克罗宁的含量

目的：建立同时测定复方吐温软膏中硫酸新霉素与盐酸达克罗宁含量的HPLC-DAD-ELSD法。方法：采用 Agilent ZOR BAXSB-C18色谱柱（250 mm ×4.6 mm,5μm）,以含0.1 mol·L-1三氟乙酸的水溶液、乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 ml·min-1,DAD的检测波长为282 nm,ELSD的漂移管温度为50℃,雾化温度为60℃,载气流速为1.6 L·min-1,柱温为35℃。结果：硫酸新霉素检测浓度的线性范围为141.540~323.520μg·ml-1（r=0.9996）,平均回收率为98.87%,RSD=0.95%（n=9）；盐酸达克罗宁检测浓的线性范围为28.000~64.000μg·ml-1（r=0.9996）,平均回收率为99.57%,RSD=1.10%（n=9）。结论：该方法结果准确、灵敏度高、重复性好,在同一色谱条件下实现了复方吐温软膏中全部有效成分的含量测定,为其质量控制提供了依据。

我国不同产地黑茶的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱研究

采用二极管阵列-蒸发光散射检测器（DAD—ELSD）串联的检测技术，建立了我国不同产地黑茶的HPLC-DAD—ELsD指纹图谱。结果表明，36个黑茶样品的HPLC—DAD指纹图谱中共确定了27个共有峰，鉴别了没食子酸、表没食子儿茶素等8种组分，HPLC—ELSD指纹图谱中共确定了15个共有峰，鉴别了谷氨酸、L-茶氨酸等6种组分。相似度分析结果表明，36个黑茶样品与黑茶HPLC—DAD共有模式的相似度在0．903-0．979之间，与黑茶HPLC-EISD共有模式的相似度在0．902～0．974之间；而6个对照茶样与黑茶指纹图谱共有模式的相似度均低于0．900。该研究建立的黑茶HPLC—DAD—ELSD指纹图谱能为我国黑茶的鉴别和质量评价提供参考。

HPLC-DAD-ELSD法测定黄芪经九州虫草双向固体发酵前后8种成分的含量

目的:建立同时测定黄芪经九州虫草双向固体发酵前后毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅳ、异黄芪皂苷Ⅱ、环黄芪醇、异黄芪皂苷Ⅰ等8种成分含量的方法,并探讨发酵处理对黄芪中上述8种成分含量的影响。方法:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光检测器联用技术(HPLC-DAD-ELSD)进行含量测定。色谱柱为Agilent 5 TC-C18;流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱;流速为1 mL/min;柱温为30℃;DAD检测波长为260 nm;ELSD蒸发管温度为100℃;雾化器温度为80℃;载气流速为1.6 L/min;进样量为15μL。结果:8种成分在各自质量浓度范围内线性关系良好(R2均大于0.9990);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%(n=3或n=6);平均加样回收率为97.88%~101.32%,RSD为1.22%~2.39%(n=6)。以未发酵黄芪中相应成分含量为100%计算,经九州虫草双向固体发酵后,黄芪中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅳ、异黄芪皂苷Ⅱ、环黄芪醇、异黄芪皂苷Ⅰ的含量变化率分别为-98.51%、-96.41%、-94.74%、-96.40%、289.20%、20.25%、-75.05%、562.46%。结论:黄芪经过九州虫草发酵后,有利于增加其主要活性成分黄芪皂苷Ⅳ、异黄芪皂苷Ⅰ、异黄芪皂苷Ⅱ的含量。

柴胡配方颗粒的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光检测器(HPLC-DAD-ELSD)联用技术,建立柴胡配方颗粒的指纹图谱。方法使用Venusil XBP-C18(L)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,进样量20μL,DAD检测器采集波长为210 nm和254 nm;ELSD检测器漂移管温度105℃,载气流量2.5 L·min^-1。结果通过19批柴胡配方颗粒样品建立了指纹图谱的共有模式,其中HPLC-DAD(210 nm)指纹图谱共有峰14个,HPLCDAD(254 nm)指纹图谱共有峰9个;HPLC-ELSD指纹图谱共有峰10个。确认了柴胡皂苷a、柴胡皂苷b1、柴胡皂苷b2及柴胡皂苷c。结论本研究所建立的方法简便准确,为该品种的质量评价与控制提供了有力的技术支持,同时对其他配方颗粒质量标准研究也具有一定的参考意义。

HPLC-DAD-ELSD法同时测定威灵仙药材中齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量

目的建立以蒸发光散射检测器（ELSD）和二极管阵列检测器（DAD）测定威灵仙药材中齐墩果酸和常春藤皂苷元的高效液相色谱分析方法。方法色谱柱：Merck Lichrocart C18柱（4.0 mm×250 mm,5μm）;流动相：甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（体积比87∶13∶0.04∶0.02）;流速：1.0 mL.min-1;柱温：30℃;DAD检测波长为210 nm;ELSD蒸发管温度为80℃,气体压力为172.375 kPa。结果常春藤皂苷元、齐墩果酸线性范围分别为1.43-14.3μg和2.1-21.0μg;常春藤皂苷元和齐墩果酸在以DAD检测时的加样回收率分别为98.02%、98.94%,RSD分别为2.61%、2.34%;在以ELSD检测时的加样回收率分别为98.72%、100.03%,RSD分别为2.51%、2.22%。结论本方法简便、重现性好、专属性强,为完善威灵仙药材质量控制标准提供了科学依据。

HPLC-DAD-ELSD法测定丹膝颗粒中8种成分的含量

目的:建立HPLC-DAD-ELSD法测定丹膝颗粒中8种成分的含量。方法:色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGⅡ(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%甲酸溶液,梯度洗脱;流速:0.8 ml·min^(-1);柱温:35℃;进样量:10μl。结果:没食子酸、栀子苷、丹酚酸B、淫羊藿苷、丹皮酚、丹参酮ⅡA、人参皂苷Ro、橙黄决明素进样量分别在0.10~1.25μg、0.20~2.50μg、0.40~5.00μg、0.10~1.25μg、0.20~2.50μg、0.03~0.38μg、0.03~0.38μg、0.03~0.38μg(r为0.9989~0.9999)范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率分别为99.5%,100.1%,98.0%,101.2%,98.9%,99.3%,98.5%,97.8%(RSD<2.0%,n=6)。结论:该方法操作简便、结果可靠,重复性好,可用于丹膝颗粒的质量控制。