HPLC-ELSD-UV法同时测定人体胆结石中胆固醇、胆红素及各种胆酸的含量

目的:建立了人体胆结石中胆固醇、胆红素及各种胆酸的HPLC-ELSD-UV含量测定方法。方法:采用ZORBAX SB-C18(4.6mm×150 mm,5μg)色谱柱,0.1%醋酸溶液(A相)和甲醇(B相)为流动相梯度洗脱,流速:1.6 mL·min-1,紫外检测器(检测波长450 nm)和蒸发光散射检测器联用检测,柱温为室温。结果:测定了16个人体胆结石中胆固醇、胆红素及各种胆酸的含量。胆固醇在0.2204-1.653 mg·mL-1、胆红素在0.536-21.44μg·mL-1、各种胆酸在0.2-1.5 mg·mL-1范围内呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.8%,101.5%,96.5%-101.2%,RSD分别为1.86%、1.71%、0.53%-2.14%(n=9);人体胆结石中的胆固醇、胆红素含量大多在776.3-972.5μg·mg-1和0.639-2.981μg·mg-1,各种胆酸未检出。结论:本法操作简便、快速、准确、适用范围广,可用于对人体胆结石中胆固醇、胆红素及各种胆酸的同时测定。

HPLC-ELSD-UV法同时测定氨酚那敏三味浸膏胶囊中长梗冬青苷、白花前胡甲素、白花前胡乙素

目的建立氨酚那敏三味浸膏胶囊中长梗冬青苷、白花前胡甲素和白花前胡乙素的定量分析方法。方法采用HPLC-ELSD-UV法测定长梗冬青苷、白花前胡甲素和白花前胡乙素,色谱柱为Venusil XBP-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,紫外检测波长为320 nm;ELSD参数:漂移管温度为80℃,氮气体积流量为2.5 mL/min,雾化温度为36℃,柱温30℃。结果长梗冬青苷在1.0716～5.358μg范围内的线性关系良好(r=0.999 1),平均回收率100.3%,RSD为2.05%(n=9);白花前胡甲素和白花前胡乙素分别在0.892 4～4.462μg(r=0.999 9)和0.486 8～2.434μg(r=0.999 7)范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.03%、99.02%,RSD为2.01%、1.98%(n=9)。结论本方法测定结果准确可靠,重复性好,可为氨酚那敏三味浸膏胶囊的质量控制提供定量评价方法。

HPLC-ELSD-UV联用测定保肾甲丸中黄芪甲苷、淫羊藿苷的含量

目的:建立保肾甲丸中黄芪甲苷、淫羊藿苷的含量测定方法。方法:采用HPLC-ELSD-UV联用方法,Waters symmetry C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相乙腈–水(30∶70),流速1m L·min^(-1),柱温30℃,紫外检测波长270nm(淫羊藿苷),蒸发光检测器漂移管温度105℃(黄芪甲苷)。结果:黄芪甲苷在0.3995μg^3.995μg范围内呈良好线性关系(r=0.9993),平均回收率为99.94%,RSD值为1.06%;淫羊藿苷在25μg·m L^(-1)~800μg·m L^(-1)范围内呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率为97.61%,RSD值为1.29%。结论:所建方法简便可靠,重复性好,可作为过保肾甲丸中黄芪甲苷、淫羊藿苷的测定方法。

不同生长年限太白贝母中贝母辛和总生物碱的含量测定

目的:测定不同生长年限太白贝母鳞茎中贝母辛和总生物碱的含量,为建立和完善中药材太白贝母的质量控制体系和适宜采收时间提供实验依据。方法:采用HPLC-ELSD法测定贝母辛,色谱柱为Agilent Extend C18(250 mm×4.0 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%二乙胺水溶液(10∶90),流速为1.0 mL/min,Alltech 2000蒸发光散射检测器;采用紫外分光光度法测定总生物碱。结果:生长2～3年的太白贝母贝母辛的含量随着生长年限的增加而增加,生长4～6年的太白贝母贝母辛的含量随着生长年限的增加而降低;生长2～4年太白贝母的总生物碱含量逐年增加,生长5～6年总生物碱含量逐年下降。结论:综合药用有效成分贝母辛和总生物碱的含量、贝母药材的产量以及土地利用率3个因素考虑,以4年生的太白贝母采收比较合适。

HPLC-UV-ELSD法同时测定青蒿中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量

用HPLC-UV-ELSD法同时测定青蒿药材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。采用Nucleodur C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μmID）；以乙腈-0．1％乙酸水（50：50）为流动相；紫外检测波长209nm，蒸发光散射检测器漂移管温度50℃。结果显示，青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸能够达到很好分离。它们的线性范围分别为0．52．2．6μg，r=0.9994（n=5）；0．022～4．4μg，r=0．9999（n=5）；0．203～8．12μg，r=0．9998（n=5）。平均回收率分别为99．45％（RSD=2．3％，n=6）；102．37％（RSD=1．7％，n=6）；101．10％（RSD=0．79％，n=6）。本法简单、准确、快速，可同时测定青蒿药材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。

HPLC-UV-ELSD联用测定黄花蒿叶片中青蒿素及相关倍半萜的含量

目的HPLC-UV-ELSD联用建立黄花蒿叶片中青蒿素及其生合成相关倍半萜的含量测定方法。方法采用Venusil XBP-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水梯度洗脱,检测波长:203 nm,流速:1.0 mL.min-1,ELSD载气压力:0.35 MPa,喷嘴温度:35℃,漂移管温度:60℃,检测器:UV-ELSD联用,测定黄花蒿叶片中青蒿素、青蒿素B、3α-羟基-1-去氧青蒿素含量。同一色谱柱条件下流动相改为乙腈-水-甲酸(体积比为60.00∶40.00∶0.08),检测波长:215 nm,流速:1.0 mL.min-1,检测器:UV检测器,测定黄花蒿叶片中青蒿酸含量。结果4种倍半萜在各自的线性范围内线性关系良好(r≥0.9990),RSD<3%,平均加样回收率分别为98.5%(RSD=2.3%)、96.5%(RSD=1.8%)、97.5%(RSD=3.6%)、95.4%(RSD=2.5%)。结论该方法可作为黄花蒿中青蒿素及其生合成相关倍半萜的含量测定方法。

黄芪总皂苷与黄芪甲苷在酸碱中的含量变化分析

目的探讨黄芪总皂苷(AST)与黄芪甲苷(AST-Ⅳ)在人工胃液(0.1mol·L-1HCL溶液)及氨试液中的含量变化情况。方法采用紫外分光光度比色法测定黄芪总皂苷含量,检测波长:531nm;采用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷含量,以Eclipse XDB(150mm×4.6mm,5μm)ODS色谱柱,流动相为乙腈:水(梯度洗脱),洗脱梯度为0-17min,乙腈26%→55%,流速为1.0mL·min-1,检测器为ELSD-Alltech3300,漂移管温度为40℃,氮气流速为1.5L·min-1。结果单纯的黄芪甲苷在0.1mol·L-1HCL溶液中降解14%左右,再经4mL8%氨试液处理后含量变化不大;黄芪总皂苷在0.1mol·L-1HCL溶液中降解了60%左右,总皂苷中的甲苷降解了58%左右;将总苷先酸解再经4mL8%氨试液处理,则其中的黄芪甲苷含量降低约23%。结论黄芪总皂苷及黄芪甲苷在0.1mol·L-1HCL溶液中含量均下降,先酸解再经4mL8%氨试液处理后总苷中的黄芪甲苷含量虽有所提高,但仍比原含量低。

工业大麻研究．Ⅲ．不同生长期工业大麻中四氢大麻酚和大麻二酚含量的测定方法比较

分别采用HPLC-UV法、HPLC-ELSD法和GC-FID法测定工业大麻枝叶中四氢大麻酚(THC)和大麻二酚(CBD)含量,并进行了比较。结果显示,HPLC-UV法和GC-FID法的测定结果较为接近,但后者采用内标法,操作繁琐;HPLC-ELSD法取样量大、灵敏度低、线性范围窄。HPLC-UV法则灵敏度高、线性范围宽、回收率高。

不同工艺纯化参芪扶正方中有效成分研究

目的:通过研究三类不同工艺对参芪扶正方(党参、黄芪)中有效成分的纯化影响。方法:采用水提醇沉法、聚酰胺法和大孔树脂吸附法,以黄芪甲苷和芒柄花素含量为指标,采用高效液相紫外/蒸发光散射检测器联用技术进行测定和指纹分析。结果:以聚酰胺法有效成分含量最高,溶液颜色最浅,干固物明显低于另两种方法。结论:参芪水提液以聚酰胺纯化效果最佳,高效液相紫外联用蒸发光散射指纹图谱可有效评价参芪水提液的纯化效果。

HPLC-UV-ELSD同时检测新型催泪喷射器中的合成辣椒素与吐温20

为检测警用催泪喷射器中合成辣椒素和吐温20的质量浓度,建立了一种紫外与蒸发光散射检测器联用的高效液相色谱方法(HPLC-UV-ELSD).其中紫外检测器检测合成辣椒素(SC)、蒸发光散射检测器检测吐温20.检测条件为:流动相为甲醇:水(80∶20),流速1 mL/min,紫外检测波长280 nm,柱温28℃;蒸发光散射检测器空气载气流量2.5 L/min,漂移管温度为60℃,雾化载气流压力设置为0.5 MPa.在合成辣椒素质量浓度为196~980μg/mL范围内,吐温20在质量浓度为212~1 060μg/mL范围内呈良好的线性关系(R^2>0.999),回收率均在90%~110%范围内.本方法已成功应用于实际警用催泪喷射器填充剂的检测.

HPLC-UV-ELSD联用检测熊香胶囊中牛磺熊去氧胆酸的含量

目的:HPLC-UV-ELSD联用检测熊香胶囊中牛磺熊去氧胆酸的含量;方法:采用Kromasil C18色谱柱(5μm,4.6mm×250mm),以甲醇-水(0.1%甲酸)(60∶40)为流动相;紫外检测波长为210nm;ELSD漂移管温度105℃,雾化气体(空气)流速2.7L·min-1;结果:牛磺熊去氧胆酸在1.44～5.76μg线形关系良好,紫外检测方式回收率为97%(n=5),RSD2.3%,UV检测方式回收率为101%(n=5),RSD1.5%;结论:与HPLC/UV相比,HPLC/ELSD测定熊香胶囊中牛磺熊去氧胆酸成分的含量结果更准确。

3种HPLC检测器测定单甘酯含量的方法比较

比较高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)、高效液相色谱-示差折光检测法(HPLC-RI)、高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定乳浊液中单甘酯的含量。结果表明:UV法检测单甘酯,杂质干扰严重,样品信号不强,灵敏度低;RI法只有在较高的质量浓度范围内才有较好的线性关系,不适合用于检测较低质量浓度的单甘酯;ELSD法检测单甘酯含量,单甘酯质量浓度在0.040～5.000mg/mL范围内有良好的线性关系,R2为0.9998,样品回收率达到92.94%,相对标准偏差为2.24%,变异系数为2.41%。HPLC-ELSD法灵敏,准确,重复性好,可用于乳浊液中单甘酯含量的测定。

HPLC⁃UV⁃ELSD法同时测定防风通圣丸中8种成分

目的建立HPLC法同时测定防风通圣丸(川芎、桔梗、甘草等)中川芎嗪、栀子苷、升麻素苷、甘草苷、5⁃O⁃甲基维斯阿米醇苷、黄芩苷、桔梗皂苷D、黄芩素的含量。方法该药物80%甲醇提取液的分析采用Venusil MP C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈⁃0.1%醋酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长260 nm;ELSD漂移管温度90℃;雾化气体积流量2.5 mL/min;雾化温度36℃。结果8种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9995),平均加样回收率99.35%~99.60%,RSD 0.52%~1.31%。结论该方法准确灵敏,重复性好,可用于防风通圣丸的质量控制。

黄芪注射液中药用辅料聚山梨酯80两种含量测定方法的比较研究

目的比较采用两种方法测定黄芪注射液中聚山梨酯80含量的优缺点。方法分别采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)和紫外-可见分光光度法(UV)进行检测;采用分子凝胶色谱柱;以乙腈-水(90:10)为流动相;流速为0.6 mL.min-1;漂移管温度110℃,载气流速为2.3 L.min-1。结果两种方法测得的结果之间存在系数关系,HPLC-ELSD法测得结果约为UV法的0.65;与黄芪注射液中聚山梨酯80理论投料量进行比较,HPLC-ELSD法测定结果比UV法更接近理论值。结论 HPLC-ELSD法简便、准确,更有利于黄芪注射液中聚山梨酯80的含量控制。

芽孢杆菌R57对黄芪的防病提质作用及其鉴定

研究旨在探讨菌株R57对黄芪的抑菌防病和品质提升作用,并对其进行分类鉴定。采用牛津杯法测定无菌发酵液的体外抑菌效果、浸根法测定离体防病效果、灌根法测定盆栽防病效果;采用灌根法处理黄芪,HPLC-UV-ELSD法测定药效成分含量变化;采用形态学观察、生理生化特性测定和16S rDNA序列分析,确定菌株分类地位。体外抑菌试验结果表明,菌株R57无菌发酵液对根腐病菌F.solani和F.acuminatum的抑菌圈直径分别为(18.02±1.71)mm和(19.96±2.42)mm。离体试验中,R57治疗性处理对2种病菌引起的根腐病在7天和15天时均有显著防效,保护性处理对F.solani和F.acuminatum侵染分别在7天和15天时有明显防效,拮抗处理仅在7天时对F.solani侵染有抑制作用。盆栽试验中,R57发酵液对F.solani和F.acuminatum引起的根腐病,保护性防效分别为61.27%±4.89%和64.33%±8.25%,治疗性防效不显著。R57发酵液施用还可显著促进黄芪中主要活性成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花苷的积累。经鉴定,菌株R57为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),该菌株具有“防病提质”的双重功效,可作为微生物制剂的多功能菌株进一步开发研究。

HPLC-ELSD及紫外分光光度法测定三七中皂苷的含量

采用反相高效液相色谱蒸发激光散射检测器测定三七中人参皂苷 Rg1 的含量。色谱柱为 CL C- ODS (6 .0mm× 15 0 m m) ,流动相为乙腈 -水 (30∶ 70 ) ,蒸发激光散射检测器。定量方法简单 ,准确。回收率为 10 0 .5 0 % ,RSD为 1.82 %。并用紫外分光光度法测定了三七中总皂苷的含量 ,结果和 HPL C法基本一致 ,说明该方法定量准确 ,回收率为 10 1.5 0 % ,RSD为 1.44 %。结论认为两方法均可以控制三七的质量。

基于HPLC-UV-ELSD指纹图谱法同时测定绞股蓝中4种成分及不同产地药材质量评价

目的:建立绞股蓝药材高效液相色谱-紫外-蒸发光散射器(HPLC-UV-ELSD)串联指纹图谱方法,并同时测定槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX的含量,对其质量优劣进行全面综合评价。方法:采用HPLC-UV-ELSD串联法和相似度评价软件,对15批不同产地绞股蓝药材进行指纹图谱研究,并对绞股蓝中槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX 4种指标性成分中的含量进行测定与分析。结果:建立了绞股蓝药材HPLCUV-ELSD串联指纹图谱法,标定了11个共有峰,指认了其中4个色谱峰;不同产地绞股蓝药材中槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX 4种成分的含量高低不一,质量存在差异。结论:建立了绞股蓝药材HPLC-UVELSD指纹图谱法,并结合相似度评价和4种成分的定量分析结果,较全面地反映该药材的质量,该法可用于不同产地绞股蓝药材质量的有效评价。

海拔高度对重庆产桔梗皂苷含量的影响

目的:探讨海拔高度对重庆产桔梗中皂苷含量的影响。方法:采用UV定量测定桔梗中总皂苷和桔梗皂苷D、D2、去芹菜糖桔梗皂苷D的含量,采用手持GPS进行测定海拔高度。运用SPSS19.0软件对海拔高度与4个有效成分含量进行相关性分析。结果:重庆产桔梗中皂苷的含量随着海拔的升高而增加,采样区域海拔高度与对应桔梗中皂苷D、D2、去芹菜糖桔梗皂苷D、总皂苷含量的相关系数分别为r1=0.988(P1=0.012),r2=0.987(P2=0.011),r3=0.996(P3=0.004),r4=0.960(P4=0.04),表明海拔高度与桔梗皂苷的含量有相关性。结论:桔梗皂苷的含量与其生长海拔高度有关,为重庆产桔梗的科学种植提供理论依据。

非达霉素原料药中有关物质的检查方法研究

目的:建立非达霉素原料药中有关物质的检查方法。方法:分别考察正相-紫外检测器色谱系统、反相-蒸发光散射检测器色谱系统、反相-紫外检测器色谱系统对非达霉素原料药中有关物质的检出能力,优选出最佳色谱系统。建立有关物质检查的高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB C18,流动相A为0.2%三乙胺缓冲液(pH 3.8)-乙腈(55∶45,V/V)、流动相B为0.2%三乙胺缓冲液(pH 3.8)-乙腈(20∶80,V/V)(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为230 nm,柱温为35℃,进样量为10μL;以不加校正因子的主成分自身对照法计算有关物质含量。结果:非达霉素在正相-紫外检测器色谱系统下不能有效分离杂质C、F,在反相-蒸发光散射检测器色谱系统下仅能检出杂质C、D、E、F 4个杂质;在反相-紫外检测器色谱系统下可检出11个杂质,故以此系统进行有关物质检查。在方法学考察中,非达霉素检测质量浓度线性范围为0.5~20.0μg/mL(R2=0.999 9);检测限为0.05 ng,定量限为0.15 ng;重复性、中间精密度试验的RSD均小于2.0%(n=6);平均回收率为98.4%(RSD为3.6%,n=9)。3批非达霉素原料药中杂质含量分别为0.53%、0.51%、0.51%。结论:非达霉素在反相-紫外检测器色谱系统下进行杂质检查效果最好;建立的有关物质检查方法专属性强、灵敏度高,可用于非达霉素原料药中有关物质的检查。

双检测器串联色谱柱分析六味地黄丸

对高效液相色谱系统进行了改造并用于中药六味地黄丸的分析。紫外检测器与蒸发光散射检测器串联以提高峰容量;升高分析温度串联色谱柱以增加柱效。结果显示,紫外检测器共检测到156个峰,蒸发光散射检测器检测到195个峰,其中41个色谱峰为可以认证的共有峰,所构建的系统非常适宜于中草药指纹图谱的研究。