HPLC-Flu法测定人血浆中美托洛尔浓度

目的:建立HPLC-Flu法检测血浆中低浓度的美托洛尔。方法:采用YWG C_(18)色谱柱,流动相为甲醇-醋酸和醋酸钠缓冲液(45:55,含0.25%庚烷磺酸钠),以普萘洛尔为内标,检测器波长:EM 302 nm,EX 284 nm。结果:线性范围为2.5～80 ng·ml^(-1),最低检测浓度为2.5 ng·ml^(-1)。日内RSD均小于8%,但日间RSD较大。能检测口服6.25 mg,12.5 mg美托洛尔的心表患者的血药浓度。结论:该方法灵敏度高,方法简便,适用于临床药物监测。

SPE-HPLC-FLU法检测人血浆样品中维拉帕米

目的建立一种简单、快捷、灵敏、准确的监测人血浆样品中维拉帕米的方法。方法采用SPE方法处理血浆样品;加洛帕米为内标,醋酸-醋酸钠溶液:甲醇:三乙胺(45:55:1)为流动相,应用HPLC色谱法配合荧光检测,荧光检测波长275nm。结果所得色谱图中维拉帕米与内标能很好分离,无明显杂质峰的影响。建立的方法经验证,线性范围为5～500ng.mL-1,检测限为1.4ng.mL-1,定量限为5.0ng.mL-1,平均加样回收率分别是90.7%、88.2%和90.2%,精密度试验RSD值<15%,各种稳定性试验中RSD值均<20%。结论该方法简单、快捷、灵敏、准确,适用于临床维拉帕米的血药浓度监测。

HPLC-FLU法测定血清中黄藤素的含量

目的 建立血清样品中黄藤素的高效液相色谱 -荧光检测法。方法 色谱柱为LiChrosorbSI 6 0 (5 μm)2 0cm× 4 0mmID ;流动相为二氯甲烷—甲醇—二乙胺—冰醋酸 (90∶9∶0 4∶0 5 ) ;流速为 1 0mL·min-1;荧光检测Ex=36 5nm ,Em=5 10nm。血清样品加 13 甲基小檗碱 (内标 ) ,用三氯乙酸 氯仿提取 ,水浴加温、氮气吹干 ,用二氯乙烷溶解进样。结果 黄藤素和内标的保留时间分别为 8 4min和 7 1min。黄藤素的最低检测浓度为 0 1ng·mL-1。在 0 1～ 10 0ng·mL-1有良好线性关系 (γ =0 9999)。血药浓度测定天内、天间精密度分别为 0 94%～1 85 %和 0 15 %～ 6 47%。结论 用高效液相色谱 荧光检测法测定黄藤素的血药浓度 ,有灵敏、专一和快速的优点 。

用HPLC-FLU法测定人血浆中双嘧达莫的浓度及其药动学

目的：建立测定人血浆中双嘧达莫浓度的HPLC-FLU分析方法，并对其在人体内的药动学进行研究。方法：采用HPLC—FLU法，色谱柱为Kromasil C18，流动相为乙腈-20mmol·L^-1。磷酸二氢钠（含0．4％三乙胺，pH6．5）（50：50），流速1．0mL·min^-1激发波长为290nm，发射渡长为485nm。用乙腈沉淀蛋白后取上清液进样，测定双嘧达莫血药浓度。结果：血浆中双嘧达莫在50．0～4000．0μg·L^-1。浓度范围内线性良好（r=0．9998），最低检测浓度为25．0μg·L^-1，低、中、高3个浓度的平均回收率分别为95．53％，109．54％，105．04％，日内、日间RSD均小于9％。结论：本方法简便、准确、干扰少．检出灵敏度高，可用于双嘧达莫的药动学研究。

维拉帕米及去甲基维拉帕米临床血药浓度的HPLC-FLU检测

目的 :建立一种简便的维拉帕米 ( Ver)及去甲基维拉帕米 ( Norv)血药浓度 HPL C- FL U的测定方法。方法 :色谱柱为Alltima C1 8柱 ( 15 0 mm× 4.6 m m,5 ︼m) ;流动相为甲醇 -水 -三乙胺 ( 5 2∶ 47.6∶ 0 .4) ,用冰醋酸调节 p H至 5 .41,流速 1ml/min。荧光检测激发波长 Ex=2 84nm,发射波长 Em=313nm。Ver和去 Norv的保留时间分别为 7.14min和 5 .17min,血样预处理采用乙腈直接沉淀法。结果 :Ver及 Norv血药浓度在 2 5～ 40 0 ng/ ml范围内线性关系良好 ( r≥ 0 .9997) ,最低检测限分别为 2 0 0 pg和 10 0 pg( r S/N≥ 3) ,最低检测浓度均为 2 0 ng/ ml。批内、批间精密度小于 5 %。结论 :本方法简便可靠 。

补肾益智方对老年痴呆症大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响

目的研究补肾益智方对老年痴呆症大鼠脑内氨基酸类神经递质含有量的影响。方法采用微透析技术收集透析样品,HPLC-FLU方法检测老年痴呆症大鼠脑内天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(γ-GABA)4种氨基酸类神经递质的含有量。结果补肾益智方能明显降低老年痴呆症大鼠脑内兴奋性氨基酸Asp和Glu的含有量,升高抑制性氨基酸Gly和γ-GABA的含有量。结论补肾益智方能降低兴奋性氨基酸含有量,为其防预及缓解老年痴呆症状提供一定的理论依据。

乳粉中4种生育酚的正相高效液相色谱荧光法含量测定

建立了反相色谱法样品前处理与正相酰胺柱色谱分离相结合的正相高效液相色谱荧光(HPLC-FLU)法同时测定乳粉中α-、β-、γ-和δ-生育酚的含量,用于乳粉中维生素E含量的准确测定。考察了不同色谱柱类型、不同流动相比例和不同进样量对4种生育酚的色谱分离情况。2.5 g乳粉样品经氢氧化钾碱性溶液皂化后,用石油醚-乙醚混合液提取浓缩至近干,用甲醇定容至10 mL,经过滤膜后进样。以V(正己烷)∶V(叔丁基甲基醚)∶V(四氢呋喃)∶V(甲醇)=810.0∶85.3∶104.3∶0.4的混合溶液为流动相等度洗脱,α-、β-、γ-、δ-生育酚在酰胺柱上18.5 min内达到基线分离。激发波长λ_(x)=294 nm,发射波长λ_(m)=328 nm,进样体积为2μL。4种生育酚在2~80 mg/L范围内,相关系数R^(2)≥0.9991;4种生育酚的定量限均为0.6 mg/kg,3水平加标平均回收率范围为88.2%~103.0%,相对标准偏差范围为1.3%~4.7%。方法色谱分离效果好、重复性好、准确度高、定量限也满足标准限量要求,具有较好的实用性,并已用于实际样品的检测,可为乳粉维生素E含量的准确测定提供技术参考。

羟基喜素碱片在肿瘤患者体内的绝对生物利用度

目的研究羟基喜树碱(HCPT)在肿瘤患者体内的绝对生物利用度。方法用随机交叉自身对照试验设计,8名肿瘤患者随机等分成2组,先后口服HCPT片剂或静脉注射HCPT针剂,用高效液相-荧光色谱法测定血药浓度。用3P97软件计算主要药代动力学参数,用梯形法计算AUC0→t。结果HCPT注射剂的主要药代动力学参数:Cmax为(2527±627)μg·L-1,t1/2α为(0.39±0.17)h,t1/2β为(4.27±2.25)h,Vc为(5.76±4.8)L,AUC为(2171.60±515.00)μg·h·L-1,CL为(55.25±5.14)L·h-1;HCPT片剂的主要药代动力学参数:Cmax为(127.80±32.90)μg·L-1,tmax为(2.37±0.70)h,tlag为(0.14±0.04)h,ka为(0.29±0.13),t1/2α为(1.73±0.18)h,t1/2β为(6.17±0.32)h,AUC为(693.80±23.50)μg·h·L-1,绝对生物利用度为(31.95±3.4)%。口服吸收符合一级吸收动力学过程,12h浓度大于10μg·L-1。结论HCPT片剂可维持12h有效血药浓度,且较静脉给药,t略呈后移现象,推测可能存在肠、肝循环。

血清中美西律的柱前衍生化-液相色谱荧光检测

目的 建立血清中盐酸美西律的柱前衍生化 液相色谱荧光检测法。方法 血清样品用丙酮液直接沉淀蛋白后 ,定量加入荧光胺丙酮溶液 ,得盐酸美西律的荧光衍生物。采用AlltimaC1 8(15 0mm× 4 6mm ,5 μm)为分析柱 ;流动相为甲醇 水 2 4mol·L- 1 二乙胺 磷酸缓冲液 (pH 4 0 ) (70∶2 8∶2 ) ;荧光检测激发波长 (Ex)为 392nm ,发射波长(Em)为 4 80nm。盐酸美西律的保留时间为 6 5min。结果 盐酸美西律在 0 10 0～ 6 4 0 0mg·L- 1 线性关系良好。本法的最低检测质量浓度为 5 μg·L- 1 ,(S N≥ 4 )。批内、批间精密度为 1 34%～ 5 31%。结论 本法操作简便、有良好的灵敏度和专一性 。

人血浆中水杨酸的测定及阿司匹林的人体药物动力学研究

目的采用HPLC—FLU测定人血浆中阿司匹林活性代谢物水杨酸的浓度，并研究人体内的药动学。方法采用Zor-baxSB—C18色谱柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相为0．02mol·L-1乙酸胺（冰醋酸调pH2．2）-乙腈-四氢呋喃（65：30：5），流速1．0ml·min-1。激发波长为300nm，发射波长为405nm。结果水杨酸0．0288—2．3000μg·ml-1线性良好（r=0.999），最低检测浓度为28．8ng·ml-1，方法回收率92．48％-109．98％，日内、日间RSD分别为3．09％-6．35％、3．08％-7．16％。结论所建方法操作简便、快速、灵敏、准确、干扰少，适用于测定水杨酸血药浓度及阿司匹林药动学研究。

复方坎地沙坦酯片在健康受试者体内的生物等效性研究

目的:建立高效液相色谱荧光法(HPLC-FLU)测定人血浆中坎地沙坦浓度并对其口服制剂进行生物等效性研究。方法:采用随机自身对照双周期交叉实验设计,19名健康受试者口服受试制剂和参比制剂后,用HPLC-FLU法测定人血浆中坎地沙坦浓度,用非房室模型估算坎地沙坦的药动学参数。结果:受试制剂和参比制剂的药动学参数如下:AUC_(0～t)分别为(1378.86±293.90)和(1338.33±324.76)μg·h·L^(-1);AUC_(0～∞)分别为(1451.48±299.56)和(1398.80±338.82)μg·h·L^(-1);C_(max)分别为(139.01±36.56)和(141.17±36.69)μg·L^(-1);t_(max)分别为(3.03±0.82)和(3.26±1.63)h;t_(1/2)分别为(8.30±2.06)和(8.17±1.43)h。受试制剂的相对生物利用度为(104.20±11.90)%。结论:经统计学分析,两种国产坎地沙坦酯片剂具有生物等效性。

枸橼酸他莫昔芬分散片在健康人体的药动学和生物等效性研究

目的:研究枸橼酸他莫昔芬分散片在健康人体内的药动学和生物等效性。方法:采用随机自身对照双周期交叉试验设计,20名男性健康志愿者口服受试制剂和参比制剂各20mg,用高效液相荧光法测定他莫昔芬的血药浓度,用非房室模型计算他莫昔芬的药动学参数。结果:枸橼酸他莫昔芬分散片和普通片的药动学参数如下:tmax分别为(6.3±2.2)、(6.7±2.4)h,Cmax分别为(72±14)、(68±16)μg/L,AUC(0-492)分别为(4.6±2.0)、(4.6±2.0)mg.L-1.h,t1/2分别为(143±24)、(153±33)h。枸橼酸他莫昔芬分散片相对于普通片的相对生物利用度为(101±13)%。结论:两制剂在人体内生物等效。

氯沙坦及其代谢物在维吾尔族和汉族健康志愿者的药代动力学

目的研究维吾尔族和汉族健康受试者单剂量口服氯沙坦钾片(抗高血压药)的药代动力学特征。方法 20名健康受试者(其中维吾尔族10名,汉族10名,男女各半),单剂量口服氯沙坦钾片50 mg;用高效液相色谱-荧光法测定氯沙坦及其代谢物E-3174血药浓度,用DAS软件进行数据处理、SPSS13.0软件进行统计学分析。结果维吾尔族受试者单剂量口服氯沙坦钾片50 mg后氯沙坦和代谢物E-3174的主要药代动力学参数分别为:Cmax(344±153),(477±166)μg·mL-1;tmax(1.0±0.3),(2.6±0.5)h;t1/2(1.0±0.4),(2.9±0.8)h;AUC0-24h(598±216),(2243±518)μg·h·mL-1;AUC0-∞(632±242),(2429±552)μg·h·mL-1。汉族受试者单剂量口服氯沙坦钾片50 mg后氯沙坦和代谢物E-3174的主要药代动力学参数分别为:Cmax(351±168),(242±60)ng·mL-1;tmax(1.4±1.1),(3.6±1.7)h;t1/2(0.8±0.4),(4.7±1.1)h;AUC0-24h(497±172),(1853±194)ng·h·mL-1;AUC0-∞(523±184),(1960±182)ng·h·mL-1。结论氯沙坦的代谢物E-3174的药代动力学参数t1/2、Vd、Cmax在维吾尔族和汉族健康受试者间的差异有显著性意义(P<0.05),不同性别间药代动力学参数的差异无显著性意义(P>0.05),所有药代动力学参数在同一民族和不同民族的个体间差异都很大,临床治疗中应实行个体化给药方案。

互为内标法测定患者血浆中氟西汀和西酞普兰的浓度

目的:建立测定人血浆中氟西汀、西酞普兰的高效液相色谱-荧光(HPLC-FLU)法,为临床用药提供参考。方法:氟西汀和西酞普兰互为内标,血浆样品碱化后经液-液萃取,以Ultimate XB-C18反相色谱柱进行分离,流动相为乙腈:0.02 mol·L-1磷酸氢二钠溶液(35∶65,pH 5.0),流速为1.0 ml·min-1,柱温为30℃。荧光检测氟西汀和西酞普兰的激发波长为230nm,发射波长为305 nm。结果:氟西汀、西酞普兰血药浓度均在15.625～1 000μg.L-1范围内线性关系良好;平均回收率分别为100.72%和100.94%;分析方法的最低定量限均为5μg.L-1;日内、日间RSD均<3%;冻融稳定性RSD均<10%。结论:本法快速、简便、灵敏、准确,适用于氟西汀、西酞普兰的血药浓度监测及药动学研究。

反相高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中拉贝洛尔的含量

目的:建立血浆中拉贝洛尔的反相高效液相色谱-荧光检测法。方法:血浆样品经叔丁基甲醚一次萃取后有机相挥干,以少量流动相重组,采用KromasilKR100-5C1(8250mm×4.6mm,5μm)为分析柱,甲醇:水:2.4molL二乙胺-磷酸缓冲液(pH=4.0)(50:48:2)为流动相,荧光激发波长(Ex)为302nm,发射波长(Em)为420nm。拉贝洛尔和内标(盐酸普萘洛尔)的保留时间分别为5.5min和8.0min。结果:血浆中的拉贝洛尔在2.5ngmL～160ngmL范围内线性关系良好,r=0.9998。方法的最低检测浓度为2.5ngmL,样品和内标平均提取回收率分别为81.28%和88.68%,批内、批间精密度为0.42%～7.72%。结论:本方法灵敏可靠,可满足拉贝洛尔的临床血药浓度监测和药代动力学研究的需要。

高效液相色谱荧光法测定人血浆中唑吡坦浓度及生物等效性研究

目的:建立高效液相色谱荧光法(HPLC-FLU)测定人血浆中唑吡坦的血药浓度并对其口服制剂人体生物等效性进行研究,为临床用药提供参考依据。方法:采用随机自身对照双周期交叉实验设计,18名健康受试者口服受试制剂和参比制剂10 mg,用HPLC-FLU法测定人血浆中的唑吡坦浓度,用非房室模型估算唑吡坦的药动学参数。结果:受试制剂和参比制剂的药动学参数如下:AUC_(0-τ)分别为(564.19±139.11)和(451.58±115.94)μg·h·L^(-1);AUC_(0-∞)分别为(588.49±139.40)和(474.56±119.43)μg·h·L^(-1);C_(max)分别为(155.48±39.43)和(125.11±33.33)μg·L^(-1);t_(max)分别为(0.75±0.27)和(1.14±0.31)h;t_(1/2)分别为(1.76±0.69)和(2.12±0.51)h。受试制剂的相对生物利用度为(126.0±12.0)%。结论:经统计学分析,两种国产唑吡坦片剂不具有生物等效性。

氯沙坦及其代谢物在朝鲜族和汉族健康人体内的药代动力学

目的:研究朝鲜族和汉族健康受试者口服单剂量氯沙坦钾片的药代动力学。方法:健康受试者20名(朝鲜族10名,汉族10名,男女各半),口服单剂量氯沙坦钾片剂50 mg;用HPLC-荧光法测定氯沙坦及其代谢物E-3174血药浓度,采用DAS软件和SPSS软件进行数据处理和统计学分析。结果:单剂量口服50 mg氯沙坦钾片后,朝鲜族受试者的氯沙坦和E-3174的主要药动学参数如下:Cmax分别为(524±349),(493±188)ng.mL-1;tmax分别为(0.9±0.4),(2.4±0.8)h;t1/2(1.5±0.4),(3.1±0.7)h;AUC0-24分别为(682±319),(2563±752)ng.h.mL-1;AUC0-∞分别为(752±331),(2608±766)ng.h.mL-1。汉族受试者的氯沙坦和E-3174的主要药动学参数如下:Cmax分别为(351±168),(242±60)ng.mL-1;tmax分别为(1.4±1.1),(3.6±1.7)h;t1/2分别为(0.8±0.4),(4.7±1.1)h;AUC0-24分别为(498±172),(1853±194)ng.h.mL-1;AUC0-∞分别为(523±184),(1960±182)ng.h.mL-1。结论:氯沙坦钾片在朝鲜族和汉族健康受试者体内药动学参数差异存在统计学意义,在不同性别间药动学参数差异无统计学意义,个体间药动学参数存在较大差异,临床治疗中应实行个体化给药方案。

高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中苯达莫司汀及γ-羟基化苯达莫司汀浓度

目的建立测定人血浆中笨达莫司汀及γ-羟基化苯达莫司汀浓度的高效液相色谱荧光检测法。方法色谱柱为Agilent C_(18)柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相为0.01mol·L^(-1)磷酸二氢钾水溶液-乙腈(68:32,v/v);荧光检测器激发波长328nm,发射波长420nm。结果高、中、低3种浓度的苯达莫司汀(16000、5000、500μg·L^(-1))和γ-羟基化苯达莫司汀(800、250、25μg·L^(-1))平均相对回收率分别为96.5%、100.3%、103 3%和98.7%、100.1%、101.3%;绝对回收率分别为54.1%、54.1%、55.6%和62.3%、64.3%、68.5%;日内、日间差RSD均低于5%(n=5);最低定量限分别为200μg·L^(-1)和10μg·L^(-1);线性范围分别为200～20000μg·L^(-1)和10～1000μg·L^(-1)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速。

血清中脱甘氨酸米多君的液相色谱-荧光检测法测定

建立了血清中脱甘氨酸米多君的反相高效液相色谱 -荧光检测法。血清样品经 C2 小柱固相萃取后 ,采用Diam onsil C1 8分析柱 ,甲醇 - 0 .1%三氟醋酸溶液 (2 8∶ 72 )为流动相 ,荧光激发波长为 2 88nm,发射波长为 32 8nm。以甲氧明为内标。脱甘氨酸米多君在 0 .5～ 32 ng/ ml范围内线性关系良好。方法的检测限为 5 pg,提取回收率大于86 % ,批内、批间精密度为 1.2 %～ 5 .4 %。

HPLC法测定抗感片中芍药苷的含量

目的：建立抗感片中赤芍药材中芍药苷的HPLC测定方法。方法：采用HPLC方法对药材以及制剂所含芍药苷进行含量测定。流动相：甲醇-0．05mol／L磷酸二氢钾溶液（30：70），流速：1．0mL／min，检测波长：230nm．结果：芍药苷对照品进样量在0．3702-0．8638μg内呈线性关系，r=0．999，平均回收率为99．23％，RSD=1．13％（n=5）。结论：该法简便快速，结果准确，重现性好，可作为该制剂的质量控制方法。