高效液相质谱联用法(HPLC-MS)测定灯盏乙素血药浓度及其临床药代动力学研究

目的:研究灯盏花素片在中国人体内的药代动力学。方法:2 0名健康志愿者单剂量口服12 0mg灯盏花素片,用高效液相 质谱联用法测定血浆中灯盏乙素总苷元。结果:本实验建立的血药浓度测定方法,血浆中杂质不干扰样品的测定,线性范围为0 .0 12 6～3.2 4mg·L-1;日内和日间精密度均小于12 .0 %。2 0名健康受试者单剂量口服灯盏花素片(12 0mg)后,主要药代动力学参数:Tmax =7.0±2 .3h、Cmax=0 .9±0 .5mg·L-1、AUC0 -tn =5 .6±1.6mg·h·L-1、AUC0 -∞=5 .8±1.6mg·h·L-1、MRT0 -tn=8.0±1.1h、MRT0 -∞=8.6±1.4h。结论:建立的LC MS法适用于灯盏乙素人体药代动力学研究。灯盏花素片口服药代动力学特点是达峰时间较长,约占受试者总人数4 5 %的药时曲线有双峰现象。

HPLC-MS/MS法同时测定清开灵口服液中7种成分的含量

目的 建立高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法同时测定清开灵口服液中7种成分含量。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×10 mm,1.7μm);以含10 mmol·L^(-1)乙酸铵和0.1%甲酸的水溶液(A)及甲醇(B)为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,正、负离子多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果 腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸质量浓度分别在0.100 4~3.213、0.784 5~8.982、0.998~3.194、0.622 5~19.92、25.05~300.6、2.513~30.15和7.775~93.30μg·m L^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系(r≥0.999 0);平均回收率(n=6)分别为100.9%、98.74%、101.2%、100.2%、100.8%、99.97%和98.94%,RSD分别为1.58%、0.59%、1.78%、1.25%、0.65%、1.69%和1.07%。15批样品中腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸的含量范围分别为0.12~0.18、0.19~0.24、0.06~0.09、0.34~0.37、4.54~4.85、0.49~0.67和1.82~2.19 mg·m L^(-1)。15批样品测定结果较为接近。结论 该方法具有良好的灵敏度、准确性和重复性,可为清开灵口服液的质量控制和后续研究提供参考及数据支持。

HPLC-MS法同时测定大鼠血浆中那格列奈及其主要代谢物M1

目的建立同时测定那格列奈及其主要代谢物M1的HPLC-MS方法。方法血浆样品经过乙酸乙酯萃取,以非那西丁为内标。色谱采用岛津C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm)分离,流动相为0.1%甲酸溶液与乙腈,梯度洗脱,流速0.2 mL/min。质谱采用选择性离子监测(SIM)阳离子模式,检测对象[M+H]^(+)为:那格列奈318.2,代谢物M1334.1,非那西丁180.1。结果标准曲线线性范围为0.0625~8μg/mL那格列奈,M1为0.0313~4μg/mL。日内及日间准确度和精密度变异均<10%,血浆样品稳定性良好,提取回收率均>96%,基质效应<5%。结论本方法稳定性好、灵敏度高、重现性好,可应用于各类生物样本中那格列奈及其代谢物M1的生物等效性与药物代谢动力学研究。

高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定CRRT时血浆哌拉西林/他唑巴坦浓度

目的建立准确、灵敏的高效液相色谱-质谱联用法(high performance liquid chromatography-mass spectrometry,HPLC-MS/MS)测定持续肾脏替代(continuous renal replacement, CRRT)时人血浆中哌拉西林钠/他唑巴坦钠的浓度。方法选用高、低两种剂量给药,采取单制剂双周期序贯试验设计,对12例行CRRT患者完成哌拉西林/他唑巴坦钠静脉滴注之后,使用HPLC-MS/MS方法同时测定哌拉西林及他唑巴坦的浓度。采用Gemini C18(50mm×3.0 mm,3μm)分析柱;流动相为甲醇:乙腈:水:1 mol/L氨水:甲酸(25∶15∶60∶0.1∶0.05),质谱检测采用电喷雾离子源,多反应离子监测(MRM)模式检测。结果血浆中哌拉西林线性范围为1～100 mg/L,他唑巴坦线性范围为0.5～40.0 mg/L,高、中、低3个浓度日内及日间精密度均小于5%。实测12例行CRRT患者,血药浓度与给药剂量呈相关性。结论高效液相色谱-质谱联用法灵敏度高、特异性好,可以运用于脓毒症患者接受CRRT时血浆哌拉西林/他唑巴坦浓度的测定。

HPLC-MS法测定人血浆中替米沙坦及药代动力学研究

目的建立人血浆中替米沙坦浓度的HPLCMS分析方法,用以测定健康受试者口服替米沙坦制剂后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药代动力学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度。方法血浆中加入内标地西泮后,乙酸乙酯提取,HPLCMS分离、分析。色谱系统ShimadzuODS柱(150mm×46mm),流动相甲醇001mol/L醋酸铵溶液(70∶30,v/v),流速10ml/min,柱温30℃。质谱检测方式SIM。结果替米沙坦的线性范围为05～400ng/ml(r=09998),最低检测浓度达01ng/ml,提取回收率大于80%。受试制剂及参比制剂的生物半衰期分别为(197±30)h和(202±36)h,达峰时间分别为(14±04)h和(16±06)h,峰浓度分别为(1739±304)ng/ml和(1782±355)ng/ml。受试制剂的相对生物利用度为(1012±130)%。结论本法适用于替米沙坦的含量测定,统计学结果表明两种制剂具有生物等效性。

HPLC-MS法测定血浆中的帕罗西汀及人体内药动学研究

目的 研究盐酸帕罗西汀的血浆浓度测定方法及其在人体内的药动学。方法 18名健康男性志愿者 ,单剂量口服盐酸帕罗西汀片 ,在设计的时间点取静脉血 ,血药浓度采用液相色谱 质谱 (HPLC MS)法测定。药动学参数采用 3P97程序计算。结果 单次服用 4 0mg盐酸帕罗西汀片后的主要药动学参数Ka ,AUC0～ 96,AUC0～∞ ,cmax,tmax,CL分别为 ( 0 .89± 0 .2 8)h-1,( 5 76 .2± 2 36 .0 )ng·h·mL-1,( 5 96 .8± 2 34.5 )ng·h·mL-1,( 2 6 .3± 9.6 )ng·mL-1,( 3.89± 2 .1)h ,( 0 .0 9± 0 .0 5 )L·h-1。结论 盐酸帕罗西汀片在中国人体内口服吸收缓慢 ,约 4h达到血药浓度峰值 ,平均消除半衰期为 19～ 2

HPLC-MS法测定犬血浆中环维黄杨星D浓度及其药代动力学研究

目的 :建立用于测定环维黄杨星D血药浓度的液相色谱 质谱联用分析方法 ,并探讨环维黄杨星D在犬体内的药代动力学。方法 :犬 5只ig环维黄杨星D 10mg·kg-1后采集一系列血样 ,利用HPLC MS(TOF)法 ,测定血浆药物浓度 ,并用 3p97软件拟合求算药代动力学参数。结果 :环维黄杨星D浓度在 0 5～ 2 0 0ng·ml-1线性关系良好 (r=0 9999)。提取回收率高于 80 % ,日内、日间RSD均小于 15 % ,符合生物样品分析要求。 5只犬ig环维黄杨星D 10mg·kg-1后的血药浓度 时间曲线呈二室模型 ,其吸收相、分布相和末端消除相的半衰期 (t1/ 2Ka、t1/ 2α和t1/ 2 β)分别为 1 72 ,2 82 ,14 90h ,曲线下面积 (AUC)为 1372 5± 2 19 4ng·h·ml-1。结论 :建立的HPLC MS联用方法专属性强 ,灵敏度高 ,可用于环维黄杨星D的体内定量分析。

HPLC-MS/MS法测定人血浆中甲氧氯普胺的浓度

目的建立测定人血浆中甲氧氯普胺浓度的LC-MS／MS方法。方法采用Alltech Alltima C18色谱柱（2．1mm×50mm，3μm），以5mmol·L^-1乙酸铵-乙腈-甲醇（体积比为50：40：10）为流动相，流速为0．2mL·min^-1，血浆样品在碱性条件下液-液萃取，通过电喷雾离子化四极杆串联质谱，以多离子反应监测（MRM）方式进行检测。用于定量分析的离子对分别为m／z 300．20→m／z227．00（甲氧氯普胺）和m/z152．20→m／z 134．00（内标，苯丙醇胺）。结果甲氧氯普胺线性范围为0．5～200．0μg·L^-1，最低定量限为0．5μg·L^-1，平均回收率为（71．38±6．35）％，日内和日间精密度均小于15％。结论该法适用于临床药物浓度监测和药物动力学的研究。

HPLC-MS法研究氯雷他定片人体相对生物利用度及药代动力学

目的:建立准确高灵敏的HPIC-MS法测定氯雷他定在血浆中的浓度,以研究氯雷他定片在健康华人志愿受试者中的药代动力学和相对生物利用度。方法:对20例健康华人男性志愿受试者进行二交叉试验,随机单剂量口服氯雷他定(20 mg)试验或参比片后,按设定时间采集肘静脉血;分取血浆1.0 mL,经0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液0.1 mL碱化和5 mL乙酸乙酯萃取处理;采用Zorbax-Ext-ODS柱,甲醇-乙腈-2.0%醋酸溶液(62:10:28)流动相,HPLC-MS内标(地西泮,[MH]+,m/z=285)法选择性正离子检测法测定氯雷他定([MH]+,m/z=383)血浆浓度。结果:HPLC-MS法测定血浆中氯雷他定的最低检测限为0.1 ng·mL-1,在0.2-20 ng·mL-1范围内线性关系良好;萃取绝对回收率为79.3%-84.0%;血药浓度测定日内、日间RSD均小于:15%。测得口服氯雷他定(20 mg)试验和参比片后的主要药代动力学参数Cmax(ng·mL-1)分别为8.3±3.7和6.8±5.4;Tmax(h)分别为1.3±0.6和1.3士0.4;tl/2(h)分别为4.6±1.4和5.1±1.4;AUCO→∞(ng·h·mL-1)分别为28.4±21.2和25.6±16.2,相对生物利用度F为(112.9±24.7)%。结论:建立的HPLC-MS方法灵敏、准确,测定结果可靠;统计分析表明氯雷他定试验和参比片生物等效。

HPLC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平浓度的不确定度评定

目的:评定HPLC-MS/MS测定人血浆中卡马西平(CBZ)浓度的不确定度。方法:分析HPLC-MS/MS法测定人血浆中CBZ浓度的不确定度来源,计算并进行合成和扩展。结果:人血浆中低浓度(7.46 ng·ml^(-1))和高浓度(745 ng·ml^(-1))CBZ的扩展不确定度分别为0.410 ng·ml^(-1)和33.400 ng·ml^(-1)(P=95%,k=2)。结论:HPLC-MS/MS法测定人血浆中CBZ浓度的不确定度在低浓度时主要由回收率、生物样品配制和基质效应引入,在高浓度时主要由生物样品配制和重复性引入。

HPLC-MS-MS法定量测定人血浆中多潘立酮的浓度

目的:建立HPLC-MS-MS方法定量测定人血浆中多潘立酮浓度。方法:以地西泮为内标,采用甲醇:0.5%乙酸=80:20为流动相,以Inerstil C18(2.1mm×100mm,3.0μm)色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行检测。多潘立酮和地西泮用于定量分析的离子对分别为[M+H]+m/z426.2→m/z175.2和[M+H]+m/z285.0→m/z193.0。结果:多潘立酮线性范围为1～80μg·L-1,定量下限为1μg·L-1(n=6)。日内、日间的RSD均<15%,平均回收率>75%。结论:本方法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于多潘立酮临床药动学研究。

HPLC-MS/MS法测定人血浆中的甲氨蝶呤浓度

目的建立人血浆中甲氨蝶呤（MTX）浓度测定的液质联用方法,并应用于临床MTX浓度监测。方法血清用甲醇沉淀蛋白,内标选择噻氯匹定（IS）,色谱柱为Kromasil C8（50 mm×2.1 mm,5μm）,流速0.6 m L·min-1,流动相为含0.1%甲酸的甲醇和水,梯度洗脱,柱温40℃。质谱在ESI正离子模式下使用MRM扫描方式,MTX和IS的离子对分别为：m/z 455.2〉308.2和m/z 264.1〉154.0。结果 MTX浓度在0.01~1μmol·L-1内线性良好,日内和日间的精密度和准确度均在±15%内。MTX在低、中和高浓度的回收率为92.2%~100.5%,10倍和100倍稀释不影响测定结果并且在所有测定的条件下均稳定。结论本研究建立的液质联用测定MTX血浆浓度的方法快速、简便、准确、稳定,适用于MTX的临床药物浓度监测和药动学研究。

HPLC-MS/MS法测定人脑脊液中替加环素浓度的不确定度评定

目的评定液质联用法(HPLC-MS/MS)测定人脑脊液中替加环素(TGC)浓度的不确定度。方法分析HPLC-MS/MS法测定人脑脊液中TGC浓度的整个过程,对测量重复性、称量、生物样品配制、工作液配制、回收率、仪器允差和标准曲线拟和等引起的不确定度分别进行评定,最后计算合成不确定度并进行扩展。结果人脑脊液中低(0.733μg?m L-1)、中(7.579μg?m L-1)和高(75.330μg?m L-1)浓度TGC的扩展不确定度分别为0.0504μg?m L-1、0.332μg?m L-1和3.721μg?m L-1(P=95%,k=2)。结论 HPLC-MS/MS法测定人脑脊液中TGC浓度的不确定度在低浓度时主要由回收率、生物样品配制和重复性引入,在中、高浓度时主要由生物样品配制和回收率引入。

HPLC-MS/MS法测定人血浆伪人参皂苷GQ浓度的不确定度评定

目的评估高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定人血浆伪人参皂苷GQ(PGQ)浓度的不确定度。方法全面分析HPLC-MS/MS法测定人血浆中PGQ浓度的整个过程,对测量重复性、标准品称量、工作液配制、生物样品配制、萃取回收过程、仪器允差和标准曲线拟和等引起的不确定度分别进行评定,计算合成不确定度并进行扩展。结果人血浆低浓度(15.16 ng·m L^(-1))、中浓度(2 516.67 ng·m L^(-1))和高浓度(3 902.00 ng·m L^(-1))PGQ的扩展不确定度分别为1.39,177.74和262.69 ng·m L^(-1)(P=95%,k=2)。结论 HPLC-MS/MS法测定人血浆中PGQ浓度的不确定度在低浓度时主要由萃取回收率、生物样品配制和测量重复性引入,在中浓度和高浓度时主要由生物样品配制和萃取回收率引入。

响应曲面法在类固醇雌激素HPLC-MS-MS定量分析中的应用

雌酮(E1)、17β雌二醇(E2)和17α乙炔基雌二醇(EE2)是雌情活力最强的3种类固醇雌激素。通过响应曲面法(RSM)优化了3种雌激素在高效液相色谱串联质谱联用(HPLC-MS-MS)检测方法中的多离子监测反应(MRM)条件,获得E1、E2和EE2的最优碎片电压分别为205.0、196.0和182.0V,最优碰撞能分别为43.0、51.0和54.0V。配合固相萃取(SPE)预处理技术,采用HPLC-MS-MS内标检测方法检测了重庆主城区嘉陵江水样中E1、E2和EE2的浓度。3者在该方法中的定量检测限分别为0.5、0.4和0.1ng/L。

大豆及其制品中12种大豆异黄酮的HPLC及HPLC-MS法测定研究

目的:建立简便、灵敏、准确的测定大豆及其制品中12种大豆异黄酮的高效液相色谱及液-质联用检测方法,并用于大豆及其制品中大豆异黄酮的检测。方法:大豆及其制品经乙腈/水室温下超声辅助提取后,采用HypersilAA-ODS柱(200mm×2.1mm×5μm),以含0.05%三氟醋酸的乙腈/水梯度洗脱,DAD260nm检测,质谱辅助定性,内标法定量。结果:各组分峰面积和内标峰面积的比值与其相应浓度均呈良好的线性关系,r>0.9990。以豆奶粉为基质,各种大豆异黄酮的加标平均回收率均大于90%,RSD在0.35%～14.5%之间。结论:该法操作简便、快速、结果准确、可靠,适用于实际样品的测定。

FPIA法和HPLC-MS/MS法测定甲氨蝶呤血药浓度的相关性研究

目的评价荧光偏振免疫分析法（FPIA）和液质联用法（HPLC-MS/MS）测定人血浆中甲氨蝶呤（MTX）浓度的相关性。方法分别用FPIA法和HPLC-MS/MS法测定人血浆中MTX的浓度,并比较两者的相关性。结果当MTX浓度在0.05-1μmol·L^-1时,Wilcoxon检验结果表明FPIA法和HPLC-MS/MS法的测定结果差异有统计学意义,回归方程为：CFPIA=1.0923·CHPLC-MS/MS＋0.001 084,r=0.975。当MTX浓度在1-100μmol·L^-1时,配对t检验结果表明FPIA法和HPLC-MS/MS法的测定结果差异无统计学意义,回归方程为：CFPIA=0.9811·CHPLC-MS/MS-0.4405,r=0.939。结论 FPIA法和HPLC-MS/MS法是否存在显著性差异取决于MTX浓度,MTX浓度可通过公式换算后供临床医师参考。

HPLC-MS/MS联用技术定量测定人血浆中氢可酮

建立HPLC-MS/MS方法定量测定人血浆中氢可酮浓度。以地西泮为内标,采用甲醇-0.05%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,以Agilent-C18（2.1×50 mm×3.5μm）色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源（ESI）,以正离子多反应监测（MRM）方式进行检测。用于定量分析的离子对分别为m/z300.2→199.1（氢可酮）和m/z285.0→193.0（地西泮,内标）。氢可酮线性范围为0.5~50μg/L,定量下限为0.5μg/L（n=6）,日内、日间精密度的RSD均小于15%,平均回收率大于75%。本方法专属性强、样品处理简便、灵敏度高,适用于氢可酮临床药动学研究。

HPLC-MS法研究碘化N-正丁基氟哌啶醇在兔体内的药代动力学

目的 :研究碘化N 正丁基氟哌啶醇 (F2 )在兔体内的药代动力学过程。方法 :6只新西兰兔耳缘静脉注射碘化N 正丁基氟哌啶醇 (F2 ) 2 .0mg·kg-1后采集血样 ,用高效液相色谱 质谱 (HPLC MS)联用技术测定血浆药物浓度 ,并用 3p97软件拟合计算药代动力学参数。结果和结论 :兔耳缘静脉给药后的血药浓度 时间曲线符合二室开放模型 ,其主要药动学参数为 :分布半衰期T1 2α 是 0 .10h ,消除半衰期Τ1 2 β 是 6 .4h ,曲线下面积AUC为 183μg·h-1·L-1,中央室分布容积VC 为 4L ,清除率Cl为12 .9L·h-1。HPLC MS联用方法测定F2 血药浓度 ,灵敏度高 ,专属性强。

HPLC-MS/MS法测定人血浆中替加环素浓度的不确定度评定

目的:评定高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中替加环素(TGC)浓度的不确定度。方法:分析HPLC-MS/MS法测定人血浆中TGC浓度的整个过程,分别评定测量重复性、称量、工作液配制、生物样品配制、回收率、仪器允差和标准曲线拟和引起的不确定度大小,最后计算合成不确定度并进行扩展。结果:人血浆中替加环素低、中、高浓度的测定值和不确定度可分别表示为:(48.737±4.587),(396.067±19.096)和(1 489.000±103.563)ng·ml-1,(P=95%,k=2)。结论:HPLC-MS/MS法测定人血浆中TGC浓度的不确定度主要来源在低浓度时曲线拟合和高浓度时回收率。