基于HPLC-Q-Exactive-MS/MS和GC-MS联用技术的蒙药通拉嘎-5化学成分研究

目的:系统分析蒙药通拉嘎-5化学成分,明确其化学物质组成。方法:采用HPLC-Q-Exactive-MS/MS和GC-MS联用技术对通拉嘎-5固有成分进行分析。结果:通过二级质谱结合CD软件和文献检索,共鉴定出105个化学成份,包括27个生物碱类,26个黄酮类,15个挥发油类,11个酚酸类,5个瑞诺烷类二萜类,5个有机酸类,3个多酚类,3个鞣质类,3个香豆素类和7个其他类。通过GC-MS法结合NIST数据库,共鉴定57个化合物,包括30个萜类、14个烃类、6个醛类、2个脂肪醇类、2个羧酸酯类、1个酮类、1个生物碱类和1个甾醇。结论:建立的HPLC-Q-Exactive-MS/MS和GC-MS分析方法可对通拉嘎-5中化学成分进行快速识别和鉴定,可为系统阐明药效物质基础和质量控制提供实验参考。

HPLC-Q-Exactive-MS/MS快速分析蒙药材悬钩子木中的化学成分

目的采用高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Exactive-MS/MS)法快速分析蒙药材悬钩子木化学成分。方法采用CAPCELL PAK MGII C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^(-1),进样体积20μL,柱温30℃,热电喷雾(HESI)质谱离子源,在负离子模式下采集数据。结果依据精确质量数和Chem Spider、Pub Chem数据库确定化合物分子式及结构式,通过比较对照品及文献报道的保留时间、一级质谱以及二级碎片离子,结合此类化合物的裂解规律,从悬钩子木中共鉴定出71个化学成分,包括30个有机酸类、22个黄酮类、7个三萜皂苷类、5个香豆素类、1个木质素类、1个没食子鞣质和2个芳香族化合物。结论该方法可快捷、准确地鉴定悬钩子木中复杂化学成分,为悬钩子木的药效物质基础研究提供科学依据。

HPLC-Q-Exactive-MS/MS快速鉴定蒙药三子散化学成分

目的采用HPLC-Q-Exactive-MS/MS对三子散复方中化学成分进行快速定性分析。方法SHIMADZU GIST C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以0.1%甲酸水-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL·min^(–1),柱温30℃,正、负离子模式下扫描三子散的一级、二级质谱信息。以总离子流图分析的分子离子峰和碎片离子的质谱信息、分子式、保留时间,结合Chemspider数据库及参考文献查找的分子式和结构式,对三子散中各成分进行定性归属。结果通过分析各类成分的质谱裂解规律和文献信息,初步推测出95个可能的化学成分,包括39个酚酸类成分、20个鞣质成分、9个有机酸酯类成分、5个单萜类成分、12个环烯醚萜类成分、8个三萜类成分和2个黄酮类成分。其中,57个来自诃子,30个来自栀子,10个来自川楝子,其中芦丁同时来源于诃子、栀子和川楝子。结论HPLC-Q-Exactive-MS/MS检测方法分离度好、灵敏度高,可快速、高效地推测出三子散中各类成分,为鉴定三子散中的化学成分建立了一种快速、高效的分析方法。

基于HPLC-Q-Exactive-MS/MS整合网络药理学研究加味塔布森-2有效成分及其抗骨质疏松机制

目的鉴定加味塔布森-2入血成分,并结合网络药理学阐述其治疗骨质疏松的作用机制。方法采用HPLC-Q-Exactive-MS/MS对加味塔布森-2入血成分进行鉴定;在此基础上结合SwissTarget Prediction与SuperPred数据库进行入血成分的靶点预测,同时在DisGeNET数据库中搜索骨质疏松相关的疾病靶点,利用Cytoscape软件构建“入血成分-靶点-疾病”网络模型,运用String数据分析平台进行蛋白互作网络分析,并且利用David数据库对核心靶点进行GO富集分析和KEGG通路分析,最后使用分子对接对网络药理学内容进行初步验证。结果最终确定入血成分21个,通过网络药理分析得到加味塔布森-2抗骨质疏松的核心靶点11个。对11个核心靶点进行GO功能注释和KEGG通路分析后,发现加味塔布森-2抗骨质疏松的信号通路主要包括HIF-1、雌激素、MAPK、甲状腺素、TNF、mTOR、PI3K/AKT等。结论该方法初步明确了加味塔布森-2的入血成分及潜在作用机制,为加味塔布森-2药理作用机制的进一步研究提供科学依据。

基于HPLC-Q-Exactive-MS法的蒙药蓝盆花血清图谱研究

目的:采用四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(HPLC-Q-Exactive-MS)技术建立蒙药蓝盆花含药血清色谱图并分析其入血成分。方法:采用ACE EXCEL 3 C18-PFP(100 mm×3 mm,3μm)色谱柱;以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;柱温为45℃;流速为0.5 mL/min;热电喷雾(HESI)质谱离子源,负离子全扫描模式下采集数据,建立15批蓝盆花含药血清和空白血清色谱图;采用SIMCA-P+14.0软件进行模式识别及多维统计分析。结果:建立了蒙药蓝盆花血清图谱,共确定17个成分,聚类分析结果表明15批蓝盆花样品分为3类,与主成分分析结果一致;正交偏最小二乘判别分析法筛选出绿原酸、新绿原酸及芹菜素3种差异较大药源性成分。结论:本研究首次采用HPLC-Q-Exactive-MS技术建立蒙药蓝盆花血清图谱,该方法可较全面地反映蓝盆花口服给药后吸收入血情况,为其体内药效物质研究及质量控制奠定基础。

协日嘎-4味散成分组成分析及6种成分含量测定

目的分析协日嘎-4味散成分组成,并测定黄柏碱、绿原酸、栀子苷、小檗碱、芦丁、姜黄素的含量。方法高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Exactive-MS)定性分析采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.35 mL/min;柱温35℃;电喷雾离子源;正负离子扫描。高效液相色谱串联三重四级杆质谱(HPLC-MS/MS)定量分析采用Shim-pack GIST-HP C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,3μm);流动相甲醇-0.1%甲酸;体积流量0.25 mL/min;柱温35℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;多反应监测模式。结果共鉴定出65种成分,包括19种生物碱、13种有机酸、13种黄酮、7种姜黄素、6种环烯醚萜、4种脂肪酸、2种醛、1种氨基酸。6种成分在各自范围线性关系良好(r≥0.9991),平均加样回收率96.44%~102.37%,RSD 2.05%~3.74%。结论本研究可为协日嘎-4味散的质量控制提供参考。

蒙药方剂朱日亨滴丸化学成分鉴定及归属研究

目的采用高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC Q-Exactive MS/MS)对朱日亨滴丸及其中间体中的化学成分进行快速鉴定和归属。方法选用ACE EXCEL3 C18-PFP色谱柱(3μm,100 mm×3 mm),流动相为含0.2%甲酸的甲醇(A)-0.2%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温35℃。正、负离子模式采集数据,质谱扫描范围为100~1000 m/z。通过文献检索、中药材网站收集朱日亨滴丸原药材中的化学成分,自建化学成分数据库。根据精确相对分子质量、二级质谱裂解碎片、对照品及文献比对,对朱日亨滴丸的化学成分进行鉴定。结果共识别和鉴定了朱日亨滴丸中130个成分。结论建立的HPLC Q-Exactive MS/MS方法快速、准确,其适用于朱日亨滴丸定性鉴别,为该药的质量体系建立和药效物质发现奠定了基础。

蒙药材悬钩子木特征图谱研究及6种成分含量测定

目的 建立11批不同产地悬钩子木特征图谱,并测定6种主要成分含量。方法 采用CAPCELL PAK MGII C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm;建立不同产地的悬钩子木特征图谱,通过HPLC-Q-Exactive-MS/MS进行共有峰的指认,进行相似度评价,并测定6种主要成分的含量。结果 悬钩子木特征图谱共标定24个共有峰,指认了其中18个峰。S1~S8批次悬钩子木指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均>0.900,其余3批产地较远,相似度差异较大。经方法学考察,6种成分在一定浓度范围内呈良好的线性关系;精密度、稳定性、重复性均符合要求;平均加样回收率为97.72%~98.94%。其中特征性成分鞣花酸含量较大,且产地分布均匀,可作为质量控制指标性成分。结论 本研究建立的悬钩子木HPLC特征图谱、定量测定分析方法和HPLC-Q-Exactive-MS/MS定性鉴定方法简便、准确、可靠,可为悬钩子木的质量控制提供参考。