HPLC-UV-MS法同时测定菟丝子中5种成分的含量

目的：建立高效液相色谱-质谱法同时测定菟丝子药材中5种成分的含量。方法：采用Agilent ZorbaxSB-C18（2.1 mm×100 mm,3.5μm）色谱柱;流动相：0.05%甲酸水溶液-乙睛,梯度洗脱;检测波长：360 nm;流速：0.4 mL/min;柱温：45℃。Finnigan电喷雾离子阱多级质谱仪;负离子检测模式;ESI喷雾电压：4.5 kV;鞘气（N2）流速：60 a.u.;辅助气（N2）流速：20 a.u.;毛细管温度：300℃;毛细管电压：-19 V,扫描范围m/z：90-800。结果：色谱峰分离情况良好,菟丝子中5种化学成分在各自的浓度范围内均具有良好的线性关系;加样回收率为96.06%-101.61%,RSD为0.67%-2.90%。结论：所建方法简便、准确,重现性好,可用于菟丝子药材的质量评价。

HPLC-UV-MS法同时测定痹祺胶囊中7个有效成分

目的建立高效液相色谱-紫外-串联质谱法同时测定痹祺胶囊(马钱子、川芎、甘草、丹参、白术、三七、党参等)中7个有效成分的方法。方法采用HPLC法,Zorbax-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;进样5μL;DAD波长切换模式;柱温40℃。Finnigan电喷雾离子阱多级质谱仪,正/负离子检测模式;ESI喷雾电压±4.5 kV;鞘气(N2)压力为276 kPa;辅助气(N2)体积流量为3.3 L/min;毛细管温度350℃;毛细管电压±19 V;扫描范围m/z 100～850 amu。结果士的宁、马钱子碱、甘草苷、丹酚酸B、甘草酸、隐丹参酮和丹参酮IIA在相应的质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999 6;平均加样回收率(n=6)在90.25%～99.11%之间,RSD均小于2.91%。结论本方法简便快捷、精密度高、重复性好,适用于痹祺胶囊的质量控制。

清开灵注射液HPLC/UV/MS/MS指纹图谱研究

目的:建立一种HPLC/UV/MS/MS清开灵注射液(板蓝根,栀子,金银花等)指纹图谱研究方法,为其质量控制提供新思路。方法:采用Phenom enex Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相分别为0.1%甲酸水溶液和乙腈梯度洗脱,流速0.5 mL/m in;采用电喷雾离子阱质谱(ESI-ITMS)分析,正、负离子二级扫描。结果:得到分离度和重现性良好的HPLC/UV/MS/MS指纹图谱,对其指纹图上13个色谱峰进行了初步定性,成功鉴别了新绿原酸、绿原酸和异绿原酸3个异构体。结论:本方法建立了清开灵注射液HPLC/UV/MS/MS指纹图谱,为中药复杂体系的分析及其质量控制提供了一种有效、可靠的模式。

毒性中药狼毒质量标准研究

目的：建立毒性中药狼毒的质量标准。方法：采用硅微、化学、液相色谱／质谱等方法进行定性鉴别，以液相色谱及液相／质谱法测定含量。结果：狼毒大戟中月腺大戟乙素含量为0．01％w／w，月腺大戟中月腺大戟乙素含量范围为0．01％-0．02％w／w，均末枪出瑞香内酯、狼毒色原酮和新狼毒素A。瑞香狼毒中瑞香内酯、狼毒色原酮及新狼毒素A等成分含量范围分别为0．57％～2．12％w／w、0．86％-1．6％w／w及0．45％-0．96％w／w，但未检出含月腺大戟乙素成分。结论：各法能用于常规榆测狼毒属植物。

高效液相色谱联用质谱法对睡莲花中4种成分的鉴定和含量测定

目的建立睡莲花中4种成分(没食子酸、没食子酸甲酯、烟花苷、槲皮素)的高效液相色谱联用质谱(HPLC-UV-MS/MS)鉴定和含量测定方法。方法采用Agilent C_(18)反相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分析,以流动相A为0.2%的冰乙酸水溶液,流动相B为甲醇进行梯度洗脱,检测波长为270 nm,柱温为30℃,流速为1 mL·min^(-1);质谱条件:电喷雾负离子扫描模式(ESI-)。结果通过睡莲花中4种成分的一级和二级质谱与对照品对比,鉴定药材中的目标化合物,4个化合物在浓度范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9990),平均加样回收率为98.87%~103.25%。结论本法能准确、可靠的对睡莲花中4种化学成分进行鉴定和含量测定,可用于睡莲花的质量控制,为其药效物质基础研究提供科学依据。

黑果枸杞中花色苷的提取与结构鉴定

采用紫外-可见光谱法并结合高效液相色谱-电喷雾串联质谱对黑果枸杞中花色苷的组成及结构进行了鉴定。结果显示:(1)黑果枸杞花色苷在0.1%盐酸-甲醇溶液中呈紫红色表明花色苷中的主要成分可能是飞燕草色素、牵牛花色素、锦葵色素及其衍生物中的一种或几种;向提取溶液中加入5%Al Cl3甲醇溶液后无红移现象表明花色苷结构B环上无邻位酚羟基;A440nm/Aλmax比值小于20%表明该色素是3,5位均带有糖苷键的双取代花色苷;在304 nm处有一最大吸收峰表明该色素分子内含有酰基;色素水解后主要生成葡萄糖。由上述可初步推测出黑果枸杞色素中主要为酰基化的锦葵色素-3,5-二葡萄糖苷;(2)经紫外分光光度法、质谱和文献报道综合分析鉴定出黑果枸杞中含有8种花色苷,分别是:飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、芍药素-3-O-葡萄糖苷、矮牵牛素-5-O-葡萄糖苷、矮牵牛素-3-O-(6-O-对香豆酰)芸香糖苷-5-O-葡萄糖苷、锦葵色素-3-O-(6-O-对香豆酰-3-O-乙酰)-5-O-二葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-(6-O-乙酰)葡萄糖苷、锦葵色素-3-O-(6-O-对香豆酰)葡萄糖苷和锦葵色素-3,5-二葡萄糖苷,其含量依次为0.86%、1.17%、2.38%、11.79%、68.35%、0.63%、5.24%、9.58%。花色苷是黑果枸杞中重要的组成成分,该试验可为黑果枸杞的质量控制提供依据。

肉制品中硝基呋喃类药物残留的研究进展

硝基呋喃类药物是一类广谱性抗生素,在食用性动物疾病的预防与控制中具有广泛的应用。由于其可能具有基因诱变性,目前很多国家和地区已禁止使用这类药物,并规定在动物源性食品中硝基呋喃类残留物的检出限为不得检出。近年来,肉制品中硝基呋喃类药物及其代谢物残留的检测技术也得到迅速发展。本文综述硝基呋喃药物及其代谢物的特性和检测技术的研究进展。

米糠油中γ-谷维素分析检测技术研究现状

γ- 谷维素是一种重要营养物质，尤其在米糠油中，其含量占1％～2％，是一种天然抗氧化剂。由于组成复杂，至今未能逐一检测出其所合成分。对目前国内外常用分析检测米糠油中γ- 谷维素的方法进行了分析比较，紫外分光光度法用于粗略测定γ- 谷维素含量，高效液相色谱法作为先进手段测定结果较为准确，液质联用、气质联用技术能精确分离检测γ- 谷维素所含阿魏酸酯成分，有助于γ- 谷维素生理活性的进一步研究。

异佛司可林在人肝微粒体与人工胃肠液中的代谢与降解

目的研究异佛司可林在人肝微粒体及人工胃肠液中的代谢与降解动力学。方法将异佛司可林与人肝微粒体、人工胃液、人工肠液进行体外共孵育,采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人肝微粒体孵育体系中异佛司可林的剩余浓度,高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)法测定人工胃液、人工肠液中异佛司可林的剩余浓度。结果异佛司可林在人肝微粒体的t1/2为(34.90±3.42)min,CLint为(16.71±1.64)m L/(kg·min);在人工胃液和人工肠液中的t1/2分别为(46.97±6.46)h和(91.67±8.26)h。结论异佛司可林在人肝微粒体中代谢显著,在人工胃液和肠液中较稳定。

凝固漂浮有机液滴-分散液液微萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定海水中苯并三唑类紫外线过滤剂

建立了海水中7种苯并三唑类紫外线过滤剂的凝固漂浮有机液滴-分散液液微萃取-高效液相色谱-串联质谱分析方法。优化后的萃取实验条件：20μL十二醇为萃取溶剂,400μL甲醇为分散溶剂,NaCl质量分数为8%,pH小于6,涡旋振荡时间2 min。目标化合物经Hypersil GOLD色谱柱（150 mm×2.1 mm,5μm）结合甲醇-水梯度洗脱分离后,用正离子多反应监测模式进行质谱分析。在较宽的线性范围内,7种化合物的线性相关系数（r2）均大于0.99;基质加标回收率为68.3%-127.5%,相对标准偏差为0.9%-15.2%,方法的检出限为0.001-0.090μg/L,定量限为0.003-0.300μg/L。将建立的方法用于大连8个海滨浴场海水中苯并三唑类紫外线过滤剂的测定,部分浴场海水有不同程度的检出。该方法简便、快速、环境友好、灵敏度高,可用于海水中苯并三唑类紫外线过滤剂的分析检测。

国产氨酚羟考酮胶囊人体生物等效性研究

目的:评价国产与进口两种氨酚羟考酮胶囊的生物等效性。方法:24名健康男性志愿者随机交叉单剂量口服2种氨酚羟考酮胶囊,采用高效液相色谱-紫外法和高效液相-质谱-质谱法分别测定血浆中对乙酰氨基酚和盐酸羟考酮的浓度。结果:受试制剂与参比制剂中对乙酰氨基酚的tmax分别为(0.75±0.48)和(0.64±0.43)h,Cmax分别为(13.45±6.13)和(13.72±5.24)mg.L-1,t1/2分别为(1.92±0.51)和(2.24±0.72)h;AUC0-tn分别为(39.55±8.34)和(39.65±8.58)mg.L-1.h,AUC0-∞分别为(42.30±8.85)和(42.95±10.11)mg.L-1.h,受试制剂的相对生物利用度为(101.56±19.43)%;而盐酸羟考酮的tmax分别为(0.86±0.34)和(0.90±0.42)h;Cmax分别为(25.81±9.54)和(22.53±7.32)μg.L-1;t1/2分别为(4.51±0.87)和(4.52±0.73)h;AUC0-tn分别为(129.67±37.27)和(116.78±41.35)μg.L-1.h,AUC0-∞分别为(134.07±38.69)和(121.61±42.13)μg.L-1.h;受试制剂的相对生物利用度为(116.18±25.90)%。结论:两制剂具有生物等效性。

阿维菌素类药物残留检测方法研究进展

阿维菌素被誉为当今最有前途的抗虫抗生素,是迄今为止活性最高的生物源杀虫剂。阿维菌素类药物对人体存在毒害作用。因此,发展检出限低、操作简单、成本低廉的新型残留检测方法实现阿维菌素类药物的快速精确灵敏检测是目前药物残留检测主要研究方向。本文综述了阿维菌素残留检测方法,汇总了被测组分、所测样品、流动相、检出限、变异系数等参数,分析了液相色谱紫外检测法、液相色谱荧光检测法及高效液相色谱-串联质谱法的优点与不足,总结不同检测方法的适用范围。结果表明,HPLC-UV适用检测浓度较高的单一组分,蔬菜样品常作为分析对象;而HPLC-FLD与HPLC-MS/MS则更适用于检出浓度较低的多组分,适合动物肉类、内脏及其奶制品等样品分析,HPLC-MS/MS适合检测检出限要求非常严格的组分。

远志-石菖蒲药对配伍前后远志化学成分定性定量分析

研究药对远志-石菖蒲配伍对远志药材化学成分的影响。采用HPLC-Q-TOF-MS/MS法对远志-石菖蒲配伍前后远志化学成分进行定性,并用HPLC-UV法进行定量分析。采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱;质谱使用电喷雾离子源,在正离子模式下扫描;通过对照品对照、质谱数据和对比文献对远志化学成分的各色谱峰进行归属,并比较远志-石菖蒲配伍前后远志各化学成分的含量变化。从远志中鉴定出8个化学成分:3,4,5-三甲氧基肉桂酸、对甲氧基肉桂酸、细叶远志皂苷、西伯利亚远志糖A5、远志酮Ⅲ、细叶远志苷B、3,6'-二芥子酰基蔗糖和细叶远志苷A;经石菖蒲配伍后,远志的8个化学成分含量无明显变化。远志-石菖蒲配伍后的化学成分定性定量研究可为该药对的体内配伍作用探索提供方法依据。

猪毛蒿不同炮制方法炮制前后化学成分变化

[目的]研究猪毛蒿不同炮制方法炮制前后水提取物、醇提取物含量、挥发性成分以及绿原酸含量差异,为寻找猪毛蒿炮制方法奠定基础.[方法]以重量法测定水提取物、醇提取物含量,GC-MS/MS测定挥发性成分,HPLC-UV测定绿原酸含量.[结果]与生品相比,晒干品的水、醇提取物含量均显著下降;烘干品水提取物含量下降,而醇提取物含量提高;阴干品无显著差异.GC-MS/MS分析不同炮制品中挥发性成分,从生品、阴干、晒干、烘干品中分别检出25、21、27、24个色谱峰,共有的组分有13个,且猪毛蒿炮制前后既有含量的改变,也有不同结构的成分出现,晒干与生品差距最大;HPLC-UV方法测定了绿原酸含量,发现炮制后均显著下降,含量从大到小依次为生品、阴干、晒干、烘干.[结论]猪毛蒿在加工过程中应尽量采用阴干方法,以防止有效成分损失.

胆固醇基磷酰齐多夫定在大鼠体内的药代动力学研究

目的建立测定大鼠血浆及组织中胆固醇基磷酰齐多夫定(CPZ)及其代谢物齐多夫定(AZT)含量的方法,并应用于CPZ在大鼠体内的药代动力学研究。方法 CPZ的测定采用HPLC-UV法,生物样品用乙腈沉淀蛋白后,经Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,以甲醇-异丙醇(90∶10,V/V,含有2 mmol/L十六烷基二甲基溴化铵、2%乙酸、0.1%氨水)为流动相,1.0 ml/min流速等度洗脱,紫外检测波长为266 nm。AZT的测定采用LC-MS/MS法,血浆及组织样品用叔丁基甲醚提取后,经Poroshell 120 EC-C18柱(50 mm×2.1 mm,2.7μm)分离,以甲醇-0.2%乙酸水(35∶65,V/V)为流动相等度洗脱;用ESI源在多反应监测方式下进行正离子检测,用于定量分析的离子反应为m/z 268.2→m/z 127.0(AZT)和m/z 152.1→m/z 110.0(对乙酰氨基酚,内标)。结果 CPZ和AZT在大鼠生物样品中浓度测定方法的线性范围分别为5~400μg/ml和2~500 ng/ml,批内、批间精密度(RSD)均<15%,准确度在±13.8%之间。CPZ在大鼠体内消除较快,AZT消除较慢,半衰期约为8 h。CPZ和AZT在大鼠的肝、脾、肺中分布较多,在心、肾中分布较少。结论方法适用于CPZ自组装体在大鼠体内的药代动力学研究。药动学结果显示,CPZ能靶向控释AZT到大鼠的肝、脾和肺中。

鱼类鲜度K值的HPLC-UV-MS/MS快速测定方法研究

建立了高效液相色谱-紫外-三重四极杆串联质谱快速测定鱼类鲜度K值[三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、腺苷酸(AMP)、肌苷酸(IMP)、肌苷(HxR)和次黄嘌呤(Hx)]的分析方法。研究了不同贮藏温度对K值的影响规律。样品经高氯酸溶液均质-超声提取后,调节pH至6.0~6.4,用水定容。采用C_(18)柱分离,以乙酸铵溶液(20mmol/L,0.1%甲酸)-乙酸铵溶液/甲醇(1∶9,V/V)为流动相进行梯度洗脱,检测波长254 nm,外标法定量,串联质谱法定性确证。ATP和ADP在5.0~100μg/mL范围内线性良好(R2>0.995),其他4种在1.0~100μg/mL范围内线性良好(R2>0.999)。在不同添加水平下(ADP:120,160和200 mg/kg;IMP:1 200,1 600和2 000 mg/kg;其他4种:60,120和180mg/kg),6种化合物的加标回收率为71%~112%。方法的相对标准偏差为8.5%~14.5%,检出限和定量限分别为0.96~18mg/kg和3.2~61 mg/kg。通过对实际样品的测定,结果表明该方法操作简便、分析快速、干扰较小、准确度较高。

丹红注射液多元指纹图谱及多成分定量分析研究

目的采用HPLC-UV-MS法建立丹红注射液多元指纹图谱，并对其中9种主要药效成分同时定量分析。方法采用AtiantisT3色谱梓（250mm×4．6mm，5μm），流动相为0．05％甲酸水溶液-50％乙蜻水溶液，梯度洗脱；质谱检测采瑚负离子选择离子（SIM）模式。结果该多元指纹图谱较全面地体现了制剂中2味处方药材片参与红化的化学信息，11批制剂指纹蚓讲相似度均在0．988以上。5-羟甲基糠醛、丹参素钠、原几茶醛、香豆酸、丹酚酸D、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A、山奈酚-3-O-苷香糖9种成分在各自质量浓度范围内呈良好线性关系，r≥0．9990：9种化合物的平均加样回收半分别为（99．0±1．4）％、（102．0±1．7）％、（99．3±1．6）％、（97．6±1．6）％、（100．0±1．8）％、（97．9±1．6）％、（100．5±4．4）％、（100．6±2．0）％、（106．0±4．7）％（n=9）；方法重复性的RSD均小于1．45％；测定的11批制剂中9种成分总量在2．61～3．06mg／mL。结论该方法简单、准确、重复性好，多元指纹图谱结合定量测定能更全面地反映丹红注射液的质量，可用于制剂的质量控制。

冠脉宁片中化工染料检查及血竭素高氯酸盐含量测定研究

目的建立冠脉宁片中化工染料检查及血竭素高氯酸盐含量测定方法。方法采用高效液相色谱-串联质谱联用法(HPLC-MS/MS)对冠脉宁片中血竭药材可能存在的化工染料进行检查,并采用高效液相色谱法对其中的血竭素含量进行测定。化工染料检查使用色谱柱为:Agilent Zorbax-SB C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.02 mol·L-1乙酸铵和乙腈的混合溶液,梯度洗脱,520 nm检测;质谱采用ESI+扫描,二级离子扫描方式。血竭素含量测定使用的色谱柱为Phenomenex Luna C18(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,流动相为乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(37∶63),检测波长440 nm。结果 56批次样品中共有7批样品可检出苏丹红Ⅰ、Ⅳ以及808猩红等化工染料。血竭素高氯酸盐在0.408~816.6μg·m L-1内有良好的线性关系,回归方程为y=1.746 1×107ρ+2 419.9,r=1.000 0;平均回收率为98.37%(RSD为1.2%,n=6)。56批次样品中血竭素含量在0.01~0.25 mg·片-1内。结论所建立的方法简便,准确,快速,可用于冠脉宁片中血竭药材的质量控制。

基于UHPLC-UV-Q-TOF-MS/MS的牛蒡子炒制前后化学成分定性定量研究

采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术定性和HPLC-UV定量多指标相结合的综合分析方法,探讨牛蒡子炒制前后化学成分变化。定性采用正负离子扫描模式,应用Peakview1.2分析鉴定出23种成分,发现牛蒡子炒制前后质变成分较少,量变成分较多,并结合Marker View1.2.1软件进行主成分分析和t检验,得出10种主要差异性成分;定量分析6种主要成分的变化,发现牛蒡子经过炒制之后绿原酸、牛蒡苷、异绿原酸A含量下降,异绿原酸B、异绿原酸C、牛蒡苷元含量增加,上述化学成分的差异可能是牛蒡子生品和炒品临床功效不同的主要原因。

食用植物油中微量蓖麻碱的液相色谱紫外及串联质谱定量测定研究

目的：建立食用植物油中微量蓖麻碱的高效液相色谱紫外/串联质谱测定方法。方法：植物油样品经无水乙醇提取后用热水溶解,正己烷脱脂后,过Oasis HLB固相萃取小柱,采用Extend C18柱（250 mm×4.6 mm i.d.,5μm）,以水＋甲醇（65＋35,v/v）为流动相进行分离,紫外检测波长为219 nm,同时在电喷雾电离（ESI）正离子模式下采用多反应监测（MRM）模式进行检测,定量离子对为m/z 165→138。结果：蓖麻碱在紫外检测条件下,在50.0-10000.0μg/kg范围内呈良好线性关系,回收率在92.7%-97.8%范围,日间RSD小于5.4%,检出限为50.0μg/kg。在串联质谱检测条件下,在0.5-50.0μg/kg范围内呈良好线性关系,回收率在90.0%-96.5%范围,日间RSD小于10.5%,检出限为0.5μg/kg。结论：本方法简便、灵敏、重现性好,能满足食用植物油中微量蓖麻碱的定量检测要求。