人AGM区基质细胞对脐血CD34^+细胞形成HPP-CFU能力的支持作用

目的探讨人主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞对脐血CD34+细胞形成高增殖潜能集落形成单位(HPP-CFU)能力的支持作用。方法采用免疫磁珠方法分离人脐血CD34+细胞,接种于底层已制备好人AGM区基质细胞S1～S5饲养层的24孔板中,同时设无饲养层组及取自同期胚胎的躯干成纤维细胞hFT为对照,体外培养28天,每7天收获细胞行造血细胞集落培养。结果5株人AGM区基质细胞hAGMS1～S5对HPP-CFU均有不同程度的扩增及维持作用,HPP-CFU在培养14天达到峰值,与无饲养层组、hFT组比较差异有统计学意义(P<0.05)。hAGMS1～S5的造血支持作用组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05),其中hAGMS3、S4优于S1、S2及S5。结论人AGM区基质细胞S1～S5对脐血CD34+细胞形成HPP-CFU的能力具有支持作用,特别是hAGNS3、S4两株细胞具有更好的造血干性维持作用,为胚胎早期造血发生机制研究提供了重要的模式细胞和基础资料。

银屑病患者骨髓造血细胞体外增殖活性研究

目的进一步了解银屑病患者骨髓造血细胞是否有异常。方法采用密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照组骨髓单一核细胞,然后在含有甲基纤维素的半固体细胞因子培养体系中进行体外高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)、粒-巨噬细胞系集落形成单位(CFU-GM)及红系集落形成单位(CFU-E)集落形成实验,培养一定时期后计数集落。结果与正常对照比较,银屑病患者的HPP-CFC及CFU-GM的集落形成数显著减少,而CFU-E形成的集落数无统计学意义。结论银屑病患者骨髓造血细胞体外增殖能力明显降低,这种异常的造血细胞可能在银屑病的免疫发病机制中发挥一定作用。

小鼠胚胎干细胞来源的HPP-CFC体外和体内造血活性分析

小鼠的造血系统起源于胚胎发育 7d的卵黄囊胚外中胚层 ,研究表明胚胎干细胞 (Embryonicstemcells ,EScells)体外分化模型能够模拟卵黄囊造血的发生过程 ;此外 ,诱导ES细胞体外定向造血细胞分化对于建立治疗性克隆以治愈多种血液病具有重要的研究和应用价值。高增殖潜能集落形成细胞 (Highproliferativepotentialcolony form ingcells ,HPP CFC)是体外培养的最原始的多潜能造血前体细胞之一。本研究发现 :小鼠ES细胞在体外分化 5～14d形成的拟胚体中含有HPP CFC。其再生潜能与胚胎期 9d的卵黄囊来源的HPP CFC相似 ,与骨髓来源则不同。RT PCR分析表明 :ES细胞来源的HPP CFC表达与造血干细胞增殖相关的特异性转录因子和多种造血生长因子受体。但分化 12d的拟胚体细胞和HPP CFC集落细胞移植受致死剂量照射的小鼠不能产生典型的脾结节。因此 ,ES细胞来源的HPP CFC在体外和体内造血活性的差异值得更深入地研究。

锂对小鼠高增殖潜能集落形成细胞和粒巨噬系祖细胞体外增殖的影响

本文观察了锂对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨髓高增殖潜能集落形成细胞（ＨＰＰ－ＣＦＣ）和粒巨噬系祖细胞ＣＦＵ－ＧＭ体外增殖的影响。ＨＰＰ－ＣＦＣ集落由ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＷＥＨＩ３条件培养液（ＷＥＨＩ３－ＣＭ，含有ＩＬ－３）及Ｌ９２９条件培养液（Ｌ９２９－ＣＭ，含有Ｍ－ＣＳＦ）所支持，而ＣＦＵ－ＧＭ由ＷＥＨＩ３－ＣＭ所支持。结果显示，ＬｉＣｌ浓度在０．４－２ｍｍｏｌ／Ｌ时呈现剂量依赖性抑制ＨＰＰ－ＣＦＣ增殖；而在０．４－１ｍｍｏｌ／Ｌ的浓度范围内，则对ＣＦＵ－ＧＭ的增殖起剂量依赖性促进作用。这些结果提示ＬｉＣｌ对ＨＰＰ－ＣＦＣ和ＣＦＵ－ＧＭ的作用不同。