hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白的制备、穿膜效应及其抗氧化、抗炎症功效

目的 探究人源性细胞膜穿透肽hPP10携带人源性抗氧化蛋白Cu,Zn-SOD的穿膜效应并观察其抗氧化、抗炎功效。方法利用RT-PCR技术扩增人源性SOD基因片段、酶切连接法构建重组质粒pET15b-Cu,Zn-SOD,pET15b-hPP10-Cu,Zn-SOD;利用镍柱亲和层析法、分子筛方法纯化Cu,Zn-SOD、hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白并利用Western blotting法鉴定其正确性;利用免疫荧光法、荧光共定位实验、Western blotting法鉴定hPP10-Cu,Zn-SOD在细胞中的穿膜效应;利用Western blotting法鉴定hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白穿膜时间梯度和浓度梯度效应;利用SOD酶活性测定试剂盒检测hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后的SOD酶活性;利用MTT法检测hPP10对细胞活性的影响。利用H2O2建立HEK293氧化应激细胞模型,通过流式细胞分析术(FCM)分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后细胞凋亡情况;并RT-qPCR分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后凋亡相关因子的表达情况;通过ROS检测分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后抗氧化能力。TPA诱导建立小鼠耳部炎症模型(5只/组,共4组),然后RT-qPCR分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后,NFκB,IL-1β、IL-6、TNFα因子的转录情况;Western blotting检测NFκB p65、p-NFκB p65、IL-1β、TNFα基因的表达;免疫组化分析炎性因子p-NFκB p65、TNFα基因的表达。结果 成功构建了重组质粒pET15b-Cu,Zn-SOD,pET15b-hPP10-Cu,Zn-SOD,并获得Cu,Zn-SOD蛋白和hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白;免疫荧光试验结果表明5μmol/L浓度的hPP10-Cu,Zn-SOD转导HEK293细胞具有明显的穿膜效应;荧光共定位实验显示融合蛋白hPP10-Cu,Zn-SOD入胞后定位在细胞膜内,部分蛋白定位在细胞核内;Western blotting实验结果表明hPP10-Cu,Zn-SOD转导Hela(P<0.05),HEK293(P<0.01)细胞具有浓度依赖性,细胞内hPP10-Cu,Zn-SOD存在可持续24 h;5μmol/L的hPP10-Cu,Zn-SOD转导细胞具有较好的抗氧化活性(P<0.01);MTT结果显示高达10μmol/L浓度的hPP10-Cu,Zn-SOD对于细胞活力的影响小。在氧化应激模型中,FCM结果显示hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白孵育细胞降低了细胞的早期凋亡(P<0.01)和晚期凋亡(P<0.05);RT-qPCR结果显示hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白孵育细胞使Bcl2、Mcl1、Deptor等抗凋亡因子升高(P<0.05),降低了Bad、P21、P27等促凋亡因子的表达(P<0.05);ROS结果显示hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白孵育细胞显著降低了细胞内的活性氧含量(P<0.01)。在炎症模型中,hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白可显著降低IL-1β、IL-6、TNFα因子的转录(P<0.05);p-NFκB p65、IL-1β及TNFα的表达都呈现了抑制作用(P<0.05);hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白处理组较Cu,Zn-SOD蛋白处理组,降低了炎性因子p-NFκB p65及TNFα基因的表达(P<0.05)。结论 融合蛋白hPP10-Cu,Zn-SOD具有明显的穿膜入胞、抗氧化、抗炎功效,且对细胞毒副作用很小。这些结果为hPP10作为新的递送载体奠定基础,也为hPP10-Cu,Zn-SOD应用于护肤品等提供了理论依据。

高压气动压力伺服系统的鲁棒控制

高压气动压力伺服系统的参数不确定性和未建模动态制约了其控制精度的提高,针对此提出了基于RISE的自适应鲁棒控制算法用于高压气动压力伺服系统的控制。考虑到核心元件高压电气伺服阀的控制性能对高压气动压力伺服系统高精度控制的影响,设计了交叉对比实验,实验结果表明,伺服阀位置控制算法有助于避免正弦信号失真、减小稳态压力抖动,系统压力控制算法能提高系统的响应速度和动态跟踪能力。

超高压果蔬汁香气品质研究进展

香气是果蔬汁倍受关注的品质特征之一。在保留果蔬汁特征香气以及减少加工异味方面,超高压处理(high-pressure processing,HPP)比热杀菌更具优势。本文综述了HPP果蔬汁加工及贮藏过程中的香气品质变化。HPP处理过程对果蔬汁整体香气品质和感官属性的影响较小,香气品质的劣变主要发生在后续的贮藏期内。本文从HPP对酶的激活或钝化及基质分子与香气相互作用等方面阐明HPP果蔬汁香气品质变化机制,总结了目前常见的HPP果蔬汁香气品质调控措施,可通过温压结合、优化加压模式以及HPP协同CO_(2)、超滤等技术提高钝酶效果,也可通过改善贮藏条件来提高产品品质。本文综述超高压果蔬汁香气品质研究进展,以期为后续产品研发和香气变化机制研究提供思路和参考。

HPP与德国现代建筑的理性主义传统

ＨＰＰ事务所是德国当代重要的建筑设计企业。ＨＰＰ的建筑创作观念，方法体现着德国现代建筑的理性主义传统。一方面，它继承发扬了理性主义传统中追求简洁，注重功能，形式与结构统一的贾风格。另一万面，它修正补充了早期理性主义实践在建筑的城市属性方面的不足。此外，应当指出的是，在激烈的商业竞争压力下，ＨＰＰ把对建筑艺术的关注更多地放在了逻辑、功能、结构、构造而不是个人风格与形式创新方面：它的集体主义创作机制在为公司赢得业务与声誉的局时，也不可避免地引起了评论界的争议。

粪便HPP1基因甲基化分析在结直肠癌早期诊断中的价值

目的探讨人粪便中增生性息肉蛋白基因(HPP1)甲基化状态的检测用于结直肠癌早期诊断的可行性。方法从52例结直肠癌患者、21例结直肠腺瘤患者和24例正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)技术分析其HPP1基因甲基化状态。结果结直肠癌粪便标本HPP1基因甲基化阳性率为71.2%(37/52),腺瘤粪便标本为57.1%(12/21),而正常粪便标本均为阴性。结论HPP1基因甲基化是结直肠癌疾病进展过程中的早期事件。粪便HPP1基因甲基化检测可望成为结直肠癌早期无创诊断或结直肠癌高风险人群筛查的一个新途径。

HPP对Cl_4致大鼠肝脏灌流损伤的影响

对离体大鼠肝脏进行灌流，用ＣＣｌ４造成肝细胞损伤，观察了２－乙基－３－羟基－６－苯硫基－４（１Ｈ）－吡啶酮（ＨＰＰ）对 ＣＣｌ４诱发的大鼠肝脏灌流损伤的影响，结果表明 ＨＰＰ对 ＣＣｌ４引发的肝细胞损伤导致丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、天门冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的升高有明显的抑制作用．提示 ＨＰＰ对离体大鼠肝脏的损伤有抑制作用．

pH值对车用AZ91B镁合金LDH/HPP膜组织和耐腐蚀性能的影响

目前关于有机磷酸(HPP)pH值对镁合金表面层状双羟基金属氧化物(LDH)膜的影响规律研究不多。为此,选择一步水热工艺处理镁合金试样使其表面生成LDH膜,通过有机磷酸完成LDH膜的表面结构转化,采用两步制备工艺得到LDH/HPP膜复合结构,并通过试验测试方法对其组织和腐蚀性能进行分析。研究结果表明:对试样表面进行有机磷酸处理后存在具有片状形态的水滑石微观结构。当有机磷酸溶液pH值达到6和8时,在LDH/HPP膜内检测到了MgHPO_(4)特征峰。相对于LDH膜,LDH/HPP膜腐蚀电位逐渐提高,腐蚀电流密度不断降低。pH为8的条件下,膜获得了最高腐蚀电位,腐蚀电流密度达到了最小,表现出了最优的耐腐蚀性能。各成膜试样都形成了一个高频容抗弧与低频容抗弧,未观察到感抗弧与扩散阻抗产生。以pH值为8的有机磷酸溶液进行处理时,膜获得了最大容抗弧半径。经过有机磷酸处理后,LDH/HPP膜获得了更大极化电阻,获得了更强的耐蚀性能。

不同表面处理对Bio-HPP与PMMA粘结强度影响的研究

目的:采用喷砂、Nd:YAG激光对聚醚醚酮生物复合材料(Bio-HPP)进行表面处理,观察其对Bio-HPP与聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)间粘接效果的影响。方法:68个Bio-HPP试件随机分成4组:CG、SA0.05、SA0.35、LA;表面处理后,扫描电镜观察,测试表面粗糙度;试件与PMMA粘接后一半浸泡蒸馏水24 h,另一半冷热循环5000次,万能试验机测试剪切强度。结果:扫描电镜观察,LA,SA较CG表面粗糙;表面粗糙度:CG<LA<SA0.05<SA0.35;剪切强度结果,CG<LA<SA0.05<SA0.35,5000次冷热循环后较浸泡24 h均有下降,CG、SA0.05、LA剪切强度降低明显,具有统计学差异(P<0.05)。结论:喷砂,Nd:YAG激光处理可以改变Bio-HPP表面形貌,提高Bio-HPP的粘接性能,适当提高喷砂压强有利于Bio-HPP与PMMA粘接的稳定。

HPP纤维水泥混凝土路面耐久性研究

传统的普通水泥混凝土路面由于受到自身材料的限制,其耐久性往往满足不了长期的使用要求。通过试验研究,在混凝土中掺入HPP纤维后,可以使其抗冻性、抗渗性、抗弯冲击性以及耐磨性能得到不同程度的提高,从而使其耐久性得到改善。

新型PVC中效引发剂HPP及同系物的合成

本文研究了以特戊酸和叔己醇或同系醇为原料经过三步反应合成新型PVC中效引发剂HPP及同系物，探讨了反应温度、反应时间、原料配比、催化剂、搅拌条件对合威反应及产率的影响。

故障终止的PLP与HPP的经典双样预测

对故障终止的PLP与HPP,给出了双样预测的Frequentist(也称经典)预测子与预测区间,提出了预测区间系数的计算方法,给出了应用于存在显著可靠性增长且符合PLP的失败终止的成败型数据的方法,并用数值例说明之。

小鼠胚胎干细胞来源的HPP-CFC体外和体内造血活性分析

小鼠的造血系统起源于胚胎发育 7d的卵黄囊胚外中胚层 ,研究表明胚胎干细胞 (Embryonicstemcells ,EScells)体外分化模型能够模拟卵黄囊造血的发生过程 ;此外 ,诱导ES细胞体外定向造血细胞分化对于建立治疗性克隆以治愈多种血液病具有重要的研究和应用价值。高增殖潜能集落形成细胞 (Highproliferativepotentialcolony form ingcells ,HPP CFC)是体外培养的最原始的多潜能造血前体细胞之一。本研究发现 :小鼠ES细胞在体外分化 5～14d形成的拟胚体中含有HPP CFC。其再生潜能与胚胎期 9d的卵黄囊来源的HPP CFC相似 ,与骨髓来源则不同。RT PCR分析表明 :ES细胞来源的HPP CFC表达与造血干细胞增殖相关的特异性转录因子和多种造血生长因子受体。但分化 12d的拟胚体细胞和HPP CFC集落细胞移植受致死剂量照射的小鼠不能产生典型的脾结节。因此 ,ES细胞来源的HPP CFC在体外和体内造血活性的差异值得更深入地研究。

广西壮族食管癌患者HPP1基因甲基化及其诊断价值的研究

目的:探讨广西壮族食管癌患者HPP1基因甲基化情况及其对食管癌诊断的应用价值。方法:本研究采用甲基化特异性PCR(Methylation specific polymerase chain reaction,MSP)方法检测临床上经病理确诊为食管鳞状细胞癌的广西壮族患者20例的癌组织(实验组)和食管癌旁正常组织(对照组),检测HPP1基因甲基化的状态,并对两组HPP1基因检测结果进行统计学分析。结果:食管癌组织检测共有18例HPP1基因呈现甲基化,其甲基化率为90%。食管癌旁正常组织HPP1基因均呈去甲基化状态,两组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HPP1基因甲基化状态的检测对广西壮族食管癌患者的早期诊断具有一定的应用价值。

时间终止时，HPP故障数的Frequentist、Bayesian与Fiducial双样和多样预测

研究了时间终止时,齐次Poisson过程故障数的预测问题,根据已出现的终止时间和故障数,给出了未来故障数的经典(Frequentist)点估计、经典精确预测区间、正态近似预测区间、Bayesian精确预测区间、极大后验点估计、Fiducial精确预测区间。

人AGM区基质细胞对脐血CD34^+细胞形成HPP-CFU能力的支持作用

目的探讨人主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞对脐血CD34+细胞形成高增殖潜能集落形成单位(HPP-CFU)能力的支持作用。方法采用免疫磁珠方法分离人脐血CD34+细胞,接种于底层已制备好人AGM区基质细胞S1～S5饲养层的24孔板中,同时设无饲养层组及取自同期胚胎的躯干成纤维细胞hFT为对照,体外培养28天,每7天收获细胞行造血细胞集落培养。结果5株人AGM区基质细胞hAGMS1～S5对HPP-CFU均有不同程度的扩增及维持作用,HPP-CFU在培养14天达到峰值,与无饲养层组、hFT组比较差异有统计学意义(P<0.05)。hAGMS1～S5的造血支持作用组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05),其中hAGMS3、S4优于S1、S2及S5。结论人AGM区基质细胞S1～S5对脐血CD34+细胞形成HPP-CFU的能力具有支持作用,特别是hAGNS3、S4两株细胞具有更好的造血干性维持作用,为胚胎早期造血发生机制研究提供了重要的模式细胞和基础资料。

制造系统动态HPP模型研究

本文应用Ｍｉｄｄａｕｇｈ和ＭｃＰｅｒｓｏｎ提出的一般决策模型对制造系统静态ＨＰＰ模型进行分析，构造了一种动态ＨＰＰ模型。

浅析超高压技术在优质乳工程中的应用前景

超高压技术(HPP)是食品加工安全领域的先进技术之一,非热处理方式具有对乳制品营养价值破坏较小,有效杀灭微生物、延长保质期和保持乳制品原有风味等优点,被认为是替代热处理的适宜加工方式。“优质”与“安全”是“优质乳工程”良性发展亟需平衡的“双刃剑”。本文介绍HPP的基本原理和特点,分析其在乳品工业中的应用,特别是在优质乳工程中的应用前景和发展趋势,为HPP在优质乳工程中的广泛应用提供理论支撑。

骨髓高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)分化产生巨核细胞的研究

本研究用正常和5-FU处理的小鼠骨髓细胞,作血浆凝块培养,对一种称作HPP-mCFU-MK的HPP-CFC亚型细胞集落进行体外追踪。发现HPP-mCFU-MK不但能形成符合HPP-CFC标准的巨大集落,而且能产生大量的巨核细胞。该巨大集落的生长,依赖添加再生障碍性贫血猪血清(AAS)或合用三种以上的基因重组造血生长因子而增强,在体外不被TGF-β1和PF4抑制。原代培养12天所得到的HPP-mCFU-MK集落,用AAS刺激可再次形成集落。该结果提示HPP-mCFU-MK是小鼠骨髓中多能相细胞的一个亚型。

PLP数据对HPP数据的等效折合

对幂律过程(PLP)数据等效折合成齐次Poisson过程(HPP)数据提出了三种方法,经比较后选择了工程上可应用的方法。

HPP吸收/解吸SO_2气体工艺参数的研究

研究了N,N’-二(2-羟丙基)哌嗪(HPP)吸收/解吸SO2的工艺条件,考察了吸收液初始pH值和吸收温度对HPP吸收/解吸SO2性能的影响。结果表明,优化的HPP溶液吸收/解吸SO2的工艺条件为:吸收液初始pH值为6.00,吸收温度50℃,解吸方式为直接加热,解吸温度102℃,解吸时间2 h。其饱和吸收量为0.472 0 mol/mol,解吸率86.42%,氧化率为2.29%。