昆明山海棠对人白血病细胞HPRT位点的影响

目的：研究昆明山海棠对人白血病细胞ＨＬ－６０ＨＰＲＴ位点的影响。方法：用ＴＨＨ水溶液对ＨＬ－６０细胞进行浓度梯度染毒，不同时间点进行单细胞微孔接种，计数阳性克隆，测定接种存活率、克隆效率和突变频率。结果：ＴＨＨ染毒细胞的突变频率，在处理剂量３．３５～２０．１０ｍｇ／ｍｌ范围内，具有明显的剂量－反应关系。但随着ＴＨＨ的浓度增高至３３．５０ｍｇ／ｍｌ组，由于细胞存活率太低，细胞数不够最后接种要求，不能继续进行。这一现象可能与ＴＨＨ的细胞毒性有关。结论：ＴＨＨ对ＨＬ－６０细胞具有肯定的致突变性。

^（60）Coγ射线诱发的V79细胞HPRT位点突变频率

用中国仓鼠Ｖ７９细胞次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶（ＨＰＲＧ）位点正向突变试验方法（Ｖ７９／ＨＰＲＴＳＹＳＴＥＭ）检测了不同剂量的￣（６０）Ｃｏ－ｙ射线诱发的Ｖ７９细胞ＨＰＲＴ位点的突变频率。结果表明，当剂量率为１．１６Ｇｒ／ｍｉｎ，剂量范围为０．５～５．０Ｇｒ时，ＨＰＲＴ位点的突变频率为３．２—３５．４个突变体／１０￣６细胞，有明显的剂量依赖关系。

基于Flp重组酶介导的盒式交换HPRT位点定点转基因研究

以电穿孔转染法将构建的交换质粒pF-HPRTF3和Flp表达载体pCMV-Flp共转染已在基因组HPRT位点整合有交换盒F-Neo-F3结构的ES细胞F18,经HAT筛选得到HAT抗性ES细胞克隆;G418敏感性试验和基因组Southern杂交表明,所分析的12个HAT抗性克隆中有3个克隆发生了预期的盒式交换重组,转基因定点整合的相对效率为25%。这一结果表明,Flp重组酶是可以在HPRT位点有效地介导盒式交换反应的,我们提出的利用Flp重组酶介导的盒式交换反应建立基于HPRT位点的转基因定点整合体系的策略是可行的。

辐射诱发细胞HPRT基因位点突变频率的研究

本文采用多核细胞检测法（ＣＢ法），研究了６０Ｃｏ γ射线照射离体人血所诱发的体细胞ＨＰＲＴ基因位点的突变频率。实验结果表明，０～５０ Ｇｙ γ射线可诱发ＨＰＲＴ基因位点突变，ＨＰＲＴ基因位点突变的频率随照射剂量增加而升高，突变频率Ｙ（１０－ ３） 与照射剂量Ｄ（Ｇｙ）间可拟合为Ｙ＝

氡及其子体诱发大鼠体细胞HPRT基因位点的突变

[目的]用多核细胞法研究氡及其子体诱发大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)基因位点突变情况。[方法]Wistar雄性大鼠24只,采用HD-3型多功能移动式氡室进行动态吸入染毒,按照氡染毒的累计暴露量,分为3个实验组和1个对照组;获取大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞,以多核细胞法检测该两种细胞的HPRT基因突变频率。[结果]大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞的HPRT基因突变频率均随氡累积暴露剂量的增加而相应增加,剂量-效应关系明显,拟合的函数分别为(?)=1.785×10^(-5)D^2+ 1.174×10^(-3)D+1.054和(?)=3.538×10^(-5)D^2+8.338×10^(-4)D+1.032。[结论]氡及其子体能诱发大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞的HPRT基因突变,呈现一定的剂量-效应关系。

晚期混合裂变产物内照射诱发大鼠外周血淋巴细胞hprt基因位点突变与染色体畸变的研究

应用多核细胞法研究晚期混合裂变产物内照射诱发大鼠外周血淋巴细胞ｈｐｒｔ 基因位点突变， 并与染色体畸变进行比较。结果表明， 淋巴细胞ｈｐｒｔ 基因位点突变不仅随内照射剂量增加而增加， 呈现出良好的正相关， 而且与染色体畸变之间亦呈现出较好的相关性。说明辐射诱发ｈｐｒｔ 基因位点突变和染色体畸变的剂量效应关系动力学相似。因此ｈｐｒｔ 基因位点突变有可能成为生物剂量计。

体细胞HPRT基因位点突变检测技术及其在电离辐射研究中的应用

次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 (HPRT)基因在单基因突变的研究中是一个经典的基因位点。本文概述了 HPRT基因位点突变检测的原理 ,列出了几种检测方法 ,并讨论了影响 HPRT基因突变频率测定的几个因素以及 HPRT基因突变在生物剂量估算中的应用 ,最后与其它辐射生物剂量计进行了比较。

健康成人体细胞HPRT基因位点突变频度值测定

健康成人体细胞ＨＰＲＴ基因位点突变频度值测定黄权光，史纪兰，商希梅，李志荣，贾喜铭，刘伟，乔健维（山东省医科院放射医学研究所济南２５０００１）近年来新近发展起来的次黄嘌呤一鸟嘌呤转磷酸糖基酶位点（ＨＰＲＴ）检测是一种快速、灵敏测定人体细胞突变的方法，...

hprt基因突变对宫颈癌放疗损伤的评估

目的:探讨hprt基因突变对宫颈癌放疗损伤的评估作用。方法:取15例宫颈鳞癌放疗患者放疗前及放疗累积剂量为10～60Gy时的外周静脉血,采用多核细胞法检测hprt基因突变率。结果:在照射累积剂量为30、40和50Gy时,hprt基因突变率在照射后升高,与照射前相比,差别有统计学意义(P<0.05)。当累积剂量达60 Gy时,hprt基因突变率虽然较照射前升高,但差别无统计学意义(P>0.05)。在0～40 Gy,hprt基因突变率基本呈线形上升,且突变率与累积剂量间呈现较好的剂量-效应关系(r=0.900,P<0.05)。回归方程为y=0.459+0.014x。结论:在累积剂量0～40 Gy范围内,hprt基因突变率在放疗后明显升高,呈现良好的剂量-效应关系,可用于评价放疗造成的损伤,是具有应用潜质的生物剂量计。

酶抑制剂对V79-hCYP2E1-SULT1A1细胞酶依赖性化学诱变的影响

目的:V79-hCYP2E1-hSULT1A1是一个表达人细胞色素P450(CYP)2E1和硫酸基转移酶(Sulfotransferase,SULT)1A1的重组中国地鼠V79[Chinese hamster lung(V79)cells]细胞系,它对于需有关代谢酶活化的间接诱变剂有基因突变反应;为观察单个酶的作用,需要建立对细胞中任一酶特异抑制的模型。方法:以细胞Hprt位点的正向突变为试验终点,N-二甲基亚硝胺(N-Nitrosodimethylamine,NDMA)和2-硝基丙烷(2-Nitropropane,2-NP)为依赖CYP2E1和SULT1A1的间接诱变剂,观察CYP抑制剂反式二氯乙烯(Trans-1,2-dichloroethylene,DCE)和1-氨基苯并三唑(1-Aminobenzotriazole,ABT)、SULT1抑制剂槲皮素和五氯酚(Pentachlorophenol,PCP)对上述间接诱变剂作用的影响。结果:在一定浓度下,ABT抑制NDMA的诱变率达99%而不影响2-NP的作用,DCE对其抑制仅达55%且对2-NP的细胞毒性有明显加强作用。槲皮素和PCP抑制2-NP的诱变率达63%和98%,且都对NDMA的作用无影响。结论:ABT和PCP可完全且特异地抑制该细胞中CYP2E1和SULT1A1依赖的诱变反应,此模型对于探讨遗传毒物的代谢活化有可靠价值。

放疗对肿瘤患者外周血淋巴细胞hprt基因位点的影响

目的 了解放疗对肿瘤患者外周血淋巴细胞hprt基因位点的影响 ,探讨hprt基因突变分析作为放疗致机体辐射损伤监测的可行性。方法 采用多核细胞法研究放疗对人外周血淋巴细胞hprt基因位点的影响及其突变频率的变化。结果 放疗可诱发人外周血淋巴细胞hprt基因位点突变 ,突变频率随放疗累积剂量的增加而升高。在同一剂量点 ,鼻咽癌病人与乳腺癌病人的hprt基因突变频率统计学上没有显著差异。肿瘤病人的hprt基因突变频率均较正常对照组高。结论 hprt基因位点突变频率分析可作为放疗致机体辐射损伤监测的生物学标志。

1-溴丙烷致中国仓鼠肺细胞hprt基因位点突变作用研究

目的探讨1-溴丙烷(1-BP)对中国仓鼠肺细胞(V79)次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hprt)基因位点的致突变作用。方法将V79分为大鼠肝微粒体混合功能氧化酶(S9)代谢活化系和非S9代谢活化系,每系各设3.375、6.750、13.500 g/L 3个不同质量浓度的1-BP实验组;另设1.000 g/L甲磺酸乙酯阳性对照组(非S9代谢活化系)、0.001g/L甲基硝基亚硝基胍阳性对照组(S9代谢活化系)和溶剂对照组,溶剂对照组加等体积的无血清培养基。染毒时间为6 h。应用细胞克隆检测法检测V79 hprt基因位点的突变率。结果非S9代谢活化系,1-BP实验组突变率与溶剂对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);S9代谢活化系,3.375、6.750 g/L 1-BP实验组突变率均高于溶剂对照组,差异均有统计学意义(P<0.01),但不存在剂量-反应关系。结论 1-BP经代谢活化后可能对V79 hprt基因位点具有致突变作用。

多核细胞检测法的方法学探讨

本文应用Ｌ９（３）４正交试验设计对影响多核细胞检测法的三个主要因素进行了探讨。结果表明：６－ＴＧ终浓度为２×１０－５Ｍ，Ｃｙｔ－Ｂ终浓度为６ｍｇ／ｌ，７２小时收获细胞的组合为最佳实验搭配方案。同时对其它影响因素也作了研究。

核工业部分超剂量受照人员辐射危害的细胞和分子遗传学调查

目的 了解核工业超剂量受照人员的健康状况 ,探求辐射危害所致早期改变指标。方法 采用现场调查与实验室细胞遗传学和体细胞基因位点突变检测相结合的方法 ,对核工业某厂 5 0名超剂量受照人员和 5 0名对照人员进行调查。结果 染色体畸变率 (CA)、微核形成率 (MN)和HPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 )基因位点突变频率(HPRT)超剂量组均高于对照组 ,其中CA和HPRT结果两组之间存在统计学显著差异。超剂量组中堆工作业岗位的三项指标均明显高于放化工作业岗位的结果 ,各项指标随着累积剂量的增高而增高 ,与剂量之间可拟合Lg直线回归方程。结论 各项指标综合分析 。

致突变试验在恶性肿瘤化疗监测中的应用

人外周血淋巴细胞姐妹染色单体交换(Sister chromatid exchanges test,SCE)、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(Hypoxanthine-guanine phosphoribosyransferase,HPRT)基因位点突变及微核实验(Micronucleus test,MN)三种致突变试验近年来广泛应用于抗肿瘤化疗过程中监测化疗造成的细胞遗传性损伤。恶性肿瘤患者自发的SCE率(SCEfrequence,SCEf)、HPRT基因位点突变(HPRTmutant frequency,HPRT)和MNf在不同肿瘤中不一致,并受多种因素影响。化疗可导致SCEf显著升高,且此升高多在化疗后一年内恢复。化疗也会造成HPRTmf、MNf不同程度升高,此升高在化疗结束后长期存在。以上提示,在化疗监测中,SCE对化疗造成的细胞遗传性损伤敏感,可用于短期监测;HPRT突变和MN则可用于化疗后长期监测,防治远期毒副反应。

健康成人和放射工作者体细胞HPRT基因位点突变率的检测和比较

目的为了解健康成人和放射工作者体细胞ＨＰＲＴ基因位点突变率。方法应用人外周血淋巴细胞抗６－ＴＧ分析技术检测了３０例健康成人和３０例放射工作者体细胞ＨＰＲＴ位点突变频率。结果健康成人ＨＰＲＴ基因位点突变频率均值为０１６２８×１０－３，变化范围为０１３００×１０－４～０２９０３×１０－３，放射工作ＨＰＲＴ基因位点的突变频率均值为０２２２５×１０－３，变化范围为０３３７×１０－４～０４７８×１０－３。ｔ检验Ｐ＜００５，两者差异显著。从检测结果亦可看出，随着放射工龄的延长，ＨＰＲＴ基因位点突变频率也随之增加。结论体细胞ＨＰＲＴ基因位点突变频率可作为各种有害因素对机体遗传损伤的生物标识物之一。