HPV-L1壳蛋白、Ki67联合检测在预测宫颈上皮内瘤变进展中的价值

目的探讨HPV-L1壳蛋白、Ki67联合检测在预测宫颈上皮内瘤变(CIN)进展中的价值。方法选取2014年7月-2016年7月在重庆市第五人民医院病理科检测出的高危型人乳头瘤病毒(HPV)阳性、细胞学诊断为不能明确意义的非典型鳞状细胞(ASCUS)和低级别鳞状上皮内病变(LSIL)患者共134例,其宫颈细胞学标本及相应的组织学标本进行HPV-L1壳蛋白联合Ki67的免疫细胞及组织化学检测,并对检测结果进行分析,以宫颈活检的组织学诊断为确诊标准。结果 77例ASCUS患者中组织活检结果≥CINⅡ的23例(29.87%),57例LSIL患者中组织活检结果≥CINⅡ的21例(36.84%)。ASCUS及LSIL患者中HPV-L1阳性率为32.47%(25/77)、26.32%(15/57),Ki67阳性率为68.83%(53/77)、66.67%(38/57)。HPV-L1壳蛋白、Ki67联合检测在HR-HPV阳性的ASCUS及LSIL中预测高级别病变的特异度、阳性预测值均显著高于2项免疫标记物单独检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HPV-L1壳蛋白和Ki67的联合检测是预测CIN进展的有效、可靠方法。

肿瘤标志物、抑癌基因P16和HPV-L1蛋白检查在宫颈癌和癌前病变诊断中的意义

目的探讨糖类抗原(CA)153、CA125、P16基因和人乳头瘤毒(HPV)-LI在宫颈癌和癌前病变中的诊断意义。方法选取2016年1月至2019年1月间宝鸡市妇幼保健院收治的行宫颈液基细胞学(TCT)联合HPV检测的78例宫颈癌患者,根据检查结果分为宫颈癌组(32例)和宫颈上皮内瘤变组(CIN组,46例),并选取78例体检正常女性作为对照组。采用电化学发光免疫分析法检测三组受检者血清中的CA153和CA125水平,并用免疫组化染色法检测P16和HPV-L1蛋白水平,分析CA153、CA125、P16和HPV-L1在宫颈癌和癌前病变中的诊断价值。结果三组受检者的CA153和CA125水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),且宫颈癌组患者、CIN组患者及对照组受检者的CA153和CA125水平均依次减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。三组受检者的CA153、CA125、P16和HPV-L1阳性率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),且宫颈癌组患者、CIN组患者及对照组受检者的CA153、CA125、P16和HPV-L1阳性率均依次减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。CA153、CA125、P16和HPV-L1单项诊断宫颈癌及癌前病变的敏感度和特异度均较低,四项联合诊断的敏感度和特异度较高。结论CA153、CA125、P16和HPV-L1联合检测可提高宫颈癌和癌前病变的诊断敏感度和特异度,值得临床推广使用。

阴道镜检查联合HPV L1壳蛋白、p16蛋白检测筛查宫颈上皮内瘤变效果

目的:探讨宫颈病变筛查中阴道镜检查、人乳头瘤病毒L1(HPV L1)壳蛋白检测、多肿瘤抑制基因(MTS1,p16蛋白)检测和联合诊断在宫颈上皮内瘤变(CIN)的临床应用效果。方法:收集2022年6月-2023年6月本院妇科门诊因疑存宫颈病变进行宫颈癌筛查的女性201例,均行HPV L1壳蛋白、p16蛋白检测和阴道镜检查,以阴道镜下宫颈组织活检病理结果为诊断依据,对HPV L1壳蛋白、p16蛋白检测、阴道镜检查及3项联合诊断的效果进行分析。结果:宫颈病理诊断无病变121例,病变80例(CIN1级54例、CIN2级25例、CIN3级1例)。阴道镜CIN检出率为53.7%,灵敏度81.3%,特异度64.5%,准确度为71.1%;HPV L1壳蛋白检测CIN检出率为55.2%,灵敏度73.8%,特异度为57.0%,精确度为63.7%。p16蛋白检测CIN检出率为53.7%,灵敏度83.8%,特异度66.1%,精确度73.1%。3项联合检测CIN检出率为64.2%,灵敏度97.5%,特异度57.9%,精确度74.6%。筛查灵敏度阴道镜、HPV L1壳蛋白、p16蛋白检测无差异(χ^(2)=2.667,P>0.05),但3项联合诊断的灵敏度高于各单独指标检测(χ^(2)=11.123、18.331、8.901,P<0.05),特异度3项联合诊断与单独指标无差异(χ^(2)=3.233,P>0.05)。结论:阴道镜检查联合HPV L1壳蛋白,p16蛋白检测筛查CIN的灵敏度可显著提高,可为临床提供有价值的诊断证据。

宫颈鳞状上皮内瘤变中人乳头状瘤病毒L1壳蛋白和磷酸化组蛋白H3的表达及意义

目的研究人乳头状瘤病毒L1(HPV-L1)壳蛋白及磷酸化组蛋白H3(PHH3)在宫颈鳞状上皮内瘤变中的表达及对宫颈病变转归的预测价值。方法选择2013年1月至2014年7月在重庆市第五人民医院病理科诊断新柏氏液基细胞学(TCT)异常且高危人乳头状瘤病毒(HR-HPV)检测阳性的病例共234例,对入选患者进行宫颈活检,以病理组织学结果作为标准进行分组;同时,检测其HPV-L1壳蛋白、PHH3的表达情况,并进行相关性分析;对其中随访到的103例患者进行HR-HPV转阴分析。结果慢性炎症组和CINⅠ组的HPV-L1阳性率高于CINⅡ~Ⅲ组和SCC组(P<0.01);PHH3阳性率SCC组高于其他3组(P<0.05),CINⅡ~Ⅲ组高于慢性炎症组和CINⅠ组(P<0.01),CINⅠ组高于慢性炎症组(P<0.01);HPV-L1、PHH3表达呈负相关;随访病例CINⅠ和CIN≥Ⅱ患者中,HPV-L1(+)/PHH3(—)组的转阴率高于其他3组。结论 HPV-L1壳蛋白联合检测PHH3可作为诊断及预测宫颈鳞状上皮内瘤变的有效指标。

子宫颈病变中HPV L1蛋白和p16的表达

目的研究HPV L1蛋白和p16在子宫颈各种病变中的表达情况,探讨它们在子宫颈病变进展中的预测价值。方法应用免疫组化方法检测41例各种子宫颈病变(CIN1级18例、CIN2级9例、CIN3级8例和浸润性鳞状细胞癌6例)中HPV L1蛋白和p16的表达。结果HPV L1蛋白在各种子宫颈病变中的阳性率为26.8%。其中HPV L1在CIN1中的阳性表达率为38.9%,CIN2为44.4%,CIN3和浸润性鳞状细胞癌均无表达。p16在各种子宫颈病变中的阳性率为68.3%,其在CIN1中的阳性表达率为38.9%,CIN2为77.8%,CIN3和浸润性鳞状细胞癌均表达阳性。100%CIN3和浸润性鳞状细胞癌为p16+/HPV L1-,而61.1%CIN1中为p16-/HPV L1+或p16-/HPV L1-。结论随着子宫颈病变的进展,HPV L1阳性表达率降低而p16阳性表达率增高。p16+/HPV L1-提示子宫颈鳞状上皮内瘤变有进展的可能,而p16-/HPV L1+和p16-/HPV L1-可能为无进展的或潜在消退的子宫颈病变。

脱落细胞人乳头瘤病毒L1壳蛋白的半定量检测有助于宫颈病变的鉴别诊断

目的研究人乳头瘤病毒L1(HPV L1)壳蛋白的表达量与宫颈上皮内瘤变的关系及其临床意义。方法采用免疫细胞化学方法检测153例宫颈脱落细胞中HPV L1壳蛋白的表达,用ImagePro Plus图像分析软件对HPV L1壳蛋白阳性单位(PU)进行半定量检测,并以宫颈活检的组织病理学结果为确诊标准。结果 HPV L1壳蛋白PU在宫颈细胞学分类为正常/炎症、未知意义的不典型鳞状细胞(ASCUS)、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变组别中定量结果依次为46.87±24.46、27.23±24.30、24.10±22.45、9.36±19.82,差异具有统计学意义(P<0.01);其PU在组织学正常/炎症、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变分组中分别为41.30±26.66、24.84±22.18、8.69±19.20,差异具有统计学意义(P<0.01);HPV L1壳蛋白PU与宫颈疾病的严重程度在细胞学分组和组织学分组中均呈负相关(r=-0.458,r=-0.441,P<0.01)。在高危型HPV感染的细胞中,HPV L1壳蛋白PU在HPV16、HPV18中的含量低于其他分型,差异具有统计学意义(P<0.01),HPV L1壳蛋白PU与年龄无关(P>0.05)。结论半定量分析HPV L1壳蛋白在诊断宫颈癌前病变中具有一定的指导作用。

HPV-16 L1甲基化和HPV E6/E7 mRNA检测宫颈病变的临床价值

目的:探讨HPV-16 L1甲基化程度、HPV E6/E7 mRNA表达水平在检测宫颈病变中的临床价值。方法:选择50例HPV-16感染患者的宫颈脱落细胞学标本,其中CIN1 11例、CIN2 11例、CIN3 21例、宫颈鳞癌(SCC)7例,另取11例病理检测HPV-16阴性或慢性炎症者为对照。采用甲基化敏感性高分辨溶解曲线法检测HPV-16 L1甲基化水平,采用b DNA技术检测HPV E6/E7 mRNA的表达情况。结果:对照组、CIN1组、CIN2组、CIN3组和SCC组HPV-16 L1甲基化阳性率分别为9.1%、72.7%、81.8%、90.5%、100.0%,HPV E6/E7 mRNA阳性率分别为45.5%、72.7%、90.9%、100.0%、100.0%;CIN2以上病变中HPV-16 L1甲基化阳性率均高于对照组,而CIN3以上病变中HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于对照组(P均<0.005)。HPV-16 L1甲基化程度和HPV E6/E7 mRNA水平均随宫颈病变严重程度的增加而升高(rS=0.638和0.525,P均<0.001);HPV-16 L1甲基化程度与HPV E6/E7mRNA表达水平呈正相关(rS=0.420,P=0.001)。结论:HPV-16 L1甲基化与HPV E6/E7 mRNA检测在分流HPV感染或细胞学阳性患者方面具有良好的临床应用前景。

尖锐湿疣组织中HPV型别检测及HPV11型L1基因的克隆与测序

目的分析黑龙江地区尖锐湿疣组织感染的HPV型别分布情况,并对HPV11型流行株L1基因进行克隆和测序,检测序列变异情况。方法提取30例尖锐湿疣组织标本中的DNA,用HPVL1区通用引物及特异性HPV6b,11,16,18型引物进行PCR扩增,分析尖锐湿疣组织中感染的HPV型别分布。对其中4株HPV11型阳性标本L1基因,经酶切、连接,分别构建pSP73-HPV11L1重组质粒,并对其L1片段进行测序。结果30例标本中,HPV6b和11型感染数分别为11例,各占36.7%;有2例合并HPV6b/11/16型的混合感染,占总病例数的6.7%;1例HPV16型单独感染,未鉴定出HPV18型感染,其他型别5例。pSP73HPV11L1重组质粒测序后,4株HPV11L1基因序列完全一致,可认为是黑龙江省流行株。其序列与原始株序列相比,仅发现了两处同义点突变。结论黑龙江地区尖锐湿疣组织中HPVDNA检出率为100%,以6b和11型为主,偶见高危型别16型感染。克隆测序表明黑龙江省流行株HPV11型L1基因高度保守。

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒6、11型的检测及L1基因的序列分析

目的 检测尖锐湿疣患者组织中人乳头瘤病毒 (HPV)6型和 11型的感染率，分析 L1晚期基因序列及其蛋白质的氨基酸序列，为基因工程疫苗的研究提供依据。方法 采用 PCR方法测定北京和锦州两地区 34例尖锐湿疣患者病损组织中 HPV6型及 11型的感染率 ,并扩增 L1晚期基因，构建重组测序质粒，双脱氧法测序观察其变异状况。结果 HPV11型感染率为 73.5％ (25/34)， 6型感染率为 44.1％ (15/34),其中两型混合感染率为 17.6％ (6/34)。 11型 L1基因 7～ 8个碱基变异，推导的蛋白质一级结构中可能有 1～ 3个氨基酸变异， 6型 L1基因仅有 3个碱基发生同义突变。结论 检测的 34例患者中以 HPV11型感染为主，兼有 6型和两型的混合感染。 11型 L1基因及蛋白有一定变异， 6型 L1基因仅发生少数碱基同义突变。

HPV L1壳蛋白在HPV单型感染和多重感染中的表达意义

目的检测人乳头瘤病毒L1(HPV L1)壳蛋白在各级宫颈病变中的阳性率,同时探讨其在HPV单型感染和多重感染中的表达及意义。方法选取2017年1月至2017年6月,上海市浦东新区人民医院妇科门诊宫颈活检且高危HPV阳性的250例患者,用免疫细胞化学法联合非同位素标记核酸分子杂交技术行HPV L1壳蛋白检测。HPV DNA分型检测采用PCR-反向点杂交法。结果 HPV L1壳蛋白在正常或宫颈炎、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)及宫颈癌(SCC)4组的阳性率分别为21. 6%、52. 8%、22. 2%、0,各组间阳性率差异有统计学意义(P<0. 05)。HPV L1壳蛋白在单型与多重感染的阳性率分别为29. 7%和21. 6%,差异无统计学意义(P>0. 05)。HPV L1壳蛋白在≤35岁、36～49岁及≥50岁3个年龄组阳性率分别为25. 5%、27. 3%、44. 0%,差异无统计学意义(P>0. 05)。结论 HPV L1壳蛋白阳性率在HPV感染中随着宫颈病变级别的加重而下降,可作为宫颈上皮内病变进展的1种预测标志物。HPV L1壳蛋白与HPV感染亚型以及单型或多重感染无明确相关性。

P16^(INK4A)联合HPV L1壳蛋白检测在宫颈鳞状上皮内病变诊断中的应用

目的初步探讨P16^(INK4A)联合HPV L1壳蛋白检测在宫颈鳞状上皮内病变诊断中的应用价值。方法选择在温州市人民医院就诊患者,收集69例宫颈鳞状上皮内病变标本,行P16^(INK4A)、HPV L1壳蛋白检测,分析P16^(INK4A)、HPV L1壳蛋白及P16^(INK4A)联合HPV L1壳蛋白在各级宫颈病变中的表达差异。结果 P16^(INK4A)在LSIL组、HSIL组、SCC组中的阳性率分别为45.5%、85.2%、100.0%。同LSIL组比较,P16INK4A在HSIL组及SCC组阳性率明显升高(P<0.01)。HPV L1壳蛋白在LSIL组、HSIL组、SCC组中的阳性率分别为63.6%、18.5%、0%,HPV L1壳蛋白在LSIL组中阳性率明显低于HSIL组及SCC组(P<0.01)。随着宫颈病变加重,P16+/L1-阳性率有升高趋势(P<0.01),P16-/L1+阳性率有下降趋势(P<0.01)。LSIL组中P16+/L1-阳性率明显低于HSIL组和SCC组(P<0.01),SCC组P16+/L1-阳性率较HSIL组有明显提高(P<0.05)。LSIL组中P16-/L1+阳性率明显低于HSIL组和SCC组(P<0.01)。P16+/L1-较P16^(INK4)、HPV L1壳蛋白单一检测筛查HSIL+特异性明显升高(P<0.01)。结论 P16^(INK4A)联合HPV L1壳蛋白有望成为诊断宫颈鳞状上皮内病变的有效指标。

广东地区HPV16型L1基因的序列分析及其毕赤酵母表达载体的构建

目的:分析广东地区人乳头瘤病毒(HPV)16型L1基因结构特点;构建广东分离株HPV16 L1毕赤酵母分泌型表达载体。方法:采用PCR技术从广东地区宫颈癌组织中扩增HPV16 L1基因,克隆入毕赤酵母表达载体pPICZαC,测序并对HPV16 L1基因进行序列分析。结果:成功扩增了广东地区HPV16 L1基因,并构建了其毕赤酵母表达载体pPICZαC-HPV16 L1。广东分离株HPV16 L1基因序列与德国标准株相比有16处不同,同源性为98.99%,其编码的氨基酸序列有8处发生改变;与中国标准株比较有9处不同,同源性为99.18%,其编码的氨基酸序列有4处发生变化;发现在HPV16 L1基因序列中nt5 649、nt5 652、nt5 654、nt5 657、nt5 692、nt5 693,6个位点存在突变。结论:广东地区HPV16 L1基因序列与德国标准株、中国标准株相比较均存在差异;成功构建广东地区HPV16 L1真核表达载体。

采用正交设计优化HPV16L1重组蛋白表达的实验研究

通过正交试验对构建的人乳头瘤病毒(HPV)16型L1蛋白的重组表达菌株pQE31-HPV16L1/M15(pREP4)进行表达条件的优化,以增加目的蛋白的表达量。实验选取影响蛋白表达的4个主要因素,分别为诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度和诱导温度,采用四因素两水平正交试验,通过SDS-PAGE及Western blot测定重组表达蛋白,以Tanon凝胶成像系统分析目的蛋白含量作为检测条件优化效果的指标,所得数据采用SAS软件进行统计分析。实验结果表明在37℃、IPTG0.5mmol/L,菌密度OD600为1.0的条件下诱导4h所得蛋白量最大;经统计正交分析的最佳诱导条件为37℃、0.5mmol/LIPTG和菌密度OD600为1.0的条件下诱导7h。经实验验证,应用正交分析的最佳条件诱导所得目的蛋白量最大,但实际中通常采用诱导4h条件。实验证明正交试验可以用于基因工程菌株蛋白表达条件优化过程,提高工作效率。

口腔鳞状细胞癌中PD-L1的表达与P16、HPV感染以及淋巴结转移关系分析

目的观察口腔鳞状细胞癌中程序性死亡分子-L1配体(PD-L1)的表达与乳头瘤病毒-16 (P16)、人乳头瘤病毒(HPV)感染以及淋巴结转移关系,初步探讨PD-L1在口腔鳞状细胞癌病情发展中的作用。方法以本院2017年6月至2018年6月期间收集到的口腔鳞状细胞癌组织蜡块为研究标本,行采用免疫组化染色法检测组织标本PD-L1、P16及HPV表达情况。观察PD-L1、P16、HPV的表达情况,并采用Spearman等级相关性分析法分析PD-L1与P16、HPV感染以及淋巴结转移关系的相关性。结果 51例口腔鳞状细胞癌组织中,PD-L1呈阳性表达44例(86.27%),PD-L1呈阴性表达7例(13.72%),P16呈阳性表达22例(43.14%),P16呈阴性表达29例(56.86%)。口腔鳞状细胞癌组织中的PD-L1表达与P16表达呈负相关(rs=-0.819,P=0.000),与淋巴结转移分期之间呈负相关(rs=-0.736,P=0.000),与HPV感染呈正相关(rs=0.653,P=0.000)。结论 PD-L1在口腔鳞状细胞癌组织中呈高度表达,且与口腔鳞状细胞癌病情发展标志物P16、HPV密切相关,同时在淋巴结转移中也具有促进作用,因此,深入研究PD-L1在口腔鳞状细胞癌病情发展的作用,有助于口腔鳞状细胞癌免疫疗法的完善。

广东地区宫颈癌组织HPV18L1基因的克隆及序列分析

目的:了解广东地区地方株HPV18L1基因结构特点,为HPV感染的检测和基因工程疫苗的研制提供实验基础。方法:采用PCR技术从广东地区宫颈癌组织中扩增HPV18L1基因,克隆入毕赤酵母表达载体pPICZαB,测序并对HPV18L1基因进行序列分析。结果:广东地区分离株与德国标准株在核苷酸序列上有4处不同,其中3处由于核苷酸的改变,其编码的氨基酸也发生相应变化,与标准株的同源性为99.8%。与中国西安地区分离株比较有两处突变点相同。结论:广东地区HPV18L1分离株与德国标准株、中国其他地区分离株之间均存在差异。

免疫细胞化学法检测HPV L1壳蛋白在宫颈脱落细胞中的表达及临床价值探讨

目的:观察HPV L1壳蛋白在宫颈脱落细胞中的表达,探讨使用其临床应用价值。方法:选择2017年2月至2019年4月我院收治的高危型HPV阳性、阴道镜检查怀疑有宫颈病变的女性,从中选择210例患者的宫颈脱落细胞标本作为本次研究的对象。采用免疫细胞化学法检测HPV L1壳蛋白表达。观察其中160例高危型HPV阳性、阴道镜检查怀疑有宫颈病变女性的宫颈脱落细胞HPV L1壳蛋白表达检查结果。结果:本次检测中,HPV L1壳蛋白的总阳性率为40.00%。慢性宫颈炎、CINⅠ、Ⅱ、ⅢHPV L1壳蛋白阳性率存在明显的差异,具有统计学意义(P<0.05)。不同宫颈细胞学分组中HPV L1壳蛋白表达阳性率存在明显差异,HPV L1壳蛋白在NILM分组中阳性表达率最低。结论:HPV L1壳蛋白表达与宫颈脱落细胞病变类型存在明显的联系,HPV L1壳蛋白阳性表达与宫颈脱落细胞病变程度呈现负相关,采用免疫细胞化学法检测这一指标可作为临床预判宫颈病变进展风险的重要依据。

人乳头瘤病毒16型L1基因重组表达质粒的构建及在E.Coli宿主中的表达与鉴定

构建 pGEX4T 1 HPV16L1重组表达系统 ,为进一步研制基因工程疫苗奠定基础 ,采用PCR方法扩增HPV16中国分离株L1外源基因片段 ,pGEX4T 1为表达载体 ,构建pEGX4T 1 HPV16L1重组表达系统 ,在大肠杆菌宿主BL(2 1)中 ,经IPTG诱导 ,表达融合蛋白GST L1,经SDS PAGE电泳和Westernblot进行鉴定结果表明 ,成功构建pEGX4T 1 HPV16L1重组表达质粒并获得高效表达并经Westernblot鉴定为L1外源蛋白。提示 :所构建的 pGEX4T 1

HPV L1衣壳蛋白在不同宫颈病变的表达及临床意义

目的探讨人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)L1衣壳蛋白在不同宫颈病变脱落细胞中的表达及临床意义。方法收集2012年1月至2013年7月在我院经第二代杂交捕获法检测HPV DNA阳性患者的官颈脱落细胞标本312份,采用CytoReact HPV L1试剂盒检测壳蛋白在宫颈脱落细胞中的表达,并追踪其组织病理结果。结果HPV L1衣壳蛋白定位于细胞核,阳性细胞其细胞核着色为红褐色颗粒,位于鳞状细胞的表层,基底细胞无表达。312份宫颈液基细胞学标本中有105份HPV L1衣壳蛋白呈阳性表达,总阳性率为33.65%(105/312),其中未见上皮内病变或恶性细胞(nega—tive for intraepithelial lesion or malignancy,NILM)为27.33%(47/172);未明确意义的非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cell of undermined significance,ASC—US)为36.92%(24/65);不排除高度鳞状上皮病变的非典型鳞状上皮细胞(ASC of can not exclude high—grade squamous intraepithelial lesion,ASC—H)为21.43%(3/14);低度鳞状上皮内病变(low—grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)为69.44%(25/36);高度鳞状上皮内病变(high—grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)为28.57%(6/21);鳞癌(squamous cell carcinoma,SCC)为0.00%(0/4)。六组间HPV L1衣壳蛋白阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05),其中LSLZ与HSIL相比,ASC—US/LSIL与ASC—H/HSIL相比,LSIL与HSIL/SCC相比,LSIL/ASC—H与HSIL/SCC相比,NILM与LSIL相比,HPV L1衣壳蛋白阳性表达率差异均有统计学意义(P均<0.05),且随宫颈细胞学病变程度的加重,HPV L1衣壳蛋白表达呈下降趋势。312例患者中有143例追踪到组织学结果,其中HPV L1衣壳蛋白阳性表达的有46例,总阳性率为32.17%(46/143),其中慢性宫颈炎为27.08%(13/48),宫颈上皮内瘤样病变Ⅰ级(cervical intraepithelial neoplasiaⅠ,CINⅠ)为48.84%(21/43),CINⅡ为33.33%(8/24),CINⅢ为17.39%(4/23),SCC为0.00%(0/5)。五组间HPV L1衣壳蛋白阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。CINⅠ与CINⅡ/CINⅢ相比,慢性宫颈炎与CINⅠ相比HPV L1衣壳蛋白阳性率差异均有统计学意义(P均<0.05),且随宫颈组织学病变程度加重,HPV L1衣壳蛋白表达呈下降趋势。以30岁为界将患者分为两组,其中≤30岁组HPV L1衣壳蛋白阳性率为44.00%(44/100);>30岁组HPV L1衣壳蛋白阳性率为28.77%(61/212),两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论随宫颈病变程度加重,HPV L1农壳蛋白表达呈下降趋势,HPV L1衣壳蛋白检测对宫颈鳞状上皮内病变有一定的预测作用。

HPV E6/E7 mRNA结合HPV L1衣壳蛋白检测诊断子宫颈癌前病变的临床意义

目的:探究人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA+HPV L1衣壳蛋白诊断子宫颈癌前病变临床价值。方法:选泰安市妇幼保健院2019年1月-2020年12月宫颈液基薄层细胞学检查(TCT)HPV DNA阳性94例患者为研究对象,根据组织细胞学检查结果将其设为观察组(宫颈上皮内瘤变,n=84)、对照组(正常宫颈,n=10);两组均接受HPV E6/E7 mRNA、HPV L1衣壳蛋白检测,以组织细胞学检查结果为金标准,比较两种诊断方式单独、联合诊断价值。结果:观察组HPV E6/E7 mRNA总阳性检出率为67.86%,较对照组的20.00%高,差异有统计学意义(P<0.05);CIN1、CIN2、CIN3阳性检出率呈现逐渐上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组HPV L1衣壳蛋白阳性检出率为35.71%,较对照组的10.00%高,差异有统计学意义(P<0.05);CIN1、CIN2、CIN3阳性检出率呈现逐渐下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。HPV E6/E7 mRNA+HPV L1衣壳蛋白联合诊断的准确度、灵敏度分别为82.98%、82.14%,较HPV E6/E7 mRNA(69.15%、67.86%)、HPV L1衣壳蛋白(41.49%、35.71%)单独检验高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在对子宫颈癌前病变诊断中,HPV E6/E7 mRNA、HPV L1衣壳蛋白阳性表达均较高,两者联合诊断后可提升诊断灵敏度。

人乳头瘤病毒L1基因与丹毒丝菌SpaA-N优势抗原表位序列的嵌合重组质粒构建及活性鉴定

为确定丹毒丝菌表面保护性抗原A的N-末端(SpaA-N)优势抗原表位,研发新型表位DNA嵌合疫苗,利用生物信息学软件对丹毒丝菌SpaA-N的优势B细胞抗原表位进行预测,以重叠PCR将优势表位插入人乳头瘤病毒16型的主要衣壳蛋白(HPV-16 L1)HI环结构的编码序列中,构建获得重组嵌合质粒pcDNA3-HPV-L1-ΔspaA。该重组质粒经体内、外瞬时转染后,RT-PCR均扩增获得了1 500 bp左右的目的片段。免疫印迹试验显示,体外转染嵌合质粒的细胞总蛋白能够与GST-SpaA-N重组蛋白免疫血清在56 kD处产生特异性结合。ELISA分析显示嵌合质粒可在小鼠体内产生差异显著的特异性抗体(P<0.01),抗体滴度为1∶1 000。此外,pcDNA3-HPV-L1-ΔspaA制备的抗血清至少可在1∶10稀释度条件下,介导外源补体对半数以上的菌体进行杀伤。该研究表明,获得的SpaA-N表位DNA嵌合疫苗具有免疫活性,为研发安全有效的丹毒丝菌新型DNA疫苗提供了一个新思路。