人乳头瘤病毒16型(新疆株)E6基因的原核表达

根据人乳头瘤病毒 16 (新疆株 ) E6基因编码序列设计引物 ,从含有 HPV16 E6基因的质粒中扩增出含 HPV16 E6基因的 DNA片段 ,该片段全长 4 5 0 bp,将所得片段与 p MD18- T载体连接 ,转化到 JM10 9大肠杆菌中 ,筛选的阳性克隆扩增后 ,提取质粒 DNA,用 Bam H I和 Sal I酶切 ,回收 4 5 0 bp的目的片段 ,定向克隆到 p ET2 8a中 ,转化 JM10 9受体菌 ,从 JM10 9受体菌中提出质粒 ,再转化到 BL2 1(DE3)中 ,筛选出转化体 ,用 IPTG诱导表达 ,在 PAGE上见到所表达的18k D的特异性的 HPV16 (新疆株 ) E6蛋白条带。