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HPV16型E7抗原表位的研究进展 被引量:2
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作者 徐云升 郝飞 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期300-302,共3页
关键词 hpv16型e7抗原 表位 研究进展 尖锐湿疣 宫颈上皮内瘤 宫颈癌
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下调HPV16 E6/E7表达宫颈癌细胞Siha上清液代谢组学
2
作者 肖金宝 赵骏达 马俊旗 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第1期22-27,共6页
目的 基于核磁共振氢谱(1H NMR)代谢组学筛选抑制HPV16 E6/E7表达,检测宫颈癌Siha细胞中差异代谢物以及相关通路,以明确感染高危型HPV16宫颈癌发生的关键代谢标志物。方法 通过RNAi片段转染Siha细胞下调E6/E7表达,分为正常对照组(Siha细... 目的 基于核磁共振氢谱(1H NMR)代谢组学筛选抑制HPV16 E6/E7表达,检测宫颈癌Siha细胞中差异代谢物以及相关通路,以明确感染高危型HPV16宫颈癌发生的关键代谢标志物。方法 通过RNAi片段转染Siha细胞下调E6/E7表达,分为正常对照组(Siha细胞)、空载组(si-NON)、si-E6组与si-E7组,并验证其转染效率。利用1H NMR代谢组学技术揭示干扰Siha细胞中E6/E7表达后所涉及的差异代谢物;结合MetaboAnalyst 5.0在线软件,得到改变的差异性代谢物和相关的代谢途径。结果 荧光倒置显微镜观察细胞荧光存在;Western blotting检测结果显示,与Siha组比较,si-E6组与si-E7组中E6/E7的表达量降低(F=145.8,P<0.001);下调E6/E7表达后,检测13种共有差异代谢物,包括异亮氨酸(Isoleucine),亮氨酸(Leucine),缬氨酸(Valine);MetaboAnalyst 5.0在线软件分析结果提示,以上代谢物主要涉及氨酰-tRNA生物化学合成途径;异亮氨酸、亮氨酸和缬氨酸的生物化学合成途径;酪氨酸、苯丙氨酸以及色氨酸的生物化学合成等10条代谢途径。结论 HPV16感染后通过改变葡萄糖及氨基酸相关代谢促进宫颈癌的进展,为宫颈癌的防治提供理论依据。 展开更多
关键词 hpv16 e6/e7 宫颈癌 代谢组学
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人乳头瘤病毒16型E7基因靶向调控cGAS-STING信号通路抑制宫颈癌细胞免疫功能的研究 被引量:1
3
作者 阿尼克孜·阿不都艾尼 夏日瓦娜·阿巴斯 +2 位作者 木则帕尔·太来提 程祥 许爱敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期293-298,共6页
目的:探讨HPV16 E7靶向调控cGAS-STING信号通路对宫颈癌细胞免疫功能的影响。方法:体外构建HPV16 E7过表达和干扰质粒,转染至SiHa细胞,qPCR检测HPV16 E7 mRNA表达水平,流式细胞术检测CD95、MICA/B、CD73、CD39、CTLA-4和CD25表达。在此... 目的:探讨HPV16 E7靶向调控cGAS-STING信号通路对宫颈癌细胞免疫功能的影响。方法:体外构建HPV16 E7过表达和干扰质粒,转染至SiHa细胞,qPCR检测HPV16 E7 mRNA表达水平,流式细胞术检测CD95、MICA/B、CD73、CD39、CTLA-4和CD25表达。在此基础上分别转染cGAS-siRNA和STING-siRNA至SiHa细胞,CCK8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡。qPCR和Western blot分别检测cGAS、STING、IFN-Ⅰ、HPV16 E7的mRNA及蛋白表达。流式细胞术检测细胞CD95、MICA/B、CD73、CD39、CTLA-4和CD25表达。结果:STING-siRNA+HPV16 E7过表达组CD95和MICA/B水平降低(P<0.05),CD73、CD39、CTLA-4和CD25水平升高(P<0.05)。cGAS、STING和IFN-Ⅰ蛋白表达水平降低(P<0.05)。STINGsiRNA+HPV16 E7干扰组结果与之相反。结论:HPV16 E7靶向调控cGAS-STING信号通路进而抑制宫颈癌细胞免疫功能。 展开更多
关键词 hpv16 e7 宫颈癌 cGAS-STING 免疫功能
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HPV16型-E6、E7在食管鳞癌组织与非癌组织中的表达 被引量:21
4
作者 许春雷 千新来 +2 位作者 周小山 赵清正 李艳春 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期165-168,共4页
背景与目的:越来越多的证据表明高危型人乳头状瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV),特别是HPV16型与多种肿瘤发生、发展密切相关。本研究旨在分析人乳头状瘤病毒HPV16型E6、E7在食管正常组织、不典型增生组织和癌组织中的表达,以探讨HPV1... 背景与目的:越来越多的证据表明高危型人乳头状瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV),特别是HPV16型与多种肿瘤发生、发展密切相关。本研究旨在分析人乳头状瘤病毒HPV16型E6、E7在食管正常组织、不典型增生组织和癌组织中的表达,以探讨HPV16型在食管鳞癌发生、发展中的生物学意义。方法:采用PicTureTM免疫组织化学方法对70例食管癌切除标本上、下切缘的正常粘膜上皮组织、43例不典型增生组织以及18例癌组织中的HPV16型E6、E7蛋白表达情况进行研究。结果:E6蛋白阳性率在正常食管粘膜上皮组织中为59.3%,在上皮不典型增生组织中为88.4%,在癌组织中为83.3%;E7蛋白在上述3种组织中的阳性率分别为62.1%、90.7%和88.9%。与正常食管粘膜上皮相比,上皮不典型增生组织和癌组织中E6、E7蛋白表达均有显著性差异(P<0.05)。HPV16型E6、E7蛋白在正常食管粘膜组织中同时表达即同步率为25.7%,而在上皮不典型增生组织和癌组织中二者同步率分别为88.3%和83.3%。结论:HPV16型E6、E7蛋白与食管鳞癌发生、发展密切相关,二者协同作用可能是食管鳞癌发生、发展的重要因素之一。 展开更多
关键词 食管鳞癌 人乳头状瘤病毒16 e6 e7 免疫组织化学
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HPV16E7抗原HLA-A2限制性CTL表位预测及其合成 被引量:9
5
作者 徐云升 郝飞 +3 位作者 吴玉章 林治华 贾正才 郝进 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期97-100,共4页
目的 预测、合成、纯化及鉴定人乳头瘤病毒E7抗原的HLA A2限制性细胞毒性T淋巴细胞表位 ,为表位抗原特异性鉴定和临床研究提供靶肽。方法 采用超模体、多项式和量化模体方案相结合的方法 ,对靶抗原HPV16E7的HLA A2限制性细胞毒性T淋... 目的 预测、合成、纯化及鉴定人乳头瘤病毒E7抗原的HLA A2限制性细胞毒性T淋巴细胞表位 ,为表位抗原特异性鉴定和临床研究提供靶肽。方法 采用超模体、多项式和量化模体方案相结合的方法 ,对靶抗原HPV16E7的HLA A2限制性细胞毒性T淋巴细胞 (CytotoxicTlymphocyte ,CTL)表位进行预测 ,并运用固相合成法合成多肽 ,经RP HPLC纯化及纯度分析 ,用质谱进行定性鉴定。结果 分别预测出了 16个、10个和 3个九肽表位 ,确定其中 5个九肽为候选合成表位 ,各合成肽的纯度都在 95 %以上。经质谱分析 ,各肽的分子量测定值与理论值相符。结论 超模体、多项式和量化模体方案联合应用可提高预测效率 ,避免了在研究E7抗原表位时盲目合成多肽 ;所合成的多肽为高纯度靶肽 。 展开更多
关键词 hpv16e7抗原 HLA-A2 CTL表位 人乳头瘤病毒
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HPV16型E6、E7变异与宫颈癌发生发展的研究进展 被引量:22
6
作者 杨丽娟 姚宇峰 +1 位作者 严志凌 杨宏英 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第11期1829-1832,共4页
宫颈癌是全球15~44岁女性中第二常见的恶性肿瘤,每年的死亡人数约为265 653人,在中国,宫颈癌的发生率及死亡率仍较高。高危型人乳头状瘤病毒(HPV)持续感染是宫颈癌前病变及宫颈癌发生的必要条件,HPV16是最常见的高危人乳头瘤病毒。HPV1... 宫颈癌是全球15~44岁女性中第二常见的恶性肿瘤,每年的死亡人数约为265 653人,在中国,宫颈癌的发生率及死亡率仍较高。高危型人乳头状瘤病毒(HPV)持续感染是宫颈癌前病变及宫颈癌发生的必要条件,HPV16是最常见的高危人乳头瘤病毒。HPV16编码的E6和E7蛋白在HPV相关的肿瘤中起关键作用。近年来的研究揭示了HPV16 E6、E7基因的变异引起氨基酸变化可影响E6、E7蛋白与p53、pRb的结合,进而与宿主细胞恶性转化相关。本文将对近年来HPV16 E6、E7变异在宫颈癌发生发展中的作用作一综述。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒(hpv) hpv16 宫颈癌 e6基因/蛋白 e7基因/蛋白 变异
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宫颈癌组织中HPV16型E6/E7序列突变分析 被引量:3
7
作者 张志珊 庄建良 +1 位作者 李爱禄 蒋燕成 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期607-611,共5页
目的分析泉州地区宫颈癌患者HPV16型E6/E7序列突变情况,探讨其与宫颈癌发生的相关性。方法取35例HPV16阳性的宫颈癌组织标本,采用PCR法扩增E6、E7全长基因。PCR产物直接测序,并与野生型序列进行比对。分析E6、E7基因的变异情况。结果 E6... 目的分析泉州地区宫颈癌患者HPV16型E6/E7序列突变情况,探讨其与宫颈癌发生的相关性。方法取35例HPV16阳性的宫颈癌组织标本,采用PCR法扩增E6、E7全长基因。PCR产物直接测序,并与野生型序列进行比对。分析E6、E7基因的变异情况。结果 E6、E7基因的突变率分别为91.4%和89.2%。E6基因中有10个位点为错义突变,2个位点为无义突变。氨基酸突变频率最高的是D25E(77.1%)。E7基因中共发现5个突变位点,有2个位点为错义突变,3个位点为无义突变,突变频率最高是N29S和无义突变T846C(均为75.0%)。结论 HPV16E6、E7基因中最常见突变位点D25E、N29S和T846C可能与宫颈癌的发生密切相关,可为研究针对中国人群的HPV疫苗提供一定的线索。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒 宫颈癌 16 e6基因 e7基因
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表达HPV16E6和E7蛋白的非复制型重组痘苗病毒的构建 被引量:1
8
作者 骆卫锋 韩立群 +4 位作者 任皎 田厚文 陆振华 谷淑燕 阮力 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期217-221,共5页
为研制HPV16的治疗性疫苗 ,首先将表达质粒 pJSA1175与非复制型痘苗病毒NTVJTK+ 进行同源重组 ,构建了痘苗重组病毒NTVJLac。再将表达质粒 pJSDME6E7R与NTVJLac进行同源重组 ,构建了表达HPV16E6和E7蛋白的非复制型重组痘苗病毒NTVJmE6E7... 为研制HPV16的治疗性疫苗 ,首先将表达质粒 pJSA1175与非复制型痘苗病毒NTVJTK+ 进行同源重组 ,构建了痘苗重组病毒NTVJLac。再将表达质粒 pJSDME6E7R与NTVJLac进行同源重组 ,构建了表达HPV16E6和E7蛋白的非复制型重组痘苗病毒NTVJmE6E7,并对获得的重组病毒进行了鉴定。Southern杂交显示 ,重组痘苗病毒NTVJmE6E7基因组中有E6和E7基因插入。该重组病毒在人源细胞中不复制。Westernblot显示 ,重组病毒在人源TK-14 3细胞中能表达E6和E7蛋白。 展开更多
关键词 表达 hpv16e6 e7蛋白 非复制重组痘苗病毒 乳头瘤病毒 宫颈肿瘤 疫苗 免疫治疗
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人乳头瘤病毒16型E7抗原表达模型的构建 被引量:3
9
作者 李辉 伍欣星 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2004年第1期7-11,共5页
目的 :构建pEGFP HPV1 6E7表达载体 ,并观察其在肝癌细胞中的瞬时和稳定表达及小鼠肝癌细胞皮下成瘤情况 ,为建立表达HPV1 6E7的实体瘤动物模型奠定基础。方法 :应用基因重组技术 ,构建增强绿色荧光蛋白(EGFP)与HPV1 6E7的融合表达载体 ... 目的 :构建pEGFP HPV1 6E7表达载体 ,并观察其在肝癌细胞中的瞬时和稳定表达及小鼠肝癌细胞皮下成瘤情况 ,为建立表达HPV1 6E7的实体瘤动物模型奠定基础。方法 :应用基因重组技术 ,构建增强绿色荧光蛋白(EGFP)与HPV1 6E7的融合表达载体 ,经限制性内切酶酶切鉴定和PCR分析 ,用脂质体转染技术将其转入小鼠肝癌细胞 ,2 4h后RT PCR检测HPV1 6E7mRNA的生成 ,荧光显微镜观察EGFP HPV1 6E7融合蛋白的表达 ,将转染细胞接种小鼠皮下 ,观察成瘤及成瘤后融合蛋白的表达情况。结果 :酶切鉴定和PCR分析证实重组质粒中插入目的基因片段及载体DNA大小、方向和插入位点均正确 ,在转染的小鼠肝癌细胞中检测到HPV1 6E7mRNA的生成和绿色荧光蛋白的表达 ,接种的转染细胞在小鼠皮下可成瘤且可检测到HPV1 6E7mRNA的生成。结论 :pEGFP HPV1 6E7表达载体便于观察转染细胞中EGFP HPV1 6E7融合蛋白的表达情况 ,小鼠肝癌细胞接种小鼠皮下可成瘤 ,成瘤后可检测到HPV1 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 表达载体 基因转染 hpv16e7 动物模 基因重组 抗原
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35例维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16型E7致癌基因突变分析 被引量:3
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作者 余勐 马正海 +2 位作者 热西旦.尼格买提 刘开江 张富春 《地方病通报》 2006年第3期17-20,共4页
目的本研究旨在检测HPV16E7基因在新疆南部维吾尔妇女宫颈癌组织中的突变。方法从35份新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取组织DNA,作为模板,PCR扩增HPV16 E7全长基因,PCR产物直接测序或克隆后测序,分析新疆维吾尔族妇女... 目的本研究旨在检测HPV16E7基因在新疆南部维吾尔妇女宫颈癌组织中的突变。方法从35份新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取组织DNA,作为模板,PCR扩增HPV16 E7全长基因,PCR产物直接测序或克隆后测序,分析新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织HPV16E7基因的突变。结果PCR检测结果宫颈癌组织中HPV16E7阳性率为82.86%(29/35);27个E7分离片段的测序和序列分析表明,26个分离株E7基因与原型相同,1个分离株E7基因核苷酸发生2处突变,即647位(在HPV16基因组中的位置)的A→G,氨基酸由Asn变异为Ser;845位的T→C,氨基酸不变。结论新疆南部地区维吾尔妇女宫颈癌患者感染的HPV16中存在E7基因的变异株,该变异株可能是由人口流动传入。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒16 宫颈癌 e7 基因突变
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广东分离株HPV16型L2与重组E7融合蛋白原核表达载体的构建 被引量:1
11
作者 芦春斌 辛庆玲 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期312-317,共6页
分析广东分离株HPV16型的L2和E7基因结构,并对E7的4个功能区重新排列组合形成失去致癌作用但其抗原表位不改变,其命名为rE7,构建pET-28a-L2、pET-28a-rE7、pET-28a-L2-rE7、pET-28a-rE7-L24个原核表达质粒.采用PCR技术从广东分离株HPV1... 分析广东分离株HPV16型的L2和E7基因结构,并对E7的4个功能区重新排列组合形成失去致癌作用但其抗原表位不改变,其命名为rE7,构建pET-28a-L2、pET-28a-rE7、pET-28a-L2-rE7、pET-28a-rE7-L24个原核表达质粒.采用PCR技术从广东分离株HPV16基因组中扩增L2基因;用重叠PCR技术人工合成rE7基因和L2-rE7、rE7-L2融合基因,并构建到原核表达载体pET-28a(+)上.成功扩增广东分离株HPV16型L2基因,经重叠PCR技术成功得到rE7、L2-rE7和rE7-L2基因并成功构建了原核表达的4个载体:pET-28a-L2、pET-28a-rE7、pET-28a-L2-rE7、pET-28a-rE7-L2.广东分离株HPV16型L2基因与中国标准株有9处不同,同源性为99.37%,其编码氨基酸序列有8处突变.成功合成失去致癌作用的基因rE7及构建4个原核表达载体. 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 L2基因 e7基因 peT-28a(+)
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HPV16型E7蛋白在喉癌组织中的表达 被引量:3
12
作者 李善玉 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期451-451,共1页
关键词 喉癌 人乳头瘤病毒16 e7蛋白 免疫组化法
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Aptima HPV E6/E7mRNA16,18/45基因型检测技术在ASCUS患者分流中的应用
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作者 闫广伟 寇俊娜 +4 位作者 郝志伟 张欢欢 杜艳敏 曹静 曾宪旭 《诊断病理学杂志》 2022年第5期451-453,共3页
宫颈癌是最常见的女性恶性肿瘤之一,2018年全球有57万宫颈癌新发病例和3.11万新致死病例[1]。宫颈癌在我国发病率居于女性生殖道恶性肿瘤之首[2]。高危型HPV持续感染是造成宫颈病变的首要因素,HPV16/18型在临床中最为常见,HPV16/18联合... 宫颈癌是最常见的女性恶性肿瘤之一,2018年全球有57万宫颈癌新发病例和3.11万新致死病例[1]。宫颈癌在我国发病率居于女性生殖道恶性肿瘤之首[2]。高危型HPV持续感染是造成宫颈病变的首要因素,HPV16/18型在临床中最为常见,HPV16/18联合感染患者进展为宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ+的概率更高[3]。随着细胞学筛查的普及,越来越多的早期宫颈病变被发现,薄层液基细胞学(TCT)检查异常结果中ASCUS最为常见。 展开更多
关键词 hpv e6/e7 mRNA hpv16 hpv 18/45 ASCUS 宫颈病变
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HPV16 E6E7抗原表达模型的建立
14
作者 高慧 朱晓芳 +2 位作者 翁晓芳 周敏 谢铮 《医学信息》 2009年第11期2378-2380,共3页
目的用基因重组技术构建pcDNA-E6E7真核表达载体。方法经限制性内切酶和序列分析,用脂质体转染技术将其转入B16细胞,G418稳定筛选后IFA法检测其表达,RT-PCR法检测HPV16E6E7mRNA的生成,并将转染细胞接种小鼠皮下,观察成瘤情况。结果酶切... 目的用基因重组技术构建pcDNA-E6E7真核表达载体。方法经限制性内切酶和序列分析,用脂质体转染技术将其转入B16细胞,G418稳定筛选后IFA法检测其表达,RT-PCR法检测HPV16E6E7mRNA的生成,并将转染细胞接种小鼠皮下,观察成瘤情况。结果酶切鉴定证实重组质粒中插入的目的基因片段及载体大小、方向和插入位点均正确,在转染的B16细胞中可见绿色荧光并检测到HPV16E6E7mRNA的生成,接种的转染细胞在小鼠皮下100%成瘤。结论提示B16细胞转染E6E7后其致瘤性与转染空载体组和野生型B16细胞组无明显差异。 展开更多
关键词 hpv16 e6e7 基因转染 肿瘤模
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新疆地区HPV16型变异体及E6、E7、LCR基因变异分析
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作者 马春华 朱开春 +2 位作者 王琳 阿也提 玛依努尔·尼牙孜 《中国生育健康杂志》 2016年第6期537-543,F0003,共8页
目的探讨新疆地区感染HPV16变异体谱系分布及E6、E7、LCR基因突变研究。方法对HPV16阳性的宫颈癌及癌前病变患者,提取基因组DNA,利用PCR扩增HPV16 DNA E6、E7基因及LCR区核苷酸片段,正反向测序。与HPV16基因序列分析比对,确定HPV16... 目的探讨新疆地区感染HPV16变异体谱系分布及E6、E7、LCR基因突变研究。方法对HPV16阳性的宫颈癌及癌前病变患者,提取基因组DNA,利用PCR扩增HPV16 DNA E6、E7基因及LCR区核苷酸片段,正反向测序。与HPV16基因序列分析比对,确定HPV16谱系分布,分析核苷酸突变位点。结果E6基因突变率为80.00%,主要突变位点为T350G(59.78%)和T178G(18.48%);E7突变率为54.78%,主要突变位点为A647G(33.33%)和T846C(26.98%);LCR突变率为23.48%,主要突变位点为C24T(74.07%)和C13T(18.52%)。新疆维吾尔族妇女与汉族妇女之间比较,维吾尔族妇女T350G突变率(72.00%)显著高于汉族(45.24%),汉族妇女A647G(33.33%)、T846C(31.25%)、C24T(78.95%)三个突变率均显著高于维吾尔族(依次为20.00%、13.33%、62.50%),差异具有统计学意义。新疆汉族妇女中感染的HPV16主要为亚洲型,新疆维吾尔族妇女感染的HPV16主要为欧洲型。结论T350G突变可能是新疆维吾尔族妇女宫颈癌高发的原因之一,新疆汉族妇女中感染的HPV16型主要为亚洲型,新疆维吾尔族妇女感染的HPV16型主要为欧洲型。 展开更多
关键词 hpv16变异体 宫颈癌 e6基因变异 e7基因变异 LCR基因变异
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p16/Ki67双染、HPV E6/E7 mRNA检测对于TCT检查为低级别鳞状上皮内病变及以下且HPV检测为阴性或其他高危型HPV阳性患者的分流作用 被引量:9
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作者 李碧军 郭瑞霞 +5 位作者 王春芳 陈曦 褚丹霞 王凯丽 杜建敏 白晶 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2021年第1期11-15,共5页
目的:探索p16/Ki67双染色法(简称双染)、HPV E6/E7 mRNA(简称E6/E7)检测对于宫颈细胞学检查(TCT)为低级别鳞状上皮内病变(LSIL)及以下且HPV检测为阴性或其他高危型HPV阳性患者的分流作用。方法:收集郑州大学第一附属医院妇科门诊就诊的... 目的:探索p16/Ki67双染色法(简称双染)、HPV E6/E7 mRNA(简称E6/E7)检测对于宫颈细胞学检查(TCT)为低级别鳞状上皮内病变(LSIL)及以下且HPV检测为阴性或其他高危型HPV阳性患者的分流作用。方法:收集郑州大学第一附属医院妇科门诊就诊的TCT检查为LSIL及以下且HPV检测为阴性或其他高危型HPV阳性(不包括HPV16、18阳性)的414例患者的宫颈脱落细胞,分别进行双染检测、HPV E6/E7 mRNA检测,并行阴道镜下活检,以组织病理学诊断为“金标准”,采用灵敏度、特异度比较TCT+HPV+双染、TCT+HPV+E6/E7和TCT+HPV检测用于筛查高级别鳞状上皮内病变及以上(HSIL+)患者的效能。结果:根据病理结果,414例中150例为HSIL+。TCT+HPV+双染检出宫颈HSIL+病变的灵敏度、特异度分别为78.7%、50.4%,TCT+HPV+E6/E7分别为74.0%、26.1%,而TCT+HPV为90.0%、8.0%。TCT+HPV+双染和TCT+HPV+E6/E7检出HSIL+病变的灵敏度相近,均略低于TCT+HPV(P<0.05),而TCT+HPV+双染的特异度远高于其他2种方法(P<0.05)。结论:对于TCT检查为LSIL及以下且HPV阴性或其他高危型HPV阳性患者,采用p16/Ki67双染联合检测具有较高的灵敏度,且能显著提高特异度,其筛查效能优于TCT和HPV联合筛查。 展开更多
关键词 TCT p16/Ki67双染色法 高危hpv e6/e7 mRNA 宫颈癌 联合检测
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HPV E6/E7mRNA检测与P16/Ki-67免疫组化检测对宫颈CIN2级病变的筛查价值探究
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作者 王冲 朱攀科 王雪玲 《四川生理科学杂志》 2024年第6期1311-1313,共3页
目的:研究人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)E6/E7mRNA与免疫组化抑癌基因P16/细胞增殖核抗原Ki-67在宫颈上皮内瘤样病变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)2级病变筛查中的应用价值。方法:选取2020年2月至2023年2月期间... 目的:研究人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)E6/E7mRNA与免疫组化抑癌基因P16/细胞增殖核抗原Ki-67在宫颈上皮内瘤样病变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)2级病变筛查中的应用价值。方法:选取2020年2月至2023年2月期间本院收治的92例宫颈炎症及病变患者作为研究对象。根据病理检查结果,将CIN2级患者纳入研究组(n=45),宫颈CIN1级和宫颈炎患者纳入对照组(n=47)。对比两组HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67单独及联合检测阳性表达率差异,采用Logistic回归分析影响CIN2诊断的危险因素,并采用受试者工作曲线分析HPV E6/E7mRNA与P16/Ki-67单独及联合检测在宫颈CIN2级病变筛查的价值。结果:研究组HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67单独检测阳性率、联合检测阳性率(82.22%,77.78%,84.44%)高于对照组(63.83%,48.94%,53.19%)(P<0.05)。Logistic回归分析显示HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67是影响CIN2诊断的危险因素(P<0.05);HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67联合检测CIN2级病变的受试者工作特征曲线下面积为0.688(95%CI:0.579~0.798),优于HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67单独预测[0.592(95%CI:0.476~0.708);0.634(95%CI:0.519~0.748)]。联合检测的准确度、灵敏度、特异度(68.8%,84.4%,53.2%)均高于单独检测HPV E6/E7mRNA(59.2%,82.2%,36.2%)、P16/Ki-67(63.4%,77.8%,48.9%)。结论:HPV E6/E7mRNA与P16/Ki-67免疫组化检测在宫颈CIN2级病变筛查中具有一定的应用价值,可以显著提高筛查宫颈CIN2级病变的诊断效能。 展开更多
关键词 hpv e6/e7mRNA P16 KI-67 宫颈CIN2级病变
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HPV16型E5基因对人永生化口腔上皮细胞E6、E7基因表达的影响 被引量:4
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作者 侯潇潇 江彤 +1 位作者 蒋欣泉 陈传俊 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2011年第4期368-372,共5页
目的:研究HPV16型E5基因对人永生化口腔上皮细胞(human immortalized oral epithelial cell,HIOEC)E6、E7基因的影响。方法:HIOEC转染pLEGFP-E5基因反转录病毒载体,同时人为突变E5基因并转染HIOEC,通过PCR检测E5及各突变体在HIOEC中的... 目的:研究HPV16型E5基因对人永生化口腔上皮细胞(human immortalized oral epithelial cell,HIOEC)E6、E7基因的影响。方法:HIOEC转染pLEGFP-E5基因反转录病毒载体,同时人为突变E5基因并转染HIOEC,通过PCR检测E5及各突变体在HIOEC中的表达。实时定量PCR检测E6、E7基因mRNA水平表达量的变化以及转染后HIOEC的细胞增殖能力,采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学处理。结果:构建了E5缺失突变体反转录病毒载体并成功转染人永生化口腔上皮细胞。转染后人永生化口腔上皮细胞的增殖行为实验表明,HPV16E5基因可促进人永生化口腔上皮细胞增殖(P<0.05),并对E6、E7基因mRNA表达具有正调控作用,但其缺失突变基因反转录病毒载体对人永生化口腔上皮细胞增殖及E6、E7表达无显著影响。结论:HPV16型E5基因可在一定程度上促进人永生化口腔上皮细胞增殖,并对E6、E7基因mRNA表达量有一定的间接上调作用。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 hpv16e5 e6/e7 缺失突变 反转录病毒载体 人永生化口腔上皮细胞
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纳米雄黄混悬液诱导Siha细胞凋亡及对HPV16E6/E7表达的影响 被引量:12
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作者 刘嵘 濮德敏 +3 位作者 赵立波 程艳香 尹伶 李天 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期54-58,共5页
目的:探讨纳米雄黄混悬液对人宫颈癌Siha细胞的抑制增殖、诱导凋亡作用及其对HPV16E6和E7致瘤基因的影响。方法:采用微射流法制备纳米雄黄混悬液,应用不同质量浓度(6.25,12.5,25,50 mg.L^-1)的纳米雄黄混悬液作用于Siha细胞不同时间... 目的:探讨纳米雄黄混悬液对人宫颈癌Siha细胞的抑制增殖、诱导凋亡作用及其对HPV16E6和E7致瘤基因的影响。方法:采用微射流法制备纳米雄黄混悬液,应用不同质量浓度(6.25,12.5,25,50 mg.L^-1)的纳米雄黄混悬液作用于Siha细胞不同时间(12,24,48,72 h),光镜和透射电镜观察实验组(不同质量浓度的纳米雄黄混悬液处理组)和对照组(不加药物的细胞)细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞DNA Ladder形成;MTT比色法测定细胞生长抑制情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期改变;RT-PCR方法检测HPV16E6和E7的表达。结果:纳米雄黄混悬液25~50 mg.L-1处理Siha细胞48,72 h后,细胞存活率降低,凋亡增加,作用呈时间-剂量依赖关系。电镜显示细胞呈典型的凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞DNA Ladder形成;流式细胞术检测证实细胞凋亡率与纳米雄黄混悬液作用浓度呈明显相关,与对照组相比,差异有极显著意义(P〈0.01),且细胞呈G0-G1期阻滞。RT-PCR检测显示随着纳米雄黄混悬液作用浓度的增加,HPV16E6和E7的表达不同程度地受到抑制。结论:纳米雄黄混悬液对于Siha细胞具有诱导凋亡、抑制增殖的作用,其机制可能与其抑制HPV16E6和E7致瘤基因的表达有关。 展开更多
关键词 纳米雄黄混悬液 SIHA细胞 细胞凋亡 hpv16e6 hpv16e7
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不同程度宫颈病变单一、多重高危型HPV感染状态下E6/E7 mRNA的表达 被引量:17
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作者 莫小亮 罗殿中 +1 位作者 党裔武 王莉 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第18期2268-2271,共4页
目的探讨不同程度宫颈病变的HPV基因型分布特点及高危型HPV E6/E7mRNA在单一、多重感染病例中的表达,以及其对HPV致病力的影响。方法收集不同程度宫颈病变石蜡组织标本共236份。采用基因芯片技术对236份标本进行23种HPV基因型分型检测,... 目的探讨不同程度宫颈病变的HPV基因型分布特点及高危型HPV E6/E7mRNA在单一、多重感染病例中的表达,以及其对HPV致病力的影响。方法收集不同程度宫颈病变石蜡组织标本共236份。采用基因芯片技术对236份标本进行23种HPV基因型分型检测,并采用Taqman逆转录-PCR技术测定高危型HPV E6/E7mRNA的表达。结果 HPV阳性率为65.3%(154/236),其中包含了233个HPV亚型(单一或多重)感染,60.9%(142/233)病例可检测出E6/E7mRNA的表达,HPV阳性率和E6/E7mRNA表达水平随宫颈病变级别的上升而升高(P<0.05)。在大于或等于CINⅡ的高危亚型感染病例中,HPV45的E6/E7mRNA表达率最高(93.3%),其次为HPV16(81.0%)、HPV18(78.4%)。在大于或等于CINⅡ的病变中,93.7%(118/126)病例可检测到E6/E7mRNA的表达,而小于CINⅡ的病变中仅有39.3%(11/28)的病例可检测到E6/E7mRNA的表达。在所有不同程度宫颈病变中,多重感染病例E6/E7mRNA表达率较单一感染病例高(61.2%vs.38.8%,P<0.05)。结论在任何程度的宫颈病变中,HPV多重感染,尤其HPV45的E6/E7mRNA高表达水平可能会提高HPV的致病力。 展开更多
关键词 宫颈病变 hpv 基因 e6/e7 MRNA
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