HPV16-E6-DNA对宫颈癌预后价值分析

目的:探究HPV16-E6-DNA对宫颈癌预后预测价值。方法:回顾性分析本院2014年1月至2017年3月收治的72例宫颈癌患者临床资料,抽血化验,采用荧光定量(PCR)技术测定HPV16-E6-DNA病毒载量,按照其检测结果将患者分成两组,即低载量组与高载量组,采用荧光定量(RTPCR)测定宫颈癌患者组织中的HPV16-E6-DNA病毒载量,利用Kaplan-Meier计算方式计算两组生存率,选用Cox回归分析法分析影响患者5年生存率的因素。结果:HPV16-E6-DNA病毒载量在宫颈癌患者组织表达水平与患者年龄、FIGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05);低载量组患者1、3、5年生存率分别为95.66%、89.31%、74.30%;高载量患者1、3、5年生存率分别是89.10%、62.61%、51.36%,低载量患者的生存率显著高于高载量组(P<0.05);Cox回归分析结果显示,HPV16-E6-DNA病毒载量以及淋巴结转移均是影响宫颈癌患者预后的重要因素(P<0.05),有统计学意义。结论:HPV16-E6-DNA病毒对宫颈癌患者预后具有重要预测价值,是宫颈癌根治术后预后监测的重要因子,作为宫颈癌根治术后影响生存率的危险独立因素。

早期宫颈癌组织中ATG-12表达与HPV16-E6/E7-DNA病毒载量及预后的关系

目的探讨早期宫颈癌组织中自噬相关蛋白-12(ATG-12)与人乳头瘤病毒(HPV)16-E6/E7-DNA病毒载量及预后的关系。方法选取2015年1月至2017年12月期间在安徽皖北煤电集团总医院保存的宫颈活检或手术切除宫颈组织203例,包括30例慢性宫颈炎、18例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ、23例CINⅡ、26例CINⅢ和106例早期(ⅠA2~ⅡB期)宫颈鳞状上皮癌(CSCC)。采用巢式多重聚合酶链式反应(NM-PCR)和免疫组化染色SP法检测组织中HPV 16-E6/E7-DNA病毒载量和ATG-12蛋白表达。分析ATG-12蛋白表达与早期CSCC临床病理特征的关系。随访CSCC患者无瘤生存时间(DFS)。采用Cox风险比例回归模型分析影响CSCC预后的因素。结果CSCC组织ATG-12蛋白阳性表达率为26.42%(28/106),低于慢性宫颈炎和CIN组织(P<0.05)。ATG-12蛋白表达与HPV16-E6/E7-DNA病毒载量呈负相关(r=-0.306,P=0.001;r=-0.436,P=0.001)。ATG-12蛋白表达与FIGO分期、间质浸润、淋巴脉管间隙浸润、淋巴结转移有关(P<0.05)。随访11~64个月,ATG-12蛋白阳性表达患者5年无瘤生存率为78.57%(22/28),ATG-12蛋白表达阴性患者5年无瘤生存率为60.26%(47/78)。多因素Cox风险回归模型结果显示,HPV16-E6/E7-DNA病毒载量和ATG-12蛋白表达是影响患者DFS的独立预后因素(P<0.05)。结论早期宫颈鳞状上皮癌组织中ATG-12阳性表达率低,与HPV16-E6/E7-DNA病毒载量呈负相关,有望成为评估HPV阳性早期宫颈癌患者预后的重要指标。

宫颈腺癌p53、HPV16/18-E6蛋白和ER的表达及其临床意义

目的 探讨宫颈腺癌组织中 p5 3蛋白、HPV16 / 18 E6蛋白及ER的表达及其临床意义。 方法 采用免疫组织化学S P法对 6 3例宫颈腺癌组织进行p5 3蛋白、HPV16 / 18 E6蛋白及ER检测。结果 6 3例宫颈腺癌中p5 3、HPV16 / 18 E6蛋白和ER阳性表达率分别为为 5 2 .3%、31.7%和 4 9.2 %。p5 3表达与肿瘤病理分级、临床分期 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期 )有关。HPV16 / 18 E6、ER的表达与宫颈腺癌的病理学分级、临床分期无关 ,但与 p5 3表达呈负相关 (P <0 .0 1) ,HPV16 / 18 E6、ER在宫颈腺癌中的表达呈正相关 (P <0 .0 1)。结论 随宫颈腺癌组织病理分级和临床分期增高p5 3阳性表达率逐渐增高 ,可能与 p5 3突变有关 ,部分宫颈腺癌的发病可能与HPV16 / 18 E6蛋白过度表达有关。部分宫颈腺癌可能属于激素依赖性 ,雌激素可能有协同HPV致癌的作用。

COX-2、HPV16-E6蛋白在宫颈癌组织中的表达及意义

目的分析研究环氧合酶-2(COX-2)、人乳头瘤病毒16型E6蛋白(HPV16-E6)在宫颈癌组织中的表达与病理特征间的关系。方法选取2017年11月~2019年11月46例初诊宫颈癌患者和46例因妇科良性疾病手术或门诊治疗的患者作为研究对象,采用S-P法对COX-2、HPV16-E6蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达进行检测,采用阳性细胞百分比和染色强弱对指标进行评分。结果病理参数中年龄、病理类型、组织学分级、临床分期和肿瘤直径的COX-2阳性表达差异无统计学意义(P>0.05),肌层浸润深度、宫旁或脉管浸润、淋巴结是否转移的COX-2阳性表达差异有统计学意义(P<0.05);病理参数中组织学分级、临床分期、淋巴结是否转移、肿瘤直径和肌层浸润深度的HPV16-E6蛋白阳性表达差异无统计学意义(P>0.05),而年龄、病理类型、宫旁或脉管浸润高度的HPV16-E6蛋白阳性表达差异有统计学意义(P<0.05);COX-2与HPV16-E6蛋白在宫颈癌组织中表达呈显著正相关关系,在宫颈慢性炎症组织中表达呈显著正相关关系。结论COX-2与HPV16-E6蛋白在宫颈癌侵袭、转移过程中可发挥协同作用。

表达HPV16-E6/E7基因的人喉鳞癌细胞系的建立

目的建立表达HPV16-E6/E7基因的人喉鳞癌细胞系。方法用阳离子脂质体基因转染技术将携带有HPV16-E6/E7DNA的真核表达质粒导入体外连续传20代的HPV阴性的Lscc-02喉鳞癌细胞系,采用PCR和Western blot检测HPV16-E6/E7基因在Lscc-02细胞系中的整合和表达。结果第22代和第35代细胞中,PCR和Western blot均分别检测出E6/E7基因和蛋白的存在,显示HPV16-E6/E7基因整合于Lscc-02细胞系中并能稳定表达。结论成功建立了表达HPV16-E6/E7基因的人喉鳞癌细胞系,为进一步研究HPV16-E6/E7基因在喉癌细胞中的作用机制以及喉癌的基因治疗奠定了基础。

宫颈鳞状细胞癌及尖锐湿疣中HPV 16-E6、HPV16-E7蛋白的表达

使用免疫组化方法检测HPV16-E6、HPV16-E7蛋白在宫颈鳞状细胞癌及宫颈尖锐湿疣、外阴尖锐湿疣的情况，结果显示宫颈鳞状细胞癌、宫颈尖锐湿疣及外阴尖锐湿疣中HPV16-E6蛋白的表达分别为50％、0％、0％；HPV16-E7蛋白的表达分别为78.3％、68.4％、85.3％。宫颈鳞状细胞癌及尖锐湿疣中均有HPV16-E7蛋白表达，但同时发现低危型HPV感染中也表达HPV16-E7蛋白，原因尚须进一步研究。

p16^(INK4a)与HPV16/18-E6在宫颈组织中的表达及其临床意义

目的研究p16INK4a与HPV在不同宫颈组织中的表达及其临床意义,以寻求预测宫颈癌前病变及宫颈癌进展及预后的生物学标记。方法选取不同的宫颈组织,采用免疫组织化学方法检测宫颈组织上HPV16/18-E6和p16INK4a的表达,并结合临床资料进行分析。结果HPV16/18-E6和p16INK4a在正常宫颈组织、慢性宫颈炎组织和宫颈上皮内瘤变组织CIN I级上呈阴性表达或弱表达,在CINⅢ级和宫颈癌组织上表达明显增强(P<0.01)。p16INK4a在宫颈癌上的表达和宫颈癌的病理分化和肌层浸润程度有明显的相关性(P<0.01)。结论HPV16/18-E6和p16INK4a在宫颈CIN III和宫颈癌上的表达有明显的相关性。p16INK4a和HR-HPV联合检测可提高对宫颈癌前变及宫颈癌的早期诊断率。

HPV16-E6上调MIF对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的检测人乳头瘤病毒16型的致癌基因E6(HPV16-E6)通过巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。方法用HPV16-E6过表达和干扰质粒转染能分泌MIF的人宫颈癌细胞C33A、Si Ha和Caski。Western blot和荧光定量PCR法检测MIF蛋白和m RNA表达,并用ELISA法检测培养上清液中MIF蛋白量;将转染后的宫颈癌细胞与人巨噬细胞非接触性共培养,检测巨噬细胞中MIF表达;C33A转染HPV16-E6后加或不加MIF抑制剂,CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖、周期和凋亡情况;采用Pearson相关分析法分析HPV16-E6和MIF间的关系、Kaplan-Meier分析HPV16-E6对患者生存率的影响。结果癌细胞、上清液和巨噬细胞中MIF表达随HPV16-E6表达而上调(P<0.05);HPV16-E6过表达可诱导C33A细胞增殖、减少G0/G1期细胞和抑制细胞凋亡;抑制MIF后,细胞增殖率下降、凋亡率增加(P<0.05);HPV16-E6表达与MIF正相关(P<0.05),Kaplan-Meier分析显示HPV16-E6表达与患者总生存率和无进展生存率有关(P<0.05)。结论 HPV16-E6可诱导宫颈癌细胞及其微环境中巨噬细胞MIF表达,并可通过MIF诱导宫颈癌细胞增殖和抑制细胞凋亡而影响宫颈癌的预后。

HPV16-E6蛋白在宫颈病变组织中的表达及临床应用

目的:探讨16型人乳头瘤病毒(HPV16)E6蛋白在宫颈病变组织中的表达及其意义。方法:选择2009年12月～2010年12月于本院妇科门诊检查后临床诊断为宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CIN)、宫颈癌、宫颈正常的患者,分别为12例、20例、27例、10例,采用免疫组化SP法检测病变组织标本HPV16-E6蛋白表达情况。结果:HPV16-E6蛋白在正常宫颈上皮、宫颈炎、CIN、浸润性宫颈鳞癌中的阳性表达率分别为0(0/10)、33.3%(4/12)、45.0%(9/20)、66.6%(18/27),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。病变组织的HPV16-E6蛋白阳性表达率显著高于正常宫颈组织(P<0.05),其中宫颈癌的阳性表达率最高,显著高于宫颈炎和CIN。结论:HPV16-E6蛋白表达与宫颈病变有重要联系,HPV16-E6蛋白的检测可以作为宫颈癌前病变转归的指标。

HPV16-E6蛋白在宫颈病变中的研究进展

高危型HPV病毒持续感染是宫颈癌及其癌前病变的主要病因,病毒编码产生的致病HPV16-E6蛋白已成为目前妇科临床和基础研究的热点问题。现就HPV16-E6蛋白的生物学特性及其在宫颈病变中的近期研究发现和进展进行简要概述。

老年宫颈癌组织中人乳头状瘤病毒16-E6、p53 mRNA表达及其与放疗敏感性的相关性

目的分析老年宫颈癌组织中人乳头状瘤病毒(HPV)16-E6、p53 mRNA表达及其与放疗敏感性的关系。方法 40例宫颈癌患者均按计划进行根治性放射治疗前后采用实时定量反转录聚合酶链反应(PT-PCR)检测宫颈癌组织中HPV16-E6、p53 mRNA的表达水平,并根据治疗结果分为有效组29例和无效组11例,分析HPV16-E6、p53与放疗敏感性的关系。结果治疗总有效率为72.50%;放疗前后无效组2例HPV16-E6、p53 mRNA和蛋白差异无统计学意义(P>0.05),放疗前后有效组4例HPV16-E6 mRNA、p53 mRNA表达水平明显改善,HPV16-E6蛋白表达水平显著低于无效组,p53蛋白表达水平显著高于无效组(P<0.05)。结论 HPV16-E6感染、p53基因异常参与了老年宫颈癌发生、发展过程,检测HPV16-E6、p53 mRNA的表达可判断宫颈癌组织放疗敏感性。

pcDNA3/HPV16 E6真核表达质粒的构建及裸DNA注射动物实验观察

目的探讨ＨＰＶ１６Ｅ６基因ＤＮＡ诱发体液和细胞免疫反应的能力。方法利用基因工程技术构建了ＨＰＶ１６Ｅ６真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３／Ｅ６，脂质体法转染Ｃｏｓ７细胞，肌肉注射免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，免疫组化技术检测抗体产生及抗原表达。结果被转染的Ｃｏｓ７细胞表达ＨＰＶ１６Ｅ６蛋白免疫小鼠产生抗ＨＰＶ１６Ｅ６抗体。结论这一结果为ＨＰＶ１６相关宫颈癌治疗性ＤＮＡ疫苗的研制提供了资料。

宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16-E6基因整合／整合率与临床病理资料相关性分析

目的探讨宫颈癌组织中人乳头病毒（human papillomavirus，HPV）16-E6表达、HPV16-E6基因的整合／整合率与临床病理资料的相关性。方法采用免疫组化对76例宫颈癌组织中HPV16-E6的表达进行检测，采用q-PCR检测38例宫颈癌HPV16．E6整合。结果免疫组化结果显示，76例宫颈癌组织中，HPV16-E6阳性表达68．4％（52／76），并与组织学的分型（r=7．251，P=0．027）、淋巴结转移（x^2=8．120，P=0．004）及术前接受化疗（x^2=8．283，P=0．004）相关。q-PCR检测显示，HPV16-E6整合感染为63．2％（24／38），游离感染和混合感染分别为21．1％和15．7％，经过统计学分析，HPV16-E6基因整合与肿瘤侵袭的深度（x^2=6．358，P=0．042）、淋巴结转移（x^2=6．035，P=0．049）及有无化疗（x^2=10．107，P=0．006）相关，差异有统计学意义。结论HPV16-E6参与宫颈癌的发生发展，并在与宿主基因发生整合的过程中发挥着重要的作用，HPV16-E6整合／整合率是潜在的宫颈癌发生进展的预测因子，可为临床的诊治提供依据。

人乳头状瘤病毒16型E6/E7基因对人喉鳞癌细胞系表皮生长因子受体和基质金属蛋白酶9表达的影响

表皮生长因子受体（EGFR）和基质金属蛋白酶（MMP）9在肿瘤的侵袭和转移发生过程中发挥着重要作用，其表达上调能导致肿瘤的侵袭和转移潜能增强。人乳头状瘤病毒16（HPV16）为喉鳞癌的主要致病因素，其主要转化活性部位在E6和E7开放读码框架。我们采用脂质体转染技术将携带有HPV16-E6／E7DNA的真核表达质粒导入HPV阴性的Lscc-02喉鳞癌细胞系，使其在细胞中表达，研究其对Lscc-02喉鳞癌细胞系EGFR和MMP-9mRNA及蛋白表达的影响，探讨HPV16-E6／E7基因与喉鳞癌演进及预后的关系。