HPV DNA、HPV E6/E7蛋白和TCT在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌筛查中的价值

目的 探讨人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)DNA、HPV E6/E7蛋白和液基薄层细胞学检查(thin-prep cytology test,TCT)在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈癌筛查中的价值。方法 选取2021年7月至2022年6月于诸暨市人民医院妇科接受早期宫颈癌筛查的成年女性190例为研究对象,分别进行HPV DNA、HPVE6/E7蛋白及TCT检测,并进一步行阴道镜活检检查。比较不同病变患者的HPVDNA、HPVE6/E7蛋白和TCT对高级别病变的诊断效能。结果 CIN3及宫颈癌患者的HPV DNA、HPV E6/E7蛋白、TCT检查及三者联合检测的阳性率均显著高于宫颈炎患者(P<0.05),宫颈癌患者的HPV DNA、HPV E6/E7蛋白、TCT检查及三者联合检测的阳性率均显著高于CIN1患者(P<0.05)。CIN2+患者的HPV DNA、HPV E6/E7蛋白、TCT及三者联合检测的阳性率显著高于CIN1-患者。HPVDNA、HPVE6/E7蛋白、TCT三者联合诊断高级别病变的敏感度、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为90.80%、30.10%、52.32%、79.48%。结论 HPV DNA、HPV E6/E7蛋白及TCT可作为筛查宫颈癌和癌前病变的手段,且三者联合检测的敏感度最高。

DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测及HPV筛查在宫颈病变诊断中的价值

目的比较分析宫颈病变筛查中人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)DNA基因分型检测、DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测的价值。方法选取宫颈病变筛查者258例作为研究对象,均接受HPV DNA基因分型检测、HPV E6/E7 mRNA、DNA倍体定量分析及宫颈组织病理检查,对比DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测、HPV DNA基因分型检测与宫颈组织病理检查结果,统计分析DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测、HPV DNA基因分型检测的价值。以宫颈组织病理检查为金标准。结果DNA倍体定量分析的灵敏性为70.00%(42/60),特异性为77.27%(153/198),准确性为75.58%(195/258),阳性预测值为48.28%(42/87),阴性预测值为89.47%(153/171)。HPV E6/E7 mRNA检测的灵敏性为86.67%(52/60),特异性为59.60%(118/198),准确性为65.89%(170/258),阳性预测值为39.39%(52/132),阴性预测值为93.65%(118/126)。HPV DNA基因分型检测的灵敏性为95.00%(57/60),特异性为39.39%(78/198),准确性为52.33%(135/258),阳性预测值为32.20%(57/177),阴性预测值为96.30%(78/81)。HPV DNA基因分型检测的灵敏性、阴性预测值均高于DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测,特异性、准确性、阳性预测值均低于DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测(P<0.05),HPV E6/E7 mRNA检测的灵敏性、阴性预测值均高于DNA倍体定量分析,特异性、准确性、阳性预测值均低于DNA倍体定量分析(P<0.05)。结论宫颈病变筛查中HPV DNA基因分型检测的价值高于DNA倍体定量分析及HPV E6/E7 mRNA检测,值得应用。

男性尖锐湿疣患者尿道黏膜HPV6/11型DNA的检测

目的探讨男性尖锐湿疣患者尿道黏膜人乳头瘤病毒6/11型的感染情况。方法采用PCR荧光法对43例男性尖锐湿疣患者疣体和尿道黏膜进行HPV6/11型核酸定性、定量检测。同时对20例健康男性的尿道黏膜进行检测。结果患者疣体处检出阳性例数为37例(86.05%),同时尿道黏膜检测阳性例数为27例(62.79%),两者比较差异有统计学意义(P<0.05);尖锐湿疣患者尿道黏膜的阳性率明显高于健康男性(5.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。针对患者HPV6/11型定量检测结果显示:疣体的病毒载量为(6.90×107)±(3.87×108),而且不同的患者虽然病程长短有区别,但病毒载量却无明显差异;尿道黏膜的病毒载量为(4.51×106)±(1.23×107),与疣体的病毒载量差异无统计学意义。结论男性尖锐湿疣患者的尿道黏膜存在着HPV6/11型的亚临床或隐性感染。

应用荧光定量聚合酶链反应检测非典型尖锐湿疣HPV 6/11-DNA

目的探讨用FQ-PCR检测非典型尖锐湿疣HPV 6/11-DNA的可行性。方法采用FQ-PCR检测194例疑诊CA、107例单纯阴道炎、50例健康查体者的HPV6/11-DNA,同时对疑诊CA者进行病理组织学检测。结果194例疑诊CA样本,HPV 6/11-DNA的阳性率为77.83%(151/194),阳性标本DNA定量范围在1.4×10 cop ies/m l^1.78×107cop ies/m l,平均为1.27×106cop ies/m l;炎症组和正常对组均为0 copy/m l。病理组织学检测阳性率为70.10%(136/194),经χ2检验,FQ-PCR与病理组织学检测二者有显著性差异(χ2=4.787,P<0.05)。HPV6/11-DNA定量数值的高低与发病部位的多少有关(χ2=9.87,P<0.01),与CA的形态、大小、数量/部位及具体发病部位无关。结论FQ-PCR检测HPV 6/11-DNA,有助于正确判断尖锐湿疣和假性湿疣,HPV 6/11-DNA数值的高低可反应CA的严重程度。

尖锐湿疣及湿疣样病变中HPV6／11DNA原位杂交的观察

对４８例生殖道尖锐湿疣（ＣＡ）及湿疣样病变常规石蜡包埋组织切片进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６／１１型ＤＮＡ原位分子杂交及病理组织学观察，在１２例ＣＡ中９例（７５％）和湿疣样病变中１例（２．７％）检出ＨＰＶ６／１１ＤＮＡ，阳性细胞位于鳞状上皮中表层的凹空细胞及其周围细胞核内。在ＣＡ与湿疣样病变的鉴别诊断中，ＨＰＶ６／１１ＤＮＡ原位杂交检测具有重要的价值。

HPV-6/11 L1/E6、HPV-6/11 L1/E7嵌合DNA疫苗质粒的构建

目的 构建HPV 6 / 11L1/E6、HPV 6 / 11L1/E7预防、治疗性DNA疫苗质粒。方法 运用PCR扩增HPV 6 /11L1、E6、E7序列 ,PCR产物连接至pGEMT Easy质粒 ,测序鉴定正确后 ,分别连接至真核表达载体pVAX ,再用酶切、连接而构建成HPV 6 / 11L1 E6 /E7 pVAX质粒。运用电穿孔法将所获得质粒转染COS 7细胞 ,免疫组化检测蛋白表达情况。结果 所构建质粒的插入目的片段测序正确 ;免疫组化检测在胞浆胞核可见棕黄色点状阳性产物沉积。结论 所构建的HPV 6 / 11L1 E6 /E7 pVAX融合蛋白表达质粒可在体外表达L1 E6 /L1 E7蛋白 。

阴道炎患者HPV6/11-DNA定量分析

目的 了解女性阴道炎患者人乳头瘤病毒 6 / 11型 (HPV6 / 11)的感染情况。方法 荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)技术检测 2 5 8例门诊患者阴道分泌物中HPV6 / 11的病毒拷贝数。结果 共检出HPV6 / 11阳性者 94例 ,阳性率 36 .43 % ,拷贝数在 10 5以上者 78例 ,占阳性者中 82 .98% ,40岁以上年龄组阳性率高且病毒复制量均在10 5以上。结论 ①中老年阴道炎患者就诊晚 ,感染重。②FQ PCR检测HPV敏感、快速、准确 。

原位杂交Dig标记的HPV6B/11、16、18型DNA应用初探

原位杂交（ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｚａｔｉｏｎ，ＩＳＨ）技术是将重组核酸分子杂交技术与组织细胞化学及免疫组化结合起来，在组织细胞原位显示特定基因或病毒感染的ＤＮＡ或ｍＲＮＡ的表达、定位、半定量及变化规律的一种新兴技术。我们做的原位杂交Ｄｉｇ标记的ＨＰＶ...

比较HPV E6/E7 mRNA与HPV DNA检测用于宫颈癌前病变筛查的临床价值

分析宫颈癌前病变的筛查方法HPV E6/E7 mRNA与HPV DNA检测的临床价值,比较两种方法分别与细胞学联合检测的诊断性能。方法 收集2020年1月-2021年8月就诊于上海市嘉定区妇幼保健院分别行液基薄层细胞学(TCT)、HPV E6/E7 mRNA检测和HPV DNA检测的209例患者,最终以阴道镜组织活检结果为准,统计分析三种检测结果及宫颈活检结果的差异,探讨在宫颈癌前病变筛查中HPV E6/E7 mRNA检测与HPV DNA检测的价值。结果209例宫颈筛查女性中HPV E6/E7 mRNA阳性率在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL中逐渐的明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。TCT联合HPV E6/E7 mRNA检测无论在敏感性、特异性还是准确性方面都比TCT联合HPV DNA检测及其他三种检测方法高。TCT联合HPV E6/E7 mRNA 检测的曲线下面积(AUC) 为0.905, TCT联合HPV DNA 的曲线下面积(0.776)。结论TCT联合HPV E6/E7 mRNA检测应用于宫颈癌早期筛查具有更好的诊断价值,有利于减少阴道镜的转诊率和患者的负担。

HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA在宫颈细胞学诊断分流中的应用

目的比较人乳头瘤病毒(human papillomavirus;HPV)E6和E7 mRNA(E6/E7 mRNA)和HPV DNA检测在分流宫颈细胞学检查结果为意义不明确的非典型鳞状上皮细胞(ASCUS)患者中的应用价值。方法选取2021年3月~2022年1月浙江省杭州市妇产科医院共300例液基细胞学诊断为ASCUS的就诊患者作为研究对象。其中150例ASCUS患者行HPV DNA二代杂交捕获(HC2)检测,另外150例ASCUS患者行HPV E6/E7 mRNA检测。300例均接受阴道镜活检和病理学检查,并以阴道镜活检的病理结果作为金标准,分析HPV DNA HC2检测以及HPVE6/E7 m RNA检测结果与宫颈病变病理分级的相关性。结果150例ASCUS患者中HPV E6/E7 mRNA检测阳性122例,HPV DNA HC2检测阳性136例。HPV E6/E7 mRNA在ASCUS患者宫颈脱落细胞中的阳性率随宫颈病变程度增加而增加,且与宫颈病变病理结果密切相关(χ^(2)=12.5,P=0.002)。与HPV DNA HC2检测相比,HPV E6/E7 mRNA检测具有较高的敏感度(95.0%)、特异度(27.8%)、阳性预测值(46.7%)、阴性预测值(89.3%)和诊断符合率(53.3%)。结论HPV E6/E7 mRNA检测阳性率与宫颈病变程度密切相关。HPV E6/E7 mRNA检测对ASCUS人群的分流效果优于HPV DNA HC2检测,可作为细胞学ASCUS人群的有效分流手段,降低阴道镜转诊率的同时有效降低宫颈病变的漏诊率。

电灼联合斑蝥素治疗对尖锐湿疣患者疗效分析及皮损HPV6/11型DNA载量的影响

目的观察电灼联合斑蝥素疗法对尖锐湿疣(CA)患者疗效及分析皮损HPV6/11 DNA载量的变化。方法纳入广州医科大学附属第四医院皮肤科门诊60例CA患者,随机分为对照组和观察组,各30例。对照组电灼治疗,观察组电灼祛除疣体后,联合斑蝥素乳膏治疗。检测治疗前及治疗后第2、8周的HPV6/11型DNA载量并比较两组的临床治疗效果。结果治疗后第8周的观察组的HPV6/11型DNA载量较对照组的低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗总有效率上,观察组显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组的复发率低于照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论电灼联合斑蝥素可有效降低CA患者HPV6/11 DNA载量,治疗效果优于单独电灼疗法,复发更少。

不同宫颈病变组织HPV6/11、HPV16/18、p53、Ki67表达的临床意义

目的 探讨人乳头状病毒（HPV）6/11、HPV 16/18、p53、Ki67表达与宫颈病变的关系及临床意义.方法 应用原位杂交及免疫组化技术,检测150例不同宫颈病变患者宫颈组织的HPV 6/11、HPV 16/18、p53、Ki67表达.结果 在宫颈良性病变、恶性病变及正常对照组织中,4个检测指标比较均有统计学差异（P均＜0.05）;在宫颈尖锐湿疣、炎症病变、宫颈上皮内瘤变Ⅰ～Ⅱ中,HPV 6/11、p53、Ki67表达阳性率比较均有统计学差异（P＜0.01或＜0.05）;p53表达在正常组织与良性病变中有统计学差异（P＜0.05）;HPV 16/18在良、恶性病变中有统计学差异（P＜0.01）.结论 在正常宫颈组织向恶性病变发展中,HPV 16/18、Ki67表达逐渐增强,p53表达逐渐降低;HPV 6/11在宫颈尖锐湿疣病变中高表达,在宫颈正常组织、恶性病变中表达较低.对宫颈活检时行HPV 6/11、HPV 16/18、p53、Ki67检测,有助于宫颈恶性病变的早期诊断.

HPV E6/E7 mRNA与HPV DNA检测在宫颈癌早期筛查中的临床价值

目的分析不同病变程度的宫颈病变患者高危型人乳头瘤病毒(HPV)DNA和高危型HPV E6/E7 m RNA表达阳性率及拷贝数的差异,评估两者对宫颈癌早期筛查的临床价值。方法收集天津市中心妇产科医院2014年因宫颈疾患行阴道镜下宫颈活检的154例患者资料和因其他良性妇科疾患行全子宫切除术的32例患者资料(对照组),154例根据宫颈活检病理结果分为宫颈上皮内瘤变低级别组(51例)、高级别组(71例)及宫颈浸润癌组(32例)。应用杂交捕获技术(HC2)HPV DNA检测和荧光定量杂交捕获技术HPV E6/E7 m RNA检测进行定量测定,并对全部患者的术后或宫颈活检石蜡标本进行E6/E7蛋白免疫组化检测。结果 HC2 HPV DNA检测和HPV E6/E7m RNA检测显示对照组阳性率低于各级别病变组(P<0.05),高危型HPV E6/E7 m RNA检测的拷贝数随着病变级别的加重而明显增高,而HC2 HPV DNA检测的拷贝数不随病变级别的加重而改变。高级别组及宫颈浸润癌组患者中,高危型HPV E6/E7 m RNA检测拷贝数>10 000的患者比例明显增多。免疫组化结果显示对照组E6/E7阳性率低于各级别病变组,高级别组、宫颈浸润癌组的E6/E7阳性率高于低级别组(均P<0.05)。结论 HPV E6/E7 m RNA的表达及拷贝数的测定与宫颈病变程度密切相关,是宫颈癌早期筛查的有效措施之一,HPV DNA检测结果为阴性时,其排除疾病意义更高,而m RNA检测结果为阳性时,其预测疾病发生及进展的价值更好,两者结合使用有利于综合评价发生宫颈病变的风险。

高危HPVE6/E7mRNA与HPV DNA检测对宫颈病变诊断及风险评估的价值

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)E6/E7mRNA检测在宫颈病变筛查及风险评估中的临床价值。方法选取妇科门诊就诊宫颈癌筛查者415例,年龄21~72岁,行HR-HPVE6/E7mRNA和HR-HPV DNA检测并结合细胞病理学分级和组织病理学诊断进行统计分析。结果随着细胞学和组织病理学分级升高,HR-HPVE6/E7mRNA和HR-HPV DNA检测阳性率呈逐渐升高趋势,两者总检出率差异均有统计学意义(P<0.01)。对于≥CINⅡ级宫颈病变的检测HR-HPVE6/E7mRNA临床灵敏度低于HRHPV DNA(P>0.05)。HR-HPVE6/E7mRNA临床特异度、阳性预测值、准确度均高于HR-HPV DNA(P<0.01)。HR-HPVE6/E7mRNA阴性预测值低于HR-HPV DNA(P>0.05)。结论将HR-HPVE6/E-7mRNA做为二线筛查指标,可更有效地检出高级别上皮内瘤变及宫颈癌,降低一过性HPV感染检出率,对宫颈病变诊断及风险评估具有明显的指导意义。

外阴恶性肿瘤中P21^(WAF1/CIP1) P53及HPV6/11 HPV16/18的检测和意义

目的 探讨P2 1WAF1/CIP1,P5 3及HPV6/11,16/18与外阴恶性肿瘤的关系。方法 P2 1WAF1/CIP1,P5 3用免疫组化SP法检测 ;HPV6/11,16/18用原位杂交法 (ISH)检测。结果 P2 1WAF1/CIP1,P5 3在外阴恶性肿瘤组、外阴上皮内瘤变 (VIN)组、正常对照组中的阳性检测率分别为 40 .0 0 % (12 /3 0 )、63 .3 3 % (19/3 0 ) ,5 2 .3 8% (11/2 1) ,47.62 % (10 /2 1) ,0 (0 /10 )和 0 (0 /10 ) ;外阴病变各组P2 1WAF1/CIP1,P5 3与正常组比较差异均有显著性 (P均 <0 .0 5 ) ;HPV6/11、16/18在外阴恶性肿瘤组、VIN组中的阳性检测率分别为 60 .0 0 % (18/3 0 )和 3 3 .3 3 % (10 /3 0 ) ,42 .86% (9/2 1)和 2 8.5 7% (6/2 1) ,正常对照组没有检测出 ;HPV 6/11阳性率外阴恶性肿瘤组、VIN组与正常组比较差异均有显著性 (P均 <0 .0 5 ) ;外阴恶性肿瘤组HPV16/18阳性率与正常组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 P2 1WAF1/CIP1P5

FQ-PCR方法检测女性CA患者HPV_(6、11)和HPV_(16、18)的实验研究

目的:探讨女性尖锐湿疣(CA)患者HPV6、11型和HPV16、18型的感染情况。方法:采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测216例女性CA患者疣体组织或分泌物中的HPV6、11型和HPV16、18型。结果:HPV6、11型阳性率为94.91%(205/216),HPV16、18型阳性率为16.20%(35/216),HPV6、11型和HPV16、18型同时阳性的感染率为12.50%(27/216)。定量测定结果显示,HPV6、11型患者病毒载量最高1.0×108 copies/ml,最低2.8×103copies/ml;HPV16、18型患者病毒载量最高1.0×108 copies/ml,最低2.57×104 copies/ml。结论:FQ-PCR技术具有灵敏、简捷、安全、特异性强的特点,避免了单纯PCR扩增产生的假阳性。女性尖锐湿疣患者应用此方法检测HPV阳性率高,可以快速区分高危型及低危型的HPV感染,有助于对尖锐湿疣的复发和癌变作出可能性预测。

HPV611相关尖锐湿疣皮损中P53和P21蛋白的表达

目的 : 了解P5 3和P2 1在HPV6 11相关尖锐湿疣 (CA)皮损中的表达和意义。方法 : 用免疫组化SP法检测经PCR法证实HPVDNA6 11阳性的 2 7例CA皮损和 10例正常皮肤。结果 : (1)CA皮损基底细胞和棘细胞表达P5 3较正常皮肤显著增加 ;(2 )CA皮损棘细胞表达P2 1与正常皮肤无显著差异。结论 : (1)P5 3可能刺激和促进HPV6 11相关CA皮损的细胞增殖 ;(2 )P2

多重PCR技术检测宫颈癌组织中HPV16、18和11/6E_6基因的研究

目的 :研究宫颈癌发病与 HPV16、18E6基因的关系。方法 :采用多重 PCR技术检测 83例宫颈癌组织中 HPV16、18及 11/ 6 E6基因。结果 :( 1)新疆地区 36例宫颈癌中 HPV E6基因检出率为 86 .11% ( 31/ 36 ) ,其中HPV16 E6占构成比 80 .5 6 % ( 2 5 / 31)。 ( 2 )山西地区宫颈癌中 HPV DNA阳性检出率 5 1.0 6 % ( 2 4/ 47) ,其中HPV16 E6占构成比 5 0 .0 0 % ( 12 / 2 4)。 ( 3)两组 HPV E6阳性检出率比较 P <0 .0 1,差异有显著性。两组 HPV16E6构成比比较 ,P >0 .0 5 ,差异无显著性。结论 :宫颈癌发生与 HPV感染的关系密切 ,且新疆地区比山西地区更为密切。两组 HPV感染以