人乳头瘤病毒DNA、E6/E7 mRNA及液基薄层细胞学检查对女性宫颈癌的筛查价值

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA、E6/E7 mRNA及液基薄层细胞学检查(TCT)对女性宫颈癌的筛查价值。方法选取28021例体检女性,均接受HPV DNA、E6/E7 mRNA和TCT单项或多项检测,记录HPV DNA、E6/E7 mRNA、TCT单独及联合检测对宫颈癌的检出情况。以组织活检结果为金标准,评估HPV DNA、E6/E7 mRNA、TCT单独或联合检测对宫颈癌的筛查价值。结果TCT、HPV DNA、E6/E7 mRNA对宫颈癌的检出率分别为8.8%、26.9%、29.7%。各方法单独检测时,TCT单独检测筛查宫颈癌的特异度最高(85.53%),但灵敏度最低(28.44%),HPV DNA单独检测筛查宫颈癌的灵敏度最高(60.25%)。两种方法联合检测时,HPV DNA+E6/E7 mRNA联合检测筛查宫颈癌的灵敏度最高(81.75%),特异度最低(26.34%),TCT+HPV DNA联合检测筛查宫颈癌的特异度(61.08%)和阴性预测值(57.11%)最高,任意两种方法联合检测筛查宫颈癌的灵敏度、特异度比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。TCT+HPV DNA+E6/E7 mRNA联合检测筛查宫颈癌的灵敏度、特异度与HPV DNA+E6/E7 mRNA检测比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05),但灵敏度高于TCT+E6/E7 mRNA联合检测,特异度低于TCT+E6/E7 mRNA联合检测,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论HPV DNA检测适合作为女性健康体检者宫颈癌筛查的首选方法,E6/E7 mRNA与TCT检测可作为宫颈癌进一步检查的优选。HPV DNA+E6/E7 mRNA联合检测具有较高的灵敏度和阳性预测值,可作为年轻女性宫颈癌筛查的优选方案,联合检测对提高阳性率及降低假阳性率有帮助。

高危HPVE6/E7mRNA与HPV DNA检测对宫颈病变诊断及风险评估的价值

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)E6/E7mRNA检测在宫颈病变筛查及风险评估中的临床价值。方法选取妇科门诊就诊宫颈癌筛查者415例,年龄21~72岁,行HR-HPVE6/E7mRNA和HR-HPV DNA检测并结合细胞病理学分级和组织病理学诊断进行统计分析。结果随着细胞学和组织病理学分级升高,HR-HPVE6/E7mRNA和HR-HPV DNA检测阳性率呈逐渐升高趋势,两者总检出率差异均有统计学意义(P<0.01)。对于≥CINⅡ级宫颈病变的检测HR-HPVE6/E7mRNA临床灵敏度低于HRHPV DNA(P>0.05)。HR-HPVE6/E7mRNA临床特异度、阳性预测值、准确度均高于HR-HPV DNA(P<0.01)。HR-HPVE6/E7mRNA阴性预测值低于HR-HPV DNA(P>0.05)。结论将HR-HPVE6/E-7mRNA做为二线筛查指标,可更有效地检出高级别上皮内瘤变及宫颈癌,降低一过性HPV感染检出率,对宫颈病变诊断及风险评估具有明显的指导意义。

HPV16 E6、E7多表位DNA疫苗的构建及免疫效果评估

目的构建和评价HPV16 E6、E7多表位DNA疫苗诱导的特异性CTL细胞应答及其对肿瘤生长的干预作用,从而揭示其作为候选HPV治疗性疫苗的潜能。方法首先通过IEDB网站中的MHC I Processing Predictions和MHC I Binding Predictions方法,分别预测人类HLA-A^(*)02:01、HLA-A^(*)11:01、HLA-A^(*)24:02和C57BL/6小鼠H-2b的限制性CTL表位,然后根据评分以及ELISPOT实验筛选出二者共同呈递的CTL表位,并将其构建成多表位DNA疫苗(pVAX1-10P)。从预防性和治疗性二个方面研究pVAX1-10P对小鼠移植TC-1异位癌的免疫干预作用,流式细胞术检测特异性CTL应答。结果获得10条可被人与鼠MHC分子共呈递的CTL表位,ELISPOT结果表明这10条CTL表位均能诱导小鼠淋巴细胞产生特异性免疫应答;由此构建的多表位DNA疫苗pVAX1-10P无论在预防性实验还是治疗性实验中,均能诱导特异性的细胞免疫并抑制肿瘤的生长。结论构建的HPV16 E6、E7多表位DNA疫苗pVAX1-10P能够诱导特异性CTL应答,显著抑制肿瘤生长,有望作为候选HPV治疗性DNA疫苗。

HPV DNA、HPV E6/E7蛋白和TCT在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌筛查中的价值

目的 探讨人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)DNA、HPV E6/E7蛋白和液基薄层细胞学检查(thin-prep cytology test,TCT)在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈癌筛查中的价值。方法 选取2021年7月至2022年6月于诸暨市人民医院妇科接受早期宫颈癌筛查的成年女性190例为研究对象,分别进行HPV DNA、HPVE6/E7蛋白及TCT检测,并进一步行阴道镜活检检查。比较不同病变患者的HPVDNA、HPVE6/E7蛋白和TCT对高级别病变的诊断效能。结果 CIN3及宫颈癌患者的HPV DNA、HPV E6/E7蛋白、TCT检查及三者联合检测的阳性率均显著高于宫颈炎患者(P<0.05),宫颈癌患者的HPV DNA、HPV E6/E7蛋白、TCT检查及三者联合检测的阳性率均显著高于CIN1患者(P<0.05)。CIN2+患者的HPV DNA、HPV E6/E7蛋白、TCT及三者联合检测的阳性率显著高于CIN1-患者。HPVDNA、HPVE6/E7蛋白、TCT三者联合诊断高级别病变的敏感度、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为90.80%、30.10%、52.32%、79.48%。结论 HPV DNA、HPV E6/E7蛋白及TCT可作为筛查宫颈癌和癌前病变的手段,且三者联合检测的敏感度最高。

宫颈HPVE6/E7检测联合计算机辅助诊断TCT及阴道炎检测在宫颈细胞学筛查中的应用价值

目的 分析宫颈人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7检测联合计算机辅助诊断宫颈液基细胞学(TCT)及阴道炎检测在宫颈细胞学筛查中的应用价值。方法 采用宫颈HPVE6/E7检测、计算机辅助诊断TCT、阴道炎检测法和阴道炎+TCT+HPVE6/E7检测对2023年2~8月在北京市昌平区中西医结合医院检查的1 586例女性进行宫颈癌筛查,发现181例疑似高级别鳞状上皮内病变(HSIL)病例,对疑似“HSIL”追加病理检查,并以病理检查作为金标准,分析上述筛查4种方法对HSIL的检出率及病理检查结果的一致性,并计算4种筛查方法对HSIL诊断的灵敏度和特异度。结果 181例疑似HSIL患者经病理检查发现共86例HSIL患者。阴道炎检测对HSIL的检出率为16.57%,Kappa值为0.488。计算机辅助诊断TCT检测对HSIL的检出率为24.86%,Kappa值为0.554。宫颈HPVE6/E7检测对HSIL的检出率为19.34%,Kappa值为0.512。阴道炎+TCT+HPVE6/E7检测对HSIL的检出率为38.67%,Kappa值为0.742。阴道炎+TCT+HPVE6/E7检测的AUC值>0.85,预测价值较高,灵敏度、特异度分别为81.40%、84.21%;阴道炎检测、TCT检测、HPVE6/E7检测的AUC值均>0.70,预测价值一般,各检测方法灵敏度、特异度分别为34.88%、52.63%,52.33%、61.05%,40.70%、64.21%。结论 宫颈HPVE6/E7、计算机辅助诊断TCT及阴道炎检测联合筛查可在一定程度上提升宫颈病变的检出率,对宫颈病变诊断具有明显指导意义。

DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测及HPV筛查在宫颈病变诊断中的价值

目的比较分析宫颈病变筛查中人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)DNA基因分型检测、DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测的价值。方法选取宫颈病变筛查者258例作为研究对象,均接受HPV DNA基因分型检测、HPV E6/E7 mRNA、DNA倍体定量分析及宫颈组织病理检查,对比DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测、HPV DNA基因分型检测与宫颈组织病理检查结果,统计分析DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测、HPV DNA基因分型检测的价值。以宫颈组织病理检查为金标准。结果DNA倍体定量分析的灵敏性为70.00%(42/60),特异性为77.27%(153/198),准确性为75.58%(195/258),阳性预测值为48.28%(42/87),阴性预测值为89.47%(153/171)。HPV E6/E7 mRNA检测的灵敏性为86.67%(52/60),特异性为59.60%(118/198),准确性为65.89%(170/258),阳性预测值为39.39%(52/132),阴性预测值为93.65%(118/126)。HPV DNA基因分型检测的灵敏性为95.00%(57/60),特异性为39.39%(78/198),准确性为52.33%(135/258),阳性预测值为32.20%(57/177),阴性预测值为96.30%(78/81)。HPV DNA基因分型检测的灵敏性、阴性预测值均高于DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测,特异性、准确性、阳性预测值均低于DNA倍体定量分析、HPV E6/E7 mRNA检测(P<0.05),HPV E6/E7 mRNA检测的灵敏性、阴性预测值均高于DNA倍体定量分析,特异性、准确性、阳性预测值均低于DNA倍体定量分析(P<0.05)。结论宫颈病变筛查中HPV DNA基因分型检测的价值高于DNA倍体定量分析及HPV E6/E7 mRNA检测,值得应用。

高危型HPVE6/E7 mRNA检测在HPV DNA阳性患者中的临床意义

目的:探讨高危型人乳头状瘤病毒(high risk human papilloma virus,HR-HPV)E6/E7 mRNA检测在HPV病毒感染患者中的临床价值和意义。方法:选取2017年1—6月在宫颈疾病诊治中心进行宫颈机会性筛查,且HPV DNA检测阳性病例200例,分别行HPVE6/E7 mRNA检测和阴道镜下的宫颈活组织检查,分析病毒阳性患者中E6/E7 mRNA的检出率以及不同病理诊断中E6/E7 mRNA的表达情况。结果:200例HPV DNA阳性患者中,HPVE6/E7 m RNA检出率为60.0%。病理学诊断高度鳞状上皮内病变(HSIL)以上,E6/E7 mRNA阳性表达最高,与正常组或低度鳞状上皮内病变(LSIL)组均有明显差异,并且E6/E7 m RNA检测的敏感度和阴性预测值较高,分别为97.9%和98.8%(P <0.05)。病理学诊断≤LSIL,E6/E7 mRNA阳性率较低,敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值都不高。结论:HPVE6/E7 mRNA基因检测可用于HPV DNA阳性患者的分流,避免过度治疗,减轻患者心理负担。HPVE6/E7 mRNA阳性表达在宫颈筛查中对高级别病变的诊断具有临床价值。

HPVE6/E7mRNA和HPV-DNA检测在宫颈癌筛查中的价值

目的:探讨高危型人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA和HPV-DNA检测在宫颈癌筛查中的价值。方法:选取975名行宫颈癌筛查并获得病理结果者为研究对象,均行HPVE6/E7mRNA和HPV-DNA检测。分析不同组织病理学分级中HPVE6/E7mRNA与HPV-DNA检测结果的阳性率;以病理检测结果为金标准,评价HPV E6/E7mRNA、HPV-DNA检测及两者联合检测诊断上皮细胞内瘤变(CIN)≥Ⅰ级的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及准确性。结果:随着组织病理学级别的升高,HPVE6/E7mRNA、HPV-DNA阳性率均呈逐渐上升的趋势(P<0.05)。对≥CINⅠ的诊断,HPVE6/E7mRNA检测的特异性、阳性预测值及准确性均高于HPV-DNA检测(P<0.05);敏感性低于HPV-DNA检测(P<0.05);两种检测方法的阴性预测值无统计学差异(P>0.05)。两者联合检测的敏感性及阴性预测值高于两者单独检测(P<0.05)。结论:HPVE6/E7mRNA和HPV-DNA检测对宫颈癌的筛查均有指导价值,HPVE6/E7mRNA检测辅助HPV-DNA检测使用,可弥补HPV-DNA检测特异性、阳性预测值等不足,提高诊断效能。

孕产妇宫颈病变筛查中高危HPVE6/E7mRNA与HPV DNA检测的临床价值

目的:研究高危HPVE6/E7mRNA检测与HPV DNA检测在孕产妇宫颈病变筛查中的临床价值。方法:选择2018年6月—2019年6月在本院接受治疗的伴有宫颈病的孕产妇64例,以宫颈病理结果为依据,对不同级别宫颈病变中者分别进行HPV E6/E7 mRNA和HPV DNA检测,比较两种检测方法效能。结果:检出慢性炎症、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ以及宫颈癌的阳性率,HPVE6/E7mRNA检测与HPV DNA检测无差异,总阳性率HPVE6/E7mRNA检测(53.1%)与HPV DNA检测(59.4%)无差异(均P>0.05)。两种检测的一致性慢性炎症与CIN分别为80.8%和85.2%,宫颈癌为81.8%,其κ值分别为0.42、0.56、0.81。两种检测的特异性HPV DNA(60.2%)低于HPVE6/E7mRNA(85.2%)(P<0.05),敏感性、阳性预测值及阴性预测值无差异(P>0.05)。结论:相比HPV NDA检测,HPVE6/E7mRNA检测能更好预测孕产妇宫颈病变进展,特别是针对高级别宫颈病变的特异性更强。

HPVE6，E7mRNA，HPVDNA，TCT检测用于早期宫颈病变筛查诊断治疗的比较

目的探讨HPVE6／E7mRNA、HPVDNA、TCT检测在早期宫颈病变筛查诊断治疗中的应用比较。方法对妇科临床诊断为宫颈病变的218例患者行HPVE6，E7mRNA、HPVDNA、TCT检测，进行宫颈痛变筛查诊断，根据细胞学诊断阳性及HPVE6／E7mRNA、HPVDNA检测为阳性的病例进行阴道镜活检。结果218例诊断为盆腔炎、慢性宫颈炎的样本，HPVE6／E7mRNA阳性检出率为26．6％．HPVDNA阳性检出率为16．0％，TCT阳性检出率为5．04％。HPVE6／E7mRNA阳性样本组织学检查阳性率为8．25％，HPVD—NA阳性样本组织学检查阳性率为3．7％．TCT阳性样本组织学检查阳性率为5．1％。HPVE6，E7mRNA转录物（Copies）值在100～1000Copies的样本，组织学诊断阳性率为2．0％，转录物（Copies）值在1000—3000Copies的样本，组织学诊断阳性率为61．5％，转录物（Copies）值在3000—5000Copies的样本，组织学诊断阳性率为100％，转录物（Copies）值在5000—20000Copies的样本，组织学诊断阳性率为100％。结论行宫颈细胞HPVE6／E7mRNA检测是对妇科早期宫颈病变的疾病患者筛查诊断的最佳选择，HPVE6／E7mRNA检测为临床防治宫颈癌变提供更可靠早的科学依据。

HPV E6/E7 mRNA与HPV DNA检测在宫颈癌早期筛查中的临床价值

目的分析不同病变程度的宫颈病变患者高危型人乳头瘤病毒(HPV)DNA和高危型HPV E6/E7 m RNA表达阳性率及拷贝数的差异,评估两者对宫颈癌早期筛查的临床价值。方法收集天津市中心妇产科医院2014年因宫颈疾患行阴道镜下宫颈活检的154例患者资料和因其他良性妇科疾患行全子宫切除术的32例患者资料(对照组),154例根据宫颈活检病理结果分为宫颈上皮内瘤变低级别组(51例)、高级别组(71例)及宫颈浸润癌组(32例)。应用杂交捕获技术(HC2)HPV DNA检测和荧光定量杂交捕获技术HPV E6/E7 m RNA检测进行定量测定,并对全部患者的术后或宫颈活检石蜡标本进行E6/E7蛋白免疫组化检测。结果 HC2 HPV DNA检测和HPV E6/E7m RNA检测显示对照组阳性率低于各级别病变组(P<0.05),高危型HPV E6/E7 m RNA检测的拷贝数随着病变级别的加重而明显增高,而HC2 HPV DNA检测的拷贝数不随病变级别的加重而改变。高级别组及宫颈浸润癌组患者中,高危型HPV E6/E7 m RNA检测拷贝数>10 000的患者比例明显增多。免疫组化结果显示对照组E6/E7阳性率低于各级别病变组,高级别组、宫颈浸润癌组的E6/E7阳性率高于低级别组(均P<0.05)。结论 HPV E6/E7 m RNA的表达及拷贝数的测定与宫颈病变程度密切相关,是宫颈癌早期筛查的有效措施之一,HPV DNA检测结果为阴性时,其排除疾病意义更高,而m RNA检测结果为阳性时,其预测疾病发生及进展的价值更好,两者结合使用有利于综合评价发生宫颈病变的风险。

HPVE6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的意义

目的探讨人类乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA检测在HPV感染阳性和液基细胞学结果异常的妇女宫颈癌筛查中的诊断性能。方法收集2013年8月-2015年6月在新疆维吾尔自治区人民医院体检中心、门诊行宫颈癌筛查的妇女6 800人,采取宫颈脱落细胞学(thinprep cytology test,TCT)检查和HPV DNA检测(hybird capture,HC-2)联合筛查,本研究选取细胞学或HPV检测结果异常的197例女性作为研究对象,对其进行宫颈HPVE6/E7mRNA检测和组织病理学检查,其中101例行HPV DNA分型检测,以病理学诊断为金标准,比较HPV DNA分型检测和HPVE6/E7mRNA检测的准确性,以及两者的并联、串联试验诊断高级别宫颈病变的准确性。结果病理学检查示,慢性宫颈炎患者80例,其中CINⅠ级16例、CINⅡ～Ⅲ级50例,宫颈癌患者51例。HPVE6/E7mRNA诊断宫颈高级别病变的ROC曲线下面积为74.95,灵敏度为85.515%,特异度为66.67%,约登指数为0.139,阳性似然比为2.555,阴性预测为81.0%,阳性预测为72.9%,均高于HPV DNA分型的诊断试验;HPVE6/E7mRNA诊断宫颈高级别病变的阴性似然比为0.222,低于HPV DNA分型的0.683,验后概率为72.9%,高于HPV DNA分型的64.6%;HPVE6/E7mRNA诊断高级宫颈病变的临床性能试验优于HPV DNA分型检测的诊断试验。两者单独检验的一致性较差(Kappa=0.1998)。结论宫颈癌的筛查手段可以选择HPVE6/E7mRNA检测,HPVE6/E7mRNA检测和HPV DNA检测、细胞学联合运用,可以提高诊断准确性。

HPV DNA和E6/E7 mRNA检测对宫颈病变诊断价值比较研究

目的评价高危HPVE6/E7mRNA在宫颈病变中的临床价值。方法将70例低度宫颈病变(慢性宫颈炎),子宫颈上皮内瘤变(CINI级)和78例高级别宫颈病变(包括CINⅡ级CINⅢ级和宫颈浸润性癌)分为两组。低度宫颈病变为对照组,高级别宫颈癌组为实验组。分别进行HPV DNA分型和HPV E6/E7 mRNA检测。结果低度子宫颈病变和高度子宫颈病变的阳性率分别为14.2%和79.5%。HPV DNA分型检测结果,低度子宫颈病变和高度子宫颈病变的阳性率分别为35.7%和85.7%。高风险HPV E6/E7 mRNA检测特异性,阳性预测值,阴性预测值(85.8%,86.1%,83.5%)显着高于(64.3%,70.5%,71.4%),差异有统计学意义。结论高危HPV E6/E7 mRNA检测有效降低了临床诊断中的过度检查和过度治疗的机会,避免了患者因高频重复感染引起的经济负担和精神压力。

HPVE6/E7mRNA和HPV-DNA检测在宫颈癌筛查中的作用

对 HPV-DNA和 HPVE6/E7 mRNA在宫颈癌筛查中的作用进行分析。方法 从我院收治的宫颈癌患者(2020.4-2022.4)中,选择320例人乳头瘤病毒(HPV)感染患者作为本次研究的对象,依据病理组织分级,将患者分为宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ组(168例)、CINⅡ组(80例)、CINⅢ组(52例)、宫颈癌组(20例),另选择同期病理检查结果确诊为炎症的60例患者作为对照组,分别对其开展HPVE6/E7mRNA、HPV-DNA检测,分析两种检测方法在不同组织病理学中的阳性检出率,并以病理检查为诊断金标准,分析其检测效能。结果 与对照组相较,CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组、宫颈癌组的HPVE6/E7 mRNA阳性率和HPV-DNA阳性率均显著较高(P<0.05)。与对照组相较,CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组、宫颈癌组E6、E7表达的阳性率均显著较高(P<0.05)。与HPVE6/E7 mRNA、HPV-DNA单一检测相较,HPVE6/E7 mRNA+HPV-DNA联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确率均明显较高(P<0.05)。结论 HPVE6/E7与HPV-DNA联合检测在宫颈癌筛查中具有较高的灵敏度和特异度,可有效提升检测的准确率。

HPVE6/E7mRNA联合P16Ki-67预测低级别宫颈鳞状上皮的临床价值评估

目的:探讨HPVE6/E7mRNA联合P16Ki-67预测低级别宫颈鳞状上皮的临床价值。方法:选取2017年1月-2019年4月在本院进行妇科检查的低级别宫颈鳞状上皮病变患者220例,以宫颈病理学为标准,对患者进行HPVE6/E7mRNA检测、P16Ki-67双染色及联合检测,比较P16Ki-67与HPVE6/E7mRNA的阳性检测率以及单一检测与联合检测对高级别宫颈鳞状上皮病变及以上患者的诊断效能。结果:HPVE6/E7mRNA宫颈炎、LSIL检测阳性率分别为13.64%、22.34%,P16Ki-67宫颈炎、LSIL检测阳性率分别为4.55%、10.64%,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。HPVE6/E7mRNA HSIL、宫颈癌检测阳性率分别为80.00%、100%,P16Ki-67 HSIL、宫颈癌检测阳性率分别为77.14%、100%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合检测灵敏度明显高于单一检测,比较差异有统计学意义(P<0.05),且联合检测约登指数较高,且特异性较高,其综合性最强。结论:HPVE6/E7mRNA联合P16Ki-67能够更好预测低级别宫颈鳞状上皮病变的进展,且针对高级别宫颈病变具有更强的敏感性,减少阴道镜转诊率,有效避免了因短暂性HPV感染的过度治疗,从而降低了监测以及治疗成本。

TCT与HPVE6/E7mRNA定量检测宫颈上皮内瘤变的价值分析

目的 TCT与HPVE6/E7m RNA定量检测应用在宫颈上皮内瘤变诊断中的应用价值。方法以我院2016年1~12月TCT确诊为宫颈上皮内瘤变的75例患者为研究对象,再予以HPVE6/E7m RNA拷贝数定量检测,对比分析检测结果,探究临床诊断应用价值。结果 >ASC-H组阳性率明显高于≤ASC-H组,组间对比差异明显(P<0.05);>ASC-H组患者HPVE6/E7m RNA拷贝数明显高于≤ASC-H组,对比差异明显(P<0.05)。结论宫颈上皮内瘤变与HPVE6/E7m RNA密切相关,阳性率及拷贝数能够反应病情进展情况,为临床诊断及治疗提供科学指导。

融合DNA疫苗CRT180/HPV6E7的构建及其免疫学特性研究

目的构建融合DNA疫苗CRT180/HPV6E7,并评价其体外实验和动物模型上的免疫学特性,尤其是抗病毒致病基因的特异性细胞免疫反应。方法分别构建DNA重组体pcDNA3.1-CRT180/HPV6E7,pcDNA3.1-CRT180,pcDNA3.1-HPV6E7。将pcDNA3.1-HPV6E7质粒经脂质体介导转染B16细胞,以G418筛选阳性细胞集落,荧光显微镜观察和RT-PCR鉴定表达HPV6E7的阳性细胞株。将质粒DNA肌注免疫C57BL/6小鼠,3次后取全血经流式细胞仪检测T细胞亚群的变化,LDH法检测小鼠的脾细胞和淋巴细胞与靶细胞B16/HPV6E7孵育后的CTL活性以及ELISA法检测共孵育上清中IL-2和IFN-γ浓度的变化。结果各组质粒经鉴定表明构建正确。转染后细胞株稳定表达HPV6E7。DNA疫苗免疫小鼠后,pcDNA3.1-CRT180/HPV6E7免疫组较pcDNA3.1-HPV6E7免疫组的外周血CD8+T细胞和TCRγδT细胞的比例显著增加,脾细胞和淋巴细胞针对靶细胞B16/HPV6E7的CTL杀伤活性更明显,分泌IL-2和IFN-γ的水平升高(P<0.05)。结论CRT180与HPV致病基因6E7相连的重组质粒疫苗pcDNA3.1-CRT180/HPV6E7能引发小鼠T细胞亚群CD8+分化并诱导出显著的特异性CTL反应。推测CRT180/HPV6E7DNA疫苗在动物模型上可以有效激活抗HPV特异性细胞免疫,有利于病毒感染的清除。

HPVE6/E7 mRNA检测对宫颈病变患者的筛查价值

目的:探讨HPVE6/E7 mRNA检测对宫颈病变患者的筛查价值。方法:选取于2018年1月至2018年12月于我院就诊的宫颈病变患者168例,分别采用HPVE6/E7 mRNA检测与TCT检测,并与组织病理学检测结果比较,分析HPVE6/E7对宫颈病变患者的筛查价值。结果:HPVE6/E7 mRNA检测阳性率高于TCT检测(P<0.05)。HPVE6/E7 mRNA检测与TCT检测灵敏度、阳性预测值、阴性预测值、特异性差异无统计学意义(P>0.05)。HPVE6/E7 mRNA检测阳性率与宫颈病变呈正相关(r=0.581,P=0.005)。其中,宫颈癌患者的HPVE6/E7感染阳性率为百分之百。结论:HPVE6/E7 mRNA检测对宫颈病变患者的筛查具有重大意义,能够通过HPVE6/E7阳性表达来判断宫颈病变严重程度,进而采取相应治疗措施,制定相关预后方案。

HPV16 E6/E7重组DNA免疫对BALB/C小鼠细胞免疫的影响

目的 :研究人乳头状瘤病毒 16型 (HPV16)E6/E7与结核杆菌热休克蛋白 70 (HSP70 )重组DNA免疫对小鼠细胞免疫的影响。方法 :采用肌肉注射DNA的方法免疫小鼠 ,用ELISA检测细胞免疫因子的表达水平 ,用RT PCR的方法检测细胞中细胞免疫因子mRNA的水平。结果 :以HPV 16E6/E7为基础的DNA免疫小鼠后 ,检测到的细胞免疫因子IL 2、IFNγ的含量明显升高 ;与结核杆菌HSP70重组后 ,IL 2、IFNγ的含量也较重组前明显升高。结论 :以HPV 16E6/E7为基础的DNA免疫能增强小鼠的细胞免疫反应 。

HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用价值探讨

目的探讨HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用价值。方法选取宫颈病变筛查的受试者407例为研究对象,均行宫颈薄层液基细胞学(TCT)检查,并检测细胞学标本中HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA的表达。215例行阴道镜宫颈活检,结合组织病理诊断结果进行统计分析。结果 407例细胞病理学诊断结果:正常范围(WNL)192例(47.17%)、意义不明的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)106例(26.04%)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)70例(17.20%)和高度鳞状上皮内病变(HSIL)39例(9.58%)。诊断为LSIL和HSIL患者中,HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检出率差异无统计学意义(P>0.05);诊断为ASCUS患者中,HPV DNA检出率显著高于HPV E6/E7 mRNA(P<0.01)。215例组织病理学诊断结果:正常109例,阴性106例,包括CINⅠ级44例、CINⅡ级27例、CINⅢ级32例、宫颈鳞癌3例。对于诊断为CINⅡ级、CINⅢ级/宫颈癌患者,HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检测的灵敏度、特异度和阳性预测值差异无统计学意义(P>0.05),但HPV E6/E7 mRNA检测的阴性预测值和准确度显著高于HPV DNA检测(P<0.05或P<0.01)。结论 HPV E6/E7 mRNA检查较HPV DNA检查能更好地评估HPV感染患者宫颈病变恶化风险,联合TCT检测对提高宫颈癌早期筛查和诊断的准确度具有积极意义。