非小细胞肺癌中hRAD17基因表达与淋巴结转移的关系

目的 研究非小细胞肺癌 (NSCLC)中hRAD17基因的表达频率及其与淋巴结转移的关系。方法 应用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)方法检测了 5 0例肺癌标本的hRAD17表达。以人NSCLC细胞株SPC A1作为阳性对照 ,癌周正常肺组织作为阴性对照。结果 5 0例肺癌中 38例hRAD17阳性表达 ,阳性率为 76 %。 38例阳性病例中有纵隔淋巴结转移者为 31例(81.5 % ) ,而 12例阴性表达病例中仅 3例 (2 5 % )有纵隔淋巴结转移 ,两组间差异具有统计学显著意义 (P <0 .0 1)。结论 hRAD17基因在肺癌中高表达 ,其阳性表达与淋巴结转移密切相关。

DNA修复基因Hrad51和转移抑制基因nm23在乳腺肿瘤中的表达及生物学意义

目的探讨DNA修复基因Hrad51和转移抑制基因nm23在乳腺肿瘤中的表达及生物学意义。方法应用S-P免疫组化法,分别检测了Hrad51蛋白和nm23蛋白在乳腺癌、乳腺纤维腺瘤、乳腺小叶增生、导管上皮不典型增生、腺癌癌旁正常组织中的表达情况。结果(1)Hrad51蛋白和nm23蛋白在乳腺癌组的表达与乳腺纤维腺瘤、乳腺小叶增生、导管上皮不典型增生、腺癌癌旁正常组织中的表达存在显著差异(均P<0.01);(2)乳腺癌中hrda51蛋白的阳性表达与肿瘤组织分级呈正相关(P<0.01),与nm23、ER、PR的阳性表达呈负相关(均P<0.01)。(3)乳腺癌中nm23的阳性表达与肿瘤组织分级呈负相关(P<0.01),与ER的阳性表达呈正相关(P<0.05),与PR的阳性表达无相关性(P>0.05)。(4)乳腺癌发生淋巴结转移与nm23、ER的阳性表达呈负相关(均P<0.01),与Hrad51的阳性表达呈正相关(P<0.01),与PR的阳性表达无相关性(P>0.05)。结论(1)Hrad51蛋白在不同病变乳腺组织中呈现不同表达,在乳腺癌组织中存在高度表达;(2)nm23蛋白也在不同病变乳腺组织中呈现不同表达,在乳腺癌组织中存在低表达;(3)检测Hrad51蛋白和nm23蛋白的表达情况有望成为评价乳腺癌患者预后的一个新指标。

浸润性乳腺癌中hRad17和MCM7的表达及临床病理意义

目的探讨浸润性乳腺癌及乳腺良性病变中hRad17和MCM7的表达及与乳腺癌发生、发展的关系。方法采用免疫组化S-P二步法检测20例乳腺良性病变及90例浸润性乳腺癌组织中hRad17和MCM7的表达。结果 hRad17和MCM7在乳腺癌中的阳性表达率分别62.2%(56/90)、84.4%(76/90),在良性组织中分别为10.0%(2/20)、30.0%(6/20),2组差异有统计学意义(P<0.01)。在90例浸润性癌中hRad17与MCM7的表达呈正相关(P<0.05);hRad17和MCM7的表达与浸润性乳腺癌的病理分级呈正相关(P<0.01),与淋巴结转移亦呈正相关(P<0.05)。结论 hRad17和MCM7蛋白的表达在乳腺癌的发生、演变过程中起重要作用。并与提示浸润性乳腺癌的不良预后因素有关,可作为预测乳腺癌预后的参考指标之一。

hRad17在浸润性乳腺癌中的表达及临床病理意义

目的:探讨hRad17蛋白在乳腺癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组化S-P二步法检测90例浸润性乳腺癌、20例良性乳腺组织中hRad17蛋白的表达情况,并分析其临床病理意义。结果:hRad17在浸润性乳腺癌组织及良性乳腺组织中表达分别为62.2%、10%,差异有显著意义(P<0.05)。浸润性乳腺癌组织中hRad17蛋白表达与浸润性乳腺癌的病理分级及淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与Ki-67亦呈正相关(P<0.05),与p53、ER、PR及C-erbB-2表达等无相关性。结论:hRad17蛋白表达在乳腺癌的发生、演变过程中起重要作用。并提示浸润性乳腺癌的不良预后,可作为预测乳腺癌预后的参考指标之一。

Hrad17在头颈肿瘤中表达下降的研究

目的 DNA损伤修复基因在维持细胞稳定性的作用及头颈肿瘤表现染色体不稳定性研究。方法应用基因表达芯片在7例头颈肿瘤和6例正常口腔粘膜中筛查表达下调的基因,用实时定量RT-PCR证实基因芯片的结果,蛋白印迹检测蛋白表达,定量PCR检测其DNA拷贝数。结果 Hrad17是发现下调的基因之一,Z-score和倍数变化分别为-2.5和0.39,定量RT-PCR显示肿瘤组织中Hrad17 mRNA表达下降,均值为0.216 6,而正常粘膜为0.395 7(P<0.05)。Western印迹显示Hrad17蛋白在肿瘤组织中检测不到(0/12),而在正常口腔粘膜组织中表达很强(6/7)。定量PCR显示Hrad17DNA在大多数头颈肿瘤组织中下降。结论 Hrad17表达的缺失经常出现在头颈鳞癌中,由于基因的缺失并可能导致头颈鳞癌基因组的不稳定性,导致肿瘤发生。

人 HRAD9 基因 5' 端调控元件的研究

ＨＲＡＤ９是从人脑基因组文库中获取的与酵母菌Ｇ２细胞周期检控基因ＲＡＤ９有高度同源性的基因。功能实验显示，ＨＲＡＤ９能够部分弥补酵母菌中ＲＡＤ９功能的不足。ＨＲＡＤ９可能具有肿瘤抑制基因的作用，该研究利用ＳＰＭ方法获得了ＨＲＡＤ９的ＣｐＧ岛，该序列覆盖ＨＲＡＤ９全长ｃＤＮＡ的５’端非翻译区的７９个核苷酸（包括第一个ＡＴＧ）和部分调控序列（包括起动子），并对该序列进行了详细分析。结果显示，ＨＲＡＤ９的起动子不含ＴＡＴＡ盒，但含有ＧＣ盒和ＣＣＡＡＴ盒。特别令人感兴趣的是，这段调控序列内有ＣＲＥＢ，ＷＴ１和ＳＲＦ等调控因子的结合位点。我们认为，这些位点可能是ＨＲＡＤ９与ｃＡＭＰ信号传递系统，ＷＴ１肿瘤抑制系统和ＳＲＦ多功能调控系统的联络环节。

Mcm7与hRad17在结肠癌组织中的表达意义及其相互关系

目的:探讨Mcm7和hRad17在结肠癌组织中表达的意义及其相互关系。方法:采用免疫组织化学SP法分析60例结肠癌和28例癌旁组织中Mcm7及hRad17的表达情况。结果:Mcm7在结肠癌中高表达,阳性率为76.67%,显著高于癌旁组织(P<0.05),Rad17在结肠癌组织中同样为高表达,阳性率为71.67%,显著高于癌旁组织中17.86%,Mcm7与hRad17在结直肠癌中的表达呈正相关(P<0.05)。结论:Mcm7与hRad17之间具有相关性,共同参与结肠癌的发生和发展。

hRad17在浸润性乳腺癌中表达及其与细胞增殖、凋亡的关系

目的探讨乳腺癌组织中hRad17表达及其与细胞增殖、凋亡之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测90例乳腺浸润性癌、8例乳腺原位癌及20例乳腺良性病变组织中hRad17表达。测定90例乳腺浸润性癌组织中K i-67、微小染色体维持蛋白7(m in ichromosom e m aintenance prote ins,MCM7)、Bc l-2、p53、ER、PR、c-erbB-2的表达。结果 hRad17蛋白在乳腺浸润性癌、乳腺原位癌和乳腺良性病变三组病例中表达差异有统计学意义(P<0.05)。90例乳腺浸润性癌中,hRad17阳性表达56例(62.2%)。乳腺浸润性癌的hRad17的阳性表达与乳腺癌的临床分期、组织学分级、淋巴结转移及K i-67、MCM7、Bc l-2表达密切相关,与患者生存期呈负相关(P<0.05)。hRad17的表达与患者年龄、肿块大小、组织学类型和p53、ER、PR、c-erbB-2表达均无关(P>0.05)。结论 hRad17在乳腺癌中表达上调,提示在乳腺癌发生、发展中起重要作用。hRad17可成为判断乳腺癌预后新的分子标记物。

基于RSR和HRAD的粤港澳大湾区护理人力资源配置分析

目的:调查粤港澳大湾区护理人力资源配置情况,为制定粤港澳大湾区护理事业发展策略提供参考依据。方法:采用秩和比法(RSR)综合评价2018年粤港澳大湾区11个地区护理人力资源配置现状并比较评价结果;采用卫生资源集聚度(HRAD)和人口集聚度(PAD)分析粤港澳大湾区护理人力资源配置公平性。结果:2018年,肇庆、深圳、惠州、江门和佛山的护理人力资源属于相对较少等级,而广州、澳门和香港的护理人力资源属于相对较多等级;广州、深圳、佛山、东莞、中山、香港和澳门的护理人力资源按地理面积配置的公平性较高,但广州和香港的护理人力资源配置过剩;珠海、惠州、江门和肇庆的护理人力资源按地理面积配置的公平性较差,其中惠州、江门和肇庆的护理人力资源配置不足。结论:粤港澳大湾区需进一步优化护理人力资源配置,在保持适量增长的情况下增强不同地区护理人力资源配置的公平性。

辐射损伤对HRAD17基因转染不同类型细胞的影响

目的探讨HRAD17在DNA辐射损伤修复及辐射诱导的凋亡中的作用。方法利用基因转染技术,对小鼠成纤维细胞NIH3T3和人宫颈癌HeLa细胞均分别转染pDOR-neo载体,pDOR-HRAD17s(正义)和pDOR-HRAD17a(反义)质粒,G418筛选获得阳性克隆。转染后各组细胞去血清培养48 h同步化后给予60Coγ射线10 Gy照射,吸收剂量率为2.54 Gy/min,加入完全培养基继续培养,并于0、61、2、14、36和48 h收集固定细胞,碘化丙啶(PI)避光染色后,流式细胞仪检测细胞DNA量。结果在辐射损伤后,转染正义HRAD17的成纤维细胞主要发生G1/S期阻滞,转染正义HRAD17的肿瘤细胞主要发生G2/M期阻滞;转染正义HRAD17的细胞凋亡比例降低,转染反义HRAD17的细胞凋亡比例升高。结论HRAD17同时参与细胞周期G1/S和G2/M期阻滞,并抑制辐射损伤诱导的细胞凋亡。

以替代延长机制维持端粒的胃肠道恶性肿瘤hRad21蛋白表达的研究及临床病理分析

目的了解以替代延长机制（ALT）维持端粒的胃肠道恶性肿瘤所占比例及其临床病理特点，并研究肿瘤组织中hRad21蛋白的表达。方法通过端粒重复放大（TRAP）分析方法检测104例胃肠道恶性肿瘤标本的端粒酶活性；根据检测结果将标本分为端粒替代延长机制组（ALT组）和端粒酶组．然后研究两组标本中hRad21蛋白的表达差异，并分析患者的临床病理和随访资料。结果ALT组有12例（11．5％），hRad21蛋白在ALT组的表达要高于端粒酶组。临床病理分析显示，ALT组的肿瘤浸润深度小于端粒酶组（P=0．021）。随访到第30个月时，ALT组的生存率为100％，而端粒酶组的生存率为56％。结论胃肠道恶性肿瘤存在通过ALT途径来维持端粒长度者，与端粒酶阳性肿瘤比较，ALT肿瘤的hRad21蛋白表达较高，肿瘤的侵袭性较弱，生存率较高。

HRAD17过表达促进辐射损伤诱导的A549细胞凋亡

目的 探讨HRAD17对辐射损伤诱导细胞凋亡的影响及其机制.方法 将HRAD17转染人肺癌细胞A549经60Co γ射线照射后观察细胞凋亡变化.用Western blot检测凋亡相关基因表达水平,RT-PCR检测凋亡相关基因转录水平.结果 HRAD17转染可促进γ射线诱导的细胞凋亡.与对照组相比,HRAD17转染组p53蛋白Set 46磷酸化和p53 AIP1基因转录明显增强.结论 HRAD17可促进辐射损伤诱导的细胞凋亡,其部分机制可能是通过提高p53 AIP1的表达来实现的.

微卫星不稳定型大肠癌中基因突变及其产物的检测

目的通过检测基因突变及其产物在微卫星不稳定型大肠癌中的表达,探讨微卫星不稳定型大肠癌发生发展的分子生物学机制。方法利用PCR、RT-PCR及蛋白印迹杂交方法,在11个大肠癌细胞株中检测微卫星稳定程度;9个蛋白质编码区域存在重复碱基序列的,与细胞生长、DNA修复及细胞凋亡相关基因中检测基因突变及其mRNA和蛋白质表达。结果检测结果发现了7个大肠癌细胞株表现高度微卫星不稳定,1个大肠癌细胞株表现低度微卫星不稳定,3个大肠癌细胞株表现微卫星稳定。与微卫星稳定的细胞株相比,微卫星不稳定型大肠癌中基因突变率显著增高。ACVRⅡ、Bax、hMSH6、hRad50、RIZ和TGFβRⅡ等6个基因突变率超过50%;ACVRⅡ、ATR、Bax、MBD4、hMSH3、RIZ和TGFβRⅡ7个基因表达突变型mRNA;而hMSH6和hRad50不表达突变型mRNA;同时hRad50的蛋白质表达与无突变的细胞株相比显著下降。结论与细胞生长,DNA修复,细胞凋亡相关基因的高度突变及其突变基因产物与微卫星不稳定型大肠癌的发生有密切相关,hRad50蛋白表达降低可能与微卫星不稳定型大肠癌的染色体不稳定有密切关系。

甘肃省2012年～2016年卫生资源配置的公平与效率研究

目的对2012年~2016年甘肃省各市卫生资源配置公平性及效率进行分析。方法采用卫生资源集聚度(Health resource agglomeration degree, HRAD)法评价甘肃省卫生资源的配置公平性,并用数据包络分析(Data Envelopment Analysis,DEA)法分析甘肃省各地级市的卫生资源配置效率。结果甘肃省按人口数配置的卫生资源公平性优于按地理规模配置的公平性,陇东地区各地级市集聚的卫生资源相对过剩,陇中地区各地级市集聚的卫生机构数较人口数配置不足,而河西地区的卫生人力资源配置公平性相对较差。2016年甘肃省卫生资源配置的综合技术效率值为0.867,总体为弱有效,14个地级市中只有5个市的卫生资源配置效率相对有效。结论应加强卫生资源投入公平性,缩小地区差异,以提升卫生资源的集聚效应和配置效率。

Ta-2.5W焊接工艺试验

Ta-2.5W属于难熔重金属合金,焊接时易氧化,出现冷热裂纹的倾向大,焊接难度极大。通过对Ta-2.5W管的焊接、热处理、拉伸试验、高温静态浸泡试验以及微观晶相组织分析等一系列试验研究,掌握了Ta-2.5W的特殊焊接技术工艺要求和焊接性能。

基于卫生资源集聚度的北京市社区卫生服务机构人力资源配置公平性分析

目的:对北京市社区卫生服务机构人力资源配置公平性进行分析。方法:运用卫生资源集聚度指标对2020年北京市所辖16个区的社区卫生服务机构人力资源情况进行评价,并分析其“十三五”期间的变化趋势。结果:城区相对区域面积的人力资源配置公平性较高,远郊区的配置公平性较差;“十三五”期间,首都功能核心区专职防保人员过剩情况逐年加重,城市发展新区的人力资源配置由公平转向短缺,城市功能拓展区的四类人员(卫生技术人员、医生、护士、专职防保人员)配置均趋于公平,生态涵养区人力资源过剩状况逐年缓解。结论:四类人员在北京市部分区域配置情况存在较大差异,北京市应统筹各区地域内情况和人口情况,分类配置人力资源,加强区域内协调,推进部分人员转岗,缓解人员短缺与过剩情况,平衡区域内各类人力资源的配置。

再谈旋压封头与标准椭圆封头的替代

通过比较几种旋压封头与标准椭圆封头的形状,并在理解JB4732[1]、ASME[2]、AD[3]等规范关于凸形封头的设计计算方法的基础上,认为只要能满足GB150-1998[5]规定的标准椭圆封头的允许形状偏差,不论封头的成形方法如何,都应属于标准椭圆封头,故在材料、厚度相同时可以等效代替标准椭圆封头。

Rad9错配修复功能缺陷与结直肠癌发生的关系

目的探讨Rad9错配修复功能与结直肠癌发生的关系。方法收集100例结直肠癌患者肿瘤样本，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测hRad9基因突变，采用快速点突变方法构建hRad9L101M点突变质粒并转染Rad9基因敲除的小鼠细胞。采用Westernblot方法检测Rad9表达．采用错配修复报告质粒及流式细胞仪检测活细胞错配修复能力。结果100例结直肠癌患者中，有7例发现了hRad9基因101位氨基酸由亮氨酸突变为甲硫氨酸。mRad9-＋L101M细胞（表达hRad9．L101M突变体的Rad9基因敲除小鼠细胞）和mRad9＋hRad9细胞（表达hRad9的Rad9基因敲除小鼠细胞）的错配修复效率分别为（34．0±5．6）％和（48．0±7．5）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。用N-甲基亚硝脲（MNU）处理细胞后，mRad9-＋L101M细胞和mRad9-＋hRad9细胞的存活率分别为（33．7±5．9）％和（21.3±4．7）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。hRad9基因101位氨基酸突变导致细胞错配修复效率下降及对MNU的抗性增加。hRad9基因多处翻译后修饰位点突变导致细胞错配修复能力下降。结论hRad9错配修复功能缺陷可能与结直肠癌发生有关。