一个L1CAM基因新变异导致的HSAS综合征的家系分析

目的对1个HSAS综合征家系L1CAM基因进行变异分析,明确该家系脑积水胎儿的致病原因,为家系的遗传咨询和产前诊断提供依据。方法收集孕中期经超声发现胎儿脑积水引产儿的DNA,进行全外显子测序,并用Sanger测序对疑似致病变异进行家系验证。结果胎儿L1CAM基因(OMIM*308840)存在c.620A>G(p.Tyr207Cys)半合子变异,胎儿姐姐与母亲携带c.620A>G(p.Tyr207Cys)杂合变异,其父亲、外祖父母、舅舅该位点均为野生型。依据美国医学遗传学与基因组学学会变异分类标准与指南,该变异为可能致病变异(PM1+PM2+PP3+PP4)。结论L1CAM基因的c.620A>G半合子变异很可能是该家系胎儿的致病原因。

配合物{[Cu(pcba)_(2)]_(2)·(MeOH)_(2)}的合成、结构、HSA结合及细胞毒性

以对氯苯甲酸为配体,合成了铜配合物{[Cu(pcba)_(2)]_(2)·(MeOH)_(2)}(pcba=对氯苯甲酸,MeOH=甲醇),经元素分析、IR和X射线单晶衍射表征,该配合物属于三斜晶系,P1空间群,晶胞参数为a=6.59180(10),b=10.7690(2),c=12.4722(2),α=90.1980(10)°,β=104.076(2)°,γ=99.673(2)°,Z=1,D c=1.593 mg/m^(3),F(000)=408,最终结构残差因子R 1=0.0400,wR 2=0.1145。采用紫外和荧光光谱对配合物及其跟人血清蛋白(HSA)相互作用的方式进行研究,结果表明,配合物浓度越大,紫外及荧光强度越低。配合物对HSA的猝灭常数K sv=5.78×10^(3)L·mol^(-1),猝灭速率常数K q=5.78×1011 L·mol^(-1)·s^(-1),配合物对HSA的结合常数K a=1.38×10^(2)L·mol^(-1),结合位点数n=0.592。同时,本文研究了{[Cu(pcba)_(2)]_(2)·(MeOH)_(2)}对胃癌细胞A549、宫颈癌细胞Hela、肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞LO2的抗增殖能力,发现其对三种癌细胞的增殖抑制效果跟顺铂相当,对人正常肝细胞LO2的毒性比顺铂小。

永宁油田河川区水平井泡沫驱开发研究

通过研究永宁油田河川区长6油层地层水泡沫剂特性和水质配伍,探索出一条低渗透油藏水平井开发地层能量补充和提高原油采收率的可持续发展之路。研究表明:发泡剂CAAG-2和HSAS具有抗盐、抗二价阳离子、发泡性强、泡沫稳定的特点,对于本区域的地层水特性和原油物性能起到良好的效果。

秦皮素与人血清白蛋白相互作用研究

目的:采用荧光光谱法分析秦皮素与人血清白蛋白(HSA)的相互作用及分子结构特征。方法:应用荧光分光光度计,通过荧光淬灭分析、同步荧光分析、三维荧光分析、疏水探针分析,获得秦皮素与HSA相互作用的光谱学信息。结果:荧光淬灭分析结果显示,秦皮素通过结合HSA引起HSA荧光淬灭,荧光猝灭机制属于单一静态猝灭;计算得出的热力学参数熵变和焓变均为正值,表明疏水力是驱动秦皮素结合HSA的主要作用力。同步荧光分析表明,秦皮素对HSA分子中Trp残基微环境影响明显,可使其特征光谱峰发生蓝移,再次表明疏水力在秦皮素结合HSA中起到重要作用。三维荧光分析结果表明,秦皮素与HSA相互作用改变了HSA的空间结构、氨基酸残基的微环境以及荧光发射峰强度;疏水探针分析结果显示,疏水探针能够显著影响秦皮素与HSA的结合,进一步验证了疏水力是秦皮素结合HSA的主要作用力。结论:秦皮素能够与HSA相互作用结合,导致HSA分子结构及光谱特性发生改变。

美国反恐预警体系建设的经验与教训

[目的/意义]恐怖主义是人类社会面临的重大威胁。如何推动反恐工作重心从事中的"应急处置"全面转向事前的"反恐预警",是取得现代反恐战争胜利的关键因素。近年来,我国暴恐事件呈多发频发以及由边疆向内地蔓延的发展态势,对国家安全和人民生命财产构成严重威胁。由于我国反恐预警建设起步较晚,目前我国尚未正式建立反恐预警体系。2001年"9·11"恐怖袭击事件发生后,次年美国建立了国土安全警报系统(HSAS)并于2011年将其升级为国家威胁警报系统(NTAS),对有效预防与遏制恐怖主义发挥了重要作用。[方法/过程]通过梳理近年来美国反恐预警体系建设的发展历程,分析与归纳了美国反恐预警建设过程中的成功做法与失败教训。[结果/结论]在此基础之上,提出要建设适应我国国情的反恐预警体系,加强反恐立法顶层设计,整合反恐情报体系,健全反恐预警机制,明确反恐预警原则以及形成全民反恐社会治理格局等政策建议。

改进的HSA算法在水利工程项目工期—成本优化中的应用研究

为解决工期-成本综合优化问题,对和声搜索算法(Harmony search algorithm,HSA)的参数取值范围进行改进。首先分析了水利工程项目工期与成本估算的影响因素,构建了工期-成本集成管理模型,然后构建BIM模型提取工程量信息,同时对HSA的主要参数记忆库取值概率HMCR与和声微调概率PAR作了改进,使其参数范围更加适应工期—成本模型的取值,整个运行过程耗时短,精度高,模型经过改进后更易于实现运算,并借助MATLAB得到了工期-成本最优解。最后,以某水闸项目为例进行验证,为水利工程项目工期-成本优化探索了新的模式。

阿霉素与血清白蛋白的作用及共存离子对反应影响的研究

本文用荧光光度法,分光光度法研究了抗癌药物阿霉素(Adriamycin)与微量金属离子、牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)的相互作用,求得药物与白蛋白的形成常数、与金属离子的结合比和形成常数,讨论了某些金属离子对药物与白蛋白形成常数的影响.

大豆苷元与人血清白蛋白的相互作用研究

采用荧光猝灭光谱、同步荧光光谱和紫外-可见吸收光谱,研究了大豆苷元与人血清白蛋白(HSA)之间的结合反应。大豆苷元对人血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用,猝灭机制属于静态猝灭,并发生了分子内非辐射能量转移。利用Stern-Volmer方程处理实验数据,得到大豆苷元与HSA之间的结合常数KA为0.34×104(23℃),1.10×104(30℃)和4.36×104L.mol-1(40℃)。根据F rster非辐射能量转移理论,求出了大豆苷元与HSA之间的结合距离为1.50 nm(23℃),1.46 nm(30℃)和1.42 nm(40℃)。通过计算相应的热力学参数,可知大豆苷元与人血清白蛋白的相互作用是一个吉布斯自由能降低的自发过程,且二者之间的主要作用力类型为疏水作用力,同时用同步荧光光谱考察了大豆苷元对HSA构象的影响。

白藜芦醇与人血清白蛋白相互作用的光谱研究

在不同温度下,用荧光猝灭光谱、同步荧光光谱和紫外-可见吸收光谱,研究了白藜芦醇与人血清白蛋白(HSA)相互作用的光谱学行为。根据不同温度下白藜芦醇对HSA的荧光猝灭作用,利用Stern-Volmer方程处理实验数据,结果表明白藜芦醇与HSA的结合常数KA为2.39×105(25℃),1.25×105(35℃)和1.10×105(45℃)。根据F rster非辐射能量转移理论,求出了白藜芦醇与HSA之间的结合距离为3.02 nm(25℃),3.46 nm(35℃)和3.79 nm(45℃)。实验表明静态猝灭和非辐射能量转移是导致白藜芦醇对HSA荧光猝灭的两大原因,通过计算热力学参数,可知该药物与人血清白蛋白的相互作用是一个吉布斯自由能降低的自发过程,且二者之间的主要作用力类型为疏水作用力。并采用同步荧光光谱探讨了白藜芦醇对HSA构象的影响。

维生素B_6与人血清白蛋白的相互作用

人血清白蛋(HSA)在2 96nm的光激发下能发射35 0nm的荧光(即λex=2 96 ,λem =35 0nm)。当HSA中加入适量的维生素B6 (B6 )后,HSA的荧光被部分猝灭,从τ0 (不加B6 时HSA的荧光寿命———分子激发态的寿命)与τi (加入B6 后的寿命)相等(近似)得知这种猝灭是静态猝灭。根据理论,可求出HSA与B6 间的结合常数K =2 6 7×10 4 L·mol- 1 。又从实验上可观察到HSA (它的激发态)可向B6 转移能量,由此可求出HSA和B6 间的临界距离R0 =1 872nm。测定了HSA和(HSA +B6 )的园二色(CD)谱,发现所测得的CD谱都很相似(基本上是一样的)。从测得的[θ]值可以算出各个样品所含的四种结构(α螺旋、β折叠片、β卷角,无规卷曲)的百分含量也大体相同。

以利多卡因为探针共振光散射法测定血清白蛋白的含量

实验发现在十二烷基苯磺酸钠(SDBS)存在下,利多卡因能增强血清白蛋白的共振光散射强度,据此,建立了以利多卡因为探针,利用共振光散射法测定牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)含量的新方法。考察了反应时间、试剂的加入顺序、pH值、SDBS和利多卡因的浓度以及共存干扰物等因素对共振光强度的影响。在优化的条件下,测定BSA和HSA的线性范围分别为1.0～45.0和0.5～30.0 mg.L-1。该方法用于人血清样品中蛋白含量的分析,获得了较高的精密度和准确度,五次平行测定的相对标准偏差在4.9%～5.7%之间,加标回收率在90%～103%之间。该方法使用常规荧光仪和常用化学试剂即可测定,操作简便、具有较高的灵敏度(检出限为0.14 mg.L-1)。对新鲜的人血清样品可以直接进行分析,无需进行样品前处理。本方法为人血清样品中蛋白含量的测定提供了一个可供选择的新途径。

丁基锡化合物与人血清白蛋白相互作用的研究

通过紫外、荧光和CD光谱,研究了船体防污漆中主要防污成分——三丁基锡(TBT)化合物及其降解产物——一丁基锡(MBT)和二丁基锡(DBT)与人血清白蛋白(HSA)相互作用的方式与程度,考察了浓度、酸度、有机溶剂和离子强度等因素对相互作用的影响.结果表明,丁基锡与HSA的相互作用是双重的,既有丁基锡中锡离子与HSA的配位作用,又有丁基锡中丁基基团的疏水作用,导致HSA二级结构破坏,α-螺旋结构减少和构象转变.一般情况下,MBT以配位作用为主,TBT以疏水作用为主,DBT两者兼而有之.

吡哌酸、氟哌酸与HSA,IgG相互作用的研究

本文研究了在人体生理pH值条件下,吡哌酸、氟哌酸与人血清白蛋白(HSA)和人体γ球蛋白(IgG)间的相互作用,求出了吡哌酸、氟哌酸与蛋白质的结合常数及结合位置,并根据热力学参数确定了它们之间的主要作用力类型.

用荧光猝灭和荧光加强两种理论研究喹诺酮类新药与白蛋白的作用

应用荧光加强和荧光猝灭两种理论公式,对四种喹诺酮类药物与人血清和牛血清白蛋白的作用作进行了对比研究,对药物与白蛋白的结合特点和通常的表征量(解离常数、猝灭常数、猝灭效率、能量转移效率、给体-受体作用距离等)进行了深入地分析;在白蛋白与药物结合类型上,四种药物对HSA和BSA的猝灭实验结果表明,这种由给体-受体结合引起的猝灭作用类型不是由生物大分子血清白蛋白单方面决定的,而是由血清白蛋白与药物、即给体与受体两者的分子结构和相互匹配共同决定的.

Hsa-miR-186在结肠癌细胞中的表达及作用

目的检测hsa-miR-186在结肠癌组织及细胞中的表达,探讨hsa-mir-186对结肠癌细胞生物学特性的影响及作用。方法应用实时荧光定量PCR检测了miR-186在12对配对的结肠癌组织、癌旁组织和5株结肠癌细胞中的表达情况;扩增包含miR-186前体序列在内的基因片段,并将其克隆至PLVYHM载体,将PLVTHM-miR186质粒转染SW620细胞,流式分选慢病毒感染的SW620细胞;CCK-8法、划痕实验和Transwell检测细胞检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Western Blot检测靶基因YY1蛋白水平的表达。结果与癌组织相比,12例癌组织中miR-186的平均表达量为0.0024±0.0027-显著低于癌旁组织的0-066±0.068,P=0.008;miR-186在高转移潜能的人结肠癌细胞SW620和LOVO相对表达量分别为0.118±0.138和0.157±0.001,与在低转移潜能HT-29细胞中表达量1.000±0.00,差异具有统计学意义P<0.05;质粒双酶切及测序鉴定PLVTHM-hsa-miRl86重组质粒构建成功;荧光定量PCR表明稳定过表达miR-186的结肠癌细胞株SW620构建成功,且过表达miR-186后降低了细胞的增殖、迁移及侵袭能力,差异均具有统计学意义P<0.05。稳定过表达miR-186的细胞中,miR-186的表达明显高于对照组和未处理组,YY1蛋白质水平有所下降。结论 hsa-miR-186在结肠癌组织以及在高转移潜能的人结肠癌细胞SW620、L0VO中低表达,具有类似抑癌基因的作用;成功构建PLVTHM-miR186慢病毒重组质粒,并稳定转染结肠癌细胞SW620,抑制了细胞的增殖、迁移和侵袭能力。miR-186调控YY1表达可能是抑制结直肠癌生物特性的重要机制之一。

金属-血清白蛋白的结构研究(Ⅴ)——钴离子与HSA和BSA的相互作用

血清白蛋白是血清中含量最丰富的蛋白质,是多种金属离子的输运蛋白。钴(Ⅱ)离子在金属蛋白研究中经常被用作光谱探针。但Co(Ⅱ)与血清白蛋白的相互作用却很少被研究。50年代Rao和Lal用光谱和电泳法推断,Co(Ⅱ)与BSA(Bovine serum albumin,牛血清白蛋白)的结合仅有羧基参与,但他们未能解释为何含氮基团完全不参与配位。本文利用紫外光谱发现在生理pH条件下,钴离子与HSA(Human serum albumin,人血清白蛋白)和BSA的1:1配合物可能有包含羧基和α-NH_2基的混合配位环境,取六配位的八面体构型,金属离子以Co(Ⅱ)和Co(Ⅲ)两种氧化态存在。

光谱法联合分子对接研究人血清白蛋白与新的抗肿瘤活性小分子的体外结合

前期研究中合成了全新的以4-苯氧基喹啉环为母核结构的,具有较好抗肿瘤活性的TypeⅡ型小分子c-Met激酶抑制剂:N-[3-氟-4-[6-甲氧基-7-[3-(4-甲基-1-哌嗪基)丙氧基]喹啉-4-氧基]苯基]-1-(2-氟苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三氮唑-3-甲酰胺(LJC-116)。该文进一步通过荧光、同步荧光、三维荧光、紫外-可见吸收等光谱方法联合分子对接技术研究了在模拟生理条件下,LJC-116与人血清白蛋白(HSA)的结合作用。研究表明LJC-116通过静态结合作用猝灭HSA的荧光,此静态作用方式同时被三维荧光以及紫外可见吸收光谱确证。在288、299、310 K温度下,计算LJC-116与HSA的表观结合常数的数量级均为104L·mol-1,说明两者的结合是中等强度。热力学常数ΔG°为负值,表明两者的结合是自发的。此外,ΔS°为正值,同时ΔH°为负值表明疏水作用和氢键是形成HSA-LJC-116(1∶11)复合物的主要驱动力。在实验条件下,通过F9rster偶极-偶极非辐射能量转移理论计算重叠积分J=7.169 7×10-15cm3·L·mol-1,R=1.28 nm,r=1.69 nm,E=15.6%。表明能量转移效率很高。位点探针试剂华法林和布洛芬的加入实验表明LJC-116与HSA结合部位处于HSA的疏水腔亚结构域ⅡA(siteⅠ)中。两者结合引起HSA的以下变化:内源性荧光猝灭、同步荧光红移0.4 nm,三维荧光光谱红移2 nm,HSA紫外吸收光谱改变以及HSA氨基酸残基微环境极性增加、疏水性下降。最后,利用分子对接对热力学计算得到的作用力和光谱方法中探讨的HSA构象变化进行了验证。该文全面阐述了两者在分子水平的作用机制,为TypeⅡ型小分子cMet激酶抑制剂的体内转运情况提供了有用的信息。

等离子点时钴－HSA金属中心的结构

用紫外光谱研究了等离子点时１：１Ｃｏ（Ⅱ）－ＨＳＡ配合物金属中心的结构，结果表明：该配合物的中心钴在低浓度时以Ｃｏ（Ⅱ）和Ｃｏ（Ⅲ）两种氧化态共存，高浓度时（＞３．０×１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１）仅以Ｃｏ（Ⅲ）氧化态存在；且金属中心随着浓度增大发生＂八面体→四方锥→四方平面＂的构型变化。与生理ｐＨ时金属中心的结构存在显著差别，可用ｐＨ效应加以解释。

新型银胶基底研究HSA的近红外表面增强拉曼散射

用紫外 -可见两步光化学还原法 ,合成了等离子体共振峰出现在近红外区的新型绿色银胶 .首次用该银胶作为基底研究人血清白蛋白 (HSA)的近红外表面增强拉曼散射 (NIR SERS) ,发现银胶中的线状银纳米粒子聚集体有较强的NIR SERS效应和生物兼容性 ,这为研究生物大分子的结构、构象和界面作用提供了一种较为理想的活性基底 .由所得到的NIR SERS光谱可发现 ,吸附在银纳米粒子表面的HSA的肽链骨架仍以α 螺旋结构为主 ,其二级构象特征基本不变 ;吸附作用诱导部分芳香氨基酸残基所处的微环境发生改变 ,趋于银纳米粒子表面 .此外 ,明显观察到COO-与C—S的特征谱带说明HSA中去质子的羧基氧、二硫桥键的硫直接与银纳米粒子表面作用 .