3-甲基腺嘌呤对转化生长因子-β诱导大鼠肝脏星形细胞株HSC-T6活化及自噬的影响观察

目的观察3-甲基腺嘌呤(3-MA)对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的大鼠肝星形细胞株HSC-T6活化及自噬的影响。方法取对数生长期的HSC-T6细胞分为空白组、TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组。TGF-β+3-MA组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入3-MA(0.5 mg/mL)处理24 h,TGF-β+PBS组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入等量PBS处理24 h,空白组加入等量PBS处理,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-βmRNA和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5 mRNA,采用Western blotting法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-β蛋白和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5蛋白。结果TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞活化标志物α-SMA、TGF-βmRNA和蛋白均高于空白组,且TGF-β+3-MA组均低于TGF-β+PBS组(P均<0.05)。TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5 mRNA和蛋白均高于空白组,且TGF-β+3-MA组均低于TGF-β+PBS组(P均<0.05)。结论3-MA可抑制TGF-β诱导的大鼠肝星形细胞株HSC-T6活化及自噬。

CCl4诱导的肝纤维化小鼠和HSC-T6细胞miR-122水平变化及其意义探讨

目的研究微小RNA(miR)-122在肝星状细胞活化/增殖及肝纤维化发生过程中的水平变化及其可能的作用机制.方法建立CCl_(4)诱导的C57BL/6小鼠肝纤维化模型,以10 ng/ml转化生长因子-β1(TGF-β1)处理HSC-T6细胞,分别在小鼠体内和肝星状细胞转染miR-122激动剂和miR-122模拟物以过表达miR-122.采用RT-PCR和Western-blot法检测组织和细胞miR-122、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)和血小板衍生生长因子(PDGF)表达,采用CCK-8法检测HSC-T6细胞增殖.结果模型组小鼠肝组织α-SMA表达水平显著高于对照组(9.92±2.12对1.12±0.54,P<0.01),而miR-122水平显著低于对照组(0.95±0.31对2.07±0.28,P<0.01);在CCl_(4)诱导的肝纤维化小鼠,miR-122激动剂转染组肝组织miR-122水平显著高于miR-122激动剂对照组(6.27±1.73对2.78±0.21,P<0.01);miR-122激动剂转染组肝组织α-SMA、I型胶原、TIMP-1和PDGF蛋白水平显著下降;在TGF-β1处理的HST-T6细胞,随着处理时间的延长,肝星状细胞α-SMA水平逐渐升高(0h:0.61±0.02,12 h:0.69±0.05,24 h:0.75±0.01,48 h:1.01±0.03,P<0.05),而miR-122水平随TGF-β1处理时间的延长而逐渐下降(0 h:0.72±0.05,12 h:0.45±0.01,24 h:0.37±0.03,48 h:0.29±0.08,P<0.05);与miR-122阴性对照转染组比,miR-122模拟物转染组细胞miR-122水平显著增加(178.45±30.62对12.18±2.39,P<0.01);Western Blot检测发现miR-122模拟物转染组细胞α-SMA蛋白表达水平显著下调;采用TGF-β1处理HST-T6细胞,与miR-122阴性对照转染组比,miR-122模拟物转染组细胞增殖活力显著降低(P<0.05).结论肝纤维化组织细胞miR-122水平下调,而过表达miR-122可抑制肝星状细胞的活化和增殖,从而可能抑制肝纤维化的发生和发展.

复方861对HSC-T6细胞基质分解素1mRNA表达水平影响的研究

为观察复方 86 1对HSC -T6细胞基质分解素 1(MMP3 )mRNA表达水平的影响 ,复方 86 1以 0 2 5mg/ml、0 5mg/ml、1 0mg/ml等浓度作用于HSC -T6细胞 48小时 ,以逆转录定量PCR方法测定其对HSC -T6细胞MMP3 mRNA表达水平的影响。结果表明 ,复方 86 10 2 5mg/ml、0 5mg/ml、1 0mg/ml等不同浓度的HSC -T6细胞mRNA表达水平依次为 2 75± 0 35、3 0 0± 0 0 1、3 5 0± 0 71,与空白对照组比较 ,可明显提高MMP3 mRNA表达水平 (P <0 0 5或P <0 0 1)。因此 ,复方 86 1提高HSC -T6细胞MMP3 mRNA表达水平 ,可能是其促进胶原降解 ,抗肝纤维化的作用机理之一。

TGF-β1对大鼠HSC-T6细胞增殖、细胞周期和胶原分泌的影响

目的观察TGF-β1对大鼠肝星状细胞系HSC-T6增殖、细胞周期以及分泌肝纤维化相关胶原的影响。方法采用MTT法检测细胞增殖;使用流式细胞仪检测细胞周期;采用荧光定量RT-PCR法检测SMAD3、c-myc、cdk-2、cyclinE、EGF、HGF、Bcl-2、NF-κB、MMP1、MMP9、MMP14、TIMP-1、PAI-1、α-SMA、COLⅠ及COLⅢ等基因mRNA水平;采用ELISA法检测细胞培养液COLⅠ、COLⅢ和α-SMA含量。结果与对照组比,TGF-β1处理24h及36h时,细胞形态及生长状况均无明显变化;在24h和36h时,TGF-β1处理组细胞G0/G1期细胞比率均减少(24h:57.3±8.5%vs 60.6±9.7%;36h:53.0±2.2%vs 56.6±5.0%),S期细胞比例略高(24h:30.6±7.2%vs26.4±10.1%;36h:35.2±3.7%vs 30.8±2.5%),但差异无统计学意义(P>0.05);TGF-β1处理组SMAD3、c-myc、cdk2、cyclin E、EGF、Bcl-2、NF-κB、TIMP1、PAI-1、α-SMA及COLⅠmRNA在24h和36h表达均上调,HGF、MMP1、MMP9、MMP14及COLⅢmRNA在24h时表达下调,36h时表达上调;TGF-β1处理组HSC-T6细胞分泌COLⅠ[24h:(63.0±7.4ng/ml vs 33.2±10.8 ng/ml,P<0.05;36h:58.5±6.0ng/ml vs 42.2±6.3ng/ml,P<0.05];α-SMA[24h:20.6±2.6ng/ml vs 4.2±0.7ng/ml,P<0.05;36h:59.7±14.6ng/ml vs 36.8±5.6ng/ml,P<0.05)均显著增加。结论 TGF-β1对大鼠肝星状细胞系HSC-T6显示了促增殖作用,并能促进肝纤维化相关胶原的分泌。

阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株HSC-T6增殖及胶原合成的影响

目的 :研究阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株 HSC- T6增殖及胶原合成的影响。 方法 :采用肝贮脂细胞株 ,以细胞增殖抑制率为指标 ,用噻唑蓝 (MTT)法测定药物对大鼠贮脂细胞株 HSC- T6增殖的影响 ;通过 3H-脯氨酸掺入法测定药物对 HSC- T6胶原合成的影响。 结果 :阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株 HSC- T6增殖及胶原合成的抑制率随药物浓度增加(2 8.9～ 46 2 .6 nm ol/ L)而升高 ,呈药物浓度依赖关系。 结论 :阿魏酸钠在体外对大鼠贮脂细胞株 HSC-

积雪草酸抑制HSC-T6细胞Ⅰ型胶原蛋白表达

目的:研究外源性TGF-β对肝星状细胞系(HSC-T6)的激活作用,以及积雪草酸抑制HSC-T6细胞Ⅰ型胶原蛋白合成的药理作用.方法:用LDH和MTT实验测定积雪草酸对HSC-T6细胞的细胞毒性和细胞增殖的影响.检测HSC-T6细胞受不同剂量和不同时间TGF-β刺激后表达Ⅰ型胶原蛋白的最佳剂量和时间.以不同剂量的积雪草酸作用于TGF-β活化的HSC-T6细胞,提取细胞总蛋白,以Western Blot方法检测积雪草酸对TGF-β活化的HSC-T6细胞Ⅰ型胶原蛋白表达的影响.结果:TGF-β刺激HSC-T6细胞表达Ⅰ型胶原蛋白的最佳剂量为1ng/mL,最佳时间24h.10～30μmol/L积雪草酸可以抑制TGF-β诱导的HSC细胞Ⅰ型胶原蛋白表达.结论:外源性TGF-β可激活HSC-T6细胞表达Ⅰ型胶原蛋白;积雪草酸抑制HSC-T6细胞Ⅰ型胶原蛋白表达.

当归芍药散含药血清对ET-1诱导的HSC-T6细胞收缩的影响

目的:通过体外实验研究当归芍药散含药血清对ET-1诱导的肝星状细胞(HSC-T6细胞)收缩的作用。方法:采用FITC-鬼笔环肽细胞骨架染色方法观察HSC-T6细胞肌动蛋白丝变化的数量;采用I型鼠尾胶原法观察HSC-T6细胞收缩的影响。结果:当归芍药散含药血清各剂量组能有效抑制肌动蛋白丝数量增多;在第24 h,模型组(ET-1)的胶原凝胶面积明显缩小(P<0.01);当归芍药散含药血清各剂量组可以不同程度地抑制ET-1(10 nmol/L)引起的HSC-T6细胞胶原凝胶收缩(P<0.05)。结论:当归芍药散含药血清可以抑制ET-1诱导的HSCs收缩。

柴胡皂苷d对氧化应激诱导的HSC-T6活化细胞内AP-1、NF-κB表达的影响及其雌激素受体机制

目的:研究柴胡皂苷d(SSd)对氧化应激诱导的肝星状细胞HSC-T6活化细胞内AP-1、NF-κB表达的影响及其雌激素受体(ER)机制,探讨植物雌激素对肝纤维化的作用机制,为临床应用植物雌激素提供理论依据。方法:体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,采用免疫组化法,检测SSd对氧化应激诱导的HSC-T6活化细胞内α-SMA蛋白表达的影响;采用Western blot法,观察SSd对氧化应激诱导的HSC-T6活化细胞内AP-1、NF-κB表达的影响。结果:氧化应激处理HSC-T6细胞后,α-SMA、AP-1和P65/NF-κB表达明显增加。如使用雌二醇(E2)或SSd预处理HSC-T6细胞24h后再接受氧化应激处理,三种蛋白表达明显降低,这种作用可被雌激素受体(ER)完全拮抗剂ICI-182780和ERβ拮抗剂THC抑制。结论 :E2、SSd可能通过调控ERβ,进而抑制核转录因子AP-1和P65/NF-κB的表达起到抑制HSC-T6活化的作用。

大黄素对HSC-T6细胞增殖及细胞周期影响的研究

目的 研究大黄素干预对大鼠肝星状细胞株 (HSC_T6)增殖和细胞周期的影响 ,探讨其抗肝纤维化的具体机制。方法 应用大鼠肝星状细胞株T6传代培养 ,采用不同浓度大黄素进行干预 ,观察各组细胞在形态学、增殖程度、细胞周期、增殖细胞核抗原 (PCNA)表达等多方面的变化。结果 ① 5～ 15mg/L浓度大黄素干预 2 4h后 ,对T6细胞的增殖产生显著的抑制效应 ,同时免疫组化显示PCNA标记指数随着药物浓度的增高其表达阳性率反而逐渐降低。②大黄素同时能够对T6细胞的细胞周期产生阻滞作用 ,随着浓度的增高 ,G0 /G1期细胞比例逐渐上升。结论 大黄素在体外对于HSC_T6的增殖具有明显的抑制作用 。

复方861含药血清对HSC-T6细胞Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶组织抑制因子1mRNA表达的影响

目的:观察复方861含药血清对HSC-T6细胞I型胶原(CoL-I)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)mRAN表达的影响。方法:不同剂量复方861灌胃大鼠制备的含药血清,作用于HSC-T6细胞48h,以逆转录定量PCR方法测定其对HSC-T6细胞CoL-I、TIMP1 mRNA表达的影响。结果:复方861 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg、6.0g/kg等不同剂量的含药血清HSC-T6细胞Col-I、TIMP1 mRAN表达水平分别为0.28±0.09、0.29±0.13、0.31±0.18、0.40±0.08,1.28±0.46、1.33±0.40、1.14±0.10、1.22±0.31,与空白对照组(0.58±0.04,2.29±0.67)比较,具有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:复方861降低HSC-T6细胞CoL-I、TIMP1mRAN表达水平,是其抗肝纤维化的作用机理之一。

复方861含药血清对HSC-T6细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达影响的研究

观察复方 86 1含药血清对HSC T6细胞Ⅰ型胶原 (CoL Ⅰ )、Ⅲ型胶原 (CoL Ⅲ )mRNA表达影响。以不同剂量复方 86 1灌胃大鼠制备的含药血清 ,作用HSC T6细胞 4 8h ,应用逆转录定量PCR方法测定其对HSC T6细胞CoL Ⅰ、CoL ⅢmRNA表达的影响。结果表明 :复方 86 10 5、1.0、2 .0、6 .0g kg等不同剂量含药血清HSC T6细胞CoL Ⅰ、CoL ⅢmRNA表达。与空白对照组比较 ,具有显著性 (P <0 .0 5或P ,0 .0 1)。因此 ,复方 86 1可降低HSC T6细胞CoL Ⅰ、CoL ⅢmRNA表达水平 ,具有抗肝纤维化作用。

枯否细胞条件培养基及混合血清对肝星状细胞HSC-T6的刺激作用

目的 探讨枯否细胞条件培养基 (KCCM )、混合的新生牛血清 (NBS)和大鼠血清 (RS)对肝星状细胞 (HSC)增殖和胶原合成的促进作用。方法 采用KCCM、单纯NBS及混合血清刺激大鼠HSC T6细胞 ,用3 H TdR和3 H 脯氨酸掺入法检测HSC增殖活性和胶原合成状况。结果 不同刺激剂作用 4 8h后 ,HSC均体积增大 ,胞突增多延长 ,核分裂像增多。 4 8h的3 H TdR和 96h的3 H 脯氨酸掺入明显增加。结论 混合血清对HSC T6的综合激活作用较KCCM和单纯 10 %NBS的作用明显 ,能明显促进其增殖和胶原合成 。

4-羟基苯并恶唑-2-酮对HSC-T6细胞增殖的影响

目的研究4-羟基苯并恶唑-2-酮(HBOA)对HSC-T6细胞增殖的影响。方法 HSC-T6细胞分别在药物处理组(HBOA浓度分别为0.008,0.04,0.2,1,5 mg/ml)及对照组(单纯培养液)中体外培养32 h。应用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞增殖情况;荧光倒置显微镜下观察对照组和药物处理组HSC-T6细胞的形态学变化。结果药物处理组HSC-T6细胞的增殖率均低于对照组,浓度为0.008 mg/ml的药物处理组与对照组相比无显著性差别(P>0.05);其他药物处理组分别与对照组比较能显著地抑制细胞增值(P<0.05或P<0.01)。HBOA对HSC细胞的增殖抑制率均随着药物作用浓度的升高而逐渐升高;经吖啶橙染色后,在荧光倒置显微镜下观察,均可见细胞数量减少、体积缩小、核破裂、核浓缩等变化,且随着作用浓度的增加变化更加明显。结论 HBOA对HSC-T6细胞具有抑制增殖的功效。

黄芩苷与芍药苷联合用药对TGFβ_1诱导HSC-T6的影响

目的:采用细胞培养的方法,体外观察黄芩苷、芍药苷及其联合用药对转化生长因子β1(TGFβ1)诱导的肝星状细胞(HSC-T6)增殖作用的影响。方法:采用TGFβ1诱导HSC-T6细胞作为活化的肝星状细胞的研究模型,在倒置显微镜下观察细胞形态变化并采用噻唑蓝(MTT)法测定黄芩苷、芍药苷及其联合用药对TGFβ1诱导的HSC-T6细胞增殖的影响。结果:黄芩苷高(0.981±0.081)、低剂量组(1.046±0.073)和芍药苷高(1.019±0.111)、低剂量组(0.983±0.064)对TGFβ1诱导的HSC-T6细胞活化有一定的抑制作用,差异无统计学意义(P>0.05)。联合用药中,高剂量黄芩苷+低剂量芍药苷(0.921±0.076)和高剂量黄芩苷+高剂量芍药苷(0.893±0.087)与模型组(1.108±0.098)相比,OD值明显降低(P<0.05)。倒置显微镜显示,各组药物除了引起部分细胞死亡外,对细胞形态无明显影响。结论:黄芩苷、芍药苷对TGFβ1的促诱导HSC-T6细胞活化作用增殖有一定的抑制作用,并且黄芩苷与芍药苷联合用药可明显提高对TGFβ1诱导HSC-T6细胞增殖抑制作用。

淫羊藿素对大鼠肝星状细胞HSC-T6的抑制作用

目的探讨淫羊藿素对肝星状细胞HSC-T6的影响及其相关机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,用含10%胎牛血清的无酚红DMEM培养基培养细胞,细胞用含5%活性炭吸附胎牛血清的无酚红DMEM培养基接种于细胞培养板。采用雌激素受体完全拮抗剂ICI-182780观察淫羊藿素(ICT)是否能够通过雌激素受体对HSC-T6细胞产生影响。实验分为对照组、ICI-182780组、淫羊藿素组、淫羊藿素联合ICI-182780组。通过MTT和免疫组化来观察ICT对HSC-T6增殖和活化的影响,通过ELISA检测TGF-β1、TIMP-1、MMP-1的表达活性来观察ICT对细胞外基质合成与降解的影响,通过Western blotting的方法检测ERK、p38、JNK的磷酸化水平来观察ICT对MAPK信号通路的影响。结果与对照组比较,加入ICI-182780(1μM)对HSC-T6细胞增殖、a-SMA、TGF-β1、TIMP-1、MMP-1的表达以及pERK、pp38、pJNK的水平均无明显影响。药物ICT干预后,细胞增殖、a-SMA、TGF-β1、TIMP-1的表达以及pERK、pp38、pJNK的水平明显被抑制,MMP-1的表达活性明显增强,差异有统计学意义(P<0.01),药物ICT联合ICI与单独用药比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ICT可以抑制HSC-T6细胞的增殖与活化、降低细胞外基质的合成,但是我们发现上述效应不是通过雌激素受体来调控的。

莪术油对HSC-T6细胞基因表达的影响

目的 :研究莪术油对HSC T6细胞基因表达的影响。方法 :从基因库中查询 5 0种肝纤维化相关基因的mRNA序列 ,用寡核苷酸探针设计软件设计探针 ,在PE890 9DNA合成仪上合成寡核苷酸 ,用OGR 0 4点样仪及醛基化玻片制备成基因芯片。以莪术油不同浓度含药培养液培养HSC T6细胞。根据细胞毒性实验 ,确定细胞存活率在5 0 %以上的药物浓度作为实验所用浓度 ,每组设空白对照 ,分别按 1小时、 6小时、 12小时、 2 4小时 4个时间段收集细胞 ,按操作步骤提取细胞总RNA ,经反转录荧光标记 ,杂交和洗涤 ,用Genepix 40 0 0B扫描仪扫描芯片 ,ImaGene4 2软件进行数据分析和归一化处理 ,使用看家基因和阳性对照对Cy3和Cy5扫描结果进行校正。 结果 :莪术油78 12 5 μg/ml作用HSC T6细胞 2 4小时 ,可使基因TIMP 2、IL 6表达分别下调 2 3、 2 2倍。 结论 :从分子水平揭示了莪术有效成分莪术油的抗肝纤维化机制。

三甲散含药血清对大鼠HSC-T6细胞Rho/ROCK信号通路的影响

目的:观察三甲散含药血清对HSC-T6细胞增殖及对Rho/ROCK信号通路的影响。方法:以三甲散含药血清作用HSC-T6细胞,以MTT法检测其对HSC-T6细胞增殖的影响,ELISA检测其对Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响,荧光定量PCR检测其对α-SMA、TIMP-1、ROCK-ⅠmRNA表达的影响,Western blot检测其对α-SMA、TIMP-1、ROCK-Ⅰ蛋白表达的影响。结果:三甲散含药血清对HSC-T6细胞增殖抑制率从12 h开始升高,24 h达到峰值;三甲散组细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原含量较空白对照组显著降低(P<0.05或P<0.01);三甲散和Y-27632均能下调HSC-T6细胞α-SMA、ROCK-Ⅰ、TIMP-1 mRNA及蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:三甲散可抑制HSC-T6细胞的增殖,其机制可能与Rho/ROCK信号通路有关。

携TIMP-1基因RNAi慢病毒载体感染大鼠HSC-T6细胞抑制目的基因表达

目的验证构建成功的携基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)基因特异性小干扰RNA的慢病毒载体对目的基因表达的抑制效应。方法以慢病毒质粒感染HSC-T6细胞,在感染6天和8天后,观察慢病毒感染效率;采用定量PCR法检测TIMP-1 mRNA水平变化;采用免疫印迹法检测TIMP-1蛋白表达变化。结果在慢病毒载体感染6天时,TIMP-1 mRNA水平较正常对照组下降约0.668倍[2-ΔΔCt为(0.668±0.046)],下降程度明显高于阴性对照组[2-ΔΔCt为(1.001±0.041),(P<0.05)];在慢病毒感染6天和8天时,RNAi组对TIMP-1蛋白表达具有明显的抑制作用,且以感染第6天为显著。结论构建成功的携TIMP-1基因特异性RNAi慢病毒载体能有效感染HSC-T6细胞,并抑制目的基因的表达。

高表达Sptlc2基因促油酸诱导的HSC-T6细胞凋亡及自噬

目的明确神经酰胺从头合成途径关键酶丝氨酸棕榈酰转移酶长链亚基2(Sptlc2)对肝星状细胞(HSC-T6)凋亡及自噬的影响。方法体外培养HSC-T6细胞株,分正常对照组、油酸组、空载体组、Sptlc2转染组,除正常对照组外,其余各组均采用100μmol·L-1油酸共培养HSC-T6细胞。转染48 h后,检测各组HSC-T6细胞内Sptlc2 m RNA表达情况。流式细胞仪检测各组HSC-T6细胞凋亡情况。MDC染色法荧光显微镜下观察各组HSC-T6细胞内自噬体数量。Western blotting技术检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2,自噬标志蛋白LC3B,自噬相关蛋白Atg5、Beclin-1的表达情况。结果 Sptlc2转染组总凋亡率明显升高,与油酸组、对照组比较差异具有显著统计学意义(P<0.01)。MDC染色示,Sptlc2转染组与油酸组、空载体组比较,自噬体数量明显增多。Sptlc2转染组凋亡相关蛋白Bax表达明显增加,凋亡相关蛋白Bcl-2表达明显减少,Bax/Bcl-2比值明显变大,与油酸组、空载体组比较差异具有显著统计学意义(P<0.01);Sptlc2转染组与油酸组、空载体组比较,自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ表达明显增加,自噬标志蛋白LC3B-Ⅰ表达明显减少,LC3B-Ⅱ/LC3B-I比值明显变大,差异具有显著统计学意(P<0.01);同时,自噬相关蛋白Beclin-1、Atg5表达均增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论油酸可以诱导HSCT6细胞凋亡及自噬。上调神经酰胺从头合成途径关键酶Sptlc2可以促进油酸诱导的HSC-T6细胞凋亡及自噬。

三甲益肝颗粒含药血清对HSC-T6细胞TGF-β1 mRNA和TIMP-1 mRNA表达的影响

目的:观察三甲益肝颗粒(S-JG)含药血清对肝星状细胞HSC-T6细胞转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)mRNA表达的影响.方法:不同的剂量的三甲益肝颗粒(1.7,3.4和6.8 g/kg)灌胃大鼠,制备含药血清,作用于HSC-T6细胞48 h,以逆转录定量PCR方法测定其对HSC-T6细胞TGF-β1 mRNA和TIMP-1mRNA表达的影响.结果:水飞蓟宾组,三甲益肝颗粒低、中、高剂量组的TGF-β1 mRNA,TIMP-1 mRNA表达水平分别为1.65±0.05,1.67±0.04,1.23±0.07,0.72±0.02,2.23±0.12,2.17±0.12,1.41±0.03,0.49±0.09,与对照组的TGF-β1 mRNA和TIMP-1 mRNA表达水平(2.11±0.11,2.72±0.11)比较,具有显著性差异(P<0.05).结论:三甲益肝颗粒降低HSC-T6细胞TGF-β1 mRNA,TIMP-1 mRNA表达水平,从分子水平上证明其抗肝纤维化的作用.