组成型热休克蛋白70-4(heat shock protein 70 cognate 4,HSC70-4)是HSP70家族的重要成员,对蛋白质的正确折叠与转运有着重要意义。本研究以中华蜜蜂转录组数据中获得的HSC70-4基因序列为基础,通过对中华蜜蜂不同发育阶段、不同组织以...组成型热休克蛋白70-4(heat shock protein 70 cognate 4,HSC70-4)是HSP70家族的重要成员,对蛋白质的正确折叠与转运有着重要意义。本研究以中华蜜蜂转录组数据中获得的HSC70-4基因序列为基础,通过对中华蜜蜂不同发育阶段、不同组织以及不同低温胁迫下的HSC70-4 m RNA表达量进行测定,以期为揭示该基因在中华蜜蜂生长发育和耐寒抗冻过程中的生理功能提供理论依据。结果显示,中华蜜蜂HSC70-4基因包含1923 bp的开放阅读框,编码641个氨基酸,蛋白分子量为70.4 k Da。中华蜜蜂HSC70-4氨基酸序列中包含3个HSP70家族的标签序列,其N端含有HSC70家族的GGXP四肽结构标志,C端包含EEVD结构。与膜翅目其它昆虫的氨基酸序列一致性在94%以上,具有较高的保守性。中华蜜蜂HSC70-4在成虫期的表达量显著高于幼虫期和蛹期(P<0.01),从幼虫期至10日龄成虫期呈逐渐上升趋势,但在15日龄至30日龄间呈现波动起伏。HSC70-4在中华蜜蜂不同组织中的表达存在显著差异(P<0.01),且在胸部高度表达,在足中中度表达,在其余组织中低度表达。中华蜜蜂HSC70-4的表达受低温胁迫的诱导,在低温胁迫2 h时其表达量最低,4 h时表达量最高。本研究结果表明中华蜜蜂HSC70-4在中华蜜蜂的生长发育过程中应对低温胁迫时发挥生理功能。展开更多
[目的]探究薯蓣皂苷调节Wnt/β-catenin通路对口腔鳞癌HSC4细胞的体外转移能力的影响。[方法]将口腔鳞癌HSC4细胞株随机分为3组:空白对照组、薯蓣皂苷组以及KYA1797K组。蛋白免疫印迹实验检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达水平;采用...[目的]探究薯蓣皂苷调节Wnt/β-catenin通路对口腔鳞癌HSC4细胞的体外转移能力的影响。[方法]将口腔鳞癌HSC4细胞株随机分为3组:空白对照组、薯蓣皂苷组以及KYA1797K组。蛋白免疫印迹实验检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达水平;采用MTT实验分析HSC4细胞的增殖能力;Transwell法分析HSC4细胞的侵袭能力;细胞划痕实验分析HSC4细胞迁移能力;TUNEL实验分析HSC4细胞凋亡率。[结果] MTT实验和Transwell实验结果显示,薯蓣皂苷或KYA1797K均能抑制口腔鳞癌HSC4细胞的生长与侵袭能力(79.57±3.78 vs 38.21±1.89 vs 32.19±2.18个,P<0.05);细胞划痕实验结果显示,薯蓣皂苷或KYA1797K均能抑制口腔鳞癌HSC4细胞的迁移能力(0.69±0.08 vs 0.36±0.09 vs 0.31±0.08,P<0.05);流式细胞术实验结果显示,薯蓣皂苷或KYA1797K均能促进口腔鳞癌HSC4细胞凋亡(0.31±0.01 vs 0.59±0.02 vs 0.56±0.03,P<0.05);蛋白免疫印迹实验结果显示,薯蓣皂苷或KYA1797K均能抑制Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达水平(0.87±0.07 vs 0.46±0.06 vs 0.51±0.08;0.71±0.06 vs 0.37±0.05 vs 0.33±0.06;P<0.05)。[结论]薯蓣皂苷可以明显抑制口腔鳞癌HSC4细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并能促进口腔鳞癌HSC4细胞凋亡。薯蓣皂苷的这一作用与抑制Wnt/β-catenin信号通路相关。展开更多
文摘组成型热休克蛋白70-4(heat shock protein 70 cognate 4,HSC70-4)是HSP70家族的重要成员,对蛋白质的正确折叠与转运有着重要意义。本研究以中华蜜蜂转录组数据中获得的HSC70-4基因序列为基础,通过对中华蜜蜂不同发育阶段、不同组织以及不同低温胁迫下的HSC70-4 m RNA表达量进行测定,以期为揭示该基因在中华蜜蜂生长发育和耐寒抗冻过程中的生理功能提供理论依据。结果显示,中华蜜蜂HSC70-4基因包含1923 bp的开放阅读框,编码641个氨基酸,蛋白分子量为70.4 k Da。中华蜜蜂HSC70-4氨基酸序列中包含3个HSP70家族的标签序列,其N端含有HSC70家族的GGXP四肽结构标志,C端包含EEVD结构。与膜翅目其它昆虫的氨基酸序列一致性在94%以上,具有较高的保守性。中华蜜蜂HSC70-4在成虫期的表达量显著高于幼虫期和蛹期(P<0.01),从幼虫期至10日龄成虫期呈逐渐上升趋势,但在15日龄至30日龄间呈现波动起伏。HSC70-4在中华蜜蜂不同组织中的表达存在显著差异(P<0.01),且在胸部高度表达,在足中中度表达,在其余组织中低度表达。中华蜜蜂HSC70-4的表达受低温胁迫的诱导,在低温胁迫2 h时其表达量最低,4 h时表达量最高。本研究结果表明中华蜜蜂HSC70-4在中华蜜蜂的生长发育过程中应对低温胁迫时发挥生理功能。
文摘[目的]探究薯蓣皂苷调节Wnt/β-catenin通路对口腔鳞癌HSC4细胞的体外转移能力的影响。[方法]将口腔鳞癌HSC4细胞株随机分为3组:空白对照组、薯蓣皂苷组以及KYA1797K组。蛋白免疫印迹实验检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达水平;采用MTT实验分析HSC4细胞的增殖能力;Transwell法分析HSC4细胞的侵袭能力;细胞划痕实验分析HSC4细胞迁移能力;TUNEL实验分析HSC4细胞凋亡率。[结果] MTT实验和Transwell实验结果显示,薯蓣皂苷或KYA1797K均能抑制口腔鳞癌HSC4细胞的生长与侵袭能力(79.57±3.78 vs 38.21±1.89 vs 32.19±2.18个,P<0.05);细胞划痕实验结果显示,薯蓣皂苷或KYA1797K均能抑制口腔鳞癌HSC4细胞的迁移能力(0.69±0.08 vs 0.36±0.09 vs 0.31±0.08,P<0.05);流式细胞术实验结果显示,薯蓣皂苷或KYA1797K均能促进口腔鳞癌HSC4细胞凋亡(0.31±0.01 vs 0.59±0.02 vs 0.56±0.03,P<0.05);蛋白免疫印迹实验结果显示,薯蓣皂苷或KYA1797K均能抑制Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达水平(0.87±0.07 vs 0.46±0.06 vs 0.51±0.08;0.71±0.06 vs 0.37±0.05 vs 0.33±0.06;P<0.05)。[结论]薯蓣皂苷可以明显抑制口腔鳞癌HSC4细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并能促进口腔鳞癌HSC4细胞凋亡。薯蓣皂苷的这一作用与抑制Wnt/β-catenin信号通路相关。
