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准晶问题多项式应力函数及其在有限元中的应用
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作者 赵颖涛 杨宇威 章伟 《北京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期887-894,共8页
本文基于广义Lekhnitskii各向异性弹性理论,提出了一种确定准晶问题多项式应力函数的系统性方法,并将之应用于杂交应力函数(HSF)单元的构造.结果表明,对于准晶平面问题,任意齐n次多项式应力函数至多存在6个独立的多项式,且多项式应力函... 本文基于广义Lekhnitskii各向异性弹性理论,提出了一种确定准晶问题多项式应力函数的系统性方法,并将之应用于杂交应力函数(HSF)单元的构造.结果表明,对于准晶平面问题,任意齐n次多项式应力函数至多存在6个独立的多项式,且多项式应力函数的一般表达式可以显式地给出.所得的多项式作为解析试函数用于构造准晶问题的新型八节点HSF单元,与传统的有限元相比,HSF单元具有更高的精度和更优异的性能. 展开更多
关键词 多项式应力函数 准晶 解析试函数 杂交应力函数(HSF)单元
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杜仲HSF基因家族的鉴定及其在逆境胁迫下的表达分析
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作者 伍淑娟 徐枫 +1 位作者 王光安 王晨 《河南农业科学》 北大核心 2024年第9期46-56,共11页
热休克转录因子(Heat shock transcription factors,HSFs)在植物的生长发育和响应非生物胁迫过程中发挥着重要作用,为了解杜仲HSF基因家族成员信息,揭示其结构特征及表达模式,通过生物信息学方法和qRT-PCR对杜仲HSF基因家族的理化性质... 热休克转录因子(Heat shock transcription factors,HSFs)在植物的生长发育和响应非生物胁迫过程中发挥着重要作用,为了解杜仲HSF基因家族成员信息,揭示其结构特征及表达模式,通过生物信息学方法和qRT-PCR对杜仲HSF基因家族的理化性质、蛋白质结构、系统进化、基因结构、保守域、启动子顺式作用元件及EuHSFs基因在杜仲叶片不同发育时期和不同非生物胁迫条件下的表达模式进行了分析。结果表明,从杜仲中共鉴定到21个EuHSFs基因,它们在蛋白质性质上存在差异,氨基酸数目、理论分子质量、等电点和不稳定系数分别介于68~369个、7.72~42.06 ku、4.31~9.22、7.05~67.28,且以酸性、亲水、不稳定的核蛋白为主。系统进化分析显示,EuHSFs被分成了3个亚组,包括ClassⅠ(1个)、ClassⅡ(7个)和ClassⅢ(13个)。通过启动子顺式作用元件分析发现,EuHSFs基因中存在大量的光响应元件和激素响应元件。EuHSFs基因在杜仲叶片不同发育时期均有表达,但表达模式存在显著差异。通过qRT-PCR检测发现,EuHSFs均能响应不同的非生物胁迫(高温、低温、高盐、干旱),如大部分EuHSFs在高温胁迫下随处理时间的延长表达量升高,且对高温和低温响应强烈。综上,杜仲HSF基因家族具有调控植物响应非生物胁迫的功能。 展开更多
关键词 杜仲 HSF 基因家族 系统进化 发育时期 非生物胁迫 表达模式
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大豆GmHSF21基因的生物信息学分析
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作者 宋勇泽 刘汝翠 +5 位作者 朱永胜 李月 姜妍 佟晓红 王绍东 王遂 《大豆科技》 2024年第1期13-20,58,共9页
植物热激转录因子(Heat shock transcription factor,HSFs)在参与高温、干旱及盐碱等逆境胁迫方面发挥重要作用。为探究大豆GmHSF21基因在盐胁迫应答中的作用,文章以大豆品种中黄13前期盐胁迫处理下的转录组差异基因数据为研究对象,对大... 植物热激转录因子(Heat shock transcription factor,HSFs)在参与高温、干旱及盐碱等逆境胁迫方面发挥重要作用。为探究大豆GmHSF21基因在盐胁迫应答中的作用,文章以大豆品种中黄13前期盐胁迫处理下的转录组差异基因数据为研究对象,对大豆HSF基因家族中的候选基因GmHSF21进行生物信息学分析。结果表明,GmHSF21属大豆HSF基因家族中的A亚族,共编码341个氨基酸,其编码区存在4处多态性位点,具有保守的HSF和HSF DNA-binding基序。系统发育分析表明,AT3G22830与GmHSF21亲缘关系近。顺式作用原件分析表明该基因启动子区具有响应多种生物及非生物胁迫的作用元件。荧光定量PCR结果显示该基因在盐胁迫条件下表达量上调,与转录组结果基本一致。 展开更多
关键词 大豆 HSF家族 盐胁迫 生物信息学分析
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高钒喷射成形高速钢HSF680钢锭组织的研究 被引量:1
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作者 辛栋梅 杜文华 +1 位作者 张海军 默雄 《河北冶金》 2024年第3期10-13,50,共5页
喷射成形的原理是将熔融金属或合金在惰性气氛中雾化为细小固态、半固态或液态熔体射流,直接喷射到较冷的衬底表面上,熔滴在沉积器表面附着、堆积、铺展、融合、固结而形成沉积坯件。通过喷射成形工艺生产了HSF680高速钢钢锭,并利用扫... 喷射成形的原理是将熔融金属或合金在惰性气氛中雾化为细小固态、半固态或液态熔体射流,直接喷射到较冷的衬底表面上,熔滴在沉积器表面附着、堆积、铺展、融合、固结而形成沉积坯件。通过喷射成形工艺生产了HSF680高速钢钢锭,并利用扫描电镜、金相显微镜及直读光谱仪对退火处理后钢锭组织、成分进行了检测。对比了从边缘到中心的成分差异和微观组织差异、不同位置的体密度和气体含量。结果表明:HSF680钢锭从边缘到中心成分偏析较小,其中碳元素相差0.009%,钒元素成分偏析控制在0.015%以内;钢锭平均体密度为7.21 g/cm3,基本接近理论密度;组织均匀细小,为MC先共晶碳化物和铁素体;受冷却因素的影响,MC碳化物的尺寸从边缘到中心为5.8μm-7.1μm-9.0μm-9.7μm;MC碳化物钒元素的成分从49.76%到60.25%不等;氧含量小于25 ppm,夹杂物为DS1级,满足国标要求。 展开更多
关键词 喷射成形 高速钢 HSF680 体密度 夹杂物
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Genome wide investigation of Hsf gene family in Phoebe bournei:identification,evolution,and expression after abiotic stresses
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作者 Wenhai Liao Xinghao Tang +6 位作者 Jingshu Li Qiumian Zheng Ting Wang Shengze Cheng Shiping Chen Shijiang Cao Guangqiu Cao 《Journal of Forestry Research》 SCIE EI CAS CSCD 2024年第5期201-215,共15页
Heat shock transcription factors(Hsfs)have important roles during plant growth and development and responses to abiotic stresses.The identification and func-tion of Hsf genes have been thoroughly studied in various he... Heat shock transcription factors(Hsfs)have important roles during plant growth and development and responses to abiotic stresses.The identification and func-tion of Hsf genes have been thoroughly studied in various herbaceous plant species,but not woody species,especially Phoebe bournei,an endangered,unique species in China.In this study,17 members of the Hsf gene family were identi-fied from P.bournei using bioinformatic methods.Phyloge-netic analysis indicated that PbHsf genes were grouped into three subfamilies:A,B,and C.Conserved motifs,three-dimensional structure,and physicochemical properties of the PbHsf proteins were also analyzed.The structure of the PbHsf genes varied in the number of exons and introns.Pre-diction of cis-acting elements in the promoter region indi-cated that PbHsf genes are likely involved in responses to plant hormones and stresses.A collinearity analysis dem-onstrated that expansions of the PbHsf gene family mainly take place via segmental duplication.The expression levels of PbHsf genes varied across different plant tissues.On the basis of the expression profiles of five representative PbHsf genes during heat,cold,salt,and drought stress,PbHsf pro-teins seem to have multiple functions depending on the type of abiotic stress.This systematic,genome-wide investigation of PbHsf genes in P.bournei and their expression patterns provides valuable insights and information for further func-tional dissection of Hsf proteins in this endangered,unique species. 展开更多
关键词 Phoebe bournei Hsf gene family Evolutionary analysis Expression mechanism Abiotic stresses
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沉默HSF1基因诱导TGF-β/Smad信号通路对口腔癌细胞放疗抵抗的作用机制
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作者 魏丛丛 郭冲冲 岳黎 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第13期3286-3291,共6页
目的探讨沉默热休克因子(HSF)1基因诱导转化生长因子(TGF)-β/Smad信号通路对口腔癌细胞放疗抵抗的作用机制。方法构建放疗抵抗细胞株SCC-9R,将细胞分为空白组、阳性慢病毒(NC)组和HSF1组。比较HOEC细胞和SCC-9细胞中HSF1表达[实时荧光... 目的探讨沉默热休克因子(HSF)1基因诱导转化生长因子(TGF)-β/Smad信号通路对口腔癌细胞放疗抵抗的作用机制。方法构建放疗抵抗细胞株SCC-9R,将细胞分为空白组、阳性慢病毒(NC)组和HSF1组。比较HOEC细胞和SCC-9细胞中HSF1表达[实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测]、细胞克隆细胞数、侵袭能力(Transwell小室法检测)、凋亡能力(流式细胞仪检测)及细胞中TGF-β1和Smad7蛋白表达(Western印迹检测)。结果HSF1在正常人口腔上皮细胞HOEC中表达较低,和HOEC细胞相比,人口腔鳞状细胞癌SCC-9细胞和抵抗细胞SCC-9R细中HSF1表达显著增加,且抵抗细胞SCC-9R中HSF1表达明显高于SCC-9细胞(P<0.05)。HSF1组CC-9/SCC-9R细胞中HSF1表达均明显少于空白组和NC组,且沉默HSF1可降低CC-9/SCC-9R细胞中HSF1表达(P<0.05)。克隆实验结果显示,空白组和NC组SCC-9和SCC-9R细胞克隆形成数均无明显差异(均P>0.05);HSF1组SCC-9和SCC-9R细胞克隆形成数较空白组和NC组显著减少(P<0.05)。细胞侵袭实验结果显示,空白组和NC组SCC-9和SCC-9R细胞侵袭能力无显著差异(P>0.05);HSF1组细胞侵袭能力较空白组和NC组明显降低(P<0.05)。细胞凋亡结果显示,空白组和NC组SCC-9和SCC-9R细胞凋亡能力无显著差异(P>0.05);HSF1组SCC-9和SCC-9R细胞的凋亡能力较空白组和NC组细胞明显增加(P<0.05)。HSF1组CC-9/SCC-9R细胞中TGF-β1、Smad7蛋白表达明显低于空白组和NC组(P<0.05)。结论沉默HSF1可抑制口腔鳞状细胞癌中TGF-β1、Smad7表达,可逆转放疗抵抗口腔癌细胞对放疗的抵抗作用。 展开更多
关键词 沉默热休克因子(HSF)1基因 转化生长因子(TGF)-β/Smad信号通路 口腔鳞状细胞癌 放疗抵抗
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棉蚜热诱导型热激蛋白90基因响应棉酚与氟吡呋喃酮胁迫以及与转录因子HSF的相互影响
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作者 梁平卓 李仁 +3 位作者 程沈航 李大鹏 张雷 甄丛爱 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1490-1499,共10页
【目的】本研究旨在鉴定棉蚜Aphis gossypii中热激蛋白(heat shock protein,Hsp)基因AgHsp90并明确AgHsp90对温度及植物次生物质和杀虫剂胁迫的响应。【方法】RT-PCR结合RACE克隆棉蚜AgHsp90并进行生物信息学分析;qRT-PCR检测AgHsp90在... 【目的】本研究旨在鉴定棉蚜Aphis gossypii中热激蛋白(heat shock protein,Hsp)基因AgHsp90并明确AgHsp90对温度及植物次生物质和杀虫剂胁迫的响应。【方法】RT-PCR结合RACE克隆棉蚜AgHsp90并进行生物信息学分析;qRT-PCR检测AgHsp90在棉蚜不同发育阶段(1-4龄若虫和成虫)、不同温度(-5,0,5,10,15,20,30,35,38和42℃)处理1 h时成虫中以及植物次生物质(20 mg/L单宁酸、50 mg/L的棉酚、50 mg/L 2-十三烷酮和50 mg/L槲皮素)和杀虫剂氟吡呋喃酮[LC25(2.410 mg/L)]胁迫24 h时成虫中的表达量。通过饲喂法对棉蚜成虫AgHsp90和热激因子(heat shock factor,HSF)基因AgHSF进行RNAi,24 h时用饲喂法及浸叶法分别测定50 mg/L棉酚和LC40(4.649 mg/L)氟吡呋喃酮处理24和48 h时棉蚜成虫死亡率,探究AgHsp90对棉蚜对棉酚和氟吡呋喃酮敏感性的影响,初步证明AgHsp90与AgHSF的相互调控。【结果】获得1个棉蚜Hsp90基因AgHsp90(GenBank登录号:UOF38310),ORF长2181 bp;AgHsp90在棉蚜不同发育阶段间的表达量相对稳定,其中只有3龄若虫与成虫间的表达量存在显著差异。温度胁迫实验结果表明,AgHsp90可以被高温明显诱导,但低温使其表达量降低。分别与对照0.5 mol/L蔗糖和Triton X-100比较,棉蚜成虫中AgHsp90的表达量不被3种植物次生物质(棉酚、单宁酸和槲皮素)显著诱导,可以分别被2-十三烷酮和LC25氟吡呋喃酮显著诱导。与对照(饲喂dsGFP)比较,AgHsp90 RNAi可明显增加棉酚和氟吡呋喃酮导致的棉蚜成虫死亡率;利用RNAi,AgHsp90与其转录因子AgHSF可相互影响彼此的表达量。【结论】棉蚜的热激蛋白基因AgHsp90能够被高温及氟吡呋喃酮显著诱导。AgHsp90很可能与棉蚜对棉酚及氟吡呋喃酮的敏感性相关。上述结果暗示AgHsp90在棉蚜应对高温及杀虫剂氟吡呋喃酮胁迫时发挥重要作用。 展开更多
关键词 棉蚜 热激蛋白90 棉酚 氟吡呋喃酮 HSF
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桑树热激转录因子(Hsf)基因家族克隆及MnHsfA1基因表达模式分析
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作者 刘丹 邱长玉 +7 位作者 韦伟 陆晓媚 黄胜 曾燕蓉 朱光书 张朝华 何骥 林强 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2320-2329,共10页
【目的】克隆桑树热激转录因子(Hsf)基因家族成员,并分析MnHsfA1基因表达模式,为深入研究该家族在桑树热应激响应中的调控机制及桑树育种提供理论参考。【方法】以川桑幼苗为试验材料,克隆其MnHsfs基因,通过多序列比对、构建系统发育进... 【目的】克隆桑树热激转录因子(Hsf)基因家族成员,并分析MnHsfA1基因表达模式,为深入研究该家族在桑树热应激响应中的调控机制及桑树育种提供理论参考。【方法】以川桑幼苗为试验材料,克隆其MnHsfs基因,通过多序列比对、构建系统发育进化树和MEME保守基序在线预测分析,对MnHsfs蛋白的理化性质、保守结构域、信号肽、跨膜结构域、亚细胞定位和启动子顺式作用元件进行预测,利用实时荧光定量PCR检测MnHsfA1基因在高温和干旱胁迫处理下的表达模式。【结果】从桑树中克隆到14个MnHsfs基因的全长编码区(CDS)序列,分别为MnHsfA4a、MnHsfA4b、MnHsfA2、MnHsfA5、MnHsfA6b-1、MnHsfA6b-2、MnHsfB4-2、MnHsfA8、MnHsfB3、MnHsfB2b、MnHsfC1、MnHsfB2a、MnHsfB4-1和MnHsfA1,长度分别为1239、1278、1404、1431、1101、1140、1185、1197、711、996、1029、936、900和1437 bp,分别编码412、425、467、476、366、379、394、398、236、331、342、312、299和478个氨基酸残基,大部分MnHsfs蛋白是一个亲水、不稳定的酸性蛋白。MnHsfs蛋白包括结合功能域(DBD)、寡聚化功能域(OD)、AHA和KLFGV等结构域,可分为A、B和C类。MnHsfA1与苹果、菠菜和拟南芥的HsfA1相似性最高;与对照相比,MnHsfA1基因相对表达量在高温和干旱胁迫处理下均显著上调(P<0.05)。【结论】MnHsfs基因具有较高的遗传保守性,高温和干旱胁迫诱导MnHsfA1基因高表达,且MnHsfA1基因的启动子顺式作用元件中含有脱落酸、茉莉酸甲酯、赤霉素等激素响应元件以及与各种非生物胁迫相关的转录因子,推测其同时调节多种非生物胁迫。 展开更多
关键词 桑树 热激转录因子(Hsf) 系统发育进化树 胁迫 顺式作用元件
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植物热激转录因子在非生物逆境中的作用 被引量:29
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作者 翁锦周 洪月云 《分子植物育种》 CAS CSCD 2006年第1期88-94,共7页
非生物逆境通常导致生物体内蛋白变性。热激蛋白(Hsp)作为分子伴侣协助蛋白的重新折叠、稳定、胞内运输和降解,以阻止受损蛋白的累积,维护细胞内环境的稳定。而热激蛋白的表达是通过热激转录因子(Hsfs)结合于热激蛋白基因的启动子的热... 非生物逆境通常导致生物体内蛋白变性。热激蛋白(Hsp)作为分子伴侣协助蛋白的重新折叠、稳定、胞内运输和降解,以阻止受损蛋白的累积,维护细胞内环境的稳定。而热激蛋白的表达是通过热激转录因子(Hsfs)结合于热激蛋白基因的启动子的热激元件上(heatshockelement,HSE),以募集其它转录因子而形成转录复合体,促进热激蛋白基因的表达。植物热激转录因子比动物系统更为多样性。根据其基本的结构域,植物热激转录因子可分为三类:HsfA、HsfB、HsfC。A类Hsfs已有大量深入的研究和报道,特别是在番茄方面。HsfB和HsfC的作用尚不清楚。在其复杂的网络中,每一热激转录因子均有其独特的作用,取决于其表达模式、亚细胞定位、聚合化、活性及与其他蛋白的相互作用。在非生物逆境,尤其是热激逆境下,A类热激转录因子在调节热激蛋白的表达起着重要作用。番茄的HsfA1起着主导作用,其缺失无法被其他相近的Hsfs所取代,但在持续热逆境下,在HsfA1的配合下,HsfA2可成为主要调节因子。B类热激转录因子可作为A类Hsfs的阻抑蛋白。然而,基于对不同的单个突变体的研究,以及对酵母Hsf1致死突变体的拯救恢复,一些热激转录因子的作用又是丰余的。此外,热激蛋白也对热激转录因子起负反馈调节作用。 展开更多
关键词 热激转录因子(hsfs) 热激蛋白(Hsps) 热胁迫 非生物逆境
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植物热激蛋白HSP100/ClpB及其在提高植物抗热性和抗寒性中的应用 被引量:9
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作者 许声涛 孙文香 +1 位作者 田进平 王崇英 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2008年第4期804-810,共7页
文章介绍了植物热激蛋白HSP100/ClpB的表达及其与抗逆性的关系,以及HSP100/ClpB在提高植物抗逆性应用中的研究进展,并对这一领域未来可能的发展方向作了展望。
关键词 热激蛋白 HSP100/ClpB 热激转录因子(hsfs) 抗逆性
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天然椰子油提取物对H_2O_2诱导的HSF细胞氧化损伤的保护作用 被引量:13
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作者 宋菲 王挥 +3 位作者 唐敏敏 沈晓君 张玉锋 邓福明 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期517-521,共5页
采用倒置生物显微镜观察人皮肤成纤维细胞(HSF)的形态,通过MTT法检测细胞存活率,并通过检测细胞内活性氧(ROS)水平、总抗氧化能力和抗氧化酶活性探讨天然椰子油提取物对H_2O_2诱导的HSF细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,天然椰子油提... 采用倒置生物显微镜观察人皮肤成纤维细胞(HSF)的形态,通过MTT法检测细胞存活率,并通过检测细胞内活性氧(ROS)水平、总抗氧化能力和抗氧化酶活性探讨天然椰子油提取物对H_2O_2诱导的HSF细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,天然椰子油提取物在质量浓度为12.5~50 mg/L范围内对H_2O_2诱导的HSF细胞氧化损伤具有保护作用,且呈浓度依赖性。天然椰子油提取物可以抑制H_2O_2引起的细胞形态损伤,提高细胞存活率,还可以通过降低细胞内ROS水平、提高细胞总抗氧化能力以及提高细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,进而起到保护HSF细胞氧化应激损伤的作用。 展开更多
关键词 化妆品原料 天然椰子油 HSF细胞 抗氧化 抗衰老
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中国荷斯坦牛HSF1基因microRNA SNPs与耐热性能的相关性研究 被引量:9
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作者 李秋玲 鞠志花 +6 位作者 贾祥捷 黄金明 李建斌 李荣岭 李芳 王长法 仲跻峰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期570-578,共9页
【目的】分析638头中国荷斯坦牛HSF1基因多态性与耐热性的关系,以期为中国耐热奶牛分子育种提供参考依据。【方法】设计引物扩增HSF1基因,通过DNA测序、PCR-SSCP和PCR-RFLP技术筛查SNPs并分型,利用miRBASE数据库定位microRNA SNPs,利用S... 【目的】分析638头中国荷斯坦牛HSF1基因多态性与耐热性的关系,以期为中国耐热奶牛分子育种提供参考依据。【方法】设计引物扩增HSF1基因,通过DNA测序、PCR-SSCP和PCR-RFLP技术筛查SNPs并分型,利用miRBASE数据库定位microRNA SNPs,利用SHEsis软件进行配对连锁不平衡分析和单倍型构建,利用SAS软件对不同基因型和单倍型组合个体耐热指标包括红细胞钾浓度、产奶量下降率、直肠温度和耐热系数进行相关分析。应用荧光定量RT-PCR技术研究热应激状态下HSF1 mRNA的转录水平。【结果】发现2个microRNA种子序列新SNPs,T909C和G4693T。其中909位碱基距离microRNA种子序列5'端3 bp,4 693位突变直接使microRNA种子序列破坏。909位点CC、CT基因型奶牛耐热性能显著高于TT基因型(P<0.05);4693位点TT基因型奶牛耐热性能显著高于GG基因型(P<0.05)。共构建出4种单倍型、发现10种单倍型组合。其中H2H4单倍型组合红细胞钾浓度和直肠温度显著低于H1H3单倍型组合(P<0.05),耐热系数显著高于H1H3组合(P<0.05),H2H4组合个体产奶量下降率显著低于H1H1组合个体(P<0.05),H2H4为耐热单倍型组合。热应激状态下HSF1 mRNA的转录水平在不同组织中存在差异,在心脏中最高,是肌肉中的11.24倍(P<0.05)。【结论】HSF1基因microRNA SNPs可作为奶牛抗热应激的候选分子标记应用于育种实践。 展开更多
关键词 中国荷斯坦牛 HSF1 耐热性能 MICRORNA 多态性
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下调miR-21通过PTEN/PI3K/Akt信号转导抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的实验研究 被引量:8
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作者 刘韵 展望 +3 位作者 游文健 林遐 高飞 章杰 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期27-31,91,共6页
目的探讨miR-21与PTEN相互作用关系及对PI3K/Akt信号通路和增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响,以期为临床诊断治疗增生性瘢痕提供新靶点。方法分别用qPCR和Western blot检测增生性瘢痕组织和细胞中miR-21和PTEN表达;双荧光素酶报告基因检... 目的探讨miR-21与PTEN相互作用关系及对PI3K/Akt信号通路和增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响,以期为临床诊断治疗增生性瘢痕提供新靶点。方法分别用qPCR和Western blot检测增生性瘢痕组织和细胞中miR-21和PTEN表达;双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-21与PTEN调控关系;Western blot检测miR-21对HSF细胞中PTEN蛋白表达的影响;MTT检测细胞增殖能力的变化。结果在增生性瘢痕组织和细胞中miR-21普遍高表达,PTEN普遍低表达;双荧光素酶报告实验和Western blot证实了miR-21对PTEN的靶向调控作用;下调miR-21可通过上调PTEN表达来抑制PI3K/Akt通路活性进而抑制HSF细胞增殖。结论下调miR-21可通过PTEN/PI3K/Akt信号转导抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖,显示出其诊断治疗增生性瘢痕的潜能,并可能为临床治疗提供新靶点。 展开更多
关键词 MIR-21 PTEN 增生性瘢痕 HSF细胞 PI3K/Akt
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植物热激反应的信号转导机理 被引量:33
14
作者 李冰 刘宏涛 +1 位作者 孙大业 周人纲 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第1期1-10,共10页
热刺激能诱导机体产生热激响应 (heatshockre sponse ,HSR)。在热激基因 (编码热激蛋白的基因 ,heatshockgene ,HSgene)表达之前许多信号转导组分已经发生了改变。已有一些直接或间接的证据表明Ca2 + 及CaM参与了植物HSR的信号转导。真... 热刺激能诱导机体产生热激响应 (heatshockre sponse ,HSR)。在热激基因 (编码热激蛋白的基因 ,heatshockgene ,HSgene)表达之前许多信号转导组分已经发生了改变。已有一些直接或间接的证据表明Ca2 + 及CaM参与了植物HSR的信号转导。真核生物中热激基因的表达被热激转录因子 (heatshocktranscriptionfactor,HSF)所介导。热胁迫时 ,HSF被激活并结合到热激元件 (heatshockelement,HSE)上。在这篇综述中 ,主要介绍与植物热激信号转导途径 (包括基因调控过程 )中上游的Ca2 + CaM信号系统及下游的热激基因表达调控相关的一些研究进展 。 展开更多
关键词 热激反应 信号转导 CAM 基因表达 HSE HSF 植物
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HSF1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞的永生化 被引量:6
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作者 刘梅冬 张华莉 +4 位作者 龚环宇 陈广文 王慷慨 鄂顺梅 肖献忠 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期174-177,共4页
目的:建立HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为HSF1的功能研究提供实验模型。方法:用脂质体介导的基因转染法将pSV 3 neo质粒导入HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞,经G 4 1 8筛选,抗性克隆扩大培养,建... 目的:建立HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为HSF1的功能研究提供实验模型。方法:用脂质体介导的基因转染法将pSV 3 neo质粒导入HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞,经G 4 1 8筛选,抗性克隆扩大培养,建立永生化细胞系;用PCR检测两种细胞株中目的基因的整合,用RT-PCR法鉴定SV 4 0T基因在转染细胞中的表达;用W estern b lot检测所建细胞株的诱导型热休克蛋白7 0的表达情况。结果:有3个细胞克隆已扩大培养稳定传代达6个月,经鉴定SV 4 0 T抗原已整合到两种细胞中且稳定表达,HSF1-/-胚胎成纤维细胞热休克蛋白7 0的诱导表达消失。结论:成功建立永生化HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞。 展开更多
关键词 HSF1 基因敲除 胚胎成纤维细胞 永生化 SV40 T抗原
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线粒体未折叠蛋白反应分子机制的研究进展 被引量:5
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作者 樊玉梅 郝强 +3 位作者 刘思颖 常彦忠 段相林 谭克 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第6期477-485,共9页
线粒体未折叠蛋白反应(UPR^(mt))作为新发现的细胞内应激机制,直接影响老化、神经退行性疾病、癌症等疾病的发生发展.UPR^(mt)是线粒体为了维持其内部蛋白质的平衡,启动由核DNA编码的线粒体热休克蛋白和蛋白酶等基因群转录活化程序的应... 线粒体未折叠蛋白反应(UPR^(mt))作为新发现的细胞内应激机制,直接影响老化、神经退行性疾病、癌症等疾病的发生发展.UPR^(mt)是线粒体为了维持其内部蛋白质的平衡,启动由核DNA编码的线粒体热休克蛋白和蛋白酶等基因群转录活化程序的应激反应.深入探究UPR^(mt)的作用机制对阐明老化和线粒体相关疾病的发病机理具有指导意义.本文主要阐述了线粒体未折叠蛋白反应的诱导因素、线虫和哺乳动物细胞中最新的未折叠蛋白应激反应的信号传导通路、调控因子、具体作用机制以及线粒体未折叠蛋白反应与衰老、免疫等疾病的联系,旨在为这些疾病提供新的理论基础和治疗靶点. 展开更多
关键词 线粒体 线粒体未折叠蛋白反应 ATFS-1 HSF1 ATF5 疾病
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小鼠TLE4基因启动子克隆及分析 被引量:4
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作者 赵黎黎 牟玉莲 +6 位作者 崔文涛 杨述林 唐中林 李勇 赵为民 刘娣 李奎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期274-278,共5页
本研究旨在初步对小鼠TLE4基因的转录调控机制进行探讨。利用PCR方法扩增TLE4基因5′上游启动区2 849 bp(-2 521 bp^+327 bp)的片段,然后通过步移缺失获得了7段长度不等的启动子片段并分别克隆到荧光素酶(LUC)报告基因表达质粒中。通过... 本研究旨在初步对小鼠TLE4基因的转录调控机制进行探讨。利用PCR方法扩增TLE4基因5′上游启动区2 849 bp(-2 521 bp^+327 bp)的片段,然后通过步移缺失获得了7段长度不等的启动子片段并分别克隆到荧光素酶(LUC)报告基因表达质粒中。通过双荧光素酶报告活性分析检测TLE4基因启动子区不同长度片段在小鼠畸胎瘤细胞(F9)及小鼠胚胎干细胞(ES)中瞬时转染后的活性。2种细胞的检测结果显示,在TLE4基因启动子区(-2 521 bp^-2 137 bp)存在负性调控元件,而在启动区(-2 137 bp^-1 794 bp)活性最强。对TLE4基因启动区(-2 137 bp^-1 794 bp)进一步缺失分析发现在该基因启动区(-2 027 bp^-1 927 bp)活性较强,分析预测该序列含有一个功能性的(HSF)的结合位点。结果推测HSF对TLE4基因的表达调控及功能行使具有重要作用。 展开更多
关键词 TLE4基因 启动子 HSF 调控序列
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拟南芥热激因子HSF1的表达与纯化 被引量:8
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作者 郭丽红 王定康 +2 位作者 袁燕 刘开庆 张乐民 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第24期11444-11445,共2页
[目的]表达和纯化拟南芥热激因子HSF1。[方法]以构建的能表达热激因子HSF1的大肠杆菌Escherichia coliM15(pQE32/His6-HSF1,pREP4)为材料,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达HSF1,再通过镍亲和层析纯化表达的HSF1,通过变性的聚... [目的]表达和纯化拟南芥热激因子HSF1。[方法]以构建的能表达热激因子HSF1的大肠杆菌Escherichia coliM15(pQE32/His6-HSF1,pREP4)为材料,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达HSF1,再通过镍亲和层析纯化表达的HSF1,通过变性的聚丙酰胺(SDS-PAGE)电泳分析表达蛋白和纯化蛋白。[结果]试验获得了表达的HSF1,并且进一步获得了纯化的HSF1。[结论]该研究为探讨拟南芥HSF1在基因组的结合位点提供了试验材料,为全面认识HSF1作用机理和生理功能奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥热激因子HSF1 表达 纯化
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白藜芦醇通过HSF1介导的铁死亡改善糖尿病心肌细胞损伤的机制研究 被引量:11
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作者 马振旺 姜德友 +5 位作者 胡丙成 袁星星 王梅 李海龙 蔡绍杰 郭婧 《海南医学院学报》 CAS 2022年第6期406-411,419,共7页
目的:观察白藜芦醇对糖尿病心肌细胞损伤的作用及其对热休克因子(HSF1)介导的铁死亡的影响。方法:通过高糖诱导H9c2构建糖尿病心肌损伤体外模型,并以暴露于正常葡萄糖浓度的H9c2作为对照,然后加入相应的药物进行干预。采用CCK8法检测细... 目的:观察白藜芦醇对糖尿病心肌细胞损伤的作用及其对热休克因子(HSF1)介导的铁死亡的影响。方法:通过高糖诱导H9c2构建糖尿病心肌损伤体外模型,并以暴露于正常葡萄糖浓度的H9c2作为对照,然后加入相应的药物进行干预。采用CCK8法检测细胞增殖水平,试剂盒法检测细胞中乳酸盐脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和铁离子浓度,Western blot法检测细胞中HSF1、凋亡蛋白(Bax和Bcl-2)及铁死亡标记蛋白(ACSL4、GPX4和SLC7A11)的表达水平。结果:与空白组相比,模型组细胞活性、SOD的活性、HSF1、Bcl-2、GPX4和SLC7A11蛋白的表达显著降低,LDH活性、MDA的含量、Bax及ACSL4蛋白的表达、Bax/Bcl-2的比值和Fe;的含量显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,白藜芦醇组H9c2细胞活性、SOD的活性、HSF1、Bcl-2、GPX4和SLC7A11蛋白的表达显著增加,LDH活性、MDA的含量、Bax及ACSL4蛋白的表达、Bax/Bcl-2的比值和Fe2+的含量显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。si-HSF1组干预后H9c2细胞活性、SOD的活性、HSF1、Bcl-2、GPX4和SLC7A11蛋白的表达显著降低,LDH活性、MDA的含量、Bax及ACSL4蛋白的表达、Bax/Bcl-2的比值和Fe2+的含量显著增加,与模型组比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:白藜芦醇通过上调HSF1的表达进而抑制细胞铁死亡改善高糖诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 白藜芦醇 糖尿病心肌病 心肌损伤 HSF1 铁死亡
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海南坡鹿HSF1cDNA的克隆与表达 被引量:3
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作者 成鹰 杜丽 +8 位作者 王凤阳 刘涛 李治深 许世英 符运南 林贤梅 吴科榜 林杰材 满初日嘎 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期191-197,共7页
采用RT-PCR和RACE方法扩增海南坡鹿热休克转录调节因子1(Heat shock transcription factor1,HSF1)cDNA全长,将扩增产物与pMD20-T载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴定后测序并进行生物信息学分析;构建pET28a-hdHSF1表达载体,经IPTG诱导表达... 采用RT-PCR和RACE方法扩增海南坡鹿热休克转录调节因子1(Heat shock transcription factor1,HSF1)cDNA全长,将扩增产物与pMD20-T载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴定后测序并进行生物信息学分析;构建pET28a-hdHSF1表达载体,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,海南坡鹿HSF1cDNA全长为2036bp,含有1个1578bp的开放阅读框,编码525个氨基酸。经生物信息学分析,HSF1是一个等电点为4.93的亲水性蛋白。经IPTG诱导表达后,得到一个带组氨酸标签的约62kD的融合蛋白,用抗His单克隆抗体进行Western blot,得到一条约62kD特异性抗体结合带,表明海南坡鹿HSF1原核表达载体成功构建并表达。 展开更多
关键词 海南坡鹿 HSF1 克隆 表达
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