重组H5N1亚型禽流感疫苗免疫孔雀后的抗体消长规律及免疫程序的研究

为了探讨孔雀对H5高致病性禽流感灭活疫苗的免疫原性,做好孔雀禽流感的防控,采用哈尔滨兽医研究所研制的重组H5N1亚型高致病性禽流感疫苗,不同剂量免疫孔雀后,跟踪其抗体消长规律。检测结果显示:小孔雀母源抗体能维持约6周;首免0.5 mL/羽颈部皮下注射,有效抗体能维持18周以上;1.0,1.5,2.0 mL/羽3个剂量组肌肉注射进行二免,以1.5 mL/羽组效果最好,有效抗体能维持10个月左右;成年孔雀1.5 mL/羽进行三免,有效抗体能维持1年以上。而且孔雀产生的抗体均一性良好,抗体阳性率均在75%以上。根据抗体消长规律,推荐了孔雀的免疫程序。

血凝素蛋白裂解位点对H5亚型禽流感病毒侵入细胞的影响

目的通过RT-PCR反应获得了H5N1亚型禽流感病毒完整的血凝素基因(HA)并克隆到真核表达载体pcDNA3上,通过转染293T细胞进行了瞬时表达验证。方法采用PCR定点突变技术,将其HA基因裂解位点的氨基酸组成由RKKR↓GLF突变为RSSR↓GLF,使其具有低致病性AIV的分子特征,并构建了表达突变后HA基因的真核表达载体pcDNA-Hm。将pcDNA-H5和pcDNA-Hm分别与MuLV假病毒构建体系的两种质粒pHIT60和pHIT111共转染转化了SV40大T抗原的人胚肾细胞293T后,收集转染细胞上清,通过Western-blot和细胞感染性实验来研究假病毒的特性。用缺乏囊膜蛋白和已经证实可以形成MuLV假病毒的水泡性口炎病毒糖蛋白G作为对照。结果转染后形成假病毒进行裂解后进行Western-blot证明两种HA蛋白都能够整合到各自的假病毒颗粒表面,野生型的HA可以检测到三条带,分别与HA0、HA1和HA2大小相符,而突变后的HAm则仅能检测到一条带,与HA前体大小相符,说明其失去了裂解活性。通过感染293T、COS-7和NIH3T3三种不同的靶细胞后发现野生型的HA所形成的假病毒MuLV-H5具有感染性和泛嗜性,而突变后的HA所形成的假病毒则失去了感染性。结论可以得出HA蛋白裂解位点的氨基酸组成不仅对H5亚型禽流感病毒的致病性有影响,对禽流感病毒侵入细胞也具有至关重要的作用。

流感病毒与禽流感

进入 2 0世纪 ,流行性感冒病毒至少有过 4次全球性大流行 ,夺去数千万人的生命 ,给人类造成巨大灾难。流感的流行与A型抗原易发生变异有关。当新变异型出现时 ,人们对之缺乏免疫力 ,象征着新的一次流行即将到来。流感病毒广泛存在于自然界禽鸟类、哺乳动物中 ,水鸟是流感病毒的基因库。流感病毒有宿主范围限制性 ,此与流感病毒认识不同的细胞受体有关。引起人类流行的流感病毒都是人流感病毒与禽流感病毒通过基因重组而来。禽流感病毒广泛流行于世界各地 ,曾造成数以千万计的禽类死亡。禽流感病毒有高致病性与低致病性之分 ,高致病性流感病毒可引起近 10 0 %鸡只死亡 ,历史上多由H 5与H7引起 ,长期在禽类中流行 ,广泛分布世界各地。但H5N1亚型高致病性流感病毒 1997年突然袭击人类 ,2 0 0 3年底至 2 0 0 4年初禽流感在亚洲许多国家流行 ,至今仍在发展 ,并侵袭人类 ,造成死亡 ,虽还未证明有人传人情况 ,但必须引起足够重视。禽流感可通过接触分泌物、排泄物与空气传播 ,还可经蛋垂直传播 ,人感染目前多与接触携带有禽流感病毒的禽及其排泄物、分泌物有关。禽流感可防可治 ,发现高致病性禽流感地区 ,应及时、果断、坚决扑杀 (禽类 ) ,彻底消毒 ,严格隔离 ,强制免疫 ,防止扩散 ,严防传给人群。

我国研制成功禽流感新疫苗

6月6日消息：能够彻底切断致命禽流感病毒向水禽、家禽及哺乳动物和人类传播的新型疫苗在我国研制成功。记者近日从国家禽流感参考实验室了解到，针对HSN1亚型禽流感研制的两种新型疫苗已于近日通过科技部和农业部的联合验收，并获国家批准使用。此疫苗的研制成功填补了世界上水禽疫苗试验的空白。