HSP_(70BCG)-Daudi肿瘤肽复合物对γδT细胞的活化作用

用固相抗体法[1] 体外扩增人PBMC的γδT细胞 ,静息化处理后用HSP70BCG Daudi肿瘤肽复合物再次刺激研究HSP70BCG Daudi肿瘤肽复合物对γδT细胞的活化作用。MTT检测γδT细胞的细胞毒作用及TNF α生物学活性。3 H TdR掺入法测定细胞增殖。HSP70BCG Daudi肿瘤肽复合物活化的γδT细胞在效靶比为 10∶1及 5∶1时对靶细胞Daudi的杀伤活性分别为 88 36 %±8 2 1%及 75 2 3%± 16 36 % ,与对照组有显著性差别。 2 4及 4 8h增殖结果各组间无差别 ;未检测出各刺激组的上清中TNF α生物学活性有何差别。结论表明HSP70BCG

异种HSP_(70)及固相抗体法体外扩增人γδT细胞的比较

目的 :比较异种HSP70 及固相抗体法体外扩增人γδT细胞。方法 :分别用固相抗体法、HSP70BCG 及小鼠榄香烯复合瘤苗热休克蛋白 70 肽复合物 (HSP70m 肽复合物 )体外扩增人PBMCs的γδT细胞 ,流式细胞仪检测细胞表型及亚型分布 ,RT PCR检测各亚型基因的取用。MTT检测γδT细胞的细胞毒作用。结果 :培养 14天后 ,抗体法扩增的PMBCs总数增加 30～ 4 0倍 ,γδT细胞的比率由 3.2 %提高到 86 .7% ;HSP70BCG 组PBMCs总数增加 7～ 8倍 ,γδT细胞的比率由 3.2 %提高到 71.32 % ;HSP70m 肽复合物组PBMCs总数增加 4～ 5倍 ,γδT细胞的比率由 3.2 %提高到 2 7.2 6 %。抗体及HSP70BCG 扩增的γδT细胞以表达Vγ9 Vδ2亚型为主 ,且Vδ1、Vδ2、Vδ3三种基因均得到取用 ,对Daudi具较高的杀伤活性。结论 :抗体及HSP70BCG 均能扩增出高纯度的γδT细胞 ,且具有完整的受体库 ,扩增的γδT细胞具细胞毒活性。