用孟德尔随机化方法研究免疫细胞表型与HSP27的因果关系

目的:探讨免疫细胞表型对HSP27的因果作用。方法:采用两样本孟德尔随机化(MR)综合分析来确定免疫细胞表型与HSP27表达水平之间的因果关系。基于公开的遗传数据,我们探索了731个免疫细胞表型与HSP27表达的因果关系,总共包括四种类型的免疫特征(中位数荧光强度(MFI)、相对细胞(RC)、绝对细胞(AC)和形态参数(MP))。综合敏感性分析用于验证结果的稳健性、异质性和水平多效性。结果:我们进行了双向FDR校正,HSP27的表达在统计学上对细胞免疫表型没有显著影响(P>0.05)。然而,在研究细胞免疫表型对HSP27的因果影响时,我们发现在三种细胞免疫性状类别(MFI、RC、AC)中,21种免疫表型与HSP27表达存在因果联系(P<0.05)。其中,12种免疫表型可促进HSP27的表达(IVW:P<0.05,OR<1),包括:IgD-CD24-AC;IgD-CD24-%lymphocyte;Myeloid DC AC;CD62L-myeloid DC AC;Activated Treg%CD4 Treg;CD38 on IgD+CD38dim;CCR2 on granulocyte;CD80 on CD62L+myeloid DC;CD80 on monocyte;CD8 on TD CD8br;CD4 on activated&secreting Treg;CD11c on granulocyte。另外9种免疫表型可抑制HSP27的表达(IVW:P<0.05,OR>1),即:CD62L-plas-macytoid DC AC;Naive CD4+AC;CD14+CD16+monocyte AC;CD3 on T cell;CD3 on CD8br;HVEM on CM CD4+;HVEM on naive CD4+;CX3CR1 on CD14-CD16-;CD45 on Mo MDSC。结论:本研究揭示了免疫细胞表型与HSP27之间存在显著的遗传相关性,这对了解HSP27的病理机制具有重要意义。它不仅为未来临床疾病的诊断和治疗提供了新思路,而且有助于开发更准确的生物标志物和治疗方法。此外,我们的研究结果扩展了免疫学的研究成果,并为进一步研究免疫细胞与热休克蛋白在免疫应答和疾病中的相互作用提供了新的证据。

Does HSP27 injection induce glaucoma damage in mice?

In a further aging society,excellent eyesight is an integral part of overall well-being and quality of life.Preserving good vision is crucial to maintaining mobility,independence,and mental health.There can be several reasons for visual impairment in elderly people,these include age-related macular degeneration,the leading cause of vision loss among older adults,cataract,glaucoma,diabetic retinopathy,retinal detachment,and others.

HSP27在补骨脂素抑制骨肉瘤细胞中的表达分析

目的研究热休克蛋白27(HSP27)在补骨脂素抑制骨肉瘤细胞中的表达分析。方法以不同浓度补骨脂素处理人骨肉瘤U-2OS细胞,通过生长曲线测定研究补骨脂素对U-2OS细胞生长的影响。然后以适当浓度的补骨脂素处理U-2OS细胞,于0 h、24 h、48 h和72 h后分别收集细胞,同时提取细胞总蛋白,采用免疫印迹法检测各组细胞HSP27的表达情况。结果补骨脂素显著抑制了U-2OS细胞的生长,并且抑制率具有浓度和时间依赖性;免疫印迹结果显示,补骨脂素处理U-2OS细胞24 h后,HSP27表达量开始出现降低,并且随着时间的延长,HSP27的表达量持续下降。结论补骨脂素抑制U-2OS细胞生长的作用可能与HSP27的降低有关。

心脏彩超指标联合血清HSP27、miR-30a水平与老年肺源性心脏病患者预后的相关性及其预测价值

目的:分析不同预后老年肺源性心脏病患者心脏彩超指标与血清热休克蛋白27(Heat shock protein 27,HSP27)、微小核糖核苷酸-30a(microRNA-30a,miR-30a)水平的相关性,并分析其预测价值。方法:选取本院2021年4月至2023年6月期间收治的81例老年肺源性心脏病患者纳入研究对象,根据患者的预后情况分为预后良好组、预后不良组。另选取同期81例健康体检者为对照组。对比三组入院时及研究组治疗14 d后血清HSP27、miR-30a及Tei指数、肺动脉收缩压(Pulmonary artery systolic pressure,PASP)水平,并分析其相关性及影响患者发生预后不良的危险因素和预测价值。结果:预后不良组血清HSP27、miR-30a及Tei指数、PASA水平相较预后良好组、对照组,均显著升高。血清HSP27、miR-30a与Tei指数、PASA均呈正相关(P<0.05)。入院时血清HSP27、miR-30a及Tei指数、PASA存在显著关联性(P<0.05)。血清HSP27、miR-30a及Tei指数、PASA水平联合预测患者发生预后不良的AUC均高于各指标单独预测。结论:老年肺源性心脏病患者心脏彩超指标与血清HSP27、miR-30a密切相关,三项联合检测对老年肺源性心脏病患发生预后不良的预测价值较高。

金果胃康胶囊调控胃癌前病变大鼠HSP27及MAD2表达研究

目的观察金果胃康胶囊对胃癌前病变大鼠胃黏膜HSP27、MAD2蛋白表达的影响。方法将85只大鼠随机分为空白组10只和造模组75只。空白组给予正常饮食,造模组采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)联合乙醇、氨水及饥饱失常组成复合造模法。将造模后大鼠随机分成模型组、金果胃康胶囊高、中、低剂量组和维酶素组。各给药组分别给予相应药物灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃,1次·d-1,连续12 w。12 w后处死所有大鼠,取胃体组织,光镜下观察各组大鼠胃黏膜组织病理变化;免疫组化法检测胃黏膜组织中HSP27、MAD2蛋白表达情况。结果模型组大鼠HSP27、MAD2蛋白表达水平明显高于空白组(均P<0.05)。各给药组HSP27、MAD2蛋白表达水平明显低于模型组(P均<0.05),且金果胃康胶囊中高剂量组明显低于维霉素组(均P<0.05)。结论金果胃康胶囊可逆转胃癌前病变的发生,作用机制可能与其能抑制HSP27蛋白的表达及控制MAD2蛋白的表达有关。

HSP27和Caspase-3在中耳胆脂瘤中的表达及意义

目的探讨抑凋亡蛋白HSP27和促凋亡蛋白Caspase-3在中耳胆脂瘤发生发展中的可能作用及意义。方法采用Western blot免疫印迹法检测锦州医科大学附属第一医院2021年1月~2021年8月期间20例中耳胆脂瘤标本及11例正常皮肤标本中HSP27、Caspase-3及内参GAPDH的表达情况;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测13例中耳胆脂瘤标本及11例正常皮肤标本中HSP27和Caspase-3 mRNA的表达;比较结果。结果Western blot结果示,在中耳胆脂瘤中HSP27(t=3.92,P<0.01)和Caspase-3(t=4.02,P<0.01)的表达显著高于正常皮肤,差异有统计学意义。qRT-PCR结果示,中耳胆脂瘤中HSP27的mRNA(t=4.85,P<0.01)和Caspase-3的mRNA表达量(t=3.70,P<0.01)明显高于正常皮肤,差异有统计学意义。③在中耳胆脂瘤标本中,HSP27和Caspase-3表达呈显著负相关(r=-0.615,P<0.01)。结论HSP27和Caspase-3在中耳胆脂瘤中表达均增高,且二者表达呈负相关,在一定程度上引起了细胞凋亡和凋亡抑制平衡紊乱,从而可能导致中耳胆脂瘤的发生。

基于HSP27-TLR4/NF-κB通路的芪参颗粒对大鼠心肌梗死后炎症反应的影响

目的基于HSP27-TLR4/NF-κB通路探讨芪参颗粒对大鼠心肌梗死后炎症反应的影响及潜在机制。方法48只雄性SD大鼠分别进行左冠状动脉前降支结扎术造模或假手术,将假手术大鼠分为对照组、芪参颗粒对照组,造模大鼠分为模型组和芪参颗粒组。术后24 h予芪参颗粒(2.352 g/kg)或蒸馏水灌胃,每日1次,连续1周。超声检测大鼠心功能,免疫荧光、HE和Masson染色评估心肌结构、炎症及纤维化改变,ELISA检测血浆热休克蛋白27(HSP27)含量,Western blot检测心肌组织Toll样受体(TLR)4和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠左室舒张末期前壁厚度、左室收缩末期前壁厚度(LVAWs)、左室舒张末期后壁厚度(LVPWd)、左心室收缩末期后壁厚度、射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)显著降低(P<0.01),左室舒张末期内径、左室收缩末期内径(LVIDs)、左室舒张末期容积、左室收缩末期容积(LVESV)显著升高(P<0.05,P<0.01);心肌细胞大量坏死,梗死边缘区心肌细胞代偿性肥大且排列紊乱,血管旁和心肌间质内大量炎性细胞浸润和胶原纤维沉积;血浆HSP27含量显著增加(P<0.01),心肌组织TLR4、NF-κB p65蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,芪参颗粒组大鼠LVAWs、LVPWd、EF和FS显著升高,LVIDs、LVESV显著降低(P<0.05,P<0.01);心肌组织炎性细胞浸润、心肌细胞存活情况和间质纤维化情况显著改善;血浆HSP27含量显著减少(P<0.01),心肌组织TLR4、NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论芪参颗粒可能通过降低血浆HSP27含量抑制TLR4/NF-κB通路,从而减轻炎症反应,改善心肌梗死后心室重构和心功能下降。

沙漠干热环境15kg负重应激行军对人体HSP27的影响

为探讨沙漠干热环境负重应激行军（ 热休克蛋白２７）（ ＨＳＰ２７） 的变化规律，对在沙漠干热环境中１５ｋｇ 负重，以不同速度和时间行军的５６ 名战士和１４ 名对照血浆ＨＳＰ２７ 进行了研究。结果发现，１５ｋｇ 负重情况下，以３－５ｋ ｍ ／ｈ 和５ｋ ｍ／ｈ 速度行军，各不同行军时间组ＨＳＰ２７ 明显增高（Ｐ＜ ０－０１） 。虽然３－５ｋ ｍ ／ｈ 行军２ 、３ 小时组ＨＳＰ２７ 明显高于行军１ 小时（Ｐ ＜０－０５） ，但５ｋ ｍ ／ｈ 各不同行军时间组同一行军时间的不同行军速度之间无差异（Ｐ＞ ０－０５） 。该结果提示，沙漠干热负重应激行军ＨＳＰ２７ 的表达在最初２ 小时最为活跃，行军２ 小时达高峰；ＨＳＰ２７ 的降解大约在行军１ 小时后加速， 行军２ 小时ＨＳＰ２７

趋化因子CCL2对血小板p38MAPK-HSP27通路的影响

目的探讨CC趋化因子配体2(CCL2)在残余血小板高反应中的作用及其调控血小板的可能机制。方法纳入ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者40例,采用Verify Now法检测P2Y12反应单元(PRU),根据检测结果将40例患者分为残余血小板高反应组(高反应组,n=24)和残余血小板正常反应组(正常反应组,n=16)。ELISA检测两组患者血浆中CCL2的表达,Western blotting检测血小板中CCL2和CCR2的表达,ARY003B蛋白芯片筛选经外源性CCL2刺激后血小板中磷酸化水平发生变化的激酶。Western blotting验证经CCL2刺激,或经CCR2拮抗剂(RS 102895)、p38MAPK信号通路抑制剂(SB 203580)预处理后血小板中p38MAPK和HSP27的磷酸化变化。结果高反应组血浆中CCL2浓度、血小板中CCL2和CCR2表达均明显高于正常反应组。经外源性CCL2刺激后,芯片筛选发现p38α、HSP27的磷酸化水平增高。在CCL2刺激前,应用RS 102895或SB 203580预处理血小板,Western blotting检测显示p38MAPK和HSP27的磷酸化水平下降。结论 CCL2以自分泌/旁分泌的方式参与残余血小板高反应,CCL2可能通过p38MAPK-HSP27通路调控血小板。

大肠癌组织中HSP27、bcl-2、p53和P-gp的表达及其意义

目的探讨热休克蛋白27(Heatshockprotein,HSP27)和bcl-2、p53、P-gp蛋白在大肠癌组织中的表达及其意义。方法运用免疫组织化学SP法检测HSP27和bcl-2、p53、P-gp在72例大肠癌组织中的表达,并运用多因素COX比例风险模型分析患者的预后。结果HSP27、bcl-2、p53和P-gp在大肠癌组织中的阳性表达率分别为69.44%(50/72)、54.17%(39/72)、59.72%(43/72)和40.28%(29/72)。HSP27在高分化腺癌组的表达率为84.85%,显著高于低分化组的28.57%(χ2=29.614,P=0.000),bcl-2、p53和P-gp在高分化腺癌组的表达率也高于低分化腺癌组,具有统计学意义(P<0.05)。HSP27与bcl-2及P-gp在大肠癌中的表达具有相关性(r=0.380,P=0.001;r=0.284,P=0.016)。COX回归分析提示HSP27表达与生存期呈负相关。结论HSP27、bcl-2、p53和P-gp在大肠癌组织中呈高表达,提示与大肠癌耐药有关;联合检测对临床制定合理的化疗方案具有指导意义;HSP27可作为判断大肠癌预后的一个独立预测指标。

鼻咽癌放疗残灶中HSP70/HSP27蛋白的表达

目的:分析鼻咽癌原发组织HSP70/HSP27蛋白表达与放疗残灶的相关性,探讨HSP70/HSP27表达对鼻咽癌放疗残灶的预测价值。方法:应用SP免疫组织化学法检测58例鼻咽癌原发组织HSP70/HSP27热休克蛋白表达,其中规范放疗后有残存癌灶的28例鼻咽癌为实验组,随访5年无癌灶复发的30例为对照病例。结果:HSP70和HSP27在实验组阳性表达率分别为92.9%(26/28)和53.6%(15/28),而在对照组的阳性表达率为53.3%(16/30)和53.3%(16/30),HSP70阳性表达率在两组间比较有统计学差异(P<0.05),而HSP27阳性表达率在两组间比较无统计学差异(P>0.05);HSP70和HSP27在实验组共同阳性表达率为50.0%(14/28),对照组为16.7%(5/30),两者比较有统计学差异(P<0.05);两者共同阴性表达率在实验组和对照组分别为3.6%(1/28)和10.0%(3/30),两者相比无统计学差异(P>0.05)。结论:HSP70在鼻咽癌抗放射损伤中可能起重要作用,检测鼻咽癌组织HSP70蛋白表达对预测鼻咽癌放射后癌灶残存可能有重要价值。

hsp27基因对鼻咽癌细胞增殖的作用及其机制

目的探讨hsp27基因对鼻咽癌细胞增殖的影响及其机制。方法利用实时定量PCR检测NP460(正常鼻咽部上皮细胞株)、CNE2(低分化鼻咽癌细胞株)及S18(CNE2的高转移亚克隆)的hsp27转录水平,利用慢病毒转染技术在hsp27转录水平较低的CNE2中过表达hsp27,利用小干扰RNA技术抑制S18细胞内的hsp27,用MTT技术检测过表达或抑制hsp27后细胞增殖速率的变化,同时检测转录因子NF-κB的转录水平的变化,分析hsp27影响鼻咽癌细胞增殖速率的可能机制。结果 (1)三种细胞株中的内源性hsp27水平为S18>CNE2>NP460,差异具有统计学意义。(2)在CNE2细胞中过表达hsp27基因后,细胞的增殖速率明显加快,NF-κB转录水平明显上调。(3)抑制S18细胞内的hsp27基因后,细胞的增殖速率明显减缓,NF-κB转录水平明显下调。结论 hsp27基因可能通过调节NF-κB信号通路而对鼻咽癌细胞发挥明显的促增殖作用,可设计针对hsp27基因的抗鼻咽癌分子治疗策略。

食管鳞状细胞癌组织中HSP27蛋白表达与患者临床病理参数相关性研究

目的探讨HSP27蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法应用Envision免疫组织化学染色方法检测食管鳞状细胞癌及癌旁组织中HSP27表达情况。结果 HSP27阳性表达主要定位于细胞质,其在食管鳞状细胞癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。HSP27阳性表达与T分期和病理分级有关(P<0.05);但与患者性别、年龄、肿瘤大小、病理分型以及淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 HSP27阳性表达情况与食管鳞状细胞癌T分期和病理分级有关,提示HSP27可能作为判断食管癌预后以及治疗的新指标。

△NP63和HSP27在宫颈癌的表达及意义

目的 探讨宫颈癌中△NP63和HSP27的表达及意义。方法 应用免疫组化SP法检测20例慢性宫颈炎上皮、30例宫颈上皮不典型增生和50例宫颈癌中△NP63和HSP27蛋白的表达。同时对35例宫颈鳞状上皮细胞癌进行mRNA杂交。结果 宫颈癌中△NF63蛋白表达率76％;HSP27蛋白表达率74％;表达率及强度明显高于慢性宫颈炎及轻、中度不典型增生上皮(P<0.05),与重度不典型增生差异不显著(P>0.05)。宫颈腺癌中△NP63无表达。HSP27表达率低(1/3)。在宫颈鳞状细胞中△NP63蛋白和mRNA的表达率及强度,低分化高于中、高分化,与临床分期密切相关;HSP27蛋白和mRNA的表达率及强度,中、高分化高于低分化,与临床分期无相关性。结论△NP63、HSP27可能与宫颈鳞状细胞癌的发生及预后有关。

HSP27基因的克隆与表达

目的 构建热休克蛋白2 7(Heatshockprotein 2 7,HSP2 7)真核表达质粒以用于肾脏缺血预适应(ischemiaPre conditioning ,IP)的作用及机制研究。方法 利用乳腺癌细胞系MCS 7,用RT PCR方法扩增HSP2 7全长基因,将HSP2 7基因克隆到真核表达载体pAAV MCS中。重组质粒转染NIH3T3细胞,Westernblot法鉴定重组质粒HSP2 7/ pAAV MCS能在哺乳动物细胞中正确表达。结果 RT PCR方法正确地扩增出全长HSP2 7基因。限制性内切酶酶切和测序结果证实HSP2 7基因克隆完全正确。重组质粒转染哺乳动物细胞系NIH3T3后,ECLWesternblot法证实了目的基因能在其中正确表达。结论 成功地克隆真核表达重组质粒HSP2 7/ pAAV MCS ,为下一步研究HSP2 7对肾脏缺血预适应的作用及其机制打下了基础。

HSP27及其磷酸化蛋白的表达对实验性急性胰腺炎细胞骨架稳定性的影响

目的:探讨小热休克蛋白(HSP27)及其磷酸化蛋白(p-HSP27)表达对急性胰腺炎(AP)模型大鼠细胞骨架保护性作用的研究。方法:将45只正常成年雄性Wistar大鼠随机分空白对照组(A组)、急性胰腺炎组(B组)、假手术组(C组)。实验前12h禁食,正常饮水,确定AP动物模型建立成功后于1h、3h、6h三个时间段处死大鼠,且随机每个时间段每组各处死5只。确定动物模型建立成功,Western-blotting检测HSP27及其磷酸化蛋白含量,RT-PCR检测HSP27mRNA表达。结果:急性胰腺炎组大鼠各时间点SAM值明显高于空白对照组和假手术组(P<0.05);急性胰腺炎组大鼠各时间点胰腺组织HSP27蛋白、p-HSP27蛋白(Ser15)和HSP27mRNA相对表达量均明显高于空白对照组和假手术组(P<0.05)。结论:在AP早期胰腺细胞骨架稳定性出现明显变化,HSP27及其p-HSP27含量及HSP27mRNA表达明显升高,提示HSP27在AP早期对胰腺细胞骨架的稳定性起到非常重要作用。

乳腺癌中pS2、HSP27、Cath-D的表达及临床意义

目的 探讨乳腺癌雌激素调节基因 pS2、HSP2 7、Cath D表达的临床意义。 方法 采用免疫组化S -P法检测 50例原发性乳腺浸润性导管癌中ER、pS2、HSP2 7、Cath -D的表达。 结果 pS2的表达与ER呈正相关性 (P <0 .0 1) ;与组织学分级呈负相关性 (P <0 .0 5)。HSP2 7表达与淋巴结转移、组织学分级及ER状态无相关性。有淋巴结转移的乳腺癌 ,间质Cath -D高表达率显著高于无淋巴结转移者 (P<0 .0 1)。结论 pS2表达与ER有关 ,pS2确能反映乳腺癌雌激素调节系统的完整性。间质Cath D表达与淋巴结转移有关 。

亚砷酸盐诱导HSP27的细胞内移位依赖于p38MAPK介导的磷酸化

为研究HSP27的磷酸化与其细胞内定位之间的关系,利用定点突变和DNA重组技术构建EGFP融合的HSP27野生型和第82位丝氨酸突变体的真核表达载体并转染NIH3T3细胞,观察两者在静息状态和亚砷酸盐刺激下的细胞内定位情况.利用p38MAPK特异性抑制剂SB203580预处理细胞后,观察对HSP27磷酸化和细胞内定位的影响.结果发现,野生型HSP27受到NaAsO2刺激后移位入核,而其突变体HSP27(S82A)不能入核.同时,SB203580的预处理使HSP27的磷酸化和NaAsO2诱导的移位入核都被阻断.这些结果表明,p38介导的HSP27磷酸化在其细胞内定位中具有重要作用.

HSP27在头颈鳞癌中的研究进展

HSP27是小分子量热休克蛋白(small heat stress proteins,sHSP)家族中的重要一员,其重要的生物学功能是保护细胞免受各种应激因素的损伤。此外,HSP27也可参与细胞的增殖、分化及细胞凋亡的信号转导通路调节等。近年来,HSP27与临床疾病尤其是与肿瘤的关系日益受到重视,本文就HSP27在头颈鳞癌中的研究进展作一综述。