小鼠HSP27/HSPB1单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备针对热休克蛋白27/热休克蛋白B1(HSP27/HSPB1)的特异性单克隆抗体并对其进行鉴定。方法用HSP27/HSPB1作为免疫抗原免疫BalB/c小鼠,通过常规杂交瘤技术将免疫后的小鼠脾细胞与SP2/0细胞经PEG融合,筛选阳性杂交瘤细胞株,进行克隆化培养后接种于小鼠腹腔制备HSP27/HSPB1单克隆抗体,并利用间接酶联免疫吸附试验、免疫印迹、免疫组织化学、免疫荧光技术对所制备的抗体进行鉴定。结果获得了一株可稳定分泌HSP27/HSPB1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为4C9C7,其亚类是IgG1,分泌的单克隆抗体能特异性结合组织和细胞中的HSP27/HSPB1蛋白。结论本实验成功制备了可稳定分泌HSP27/HSPB1单克隆抗体的杂交瘤细胞及HSP27/HSPB1特异性的单克隆抗体,可应用于各种相关的科学研究。

HSP27和CFL-1在角质细胞急性刺激反应中相关性的研究

研究急性刺激条件下,角质细胞中热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)和Cofilin-1(CFL-1)的表达是否具有相关性,初步探讨皮肤急性刺激反应的作用机理.通过免疫印迹法检测十二烷基硫酸钠(SDS)诱发的急性刺激反应下,角质细胞中HSP27和CFL-1蛋白的表达,并通过RNAi技术验证两者之间的相关性.结果发现,急性刺激诱导HSP27表达显著下调,CFL-1显著上调;干扰HSP27后,CFL-1的表达也随着下调,SDS刺激后,则表达上调.在急性刺激性条件下,HSP27和CFL-1的表达具有一定的浓度和时间依赖性;急性刺激能影响角质细胞骨架的改变,这些改变可能是通过HSP27和CFL-1的相互作用来调节的.

上皮性卵巢癌组织中DJ-1和HSP27蛋白的表达及与肿瘤侵袭转移的相关性

收集我院卵巢上皮性肿瘤石蜡组织标本43例和正常卵巢组织标本28例,采用免疫组织化学染色法检测DJ-1和HSP27蛋白的表达情况。结果DJ-1、HSP27蛋白在卵巢癌组织中的表达率均明显高于正常卵巢组织(P<0.05);皮性卵巢癌组织中DJ-1和HSP27蛋白的表达与分化程度、淋巴结转移相关(P<0.05)。上皮性卵巢癌组织中DJ-1和HSP27蛋白表达上调,其高表达可能促进上皮性卵巢癌侵袭转移。

三阴性乳腺癌中DJ-1和HSP27的表达及其临床意义

目的:探讨三阴性乳腺癌(TNBC)中DJ-1和HSP27的表达及其临床意义。方法:收集第四军医大学西京医院TNBC石蜡组织标本185例和正常乳腺石蜡组织标本120例,采用免疫组织化学SP法检测DJ-1和HSP27蛋白在TNBC组织和正常乳腺组织中的表达,并分析两者与TNBC临床病理学特征的关系。结果:185例TNBC组织中有137例呈DJ-1阳性表达,表达率为74.1%;有125例呈HSP27阳性表达,表达率为67.6%。120例正常乳腺组织中,6例DJ-1呈弱阳性表达,表达率为5.0%,而25例呈HSP27阳性表达,表达率为20.8%。TNBC组织中DJ-1和HSP27阳性表达率明显高于正常乳腺组织(P<0.05)。DJ-1在TN-BC组织中的表达与腋窝淋巴结转移、组织学分化、TNM分期、脉管癌栓密切相关(P<0.05),HSP27在TNBC组织中的表达与组织学分化密切相关(P<0.05)。185例TNBC组织中,DJ-1和HSP27蛋白的表达之间呈正相关(r=0.519,P<0.05)。结论:TNBC组织中存在DJ-1和HSP27的高表达,DJ-1对TNBC患者的恶性增殖、淋巴结转移、侵袭性强的生物学行为有重要影响,HSP27对TNBC患者的肿瘤细胞恶性分化程度有重要影响,且两者间存在协同作用。

拟阿尔茨海默病模型大鼠海马CA1区HSP27及IL-1表达

目的探讨Aβ(β-淀粉样肽)诱AD大鼠模型中海马HSP27和IL-1的表达,研究信号转导及炎性机制在AD中的作用。方法采用立体定向下双侧海马注射Aβ1-42建立AD动物模型,通过免疫组化染色及Western blot等方法,观测大鼠学习记忆能力、海马组织结构的病理改变及HSP27和IL-1的表达情况。结果HE染色显示,模型组大鼠海马神经元变性、缺失,胶质细胞浸润;免疫组化结果显示模型组大鼠海马CA1区HSP27和IL-1免疫阳性细胞表达多见(P<0.05);West-ern blot显示模型组海马组织HSP条带增宽表达强度高于对照组(P<0.05)。结论HSP27在AD的炎症反应机制中可能具有重要作用。

涎腺肿瘤中HSP27、HSP70与PCNA、CD9蛋白表达的相关性

目的研究热休克蛋白(HSP)27和70在涎腺肿瘤中的表达特征及与增殖细胞核抗原(PCNA)和移动相关蛋白-1(MRP-1,CD9)的相关性,探讨其对涎腺肿瘤发生发展的可能作用。方法采用免疫组化SP法和免疫组化双标双染法检测41例良性和17例恶性肿瘤中HSPs的表达。结果 (1)涎腺肿瘤中HSP27和HSP70高表达,但表达定位和强度存在差异。(2)涎腺恶性肿瘤中HSP27和CD9的阳性率和阳性强度均降低(P<0.05和P<0.01)而HSP70和PCNA的阳性率和阳性强度均增高(P均<0.05)。(3)HSP70的阳性率与阳性强度均与PCNA正相关(相关系数分别为Cramer’sV=3797和r=0.5123,P均<0.01);HSP27的表达率与CD9的阳性率正相关(Cramer’sV=0.3477),但阳性强度比较无相关(r=0.1762,P>0.05)。结论 (1)HSP70可能促进PCNA高表达,有用于涎腺肿瘤细胞的增殖。(2)HSP27可能不完全抑制肿瘤细胞的增殖。(3)HSP27和CD9的表达减少均可能是肿瘤细胞分化降低的标志,协同于增殖的恶性肿瘤细胞的迁移。

热休克蛋白27及热休克因子1在牙髓炎中的表达研究

目的:探讨热休克蛋白27(HSP27)和热休克因子1(HSF1)在实验型大鼠牙髓炎模型中的表达。方法:建立实验性大鼠上颌第一、第二磨牙牙髓炎模型并收集临床正常及牙髓炎组织标本,制作连续切片,应用免疫组化方法检测HSP27、HSF1的表达及定位。结果:免疫组化染色发现,大鼠正常牙髓组织中,HSP27阳性表达部位位于成牙本质细胞层;大鼠炎性牙髓组织中HSP27在成牙本质细胞层及炎症牙髓区域均呈阳性表达,且其表达强度随炎症程度逐渐增强;HSF1在大鼠正常及牙髓炎组织中均未表达。人牙髓组织检测结果与动物实验结果相一致。结论:HSP27的表达与牙髓炎的病变程度呈正相关;在牙髓组织损伤修复过程中HSP27可能是介导矿化修复的主要因子之一,而HSF1不参与该修复过程。

血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α与肝细胞癌患者经肝动脉化疗栓塞术治疗疗效的关系研究

目的:探讨血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、热休克蛋白(HSP)27、HSP70、HSP90α与肝细胞癌(HCC)患者经肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗疗效的关系。方法:选取2021年6月~2023年6月在南充市中心医院接受TACE治疗的HCC患者125例,根据TACE治疗疗效分为无效组(47例)和有效组(78例)。采用酶联免疫吸附法检测血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α。多因素Logistic回归分析影响HCC患者TACE治疗疗效的因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α对HCC患者TACE治疗无效的预测价值。结果:与有效组比较,无效组血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α水平升高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,低分化、血管侵犯和HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α升高为HCC患者TACE治疗无效的独立危险因素(P<0.05)。血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α联合预测HCC患者TACE治疗无效的曲线下面积为0.958,大于血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α单独预测的0.750、0.739、0.742、0.749。结论:血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α升高是HCC患者TACE治疗无效的独立危险因素,血清HIF-1α、HSP27、HSP70、HSP90α联合预测HCC患者TACE治疗无效的价值较高。

Intracellular HSP70L1 inhibits human dendritic cell maturation by promoting suppressive H3K27me3 and H2AK119Ub1 histone modifications

Epigenetic regulation has been attracting increasing attention due to its role in cell differentiation and behaviors.However,the epigenetic mechanisms that regulate human dendritic cell(DC)differentiation and development remain poorly understood.Our previous studies show that extracellular heat shock protein 70-like protein(HSP70L1)is a potent adjuvant of Th1 responses via stimulating DCs when released from cells;however,the role of intracellular HSP70L1 in DC differentiation and maturation remains unknown.Herein,we demonstrate that intracellular HSP70L1 inhibits human DC maturation by suppressing MHC and costimulatory molecule expression,in contrast to the adjuvant activity of extracellular HSP70L1.The stability of intracellular HSP70L1 is dependent on DNAJC2,a known epigenetic regulator.Mechanistically,intracellular HSP70L1 inhibits the recruitment of Ash1l to and maintains the repressive H3K27me3 and H2AK119Ub1 modifications on the promoter regions of costimulatory,MHC and STAT3 genes.Thus,intracellular HSP70L1 is an inhibitor of human DC maturation.Our results provide new insights into the epigenetic regulation of cell development by intracellular HSP70L1.

读《颞叶癫痫大鼠海马CA1区热休克蛋白27的表达》一文有感

最近中华医学杂志杨璞等发表的一篇论著《颞叶癫痫大鼠海马CA1区热休克蛋白27的表达》提供了非常有用的信息。文章强调了热休克蛋白27基因（HSP27基因）在神经元保护和病理学发生机制方面的重要性。例如，HSP27在神经病变发展过程中的突显性表达，可以起到保护糖尿病患者中感觉神经元的作用。

腓骨肌萎缩症患者致病基因突变特点的研究

目的探讨腓骨肌萎缩症(CharcotMarieToothdisease,CMT)致病基因的突变特点。方法应用实时荧光定量PCR方法、聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCRSSCP)或PCR直接测序等方法对113个确诊的CMT家系进行了PMP22、MPZ、CX32、EGR2、GDAP1、NEFL、HSP22、HSP27等致病基因进行突变检测。结果发现有36个家系为PMP22重复突变所致,7个家系为CX32基因突变所致,1个家系为MPZ基因突变所致,1个家系为GDAP1基因突变所致,1个家系为HSP22基因突变所致,1个家系为HSP27基因突变所致,未发现PMP22、EGR2和NEFL基因点突变。结论CMT的PMP22基因重复突变所占比例为31.9%,CX32基因突变所占比例为6.2%,HSP22、HSP27、MPZ和GDAP1基因点突变所占比例均为0.9%,PMP22、EGR2和NEFL基因点突变少见。

COPD大鼠模型气道弹性及炎症因子改变的研究

目的探讨COPD大鼠模型中气道弹性及炎症因子的改变。方法将40只Wistar大鼠随机分为5组，每组再分两组（COPD模型组及正常对照组），采用烟熏加气管内注入脂多糖的方法制造COPD大鼠模型。用HE三染色及马松（Masson）三色染色评价大鼠气道壁病理变化和胶原纤维的变化；采用ELISA法检测血清中基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase9，MMP9）、金属蛋白酶抑制物1（tissue inhibitor of metalloproteinasel，TIMPl）及热休克蛋白（heatshock proteins27，HSP27）的表达水平。结果COPD模型组血清MMP9、TIMP1及HSP27的表达水平高于正常对照组的表达水平；COPD模型组MMP9的表达总体呈上升趋势，差异有统计学意义（P〈0．01）；COPD模型组TIMP1的表达总体呈上升趋势，G3与G5组（P〈0．01）及G4与G5组（P〈0．01）差异有统计学意义；COPD模型组MMP9／TIMP1的比值随MMP9和TIMP1改变而变化，差异有统计学意义（P〈0．01）；COPD模型组HSP27的表达呈轻微上升趋势，G4与G5组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MMP9／TIMP1的平衡及胶原纤维、HSP27的改变可以作为评价COPD进展的重要指标。