热休克蛋白27在神经系统中的生物学作用

热休克蛋白（heat shock protein,HSP）广泛存在于多种生物细胞,属于高度保守的蛋白质家族。它是20世纪70年代由美国学者Tissieres等[1]发现的一类新型蛋白质。热休克蛋白可以上调细胞的应激反应能力,以保护细胞远离各种压力,当细胞遭受高热、氧化还原反应,接触重金属以及氨基酸类似物或细胞毒性药物时会启动神经系统内的热休克蛋白系统。

庆大霉素中毒性耳聋豚鼠耳蜗热休克蛋白70的表达及川芎嗪的保护作用(英文)

背景:川芎嗪具有降低庆大霉素的耳毒性作用,但川芎嗪能否通过增加耳蜗热休克蛋白70表达,从而拮抗庆大霉素的耳蜗毒性作用。目的:应用免疫组化及图像分析技术并结合听性脑干反应测试,观察川芎嗪对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗热休克蛋白70表达的影响。设计:随机对照实验,直线相关分析。单位:沈阳医学院生理教研室和中国医科大学听力研究室。材料:选用清洁级耳郭反射灵敏的健康白色红目豚鼠40只,体质量200～250g,雌雄不拘。随机分为庆大霉素组、川芎嗪+庆大霉素组、川芎嗪组、正常对照组,每组10只。方法:川芎嗪+庆大霉素组每日左侧腹腔注射川芎嗪注射液140m g/kg,同时在右侧腹腔注射硫酸庆大霉素注射液100m g/kg。庆大霉素组:每日腹腔注射硫酸庆大霉素注射液100mg/kg。川芎嗪组每日腹腔注射川芎嗪注射液140m g/kg。正常对照组每日腹腔注射生理盐水2.5m L /kg,各组皆连续用药10d。各组动物混合饲养,每日测量体质量调整药量。在用药前和停药后分别检测各组大鼠听性脑干反应阈值,停药处死后应用SABC 免疫组化和图像分析技术,观察各组豚鼠耳蜗热休克蛋白70表达情况。主要观察指标:①各组大鼠听性脑干反应阈值。②各组大鼠耳蜗热休克蛋白70表达。结果:①豚鼠听性脑干反应阈值:川芎嗪+庆大霉素组、庆大霉素组均明显高于正常对照组犤(21.09±4.50)dBnH L,(36.55±6.13)dBnH L,(2.50±2.75)dBnHL,t=15.764～22.665,P <0.001犦。川芎嗪+庆大霉素组明显低于庆大霉素组(t=9.092,P <0.001)。②豚鼠耳蜗各部位热休克蛋白70表达:庆大霉素组耳蜗Corti's器、血管纹和螺旋韧带、螺旋缘、螺旋神经节4个部位细胞热休克蛋白70阳性反应产物平均灰度值低于正常对照组犤(88.24±4.34,96.85±1.05;121.24±0.92,128.76±1.59;96.15±1.10,98.78±0.54;117.73±1.18,120.51±0.80),(t=6.097～18.307,P <0.001)犦。川芎嗪+庆大霉素组耳蜗Corti’s 器、血管纹和螺旋韧带、螺旋缘、螺旋神经节4个部位细胞热休克蛋白70阳性反应产物平均灰度值明显高于庆大霉素组(92.53±2.25,88.24±4.34;125.20±1.43,121.24±0.92;98.71±0.91,96.15±1.10;118.91±0.46,117.73±1.18,t=3.925～10.415,P <0.001)。③各组各部位热休克蛋白70阳性反应产物平均灰度值与听性脑干反应阈值高度相关(r=-0.8141～-0.9841,P <0.001)。结论:应用川芎嗪注射液可降低听性脑干反应阈值和庆大霉素中毒耳蜗热休克蛋白70的表达,以减轻庆大霉素的耳毒性损伤,从而改善听功能。

脂多糖通过上调热休克蛋白27的表达减轻小鼠肾缺血再灌注损伤

目的探讨热休克蛋白27(heat shock protein-27,HSP27)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)减轻小鼠肾缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)损伤中的作用。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:假手术组、LPS+假手术组、肾IR组和LPS+肾IR组,每组又分为槲皮素(quercetin,200 mg/kg)亚组和溶剂对照亚组。采用右肾切除+左肾肾蒂夹闭25min后再灌注建立肾IR模型,在肾IR前3d腹腔注射LPS(3mg/kg)进行预处理,采用槲皮素(200mg/kg)灌胃抑制HSP27的表达。再灌注后24h,各组小鼠经腹主动脉采血检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平评估肾IR损伤模型,取左肾评估炎症反应程度、HSP27蛋白表达水平及凋亡相关蛋白caspase-3的活性。结果 LPS预处理可明显降低肾IR后的血清Cr、BUN水平,并减少肾小管损伤程度,同时能提高肾内HSP27的表达水平(P<0.05);槲皮素能明显抑制肾内HSP27的表达水平,且能明显削弱LPS预处理对肾脏IR的减轻作用,包括升高Cr、BUN水平和造成更严重的炎症反应(P<0.05)。另外,LPS能明显降低肾脏IR后肾内caspase-3的活性,但槲皮素能明显削弱这种作用(P<0.05)。结论 LPS通过上调HSP27的表达减轻小鼠肾脏IR损伤。

共伴侣分子Cdc37从人热休克蛋白90复合体解离中ATP的作用机制

目的探讨ATP导致共伴侣分子细胞分裂周期蛋白37(Cdc37)从人热休克蛋白90(HSP90)复合体解离的可能机制,为抗肿瘤新药研发提供理论依据。方法用免疫共沉淀法(IP)捕获人组织淋巴瘤细胞(U937细胞)中HSP90复合体后,进行以下实验:(1)用流式细胞术(FCM)检测经过ADP、17-烯丙基胺格尔德霉素(17-AAG)、亚胺二磷酸腺苷(AMPPNP)、ATP处理后HSP90复合体中的Cdc37含量,并分别与经二甲基亚砜(DMSO)处理的对照组进行比较,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是单纯由ATP结合导致还是依赖ATP水解;(2)用FCM检测对照组及ATP处理后复合体中Cdc37和其他共伴侣分子中S期激酶关联蛋白1 G2等位基因抑制因子(Sgt1)、HSP70相互作用蛋白(HIP)、FK-506结合蛋白(FKBP5)、应激诱导蛋白1(STIP1)、热休克蛋白90腺苷三磷酸酶同系物1激活剂(AHSA1)的变化情况,并用IP-westernblot(IP-WB)进行验证,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是否伴随其他共伴侣分子解离;(3)用IP-WB检测对照组及ATP处理组复合体中HSP90、Cdc37及共伴侣分子Sgt1的磷酸化水平;用FCM检测对照组、ATP组及蛋白激酶抑制剂组复合体中的Cdc37及Sgt1的含量。研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是否伴随HSP90、Cdc37及其他共伴侣分子磷酸化。结果与对照组相比,ATP处理后HSP90复合体中Cdc37含量显著下降,而ADP、AMPPNP及17-AAG处理对Cdc37无影响;HSP90复合体中加入ATP导致复合体中Cdc37解离,伴随复合体共伴侣分子Sgt1含量降低;HSP90复合体中加入ATP后,复合体中Cdc37、Sgt1磷酸化水平显著增加。而在HSP90复合体中加入蛋白激酶抑制剂后,会阻断ATP导致的Cdc37及Sgt1与复合体解离。结论HSP90复合体中ATP导致Cdc37解离的可能机理是:(1)ATP结合HSP90导致该复合体构象改变;(2)ATP导致Sgt1与该复合体解离,且在这个过程中伴随Cdc37与Sgt1的磷酸化增加。特异性抑制Cdc37和HSP90结合,是抗肿瘤新药研究的方向之一,研究Cdc37与HSP90解离机制是此类药物开发的基础。

趋化因子CCL2对血小板p38MAPK-HSP27通路的影响

目的探讨CC趋化因子配体2(CCL2)在残余血小板高反应中的作用及其调控血小板的可能机制。方法纳入ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者40例,采用Verify Now法检测P2Y12反应单元(PRU),根据检测结果将40例患者分为残余血小板高反应组(高反应组,n=24)和残余血小板正常反应组(正常反应组,n=16)。ELISA检测两组患者血浆中CCL2的表达,Western blotting检测血小板中CCL2和CCR2的表达,ARY003B蛋白芯片筛选经外源性CCL2刺激后血小板中磷酸化水平发生变化的激酶。Western blotting验证经CCL2刺激,或经CCR2拮抗剂(RS 102895)、p38MAPK信号通路抑制剂(SB 203580)预处理后血小板中p38MAPK和HSP27的磷酸化变化。结果高反应组血浆中CCL2浓度、血小板中CCL2和CCR2表达均明显高于正常反应组。经外源性CCL2刺激后,芯片筛选发现p38α、HSP27的磷酸化水平增高。在CCL2刺激前,应用RS 102895或SB 203580预处理血小板,Western blotting检测显示p38MAPK和HSP27的磷酸化水平下降。结论 CCL2以自分泌/旁分泌的方式参与残余血小板高反应,CCL2可能通过p38MAPK-HSP27通路调控血小板。

热休克蛋白27致敏对大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的 观察热休克蛋白27（HSP27）致敏对大鼠视网膜神经节细胞（RGC）凋亡的影响.方法 35只雌性Wistar大鼠分为HSP27致敏组、硼酸盐缓冲液（BBS）对照组、正常组,分别为15、15、5只大鼠.给予HSP27致敏组大鼠后肢皮下注射100μg的HSP27和完全弗式佐剂,腹腔注射1μg百日咳毒素.BBS对照组大鼠于相同部位注射等量BBS.正常组大鼠不作任何处理.注射前3d及注射后3d,1、2、4、6、8周,检测大鼠双眼眼压.注射后4、6、8周行视网膜冰冻切片,采用原位末端标记法检测RGC的凋亡情况,计算细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清和脑脊液中HSP27抗体的含量.结果 HSP27致敏组、BBS对照组、正常组大鼠注射前后眼压均无明显波动,差异均无统计学意义（P＞0.05）.HSP27致敏组于注射后4周即可见RGC凋亡,注射后6周凋亡的RGC明显增多.BBS对照组及正常组均未见RGC凋亡.HSP27致敏组大鼠血清、脑脊液中HSP27抗体含量分别于注射后4、6周出现高峰,然后随着注射时间延长而递减.注射后4、6、8周,HSP27致敏组RGC凋亡率、血清中HSP27抗体含量、脑脊液中HSP27抗体含量分别与BBS对照组、正常组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;BBS对照组RGC凋亡率、血清中HSP27抗体含量、脑脊液中HSP27抗体含量与正常组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 HSP27致敏可促进大鼠RGC的凋亡.脑脊液中HSP27抗体含量与RGC凋亡趋势一致.

热休克蛋白27介导多发性骨髓瘤U266细胞对硼替佐米的耐药

目的 :研究多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞中热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)表达水平,并探讨其与硼替佐米(bortezomib,BTZ)耐药的相关性。方法 :分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测22例MM患者(12例为初治患者,10例为含硼替佐米方案治疗后复发患者)骨髓瘤细胞(CD38+/CD138+浆细胞)中HSP27 mRNA和蛋白表达水平。建立对硼替佐米耐药的U266/BTZ细胞株,CCK-8法检测不同浓度的BTZ、多柔比星和依托泊苷对亲本U266细胞和耐药U266/BTZ细胞增殖活力的影响,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测U266和U266/BTZ细胞中HSP27 mRNA和蛋白的表达水平。采用siR NA干扰技术沉默U266/BTZ细胞中HSP27基因的表达水平,FCM法检测沉默HSP27基因表达对BTZ诱导U266/BTZ细胞凋亡的影响。采用BTZ单药或联合p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activate protein kinase,MAPK)信号通路抑制剂SB203580处理U266细胞,蛋白质印迹法检测细胞中HSP27、磷酸化-HSP27(phospho-HSP27,p-HSP27)、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白的表达水平。最后,构建重组慢病毒pC DH-CMV-MCSEF1-copG FP-T2A-Puro/HSP27并将其感染U266细胞使HSP27基因过表达,采用荧光底物法检测不同浓度的BTZ对U266细胞中20S蛋白酶体活性的影响。结果 :复发MM患者骨髓瘤细胞中HSP27 mRNA和蛋白的表达水平明显高于初治MM患者(P值均<0.01)。成功构建对BTZ耐药的骨髓瘤细胞株,与亲本U266细胞相比,BTZ、多柔比星和依托泊苷对耐药U266/BTZ细胞的半数抑制浓度(half-maximalinhibitoryconcentration,IC50)均明显提高(P值均<0.01),U266/BTZ细胞中HSP27 mRNA和蛋白表达水平均明显上调(P值均<0.01)。沉默HSP27基因表达可显著提高BTZ诱导的U266/BTZ细胞的凋亡率。BTZ单药处理可上调U266细胞中HSP27、p-HSP27和p-p38MAPK蛋白的表达水平;与BTZ单药组相比,SB203580联合BTZ组U266细胞中HSP27、p-HSP27和p-p38MAPK蛋白的表达水平均明显下调(P值均<0.01)。HSP27基因过表达可显著减弱BTZ对U266细胞中20S蛋白酶体活性的抑制作用(P值均<0.01)。结论 :HSP27表达与MM细胞对BTZ耐药密切相关,这可能与BTZ暴露活化p38 MAPK信号通路上调HSP27表达,从而反馈性减弱BTZ对蛋白酶体活性的抑制有关。

严重烫伤后早期大鼠胃黏膜组织中热休克蛋白70表达变化及胰岛素干预作用

目的研究热休克蛋白（HSP70）在严重烫伤早期大鼠胃黏膜组织中动态表达变化及胰岛素和HSP70对严重烫伤早期大鼠胃黏膜组织的保护作用，探讨胰岛素促进HSP70表达的可能机制。方法采用大鼠烫伤模型，以免疫组织化学的方法和显微图像分析方法观察伤后3、6、12、24和48h不同时相点胃黏膜组织中HSP70的表达情况及胃黏膜组织的病理形态学变化。结果治疗组除12h时相点（9．40±1．52，P=0．065）外其余不同时相点HSP70的表达水平分别高于烫伤组相同时相点HSP70的表达水平[（6．80±1．10，8．60±0．55，10．80±1．64，11．40±1．34），P〈0．05]，治疗组各时相点胃黏膜损伤指数分别低于烫伤组相同时相点损伤指数[（4．05±O．36，11．97±1．15，20．98±2．83，13．92±O．94，1．60±0．55），P〈0．05]。病理形态学变化显示对照组胃黏膜组织结构完整无损伤，烫伤早期SD大鼠胃黏膜组织损伤明显，治疗组SD大鼠胃黏膜组织损伤较烫伤组明显减轻。相关分析结果显示，HSP70与胃黏膜损伤指数、血糖之间呈正相关（r=0．904，0．961，P〈0．01）。结论胰岛素能够明显增强严重烫伤早期SD大鼠胃黏膜组织内HSP70的表达，促进胃黏膜组织HSP70的合成，可能是胰岛素保护胃黏膜组织的重要机制之一。

热休克蛋白27在甲状腺癌中的研究进展

热休克蛋白27(HSP27)是热休克蛋白家族的重要成员之一,除了其众所周知的伴侣功能外,近些年的研究表明其在某些恶性肿瘤中存在过表达的情况,大量研究证实了HSP27与甲状腺癌之间存在明显相关性,本文就HSP27在甲状腺癌中的研究进展作一综述。

应用蛋白质组学方法研究动脉粥样硬化闭塞症发病机制

目的 运用比较蛋白质组学的方法筛选人动脉粥样硬化闭塞症（ASO）差异蛋白质,探讨ASO发病机制.方法 选取8例ASO患者的股动脉作为ASO组,其中男性6例,女性2例,平均年龄68.6岁；对照组为无病变股动脉5例,其中男性3例,女性2例,平均年龄44.2岁.提取组织蛋白质,行双向凝胶电泳分离、质谱分析及数据库查询,获得差异蛋白信息.利用免疫组化和Western blot进一步验证其中的差异蛋白.结果 两组蛋白质表达存在明显差异,筛选出差异2倍以上的蛋白质点53个,27个上调,26个下调,质谱鉴定了25个差异点,代表13种蛋白质,主要涉及平滑肌细胞增殖迁移、氧化应激、炎症等；验证其中的热休克蛋白27（HSP27）,结果与质谱鉴定一致.结论 蛋白质组学筛选ASO差异蛋白质是可行的,筛选出的差异蛋白质可能参与了ASO的发病机制.其中,差异蛋白HSP27可能有重要作用.

转化生长因子-β1对人视网膜色素上皮细胞热休克蛋白47及血管内皮生长因子表达的影响

人视网膜色素上皮（RPE）细胞增生、迁移、合成细胞外基质是促进增生性玻璃体视网膜疾病（PVD）发生和发展的主要原因之一.血管内皮生长因子（VEGF）可诱导入RPE细胞增生、迁移 转化生长因子-β1（TGF-β1）可诱导入RPE细胞迁移及合成细胞外基质 均在PVD形成过程中发挥着重要作用.但目前,有关其作用机制尚不明确.RPE细胞热休克蛋白47（HSP47）是一种胶原特异的分子伴侣,对胶原成熟有一定影响.我们通过观察TGF-β1对人RPE细胞HSP47及VEGF合成的影响,以进一步探讨TGF-β1在PVD发病机制中的作用.现将结果报道如下.

糖皮质激素治疗重症肌无力患儿与外周血单个核细胞中热休克蛋白90α、β的关系

目的 探讨糖皮质激素（GC）治疗重症肌无力（MG）患儿与外周血单个核细胞（PB-MC）中热休克蛋白（HSP） 90α、β的关系.方法 对20例新发MG患儿治疗前后及健康儿童19例留取新鲜血液,分离出PBMC,一部分选用RT-PCR法检测HSP90α、β亚型mRNA表达水平;另一部分用免疫细胞化学观察PBMC中HSP90α、β阳性细胞比例.结果 MG患儿治疗前后HSP90α、β阳性细胞比例均比对照组明显升高（P＜0.05）、mRNA表达水平均比对照组升高（P＜0.05）,且MG患儿治疗后HSP90β主要表达于细胞核（P＜0.05）.结论 MG患儿PBMC中HSP90α、β在GC干预后HSP90β升高显著,提示HSP90β协助糖皮质激素受体（GR）结合、转运GC的数量增加,促进和增强GC的生理及药理作用的发挥,从而达到改善患儿临床症状.

透明质酸钠对膀胱黏膜损伤后修复的影响

目的探讨不同分子量与浓度的透明质酸钠(SH)对膀胱黏膜损伤后上皮修复的影响。方法将大鼠随机分为A、B、C、D、E、F共6组,每组8只,A组为空白对照组,B组为阴性对照组,C组为小分子量低浓度组,D组为小分子量高浓度组,E组为大分子量低浓度组,F组为大分子量高浓度组。用盐酸损伤大鼠膀胱黏膜后,分别用大、小(1650ku、1100ku)分子量和高、低(0.2%、0.08%)浓度的SH溶液膀胱内灌注,用常规病理染色技术观察膀胱黏膜损伤范围及炎症浸润的改变情况,用免疫组织化学法检测SH对热休克蛋白60、70(HSP60、HSP70)在黏膜中表达的影响。结果镜下病理改变,C、D、E组均有黏膜充血,少量出血,F组为散在小点状出血;HSP60的表达,F组分别与B、C两组相比有统计学意义(P<0.01),D、C两组对比差异有统计学意义(P<0.05),F、E两组相比差异无统计学意义(P>0.05);HSP70的表达,F组分别与B、C、D、E组相比差异均有统计学意义(P<0.01),D、C两组对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论增加SH的分子量及浓度对于提高膀胱黏膜损伤后修复的效果是明显的,这可能与增加了SH的黏稠度有关。

去甲肾上腺素预处理对大鼠供心肌细胞凋亡及凋亡蛋白表达的影响

目的 探讨去甲肾上腺素预处理是否可诱导心肌热休克蛋白70（HSP70）的合成,并进一步研究其对大鼠供心缺血再灌注后心肌细胞凋亡及凋亡蛋白表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠18只,随机分为2组：对照组（n=9）,腹腔注射生理盐水0.5 ml,24 h后取离体心脏灌注HTK心肌保护液,4℃保存3 h.然后行Langendorff离体心脏灌注,灌注Krebs-Henseleit（K-H）液2 h.实验组（n=9）,腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素（溶于生理盐水中）3.1 μmol/kg（0.53 mg/kg）,腹腔注射24 h后取离体心脏,处理方法同对照组.心脏灌流结束后取材测定各组心肌HSP70表达,TUNEL法测定心肌细胞凋亡率,免疫组化法测定凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达,并对相关指标做统计学处理比较.观察心肌细胞光镜结构和电镜下的超微结构.结果 实验组心肌组织HSP70表达明显高于[（17.78±1.82）%]对照组[（5.22±1.05）%],心肌细胞凋亡率明显低于[（5.57±1.05）%]对照组[（9.44±1.27）%],凋亡相关蛋白Bcl-2明显高于[（41.88±5.09）%]对照组[（31.36±3.27）%],Bax明显低于[（22.61±3.49）%]对照组[（40.52±4.17）%].实验组心肌组织光镜下结构以及电镜下超微结构的损伤较对照组明显减轻.结论 去甲肾上腺素预处理能诱导心肌组织HSP70高表达,HSP70对离体大鼠心脏经过缺血再灌注后具有明显的保护效应,去甲肾上腺素预处理能够明显保护心肌的结构和功能,抑制心肌细胞凋亡.

沙库巴曲缬沙坦和缬沙坦在老年心力衰竭的应用价值比较

目的基于血清热休克蛋白27(serum heat shock protein 27,HSP27)和可溶性糖蛋白130(soluble glycoprotein 130,sgp130)水平的变化,探究沙库巴曲缬沙坦与缬沙坦在老年慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)治疗中的应用价值差异。方法回顾性选取2021年6月至2023年12月徐州医科大学第二附属医院收治的204例CHF患者为研究对象,随机数字表法分为A组和B组,各102例。A组给予沙库巴曲缬沙坦治疗,B组给予缬沙坦治疗。比较治疗6个月后的临床疗效及心功能等级差异;比较治疗前后患者HSP27、sgp130、N末端B型钠尿肽前体、心脏超声相关指标;记录患者心血管事件发生情况。结果治疗后,A组患者临床总有效率显著高于B组,A组患者纽约心脏病协会心功能分级优于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后2组患者HSP27、sgp130、N末端B型钠尿肽前体、左心室舒张末期内径、左心室后壁厚度、室间隔厚度水平显著降低,且A组低于B组(P<0.01);治疗后2组左心室射血分数、心排血量显著升高,A组高于B组[(55.47±5.27)%vs(52.70±5.08)%,(4.97±0.26)L/min vs(4.61±0.16)L/min,P<0.01]。治疗后,A组心肌梗死、心血管事件总发生率低于B组(0.98%vs 6.86%,P=0.030;8.82%vs 18.63%,P=0.042)。结论在老年CHF患者中,相较于缬沙坦治疗,沙库巴曲缬沙坦更能有效调节机体血清HSP27、sgp130水平,逆转心室重构情况,改善患者心功能。

点阵Er：YAG激光照射对皮肤胶原增生的影响

目的探讨点阵铒：钇铝石榴石（Er：YAG）激光定点多重脉冲照射对正常人皮肤的组织学影响。方法使用点阵Er：YAG激光连续多脉冲照射正常受试者的上臂皮肤，取照射后1h、24h、48h、72h、7d、15d及30d的照射皮肤和未照射皮肤进行组织学观察，包括HE染色、抗热休克蛋白70、47免疫组化染色和Masson染色。结果点阵Er：YAG激光连续多脉冲照射正常受试者皮肤，刺激皮肤组织产生一系列点阵排列的局灶性锥状气化剥脱微损伤。照射后1—7d，微损伤区皮肤产生炎症反应，表皮细胞上皮化；7～30d局部真皮内胶原新生、重塑。热休克蛋白70在照射后72h至第7天内呈峰值表达；热休克蛋白47在照射后15～30d持续高表达。结论点阵Er：YAG激光定点多重脉冲照射人体皮肤可以到达真皮深层，从而获得局灶性胶原增生的疗效。

Aβ25-35诱导大鼠心肌细胞内质网应激和细胞凋亡的研究

目的 研究β淀粉样蛋白25-35（Aβ25-35）对培养大鼠心肌细胞的凋亡及内质网应激相关蛋白的影响,探讨内质网应激在A β25-35所致心肌损伤中的作用.方法 体外培养大鼠心肌细胞,给予不同浓度Aβ25-35刺激,用MTT方法观察心肌细胞的存活率,采用Hoechst33258染色观察心肌细胞的形态,流式细胞术检查细胞凋亡率,采用Western blot方法检测内质网应激蛋白X盒结合蛋白-1（XBP-1）、葡萄糖调节蛋白78 （GRP78）和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）的水平,以及凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved PARP的水平.结果 Aβ25-35可以降低体外培养大鼠心肌细胞的存活率,促进凋亡,且呈现浓度依赖的方式.给予Aβ25-35后内质网应激蛋白XBP-1、GRP78和CHOP表达增加,同时凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）表达也增加.结论 Aβ25-35可以导致体外培养的大鼠心肌细胞发生凋亡,而内质网应激可能参与了心肌细胞发生凋亡过程,为有效防治AD相关性心肌损伤提供新思路.

胆总管结扎预适应减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的探讨胆总管结扎预适应减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤的可能机制。方法C57BL／6小鼠分为3组进行实验。胆总管结扎预适应组（CBDL组）结扎胆总管（d0），2d后（d2）再通，再过2d后（d4）行左肾缺血再灌注手术；假手术组仅结扎胆囊管（d0），d4再行左肾缺血再灌注手术；对照组不进行任何处理。监测血胆红素总量（THil）的变化情况。肾脏缺血再灌注后24h（d5）检测各组小鼠血清肌酐（Cr）。蛋白质印迹法检测CBDL组和假手术组肾脏热休克蛋白27（HSP-27）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达情况。结果CBDL组胆总管结扎2d后，TBil达到最高，再通2d后，TBil基本降至正常水平。CBDL组Cr低于假手术组（P〈0．05）。CBDL组HSP-27和eNOS的表达量高于假手术组（P〈0．05）。结论胆道结扎预适应能明显减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤，其机制可能与引起肾脏局部HSPL27和eNOS高表达有关。

天疱疮发病机制的研究进展

天疱疮是自身免疫引起表皮棘层细胞松解导致的慢性复发性表皮内大疱性皮肤病，典型表现为红斑基础上的疱壁松弛性水疱、糜烂、尼氏征阳性。依据天疱疮的临床表现，分为寻常型、增殖型、落叶型和红斑型天疱疮。天疱疮主要的发病机制是患者存在针对角质形成细胞桥粒芯（糖）蛋白的自身抗体，但棘层松解的详细机制尚不清。近年来，随着对蛋白组学、免疫学和分子生物学技术的发展以及天疱疮发病机制研究的不断深入，发现天疱疮的发病机制中除传统的桥粒芯（糖）蛋白自身抗体外，非桥粒芯（糖）蛋白抗体因素也参与了棘层松解的形成，为天疱疮提供了新的潜在治疗靶位。