热休克蛋白90在HBV复制中的作用

HBV传播范围广,慢性感染状态多,治愈率低,提高HBV治愈率有助于改善患者的长期预后状况。热休克蛋白90(Hsp90)是广泛存在于生物体内的一种分子伴侣蛋白。近年来越来越多的研究表明,Hsp90与HBV感染有关,在HBV的复制过程中起重要作用,可与病毒的特定蛋白相互作用促进病毒复制,也可与宿主自身蛋白相互作用来发挥功能。本文就近年来Hsp90在HBV复制中的作用相关研究进展作一综述,以期为以Hsp90为靶点的抗HBV药物研发与HBV防治提供新的理论指导和方向。

大鼠弥漫性轴索损伤后海马热休克蛋白质70 mRNA表达

目的研究大鼠弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后大脑海马中热休克蛋白质(heat-shockproteins,HSP)70 mRNA的表达变化。方法采用RT-PCR扩增,扩增产物用琼脂糖凝胶电泳检验,观察DAI后大鼠海马中HSP70 mRNA的表达变化。结果损伤后4 h,大鼠海马中HSP70 mRNA的表达增加,24 h表达达高峰,48 h后表达减弱。结论大鼠海马中HSP70 mRNA表达可作为DAI诊断的参考指标。

热休克蛋白90与类固醇激素受体功能的研究进展

热休克蛋白90(HSP90)是一类重要的应激蛋白,作为分子伴侣参与蛋白质的折叠、运输等过程。作为类固醇激素受体的伴侣蛋白,HSP90在一定程度上决定了其功能状态,因而极有必要对HSP90的异常合成、分布、功能及其与类固醇激素发挥生理效应和治疗作用之间的关系、调节机制作深入的探讨。现就目前的研究现状综述如下。

类胡萝卜素对合浦珠母贝热休克蛋白基因HSP22表达的影响

该研究获得了合浦珠母贝(Pinctada fucata)热休克蛋白22 (heat shock protein 22,PfHSP22)基因cDNA序列,全长2 187 bp,其中开放阅读框699 bp,预测编码232个氨基酸。结构预测显示PfHSP22具有小热休克蛋白家族典型结构域"α-晶体结构域"(ACD)。氨基酸序列比对结果显示,PfHSP22与缢蛏(Sinonovacula constricta)的HSP22相似性最高(54%)。进化分析显示,PfHSP22与软体动物的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果分析表明,常温条件下,PfHSP22在类胡萝卜素含量高的橘色组和含量低的白色组的各组织中均有表达,足中表达量最高,且橘色组均显著高于白色组(P<0.05),表明类胡萝卜素含量高低可能影响PfHSP22的基础表达量。高温胁迫时,橘色组和白色组各组织的PfHSP22表达量在前3 h基本呈现下降趋势,之后呈现出或升高或下降的复杂变化;其中橘色组一些组织的PfHSP22表达量显著升高时间晚于白色组,这可能是由类胡萝卜素含量差异引起。

HBV相关肝细胞癌肿瘤组织中热休克蛋白mRNA表达水平与肿瘤分期的相关性分析

目的分析肝细胞癌(HCC)肿瘤组织中热休克蛋白(HSP)mRNA表达水平与HCC肿瘤分期的相关性。方法从NCBI网站的基因表达数据库(GEO)下载GSE14520数据集。从GSE14520基因数据库中获取HSP基因25种,通过与数据库下载的临床资料比对,纳入具有HSP基因mRNA表达水平和有对应临床资料的220例HCC患者。提取220例患者癌组织HSP基因的mRNA表达水平及对应的TNM分期及BCLC分期并进行相关性分析。采用Kruskal-Wallis H非参数检验进行多组间比较,采用单因素及多因素logistic回归分析HSP与HCC肿瘤分期的相关性。结果 HSPA12A、HSPA5、HSP90AA1与HSPA13 mRNA随着TNM分期增高,表达逐渐升高(P值均<0.05);HSP90AA1 mRNA随着BCLC分期增高,表达逐渐升高(P<0.05)。HSPA4L(OR=1.019,P=0.005)、HSPA12A(OR=1.077,P=0.026)与HSP90AA1(OR=1.001,P=0.002)是影响TNM分期的危险因素;HSPA9 mRNA升高与HCC患者TNM分期呈负相关(OR=0.995,P=0.011)。HSPH1(OR=1.005,P=0.041)、HSPA1B(OR=1.002,P=0.048)与HSPA5(OR=1.000,P=0.001)是影响BCLC分期的危险因素;HSPA9 mRNA升高与肝癌BCLC分期呈负相关(OR=0.995,P=0.005)。结论 HSP与HCC患者肿瘤临床分期存在一定相关性。

非小细胞肺癌患者血清热休克蛋白90α的临床意义研究

目的了解非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清热休克蛋白90α(HSP90α)的临床意义。方法选取2013年1月—2014年5月,在郑州大学第一附属医院中西医结合内科、胸外科及呼吸内科接受住院治疗的NSCLC患者80例为肺癌组;另选取同时期在郑州大学第一附属医院进行体检的健康成年人30例为对照组。比较并分析两组血清HSP90α水平;比较不同肿瘤分期(TNM分期)患者血清HSP90α水平,探讨TNM分期与血清HSP90α水平的相关关系;根据中医辨证结果对肺癌组进行中医分型,比较不同中医分型患者的血清HSP90α水平。结果对照组与肺癌组血清HSP90α水平比较,差异有统计学意义(t=16.02,P<0.05)。不同TNM分期患者的血清HSP90α水平比较,差异有统计学意义(F=14.98,P=0.00);Spearman秩相关分析显示,TNM分期与血清HSP90α水平呈正相关(rs=0.42,P<0.01)。不同中医分型患者的血清HSP90α水平比较,差异有统计学意义(F=4.22,P<0.01)。结论NSCLC患者的血清HSP90α水平较健康成年人高,TNM分期较高的患者,其血清HSP90α水平也较高。血清HSP90α水平可以反映NSCLC患者正邪、虚实的转变,有望成为其中医辨证论治的客观依据,可作为NSCLC患者的肿瘤标志物,在预测疾病的发生、发展方面具有较高的临床意义。

热休克蛋白70阳性表达与食管鳞癌临床预后分析

【目的】探讨热休克蛋白70(HSP70)与食管鳞癌预后的关系。【方法】收集100例石蜡包埋食管癌肿瘤组织,用免疫组化方法研究其HSP70的表达情况。【结果】食管鳞癌组织中HSP70蛋白表达阳性率为90%,高于正常黏膜表达(13.3%),差异有显著性(P<0.01),食管鳞癌组织中HSP70蛋白的表达水平比正常食管黏膜明显升高。在伴有与不伴有淋巴结转移的食管鳞癌病例中,HSP70阳性表达率分别为84%和96%,差异有显著性(P<0.05)。在术后生存期<3年的食管鳞癌病例中,83.3%表达HSP70,而在生存期>5年的病人中,HSP70阳性表达率为96.1%,阳性率差异有显著性(P<0.05)。【结论】HSP70蛋白的表达与预后有关,HSP70高表达者预后好,HSP70可以作为判断食管鳞状细胞癌预后的重要生物指标之一。

热休克蛋白90抑制剂17-AAG对乙型肝炎病毒复制的抑制作用

目的探讨热休克蛋白90(HSP90)是否参与肝细胞转化生长因子(TGF)β信号通路的活化,以及HSP90对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法 HSP90抑制剂17-AAG作用HepG2细胞,提取细胞总RNA,实时定量RT-PCR检测TGFβ下游信号分子PAI-1的表达。HepG2细胞用17-AAG预处理2 h,同时用TGFβ或TβR抑制剂SB431542作用后,将HBV复制型质粒HBV1.3转染细胞,第4 d提取HBV核心颗粒,Southern Blot检测HBV复制中间体,ELISA检测上清HBsAg的表达。结果 17-AAG能够下调HepG2细胞PAI-1的表达,HepG2细胞内HBV复制中间体表达水平明显降低,HBsAg的表达亦受到抑制,但上调或阻断TGFβ信号通路对HBV复制影响不明显。结论 HSP90参与肝细胞内TGFβ信号通路的活化,其抑制剂17-AAG能够抑制HBV的复制与蛋白表达,但该抑制作用与TGFβ信号通路活化无关。

肺鳞状细胞癌组织热休克蛋白90的表达及其临床意义

[目的]探讨肺鱗状细胞癌组织中热休克蛋白90(HSP90)的表达,分析其表达与临床病理特征及预后的关系。[方法]选取2003~2013年在中南大学湘雅二医院胸外科手术切除的159例具有完整随访资料的肺鳞状细胞癌患者的癌组织和53例非癌对照肺组织的石蜡标本,制作高通量的组织芯片,采用免疫组织化学SP法检测组织样本中HSP90的表达,回顾性分析其表达水平与患者临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier生存曲线分析HSP90不同表达水平与肺鳞状细胞癌患者总生存时间(OS)的差异。[结果]与非癌肺组织相比,肺鳞状细胞癌组织中HSP90的高表达率明显增高(P<0.05);临床冚期患者的HSP90表达水平高于临床Ⅰ〜Ⅱ期患者(P=0.010),淋巴结有癌转移的患者的HSP90的表达水平高于无淋巴结转移的患者(P=0.016),高表达HSP90的肺鳞状细胞癌患者总体生存率显著低于低表达HSP90的患者(P=0.002);Cox多因素风险回归分析发现,高表达HSP90的肺鳞状细胞癌患者预后比低表达HSP90患者差(P=0.042)。[结论]除临床分期及肿瘤的病理分级外,高表达HSP90可作为评估外科手术切除肺鳞状细胞癌患者预后差的独立分子标志物。

非小细胞肺癌组织中热休克蛋白HSP70的表达及意义

目的:研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者癌组织的热休克蛋白(heat shock protein, HSP)的表达及病理学意义.方法:通过免疫组化的方法研究HSP70在NSCLC组织中的表达,分析其与NSCLC组织分型、分化程度及临床分期的关系.结果:47例NSCLC组织中37 例HSP70表达阳性,较癌旁组织明显增加,P<0.01;26例鳞癌中20例为阳性表达,21例腺癌中17例阳性表达,P>0.05; 16例高分化癌中有10例阳性表达,31例中低分化癌中27例表达阳性,P<0.05;20例Ⅰ～Ⅱ期癌中有13例阳性表达,27例Ⅲ～Ⅳ期癌中24例表达阳性,P<0.05;30例伴有淋巴结转移的NSCLC中有27例阳性表达,17例不伴有淋巴结转移的NSCLC中10例表达阳性,P<0.05.NSCLC组织HSP70表达显著升高,HSP70表达与NSCLC的临床分期相关,但与NSCLC组织类型无关.结论:HSP70在NSCLC的发展与演进中可能具有重要的意义.

共伴侣分子Cdc37从人热休克蛋白90复合体解离中ATP的作用机制

目的探讨ATP导致共伴侣分子细胞分裂周期蛋白37(Cdc37)从人热休克蛋白90(HSP90)复合体解离的可能机制,为抗肿瘤新药研发提供理论依据。方法用免疫共沉淀法(IP)捕获人组织淋巴瘤细胞(U937细胞)中HSP90复合体后,进行以下实验:(1)用流式细胞术(FCM)检测经过ADP、17-烯丙基胺格尔德霉素(17-AAG)、亚胺二磷酸腺苷(AMPPNP)、ATP处理后HSP90复合体中的Cdc37含量,并分别与经二甲基亚砜(DMSO)处理的对照组进行比较,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是单纯由ATP结合导致还是依赖ATP水解;(2)用FCM检测对照组及ATP处理后复合体中Cdc37和其他共伴侣分子中S期激酶关联蛋白1 G2等位基因抑制因子(Sgt1)、HSP70相互作用蛋白(HIP)、FK-506结合蛋白(FKBP5)、应激诱导蛋白1(STIP1)、热休克蛋白90腺苷三磷酸酶同系物1激活剂(AHSA1)的变化情况,并用IP-westernblot(IP-WB)进行验证,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是否伴随其他共伴侣分子解离;(3)用IP-WB检测对照组及ATP处理组复合体中HSP90、Cdc37及共伴侣分子Sgt1的磷酸化水平;用FCM检测对照组、ATP组及蛋白激酶抑制剂组复合体中的Cdc37及Sgt1的含量。研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是否伴随HSP90、Cdc37及其他共伴侣分子磷酸化。结果与对照组相比,ATP处理后HSP90复合体中Cdc37含量显著下降,而ADP、AMPPNP及17-AAG处理对Cdc37无影响;HSP90复合体中加入ATP导致复合体中Cdc37解离,伴随复合体共伴侣分子Sgt1含量降低;HSP90复合体中加入ATP后,复合体中Cdc37、Sgt1磷酸化水平显著增加。而在HSP90复合体中加入蛋白激酶抑制剂后,会阻断ATP导致的Cdc37及Sgt1与复合体解离。结论HSP90复合体中ATP导致Cdc37解离的可能机理是:(1)ATP结合HSP90导致该复合体构象改变;(2)ATP导致Sgt1与该复合体解离,且在这个过程中伴随Cdc37与Sgt1的磷酸化增加。特异性抑制Cdc37和HSP90结合,是抗肿瘤新药研究的方向之一,研究Cdc37与HSP90解离机制是此类药物开发的基础。

热休克蛋白70的表达与HBV相关肝细胞癌临床病理学特征的相关性分析

目的：分析 HBV 相关肝细胞癌（HCC）肿瘤组织中热休克蛋白（HSP）70表达水平与 HCC 临床病理学特征的相关性。方法通过基因表达数据库（GEO）获取资料，对 HSP70基因表达与 HCC 临床病理学特征进行统计学分析。分类变量采用频数（构成比）进行统计描述，统计分析采用χ2检验或 Fisher 确切概率法。HSP 与 HCC 临床病理学特征相关性分析采用单因素及多因素 Logistic 回归分析，单因素分析显示 P ＜0．10的变量纳入多因素分析。结果HSPA4L、HSPA6、HSPA13高表达患者 HCC 主瘤体＞5 cm 的比率明显高于低表达组（P 值均＜0．05）；HSPA1A、HSPA6低表达组合并肝硬化的比率明显低于高表达组（P 值均＜0．05）；HSPA5、HSPA13高表达组 AFP ＞300 ng／ml 的比率明显高于低表达组（P 值均＜0．01）。合并肝硬化和（或）主瘤体＞5 cm 的 HCC 患者生存率明显降低（P 值均＜0．05）。经 Logistic 多因素分析，HSPA4L 高表达可促进 HCC 瘤体生长[OR ＝1．019，95％可信区间（95％CI）：1．006～10．032，P ＝0．003]；HSPA1B 高表达的 HCC 患者合并多发结节的风险较大（OR ＝1．002，95％CI：1．000～1．004，P ＝0．003）。结论HSPA4L 及 HSPA1B 的表达与 HCC 临床病理学特征存在一定的相关性，可能为 HCC 治疗靶点及预后预测因子。

热休克蛋白90抑制剂研究进展

热休克蛋白90(HSP90)抑制剂能够抑制HSP90,促使在肿瘤生长信号通路中起重要作 用的HSP90效应蛋白通过泛素化降解,从而阻断肿瘤增殖生长信号通路的多个靶点,有效阻止肿瘤 的生长。现综述近年来有关HSP90抑制剂在肿瘤治疗方面的研究进展。

热休克蛋白90通过蛋白激酶B通路在局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用机制研究

目的探讨热休克蛋白90(HSP90)在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用机制及丹参多酚酸盐干预的影响。方法采用线栓法制作SD大鼠脑缺血再灌注损伤模型。选用健康雄性SD大鼠75只随机分为对照组、模型组、抑制剂组、丹参多酚组及联合组,每组15只。对照组仅暴露左颈总动脉及颈内外动脉后缝合皮肤。模型组建立缺血再灌注模型,抑制剂组、丹参多酚组及联合组分别于建立缺血再灌注模型后给予抑制剂、丹参多酚酸盐及抑制剂联合丹参多酚酸盐。比较各组脑梗死体积,Western blot法测定HSP90、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)变化。结果与模型组比较,对照组和丹参多酚组脑梗死体积明显减少,差异有统计学意义[0 mm3和(163.11±9.12)mm3 vs(268.92±14.36)mm3,P<0.05]。与联合组比较,抑制剂组脑梗死体积明显增加,差异有统计学意义[(237.13±11.11)mm3 vs(219.08±7.44)mm3,P<0.05]。与模型比较,对照组HSP90蛋白表达水平明显降低,丹参多酚组HSP90的蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,对照组和抑制剂组p-Akt蛋白表达明显降低,丹参多酚组p-Akt蛋白表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与丹参多酚组比较,联合组p-Akt蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HSP90可能通过Akt/p-Akt通路在脑缺血再灌注损伤中发挥神经保护作用。

血清热休克蛋白90α对肝细胞癌经肝动脉化疗栓塞术后生存的预测价值

目的探讨术前血清热休克蛋白90α(HSP90α)水平对经肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗的肝细胞癌患者术后生存时间的影响。方法回顾性分析2019年1月1日—2020年6月1日于西南医科大学附属医院肝胆外科接受单一TACE治疗的97例肝细胞癌患者的临床资料。以患者血清HSP90α水平的中位数作为临界值,将入组病例分为高水平组(HSP90α>135 ng/L,n=48)和低水平组(HSP90α≤135 ng/L,n=49)。计数资料2组间的比较采用χ^(2)检验。采用Kaplan-Meier法计算中位生存时间,组间比较采用log-rank检验。通过log-rank单因素分析及Cox回归多因素分析探索患者术后生存时间的影响因素。结果血清HSP90α高水平组与低水平组患者的肝功能Child-Pugh分级(χ^(2)=19.356,P<0.01)、肿瘤坏死(χ^(2)=9.964,P=0.002)、BCLC分期(χ^(2)=22.356,P<0.01)及ECOG评分(χ^(2)=6.644,P<0.05)比较,差异均有统计学意义。HSP90α高水平组患者的中位生存时间比低水平组短,差异有统计学意义(χ^(2)=15.551,P<0.01);HSP90α水平(HR=1.690,P<0.05)及BCLC分期(HR=2.373,P<0.05)均是肝癌患者TACE术后生存时间的独立影响因素。结论术前血清HSP90α水平是影响肝癌患者TACE术后生存时间的独立因素,有望成为评估经TACE治疗肝癌患者预后的潜在指标之一。

老年急性胰腺炎患者血清热休克蛋白70细胞因子信号转导抑制因子-3淀粉酶表达与磁共振成像严重指数的相关性分析

目的 探讨老年急性胰腺炎(AP)患者血清热休克蛋白70(HSP70)、细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)、淀粉酶表达与磁共振成像(MRI)严重指数(MRSI)的相关性分析。方法 选取2017年10月至2019年10月96例急性胰腺炎患者作为观察组,根据中华医学会外科学分会胰腺外科学制定的《急性胰腺炎诊治指南》分为轻度20例、中度41例、重度35例;另选取96名健康体检者作为对照组。对比2组临床资料、血清HSP70、SOCS-3、淀粉酶表达,分析血清指标对急性胰腺炎的诊断价值,并对比不同病情程度血清指标水平、MRSI,分析血清指标、MRSI与病情程度相关性及血清指标与MRSI的相关性。结果 观察组血清HSP70、淀粉酶水平高于对照组,SOCS-3水平低于对照组(P<0.05);SOCS-3诊断急性胰腺炎曲线下面积(AUC)(0.809)>淀粉酶(0.802)>HSP70(0.739),选取诊断价值最优的血清指标做联合诊断发现,SOCS-3、淀粉酶联合诊断急性胰腺炎AUC为0.891,敏感度为73%、特异度为91%;血清HSP70、淀粉酶表达、MRSI随病情程度加重上升,而血清SOCS-3表达则随病情程度加重降低(P<0.05);血清HSP70、淀粉酶水平、MRSI与急性胰腺炎病情程度呈正相关,SOCS-3与病情程度呈负相关(P<0.05);血清HSP70、淀粉酶水平与急性胰腺炎患者MRSI呈正相关,血清SOCS-3水平与MRSI呈负相关(P<0.05)。结论 血清HSP70、SOCS-3、淀粉酶水平在老年急性胰腺炎患者中呈异常表达,并与MRSI存在一定相关性,有望成为老年急性胰腺炎诊断的有效血清标志物,为临床评估病情程度提供数据支持。

热休克蛋白70对中暑大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究

目的观察热休克蛋白70(HSP70)对急性肺损伤的保护作用。方法 64只SD大鼠按随机数字表法分为假加热正常对照组(Sham组)、中暑组(HS组)、中暑加谷氨酰胺处理组(HS+GLN组)和中暑加槲皮素处理组(HS+QU组),每组16只。Sham组大鼠置于温度23℃,湿度55%±5%环境中,其余3组大鼠置于模拟热气候动物舱(舱内温度39℃,相对湿度65%)内。监测大鼠直肠温度、收缩压和脉率,比较各组大鼠热应激反应的差异。以收缩压从峰值开始下降作为中暑的开始,之后将大鼠移至常温复温。分别在中暑恢复期0h和6h处死大鼠,每个时间点8只,留取支气管肺泡灌洗液(BALF)后分离肺脏组织行组织学观察。采用酶联免疫法检测BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度,以及肺组织匀浆中的HSP70浓度。结果与HS组和HS+QU大鼠比较,HS+GLN组大鼠承受更多的热负荷后才发生HS(P<0.001),起病后的中位生存时间明显延长(P<0.001)。与Sham组比较,HS组大鼠肺组织匀浆HSP70浓度呈时间依赖性升高(P<0.001);HS+GLN组HSP70浓度在各个时点与HS组比较均明显升高(P<0.001),而HS+QU组的HSP70表达则受到明显抑制时点与Sham组比较差异无统计学意义(P>0.05),但明显低于HS组和HS+GLN组(P<0.001)。与HS组和HS+QU组比较,HS+GLN组大鼠BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度明显降低(P<0.001),病理结果显示其肺损伤更轻(P<0.001),而HS+QU组则相反。结论 HSP70具有保护HS大鼠急性肺损伤的作用,其机制可能与增强大鼠热耐受能力和抑制HS大鼠肺部炎症相关。

曲美他嗪对大鼠心肌缺血再灌注后热休克蛋白70及超氧化物歧化酶表达的影响

目的探讨缺血再灌注模型大鼠给予曲美他嗪预处理在心肌缺血再灌注保护作用的可能机制。方法选择SD大鼠120只,随机分为对照组、缺血再灌注组、HSP70合成抑制剂组、曲美他嗪组、联合组,每组24只,每组又根据缺血后再灌注时间分为30min、4h及8h3个时间点,每个时间点8只大鼠。每组分别于各时间点测定心肌HSP70阳性细胞数,血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)及心肌梗死面积百分比。结果与对照组比较,缺血再灌注组、HSP70合成抑制剂组、曲美他嗪组、联合组再灌注4及8h血清CK、CK-MB明显升高(P<0.01)。曲美他嗪组再灌注4及8h血清CK、CK-MB较联合组和缺血再灌注组明显降低,再灌注30min、4h及8hHSP70、SOD较联合组和缺血再灌注组明显升高,丙二醛较联合组和缺血再灌注组明显降低(P<0.01)。曲美他嗪组再灌注4及8h心肌梗死面积较联合组和缺血再灌注组明显减少[(39.15±3.62)%vs(44.65±5.14)%、(45.18±3.45)%,P<0.05;(41.28±5.26)%vs(47.54±5.89)%、(46.27±3.94)%,P<0.05]。结论曲美他嗪能升高心肌细胞HSP70水平,减少心肌梗死面积,对缺血再灌注大鼠心肌具有保护作用。

热休克蛋白70与体外补充镁在家兔肾缺血再灌注损伤中的保护性作用

目的:探讨外源性镁离子在兔肾缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)中是否有保护性作用,研究再灌注损伤过程中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)及HSP70-mRNA在再灌注损伤中的表达情况。方法:普通级日本大耳白兔90只,体重1.8～2.0 kg,分为缺血再灌注组(I-R)、MgSO4补充组和假手术组。经腹正中切口切除右肾成为左侧孤立肾模型。I-R组及MgSO4补充组均夹毕左肾动脉1 h,MgSO4补充组在夹毕动脉前及夹毕过程中经耳缘静脉给予2.5%(质量分数)MgSO4 1 mL/(kg.h)灌注。于再灌注后1 h、2 h、4 h、24 h、48h和72 h分别取肾皮质组织做免疫组织化学测定3组间各时段HSP70水平,分析其差异是否有统计学意义。使用Real time-PCR测定组间不同时段HSP70-mRNA表达水平,分析其差异是否有统计学意义。并通过组织学病理检查观察MgSO4是否对IRI具有保护性作用。结果:免疫组织化学显示在缺血再灌注24 h及48 h,I-R组可见部分近段小管中等强度表达HSP70,而MgSO4组24 h仅见微弱HSP70表达,48 h未见HSP70表达。Real time-PCR显示两组HSP70-mRNA均在再灌注1 h开始上升,2 h时达到峰值,24 h后明显下降。再灌注1 h、2 h和4 h时I-R组与MgSO4补充组差异有统计学意义(P<0.05),24 h时两组差异无统计学意义。组织学检查发现MgSO4补充组肾小管细胞脱落、坏死程度较I-R组明显减轻。结论:体外补充镁离子可以显著减轻肾缺血再灌注损伤的程度,并可以降低IRI过程中肾皮质HSP70及HSP70-mRNA的表达。

瑞舒伐他汀对动脉粥样硬化模型兔血清高敏C反应性蛋白和热休克蛋白70的影响

目的探讨瑞舒伐他汀(ROS)对兔动脉粥样硬化(AS)模型血清高敏C反应性蛋白(hs-CRP)及热休克蛋白70(HSP70)的影响。方法清洁级雄性新西兰大耳白兔31只,将其随机分为模型组(内膜损伤+高脂饮食)、干预组(内膜损伤+高脂饮食+ROS)和对照组(基础饮食)。实验的第1周末,对模型组及干预组兔进行腹主动脉球囊拉伤。于实验的当时、第6及12周,采集空腹12 h的兔股动脉血2 m l,离心并分离血清,用ELISA法检测血清hs-CRP和HSP70的水平。结果实验第6周和第12周,干预组兔血清hs-CRP及HSP70的含量较对照组显著增高(P<0.01);模型组兔血清hs-CRP及HSP70的含量较对照组和干预组显著增高(均为P<0.01)。结论 ROS能显著降低兔AS模型血清hs-CRP和HSP70的水平,具有明确的抗炎作用。