体外大鼠肝细胞中毒模型的建立与初步应用

以D-氨基半乳糖(D-Gal)作用于原代培养的大鼠肝细胞,通过检测培养细胞上清中丙氨酸转氨酶(ALT)值,建立了体外肝细胞中毒模型。利用此模型,初步探讨了肝再生刺激物质(HSS)、强力宁及肝安的体外降酶作用。实验发现,HSS虽能刺激正常大鼠肝细胞DNA合成增加,但在体外单独使用却未能发现其具有降酶作用;强力宁及肝安在一定剂量范围内能降低ALT值。由此认为,该模型可作为初步筛选降酶药物的一种较为直观的方法。

肝再生刺激因子、表皮生长因子对肝细胞的作用

目的：观察肝再生刺激因子(HSS）及表皮生长因子（EGF)对肝细胞增殖再生作用合适剂量及其联合效应，并推测HSS作用时相。方法：以~3HTdR掺入法检测细胞DNA增殖；体外原代大鼠肝细胞培养不同时间加入HSS,MTT法检测细胞生长状况。结果与结论：1.HSS（≤100μg／ml)和EGF（≤100ng／ml）对肝衍生细胞均有显著刺激作用（P＜0.01）,并存在剂量关系，但剂量过大，刺激作用反而下降。2.HSS、EGF存在协同作用，原代肝细胞、肝癌细胞株（SMMC-7721、BEL-7402）体外培养48h后，经(~3H）TdR掺入法检测cpm值分别为各自对照组的5.94、2.98和3.36倍。3.体外培养原代大鼠肝细胞，于贴壁后Oh.20h加入HSS其刺激作用较40h组显著.提示HSS可能主要作用于肝细胞再生G1/S期。