表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂ZD1839与伊利替康联合效应的实验研究

目的探讨ZD1839与伊利替康的活性代谢产物7-乙基-10羟基-喜树碱(SN38)联合的最佳方案及其机制。方法以药物联合效应测定方法,评价ZD1839和SN38不同给药顺序对人结肠癌细胞HT-29和LoVo的抑制作用;以Western blot和免疫共沉淀方法,分析ZD1839与化疗不同联合方案对各自靶蛋白及其下游分子表达的影响;以流式细胞仪测定不同联合方案对细胞周期的影响;以组蛋白相关的DNA碎片分析,比较不同方案对细胞凋亡指数的影响。结果先SN38后ZD1839的序贯给药方案表现出明显的协同作用;反之,则表现为拮抗作用。SN38明显抑制细胞拓扑异构酶-I (Topo-I)活性;ZD1839不影响表皮生长因子受体(EGFR)的表达,但能抑制EGFR的磷酸化。与SN38单药相比,SN38联合ZD1839对Topo-I的抑制无增强;与单药ZD1839相比,联合方案对EGFR、MAPK磷酸化的抑制作用无增强,但ZD1839、SN38同时给药,和先SN38后ZD1839序贯给药对AKT的抑制有所增强。同时,联合方案对细胞周期分布的改变影响明显。ZD1839可明显维持化疗诱导的DNA损伤和细胞凋亡。结论先SN38后ZD1839序贯给药可能是治疗结肠癌的最佳联合模式。