HTK基因对脐静脉内皮细胞相关基因表达的影响

目的 利用已经构建好的腺相关病毒-人组织激肽释放酶基因重组体(rAAV-HTK),感 染体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察HUVEC细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、凋亡 蛋白酶(caspase-3)、内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮素B1受体(ETR-B1)以及缓激 肽B1受体、缓激肽B2受体的mRNA表达量变化情况,探讨利用rAAV-HTK治疗高血压、缺血性心脏 病的可行性。方法 将已经构建好的rAAV-HTK重组质粒感染体外培养的HUVEC细胞。应用半定 量RT-PCR方法检测感染rAAV-HTK前后HUVEC中eNOS、caspase-3、ET-1、VEGF、ETR-B1以及缓激 肽B1受体、缓激肽B2受体的mRNA表达量变化情况。结果 转染有rAAV-HTK的HUVEC细胞内 其细胞内eNOS的mRNA合成量增加,caspase-3的mRNA表达量降低,VEGF、ET-1、ETR-B1、缓激肽 B1受体、缓激肽B2受体的mRNA表达量没有变化。结论 rAAV-HTK重组体感染HUVEC细胞能够 使HUVEC细胞内eNOS的mRNA表达量增高,caspase-3的mRNA表达量减低,提示HTK能够改善内 皮细胞功能,转HTK能够应用于高血压等血管内皮功能异常的心血管疾病的基因治疗。