SYBRGreen荧光定量PCR检测HTLV-I前病毒tax基因方法的建立

目的建立HTLV—I前病毒tax基因的荧光定量PCR检测方法。方法根据HTLV—Itax基因序列设计引物，将PCR克隆的tax片段链接入质粒载体，经筛选鉴定后，以含有目的片断的质粒为阳性模板建立实时荧光定量检测方法。结果扩增体系的敏感度可达10拷贝／反应。模板浓度在10^5～10^1拷贝／反应时，模板浓度与循环闽值（Q）之间相关性良好，相关系数r=-0，9987，且模板浓度相同的反应管之间具有良好的重复性和稳定性。结论SYBRGreen荧光定量PCR检测HTLV—I前病毒tax基因方法具有简便、快速和灵敏度高等优点，可能在疾病诊断、监测以及血液筛查中具有一定的应用前景。

石家庄地区无偿献血者HTLV-Ⅰ/Ⅱ检测情况分析

目的分析石家庄地区无偿献血者中人类嗜T淋巴细胞白血病病毒(HTLV)检测结果,为本地区临床用血安全提供科学依据。方法采用ELISA法(双抗原夹心)对河北省血液中心2016年9～12月采集的献血者标本进行HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体筛查,初筛反应性标本再进行双孔复试。复试阳性标本送卫生部临床检验中心做相关附加试验。结果石家庄地区41 000人份献血者标本中初筛阳性标本25例,经RT-PCR和蛋白印迹法(western blot,WB)确证阳性1例。该试剂假阳性率为0.06%。对献血者进行追溯,确认该献血者为无症状固定献血者,已有4次合格献血经历。结论石家庄地区无偿献血者属于HTLV-Ⅰ/Ⅱ感染的非流行区或低发区。采用ELISA法进行HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体筛查,其结果假阳性率低,适用于大规模血液筛查和血清流行病学调查。

2016-2019年江苏地区无偿献血人群HTLV-I/II流行情况调查

目的:调查江苏地区(南京、苏州、徐州)无偿献血人群人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-I/II)感染流行情况。方法:对2016-2019年江苏省四家血站(江苏省血液中心、南京市红十字血液中心、苏州市中心血站、徐州市中心血站)共408 262例无偿献血者样本进行HTLV-I/II抗体ELISA筛查,将初筛阳性样本统一送至国家卫生健康委临床检验中心进行RT-PCR和Western blot确认。结果:经HTLV-I/II抗体ELISA筛查共检出阳性82例,初筛阳性率为0.20‰(82/408 262),经确认,HTLV-I型阳性3例,确诊阳性率为0.74/100 000(3/408 262)。3名HTLV-I阳性献血者均为育龄期女性重复献血者。结论:江苏地区属于HTLV低流行区域,制定合理的HTLV血液筛查策略可进一步降低输血传播该病毒的风险。

一类带有治愈率和ATL反应的HTLV-Ⅰ感染模型的性质分析(英文)

本文主要介绍一类带有治愈率和ATL反应的HTLV-Ⅰ感染且具有饱和传染率的模型的性质,通过稳定性分析,得到了被感染的T细胞绝灭和HTLV-Ⅰ感染持续的条件.

人T细胞白血病病毒1型/人嗜T细胞病毒1型(HTLV-1)及其与相关疾病关系的研究进展

人T细胞白血病病毒1型/人嗜T细胞病毒1型(HTLV-1),是一种和人类T淋巴细胞白血病及HTLV-1相关性脊髓病/热带痉挛性瘫痪(HAM/TSP)等疾病密切相关的逆转录病毒。以往对于该病毒的认识仅仅局限于其导致这两种常见疾病,近来发现越来越多的自身免疫性疾病与该病毒的感染有着密切的联系。同时,该病毒通常经过漫长的潜伏期后发病,一旦发病治疗往往收效甚微,明确病毒如何侵入机体、其致病机制、如何和机体的免疫系统相互作用在细胞内长期潜伏,以便采取有效的早期干预措施将是后续研究的重点方向。我们总结了该病毒导致的相关免疫性疾病、该病毒和免疫系统相互作用的致病机制及治疗方式。

嗜人T细胞病毒Ⅰ型(HTLV-Ⅰ)与风湿病发病是否有关?

嗜人T细胞病毒Ⅰ型 (HTLV Ⅰ )与人类疾病的关系日益受到重视。除了与白血病有关外 ,HTLV Ⅰ与风湿病的关系仍是国内外颇具争议的研究热点。本文就HTLV Ⅰ是否与系统性红斑狼疮 (SLE)、类风湿性关节炎 (RA)、干燥综合征、系统性硬化症、HTLV Ⅰ相关性关节病等风湿病的发病有关、与风湿病的相互关系及发病机理作一综述。

云南HTLV-1成人T细胞白血病1例

成人Ｔ细胞白血病（ＡＴＬ）是流行于日本西南部、加勒比海地区及非洲中部的一种特殊类型的白血病，我国台湾、东南沿海、北京有报道，既往云南尚未报道，我们近来发现１例，现报告如下。１病例介绍患者，男性，３２岁，汉族，云南籍。因头昏、低热、腹胀一月，高热２ｄ于...

人嗜T淋巴细胞白血病病毒I型(HTLV-Ⅰ)核心蛋白(p24)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

人嗜Ｔ淋巴细胞白血病病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ⅰ）核心蛋白（ｐ２４）基因的克隆及在大肠杆菌中的表达段震峰，滕志平，纪志武，陈国敏，张永利，曾毅（中国预防医学科学院病毒学研究所，北京１０００５２）关键词人嗜Ｔ淋巴细胞白血病病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ｉ），聚合酶链反...

HTLV-I的分离研究

目的建立从HTLV-I感染者中分离HTLV-I的方法。方法采集HTLV-I感染者的肝素抗凝血,分离外周血单核细胞(PBMCs),与健康供者PBMCs或BJAB细胞共培养进行HTLV-I的分离,用P19抗原ELISA试剂盒检测共培养上清,提取培养细胞的基因组DNA,用HTLV-I的Gag、Tax两引物进行PCR扩增,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,并进行测序确定病原分离结果。结果从5例经WB确认的HTLV-I感染者中分离到4株HTLV-I毒株,P19抗原显示阳性结果,PCR法也扩增出HTLV-I前病毒DNA,对扩增产物的Gag区进行测序,亦证实该片段为HTLV-I Gag区序列。结论HTLV-I已首次在国内成功分离。

HTLV-I相关抗原及其抗体在AML细胞表面的表达

应用直接免疫金银染色法和直接酶免疫法分别检测３７例急性髓系白血病（ＡＭＬ）患者白血病细胞培养前后其表面ＨＴＬＶ－Ｉ相关抗原及其抗体的变化。结果表明，培养前ＨＴＬＶ－Ｉ相关抗原的患者阳性率、细胞阳性率（％，ｘ±ｓ）分别为２７．０％（１０／３７）、１６．８９±２７．７４，培养６天后分别上升至７８．４％（２９／３７）、４３．４４±３０．０６，分别经χ２检验和ｔ检验表明均有显著性差异（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１）。培养前ＨＴＬＶ－Ｉ相关抗体的患者阳性率、细胞阳性率（％，ｘ±ｓ）分别为７３．０％（２７／３７）、４８．２１±３４．３０，培养６天后未能检测出ＨＴＬＶ－Ｉ相关抗体。２０例对照采用相同的细胞分离、培养和检测手段无阳性发现。进一步分析表明，培养前ＡＭＬ细胞表面ＨＴＬＶ－Ｉ相关抗原及其抗体表达的细胞阳性率之间呈明显负相关（ｒ＝－０．５６，Ｐ＜０．０１）。从而推论ＡＭＬ可能与外源性。

HTLV-1蛋白酶与印地那韦识别的分子动力学模拟

对HTLV-1蛋白酶和抑制剂印地那韦的复合物进行了11 ns的分子动力学模拟,从分子整体、氢键、结合自由能及运动性等方面进行了分析。结果表明,动力学模拟使得体系更为松弛,但大部分氢键仍得到保持;疏水相互作用有利于HTLV-1蛋白酶和印地那韦的结合,关键残基主要分布在R10、L30-V39、V56-F67和W98-I1004个区域;结合自由能预测值与试验数据吻合较好。印地那韦结合仅能部分抑制HTLV-1蛋白酶的Flap、top-site以及两个exo-site位点柔性,解释了印地那韦的HIV-1 PR抑制活性为何略大于HTLV-1 PR。该研究为基于受体结构的抗HTLV-1药物研发打下了一定的结构和理论基础。

HTLV-1 Tax蛋白与T细胞的细胞周期调变

人1型T细胞白血病病毒(HTLV-1)能引发成人急性T细胞白血病(ATL)以及一种慢性渐进性的中枢神经系统疾病--热性痉挛性下身截瘫/白血病病毒相关脊髓病(TSP/HAM).成人T细胞白血病(ATL)表现为成熟T淋巴细胞恶性增生.由于HTLV-1 Tax蛋白与T细胞增殖调控有重要关系,本文将主要综述HTLV-1 Tax蛋白如何参与调变T细胞细胞周期从而探讨Tax在T淋巴细胞转化中的作用.

HTLV-Ⅰ相关性HAM/TSP患者血清及脑脊液IL-6的测定及其意义

【目的】探讨白细胞介素6(IL-6)在人嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型相关性脊髓病/热带痉挛性瘫痪(HAM/TSP)发病中的作用。【方法】应用免疫放射方法检测8例HAM/TSP患者血清及脑脊液中IL-6水平。【结果】HAM/TSP患者血清及脑脊液中IL-6含量分别为(194.76±30.01)pg/ml;(184.12±36.39)pg/ml,而其他神经系统疾病(OIND)组血清及脑脊液中IL-6含量分别为(132.61±21.76)pg/ml;(124.95±15.39)pg/ml,正常对照组(NC)组血清IL-6含量为(127.08±22.05)pg/mL。HAM/TSP患者血清及脑脊液IL-6水平均明显高于正常对照组(P<0.01);但HAM/TSP患者血清中IL-6含量与脑脊液中IL-6含量水平不呈线性相关。【结论】IL-6在HAM/TSP发病的免疫机制中可能起到重要作用。

一类具有两个离散时滞的HTLV-1病毒模型动力学分析

目的:研究一类具有细胞内时滞和CTL免疫时滞的HTLV-1病毒动力学行为.方法:定义依赖于时滞的基本再生数R0,建立一个李雅普诺夫函数研究未感染平衡点稳定性,利用特征方程根是否穿越虚轴判断感染平衡点的稳定性.结论:当R0<1时,未感染平衡点是全局稳定的;当R0> 1时,非感染平衡点存在,存在以下两类情形:(a)仅考虑细胞内时滞,非感染平衡点在一定条件下是局部渐近稳定的;(b)仅考虑免疫时滞,系统会产生Hopf分岔.结论:数值模拟验证模型结论有效,可为HTLV-1药物研发提供依据.

时滞HTLV-I病毒模型的稳定性分析

通过对系统的特征方程根的分布分析,讨论了系统平衡点的局部稳定性,确定了系统的线性稳定性区域,发现当系统中的时滞经过一系列临界值时,系统经历了Hopf分支.最后,数值模拟验证了理论结果.