硬膜外虎纹镇痛肽-I(HWAP-I)注射对大鼠慢性神经病理痛的影响

目的 :已有的研究表明HWAP I对大鼠的生理痛、急性和亚急性病理痛均有良好的镇痛效应。本文以吗啡作为阳性对照 ,主要研究了硬膜外注射HWAP I对大鼠慢性神经病理痛的镇痛作用。方法 :本实验以不同内径的单套束缚大鼠单侧坐骨神经造成慢性神经病理性痛模型 ,该模型与慢性束缚性损伤模型 (ChronicConstrictionInjuryModel,CCI模型 )极为相似。对术后第五天的大鼠从其硬膜外注入不同剂量的HWAP I、盐酸吗啡 ,运用光热辐射测痛和非伤害性机械刺激测痛两种测痛方法比较了二者给药后 30、6 0和 12 0分钟的作用效果。结果 :2 0 μg/kg、4 0 μg/kgHWAP I对模型侧足的热痛过敏反应和机械触诱发痛觉超敏反应均有明显的镇痛作用 ,并维持 2个小时以上 ;盐酸吗啡 4 0 μg/kg对大鼠双侧脚的热痛过敏产生即时而短暂的阻断效应 ,对机械触诱发痛觉超敏无影响。结论 :硬膜外注入HWAP I能有效的缓解坐骨神经束缚性损伤大鼠的神经病理性痛。

虎纹镇痛活性肽在毕赤酵母中的分泌表达

虎纹镇痛活性肽HWAP Ⅰ是从虎纹捕鸟蛛初毒中分离纯化 ,具有镇痛活性的多肽类神经毒素 .为了在P .pastoris中高效分泌表达HWAP Ⅰ ,依照RT PCR的结果 ,人工合成编码虎纹镇痛活性肽的基因片段 ,与酵母表达载体 pPIC9K重组 ,构建表达质粒pPIC9K HWAP Ⅰ .转化GS115宿主菌后 ,筛选出整合型His+ MutS 表达菌株 .经诱导培养后 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)证明HWAP Ⅰ在毕赤酵母中能有效分泌表达 ,产物的分子质量为 4ku左右 ,产量达 80mg/L .