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HYOU1在胰腺癌发生发展中的作用及其调控机制
1
作者
丁家璐
孙倍成
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024年第8期1354-1361,共8页
目的 探究人低氧上调因子1(HYOU1)调控胰腺癌发生发展的机制。方法 生物信息学和免疫组织化学染色分析HYOU1在胰腺肿瘤组织和正常及癌旁组织中的表达水平以及与患者预后的关系;实时荧光定量PCR(qPCR)、蛋白质印迹(Western blot)检测HYOU...
目的 探究人低氧上调因子1(HYOU1)调控胰腺癌发生发展的机制。方法 生物信息学和免疫组织化学染色分析HYOU1在胰腺肿瘤组织和正常及癌旁组织中的表达水平以及与患者预后的关系;实时荧光定量PCR(qPCR)、蛋白质印迹(Western blot)检测HYOU1在正常胰腺导管上皮细胞和多种胰腺癌细胞系中的表达水平;利用CRISPR-Cas9技术在表达水平最高的细胞系BXPC-3和Panc-1中敲除HYOU1,通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)、集落形成和划痕实验检测细胞存活、增殖和迁移能力,流式细胞术检测细胞抗凋亡能力;通过Western blot实验在野生型和HYOU1敲低细胞中检测PI3K/Akt通路中指标PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt的蛋白水平;利用PI3K/Akt通路激活剂Recilisib处理HYOU1敲低细胞系并检测细胞增殖能力。结果 HYOU1在胰腺肿瘤组织中的表达高于正常组织,HYOU1高表达患者生存期短于低表达患者(P<0.01);免疫组化染色显示,HYOU1在胰腺癌患者肿瘤组织中的表达高于癌旁组织(P<0.01);胰腺癌细胞系中HYOU1 mRNA和蛋白水平高于正常胰腺导管上皮细胞(P<0.001,P<0.01)。敲低HYOU1能抑制BXPC-3和Panc-1细胞存活、增殖和迁移,促进细胞早期凋亡,还能抑制PI3K/Akt信号通路激活,而PI3K/Akt通路激活剂Recilisib能逆转敲低HYOU1对细胞的作用。结论 HYOU1通过激活PI3K/Akt信号通路促进胰腺癌发展。
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关键词
hyou1
胰腺癌
PI3K/AKT信号通路
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职称材料
HYOU1对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响及其机制
2
作者
周晨明
薛岩
+2 位作者
孟丽
朱艳
徐彦楠
《山东医药》
CAS
2023年第32期6-10,共5页
目的观察内质网分子伴侣复合物缺氧上调基因1(HYOU1)对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响,并基于ROS/PI3K/AKT通路探讨相关机制。方法培养RSC96细胞,构建HYOU1重组表达质粒,采用随机数字表法将细胞分为高糖组、高糖+对照质粒组和高糖+HY...
目的观察内质网分子伴侣复合物缺氧上调基因1(HYOU1)对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响,并基于ROS/PI3K/AKT通路探讨相关机制。方法培养RSC96细胞,构建HYOU1重组表达质粒,采用随机数字表法将细胞分为高糖组、高糖+对照质粒组和高糖+HYOU1质粒组,三组均以高糖培养,其中高糖+对照质粒组和高糖+HYOU1质粒组分别转染对照质粒和pEGFP-HYOU1质粒。采用Western blotting法检测各组细胞中的自噬相关蛋白(LC3、ATG5、ATG12、Beclin1、p62)、JAK/STAT通路相关蛋白(JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、STAT6)、ROS/PI3K/AKT通路相关蛋白(PI3K、AKT、mTOR、pPI3K、pAKT、pmTOR),采用流式细胞术测算细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2,采用DCFH-DA染色检测各组ROS水平。结果高糖+HYOU1质粒组LC3、ATG5、ATG12、Beclin1蛋白表达低于高糖组和高糖+对照质粒组,p62蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05)。高糖+HYOU1质粒组凋亡率、Bax mRNA表达低于高糖组和高糖+对照质粒组,Bcl-2 mRNA表达及JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、STAT6蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05)。高糖+HYOU1质粒组PI3K、AKT、mTOR、pPI3K、pAKT、pmTOR蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组,ROS水平低于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05)。结论HYOU1过表达可下调高糖环境施万细胞的自噬和凋亡,作用机制可能与调控ROS/PI3K/AKT通路有关。
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关键词
hyou1
基因
施万细胞
细胞自噬
细胞凋亡
ROS/PI3K/AKT通路
糖尿病
糖尿病周围神经病
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职称材料
牦牛HYOU1基因克隆及组织表达分析
被引量:
3
3
作者
季文博
王会
+3 位作者
柴志欣
王吉坤
信金伟
钟金城
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期123-131,共9页
为探究HYOU1基因在牦牛中的组织表达谱,通过对西藏牦牛HYOU1基因的CDS区进行克隆测序,分析该基因的结构和功能,采用RT-PCR技术检测黄牛和牦牛肺脏、心脏、肝脏、乳腺、大脑及肌肉中HYOU1基因的相对表达量。结果表明:(1)HYOU1基因CDS区...
为探究HYOU1基因在牦牛中的组织表达谱,通过对西藏牦牛HYOU1基因的CDS区进行克隆测序,分析该基因的结构和功能,采用RT-PCR技术检测黄牛和牦牛肺脏、心脏、肝脏、乳腺、大脑及肌肉中HYOU1基因的相对表达量。结果表明:(1)HYOU1基因CDS区长度为3 006 bp,其中A、G、C和T含量分别为25.0%、31.1%、26.7%和17.1%,存在一定碱基偏好性;发现1个(ACG→ACA)SNP位点,为同义突变。(2)生物信息学分析表明该蛋白呈中性,为较不稳定、亲水性分泌信号蛋白;存在一个跨膜螺旋(TMhelix)区位于13-35氨基酸位置;二、三级蛋白结构分析发现其主要的空间构象为:无规则卷曲及α-螺旋。(3)聚类分析显示,西藏牦牛与野牦牛的遗传距离最近,与瘤牛及普通牛的遗传距离次之,与水牛最远。(4)RT-PCR结果显示HYOU1基因在黄牛和牦牛肝脏、乳腺、肺脏、大脑、心脏、肌肉6个组织中均有表达,且相对表达量依次递减;在相同组织中,黄牛组织的表达量均显著高于牦牛组织中的表达量(P<0.05),其中黄牛肝脏组织的表达量为牦牛表达量的4.4倍。
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关键词
牦牛
黄牛
hyou1
基因
生物信息学分析
组织表达谱
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职称材料
题名
HYOU1在胰腺癌发生发展中的作用及其调控机制
1
作者
丁家璐
孙倍成
机构
南京中医药大学鼓楼临床医学院肝胆外科
安徽医科大学第一附属医院肝胆胰及移植外科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024年第8期1354-1361,共8页
基金
安徽省临床医学研究转化专项(编号:202204295107020008)
安徽省高校科研项目(编号:2022AH010070)。
文摘
目的 探究人低氧上调因子1(HYOU1)调控胰腺癌发生发展的机制。方法 生物信息学和免疫组织化学染色分析HYOU1在胰腺肿瘤组织和正常及癌旁组织中的表达水平以及与患者预后的关系;实时荧光定量PCR(qPCR)、蛋白质印迹(Western blot)检测HYOU1在正常胰腺导管上皮细胞和多种胰腺癌细胞系中的表达水平;利用CRISPR-Cas9技术在表达水平最高的细胞系BXPC-3和Panc-1中敲除HYOU1,通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)、集落形成和划痕实验检测细胞存活、增殖和迁移能力,流式细胞术检测细胞抗凋亡能力;通过Western blot实验在野生型和HYOU1敲低细胞中检测PI3K/Akt通路中指标PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt的蛋白水平;利用PI3K/Akt通路激活剂Recilisib处理HYOU1敲低细胞系并检测细胞增殖能力。结果 HYOU1在胰腺肿瘤组织中的表达高于正常组织,HYOU1高表达患者生存期短于低表达患者(P<0.01);免疫组化染色显示,HYOU1在胰腺癌患者肿瘤组织中的表达高于癌旁组织(P<0.01);胰腺癌细胞系中HYOU1 mRNA和蛋白水平高于正常胰腺导管上皮细胞(P<0.001,P<0.01)。敲低HYOU1能抑制BXPC-3和Panc-1细胞存活、增殖和迁移,促进细胞早期凋亡,还能抑制PI3K/Akt信号通路激活,而PI3K/Akt通路激活剂Recilisib能逆转敲低HYOU1对细胞的作用。结论 HYOU1通过激活PI3K/Akt信号通路促进胰腺癌发展。
关键词
hyou1
胰腺癌
PI3K/AKT信号通路
Keywords
hyou1
pancreatic cancer
PI3K/Akt signaling pathway
分类号
R735.9 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
HYOU1对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响及其机制
2
作者
周晨明
薛岩
孟丽
朱艳
徐彦楠
机构
河北医科大学大型科研仪器设备共享服务平台
河北医科大学第二医院神经内科
河北医科大学教学实验中心
出处
《山东医药》
CAS
2023年第32期6-10,共5页
基金
河北省医学科学研究课题计划项目(20220974)。
文摘
目的观察内质网分子伴侣复合物缺氧上调基因1(HYOU1)对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响,并基于ROS/PI3K/AKT通路探讨相关机制。方法培养RSC96细胞,构建HYOU1重组表达质粒,采用随机数字表法将细胞分为高糖组、高糖+对照质粒组和高糖+HYOU1质粒组,三组均以高糖培养,其中高糖+对照质粒组和高糖+HYOU1质粒组分别转染对照质粒和pEGFP-HYOU1质粒。采用Western blotting法检测各组细胞中的自噬相关蛋白(LC3、ATG5、ATG12、Beclin1、p62)、JAK/STAT通路相关蛋白(JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、STAT6)、ROS/PI3K/AKT通路相关蛋白(PI3K、AKT、mTOR、pPI3K、pAKT、pmTOR),采用流式细胞术测算细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2,采用DCFH-DA染色检测各组ROS水平。结果高糖+HYOU1质粒组LC3、ATG5、ATG12、Beclin1蛋白表达低于高糖组和高糖+对照质粒组,p62蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05)。高糖+HYOU1质粒组凋亡率、Bax mRNA表达低于高糖组和高糖+对照质粒组,Bcl-2 mRNA表达及JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、STAT6蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05)。高糖+HYOU1质粒组PI3K、AKT、mTOR、pPI3K、pAKT、pmTOR蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组,ROS水平低于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05)。结论HYOU1过表达可下调高糖环境施万细胞的自噬和凋亡,作用机制可能与调控ROS/PI3K/AKT通路有关。
关键词
hyou1
基因
施万细胞
细胞自噬
细胞凋亡
ROS/PI3K/AKT通路
糖尿病
糖尿病周围神经病
Keywords
hyou1
gene
Schwann cells
autophagy
apoptosis
ROS/PI3K/AKT pathway
diabetes mellitus
diabetic peripheral neuropathy
分类号
R587.1 [医药卫生—内分泌]
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职称材料
题名
牦牛HYOU1基因克隆及组织表达分析
被引量:
3
3
作者
季文博
王会
柴志欣
王吉坤
信金伟
钟金城
机构
西南民族大学青藏高原研究院
西南民族大学青藏高原动物遗传资源保存与利用教育部重点实验室
西藏自治区农牧科学院省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期123-131,共9页
基金
西南民族大学研究生创新型科研项目(CX2017SZ033)
国家肉牛牦牛产业技术体系(CARS-37)
文摘
为探究HYOU1基因在牦牛中的组织表达谱,通过对西藏牦牛HYOU1基因的CDS区进行克隆测序,分析该基因的结构和功能,采用RT-PCR技术检测黄牛和牦牛肺脏、心脏、肝脏、乳腺、大脑及肌肉中HYOU1基因的相对表达量。结果表明:(1)HYOU1基因CDS区长度为3 006 bp,其中A、G、C和T含量分别为25.0%、31.1%、26.7%和17.1%,存在一定碱基偏好性;发现1个(ACG→ACA)SNP位点,为同义突变。(2)生物信息学分析表明该蛋白呈中性,为较不稳定、亲水性分泌信号蛋白;存在一个跨膜螺旋(TMhelix)区位于13-35氨基酸位置;二、三级蛋白结构分析发现其主要的空间构象为:无规则卷曲及α-螺旋。(3)聚类分析显示,西藏牦牛与野牦牛的遗传距离最近,与瘤牛及普通牛的遗传距离次之,与水牛最远。(4)RT-PCR结果显示HYOU1基因在黄牛和牦牛肝脏、乳腺、肺脏、大脑、心脏、肌肉6个组织中均有表达,且相对表达量依次递减;在相同组织中,黄牛组织的表达量均显著高于牦牛组织中的表达量(P<0.05),其中黄牛肝脏组织的表达量为牦牛表达量的4.4倍。
关键词
牦牛
黄牛
hyou1
基因
生物信息学分析
组织表达谱
Keywords
yak
cattle
hyou1
genes
bioinformatics analysis
tissue expression profile
分类号
S823.85 [农业科学—畜牧学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HYOU1在胰腺癌发生发展中的作用及其调控机制
丁家璐
孙倍成
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
2
HYOU1对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响及其机制
周晨明
薛岩
孟丽
朱艳
徐彦楠
《山东医药》
CAS
2023
0
下载PDF
职称材料
3
牦牛HYOU1基因克隆及组织表达分析
季文博
王会
柴志欣
王吉坤
信金伟
钟金城
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
3
下载PDF
职称材料
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