龙葵碱对H_(22)荷瘤小鼠细胞膜流动性和膜蛋白水平的影响

目的观察龙葵碱对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜流动性和膜蛋白水平的影响。方法采用荧光探针DPH标记法测定肿瘤细胞膜流动性,考马斯亮蓝法测定肿瘤细胞膜蛋白水平。结果龙葵碱可显著降低H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜流动性,降低H22小鼠肿瘤细胞膜蛋白水平。结论龙葵碱是通过影响肿瘤细胞膜的流动性和肿瘤细胞膜上的蛋白水平恢复细胞的正常生理活性而达到抗肿瘤作用。

龙葵碱对H_(22)荷瘤小鼠肿瘤细胞膜唾液酸和封闭度的影响

目的研究龙葵碱对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜唾液酸(SA)水平和封闭度的影响。方法建立H22荷瘤小鼠模型,荷瘤小鼠分别sc生理盐水、环磷酰胺、龙葵碱(9.375、18.75、37.5mg/kg)。采用比色法测定H22小鼠肿瘤细胞膜SA水平和封闭度。结果龙葵碱可剂量依赖性地降低荷瘤小鼠肿瘤细胞膜SA水平和肿瘤细胞膜封闭度。结论龙葵碱通过降低H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜SA水平和肿瘤细胞膜封闭度起抗肿瘤作用。

克癌临对荷肝癌(H_(22))小鼠IL-2和NK细胞活性的影响

目的 :研究和探讨中药复方克癌临对荷肝癌 (H2 2 )小鼠的免疫调节作用。方法 :建立荷实体型肝癌(H2 2 )小鼠模型 ,观察经克癌临治疗对其IL - 2和NK细胞活性的影响。结果 :克癌临能显著提高荷瘤小鼠IL - 2和NK细胞活性 ,且其IL - 2活性及NK细胞活性和模型组或阳性对照组 (5 -Fu组 )比较有非常显著性差异 (p<0 0 0 1)。结论 :克癌临方药可显著提高荷瘤机体的抗肿瘤免疫功能。

癌肿宁对荷肝癌(H_(22))小鼠的抑瘤作用及其对IL-2和NK细胞活性的影响

目的:探讨中药复方癌肿宁治疗实验性肝癌的疗效和机理。方法:建立荷实体型肝癌(H_(22))小鼠模型,观察经癌肿宁治疗对其肿瘤生长、NK细胞活性和IL-2活性的影响。结果:癌肿宁能显著抑制肿瘤的生长,其最高抑瘤率达56.66％,并可明显增强IL-2和NK细胞活性。结论:癌肿宁有明显的抗肝癌作用,并显著提高荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫功能。

白附子混悬液对H_(22)荷瘤小鼠肿瘤生长抑制作用及对免疫器官功能的影响

[目的]研究白附子混悬液对H_(22)细胞的抑瘤效应及其对免疫器官(胸腺、脾脏)功能的影响。[方法]用不同浓度的白附子混悬液(SGIR)给H_(22)实体瘤模型小鼠进行灌胃治疗,测定各组小鼠肿瘤生长抑制率(IR)和胸、脾指数。[结果]白附子混悬液能够明显抑制H_(22)细胞的生长,抑瘤率为39.14%,与模型组比较有显著性差异(P<0.01);给予白附子混悬液825mg/(kg·d)治疗能够促进荷瘤小鼠胸腺的发育,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),接近正常对照组水平,模型组小鼠脾指数与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05)。[结论]白附子混悬液对H_(22)细胞的生长有明显的增殖抑制作用;白附子混悬液对H_(22)细胞的增殖抑制作用可能是通过促进荷瘤小鼠的胸腺发育,从而达到调节荷瘤机体的免疫功能。

SPRIDA对小鼠H_(22)肝癌相关基因表达谱的影响

目的研究SPRIDA(施普睿达)对荷H22肝癌小鼠基因表达的调节差异,探讨SPRIDA治疗小鼠肝癌的可能机制。方法运用基因表达谱芯片技术检测SPRIDA对荷瘤小鼠的基因表达调节,并对差异基因进行Pathway聚类和统计分析。结果SPRIDA作用前后表达有差异的基因共358条(占芯片基因总数的8.74%),其中172条(172/4096,4.20%)基因表达上调,186条(186/4096,4.54%)基因表达下调。经Pathway聚类分析,表达差异基因主要属于细胞凋亡、细胞周期、NK细胞介导的细胞毒、细胞黏附分子、肿瘤生长因子β、Wnt等信号通路。结论SPRIDA主要是通过影响肿瘤细胞周期进程、调节肿瘤细胞凋亡和黏附相关基因的表达等多种途径抑制肿瘤的增殖和转移。

HPLC法测定H_(22)小鼠肿瘤腹水中补骨脂内酯的含量

根据临床研究需要,我们建立了用HPLC 测定小鼠肿瘤腹水中补骨脂内酯含量的方法.本方法回收率100.44%,日内误差CV%<4%,日间误差CV%<8.7%.我们认为本法比较简便、迅速,有较好的实用性.

木蝴蝶挥发性成分对H_(22)荷瘤小鼠实体瘤抑制作用及其机制初步研究

目的探讨木蝴蝶挥发性成分抗肝肿瘤作用及其可能的作用机制。方法本研究采用H22实体瘤模型,随机分为空白组、模型组、阳性对照组(环磷酰胺100 mg·kg^(-1))、木蝴蝶挥发性成分低、中、高剂量(17.5、35、70 mg·kg^(-1))组,灌胃给药12 d,计算肿瘤抑制率、胸腺及脾指数及血清中IL-2、IL-6的含量。HE染色法观察小鼠实体瘤生长情况。采用0~1.0 g·L^(-1)的木蝴蝶挥发性成分处理人肝癌SMMC-7721细胞,分别采用MTT法检测其对细胞增殖的影响,TUNEL法检测其对肝癌细胞凋亡的影响,RT-PCR法检测其对Bax、Bcl-2、caspase-3 mRNA表达的影响。结果木蝴蝶挥发性成分高剂量的抑瘤率为42.08%;与模型组相比,木蝴蝶挥发性成分能明显提高小鼠的胸腺指数、IL-2及IL-6水平。木蝴蝶挥发性成分体外能明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖,诱导细胞凋亡,减少Bcl-2 mRNA的表达,增加Bax、caspase-3 mRNA的表达。结论木蝴蝶挥发性成分具有明显的体内、体外抗肝肿瘤作用,其作用机制可能与增强机体免疫力、促进肿瘤细胞凋亡有关。

鲜人参膏对H_(22)荷瘤小鼠抗肿瘤作用的初步研究

目的通过建立H_(22)移植瘤小鼠模型,探讨鲜人参膏(Fresh ginseng paste,FGP)对H_(22)荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法将ICR小鼠随机分成模型组、阳性对照组(环磷酰胺,CTX)、FGP低剂量组(300 mg/kg)和高剂量组(600 mg/kg),连续给药15d后,计算抑瘤率和脏器指数,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平;并通过酶联免疫试剂盒测定小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)的含量。结果FGP能够明显改善H_(22)荷瘤小鼠的一般状况,抑制肿瘤生长,显著降低脾脏指数及胸腺指数(P<0.05);此外,与模型组相比,FGP能够明显改善肝功能的损伤,并显著升高TNF-α和IFN-γ的水平(P<0.05)。结论FGP对H_(22)荷瘤小鼠具有一定的抗肿瘤作用,并能够减少肝损伤,其作用机制可能与增强机体免疫力有关。

“江边一碗水”总木脂素的抗肿瘤作用及一般毒性的研究

为评价"江边一碗水"总木脂素对H22荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用和相关毒性,用SPF级雄性小鼠腋下接种肝癌H22瘤株建立了移植性肝癌H22小鼠模型,观察了不同剂量的"江边一碗水"总木脂素给药10 d后对荷瘤小鼠的肿瘤抑制率、体重、免疫器官指数及血尿常规、肝肾功等的影响.结果表明:50,100,200 mg/kg"江边一碗水"总木脂素的抑瘤率分别为44.9%,54.8%和62.1%."江边一碗水"总木脂素对H22小鼠体重、免疫器官指数、造血系统、肝肾功能等生理生化指标无明显影响.故"江边一碗水"总木脂素具有较显著的抗肿瘤作用和较低的毒性,是其抗肿瘤的药效物质基础.

蜜煮川乌对H_(22)荷瘤小鼠免疫功能影响的实验研究

目的 研究蜜煮川乌饮片对H2 2 荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法 利用H2 2 荷瘤小鼠为动物模型 ,检测不同剂量蜜煮川乌饮片治疗后小鼠脾脏中T细胞、B细胞增殖和腹腔巨噬细胞吞噬活性。结果 中剂量蜜煮川乌能促进H2 2 荷瘤小鼠T细胞增殖、抑制B细胞增殖、增强腹腔巨噬细胞的吞噬活性。结论 中剂量蜜煮川乌对H2 2 荷瘤小鼠的免疫功能有影响。

芪蟾口服结肠靶向片初步药效学研究

目的:观察芪蟾口服结肠靶向片浸膏对小鼠的急性毒性反应,以评价其安全性;研究芪蟾口服结肠靶向浸膏对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法:采用经典的急性毒性试验方法测定芪蟾口服结肠靶向浸膏的半数致死量(LD50),观察急性毒性症状,记录死亡数;建立H22荷瘤小鼠模型,随机分成6组,分别给予芪蟾口服结肠靶向浸膏高、中、低剂量灌胃,临床汤剂组灌胃,化疗药物5—Fu腹腔注射单独应用,生理盐水灌胃。正常饲养,给药10天后,摘眼球取血,处死小鼠,分别取出肿瘤组织、小鼠脾脏、胸腺,进行抑瘤率、脾指数、胸腺指数的检测。采用酶联免疫法测定TNF-α、IFN-γ细胞因子水平。结果:芪蟾口服结肠靶向片浸膏小鼠口服LD50为43.26g.kg-1,相当于人临床日用量的19.6倍,;芪蟾口服结肠靶向浸膏各剂量组均可有效抑制肿瘤生长,5-Fu腹腔注射单独应用的抑瘤率为40.52%,芪蟾靶向浸膏3个剂量组的抑瘤率分别为37.41%、33.21%、31.85%。与5-Fu组比较,芪蟾口服结肠靶向浸膏各剂量组能显著提高小鼠脾脏、胸腺的重量(P<0.05)。与模型对照组相比,能明显提高细胞因子TNF-α,IFN-γ的水平(P<0.05)结论:芪蟾靶向浸膏各剂量组均可不同程度抑制肿瘤的生长,以芪蟾靶向浸膏低剂量组效果最为明显,其作用机制与增加小鼠免疫器官重量、增加细胞因子TNF-α,IFN-γ水平等有关。提示芪蟾靶向浸膏有抗肿瘤作用,为临床应用提供科学的实验数据,对临床有实际的指导意义。

胎盘多肽对肿瘤细胞生长抑制作用研究

目的 探讨胎盘多肽 (PPs)对小鼠肿瘤细胞体内、外生长的影响。方法 染料排斥试验及肿瘤细胞体内种植实验。结果 PPs在体外对肿瘤细胞无明显的直接杀伤作用 (P >0 0 5 ) ,但体内肿瘤种植实验中给药组H2 2 腹水瘤小鼠生命延长率为 70 % ,S180 实体瘤生长抑制率为 6 5 % ,与对照组相比实验组荷瘤小鼠生存时间有显著差异 (P <0 0 1 )且肿瘤的形成也有明显的抑制作用 (P <0 0 1 )。

可移植性小鼠肝癌的脂质过氧化及其对红细胞...

以BALB/C近交系小鼠和NIH小鼠(封闭群)为实验动物,可移植性小鼠肝癌(H_(22))作肿瘤模型,比较了肝癌和正常肝组织的脂质过氧化物含量,研究了肿瘤对其宿主紅细胞、肝、脾和心脏脂质过氧化的影响。结果表明,不仅肿瘤组织本身的脂质过氧化反应弱,脂质过氧化产物少,而且还影响其宿主的紅细胞、肝、脾和心脏的脂质过氧化反应,造成这些细胞或组织的脂质过氧化产物减少。此外,肿瘤这种对宿主脂质过氧化的影响还有明显的性别差异,即雄性宿主肿瘤外其他组织脂质过氧化反应减弱更为显著。

消瘤藤醇提物对H_(22)荷瘤鼠的抑瘤作用研究

目的探讨消瘤藤乙醇提取物(PTAE)对H_(22)荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用及其可能机制。方法选取小鼠60只,留10只作为正常对照组,其余小鼠均接种H_(22)荷瘤造模,造模成功后小鼠随机分为5组:模型对照组,氟尿嘧啶组(20 mg·kg^(-1)),消瘤藤乙醇提取物高、中、低剂量组(生药180、90、45 g·kg^(-1)),每天给药1次,连续给药10 d后各组小鼠眼球取血,分离血清,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;剥离瘤块、脾脏和胸腺,称重并计算抑瘤率、脾指数和胸腺指数;HE染色观察肿瘤组织病理学改变。结果与模型对照组比较,消瘤藤乙醇提取物高、中剂量组瘤重均明显降低(P<0.01,P<0.05),抑瘤率分别为37.44%和38.46%;消瘤藤乙醇提取物中剂量可显著提高荷瘤鼠脾脏指数(P<0.01);消瘤藤乙醇提取物高剂量组能显著升高血清白细胞介素-2水平(P<0.05);消瘤藤乙醇提取物高、中、低剂量组还可显著升高血清肿瘤坏死因子-α水平(P<0.01)。结论消瘤藤乙醇提取物具有抗肿瘤作用,其机制可能与调节机体细胞免疫功能有关。

维生素E促进小鼠H-22移植瘤的作用及机制

[目的]利用H-22荷瘤小鼠研究维生素E(vitamin E,VE)对肿瘤发生发展的作用及机制。[方法]建立H-22小鼠荷瘤模型,计算肿瘤指数与肝脏指数,利用试剂盒检测血糖、血清低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、总胆固醇(total cholesterol,TC)以及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)水平,利用苏木素-伊红染色与Real-time PCR检测VE对肿瘤发展和转移的作用及分子机制。[结果]肿瘤-VE组LDL水平、肿瘤组和肿瘤-VE组TC、AKP水平显著高于对照组(LDL,P <0.05;TC,P <0.01;AKP,P <0.001)。肿瘤组织中肿瘤-VE组小鼠p27K ip1、Stat3以及Cxcl12基因表达水平显著高于肿瘤组(p27Kip1和Stat3,P <0.05,Cxcl12,P <0.01)。肝脏组织中肿瘤-VE组Jak2、Pigf及Cxcl12基因表达水平显著高于肿瘤组(P <0.05),且肿瘤组Jak2、Pigf及Cxcl12基因表达水平显著高于对照组(P <0.05)。[结论] VE处理的H-22荷瘤小鼠肿瘤组织中p27Kip1、Stat3及Cxcl12表达水平显著升高,肝脏组织中Jak2、Pigf及Cxcl12表达水平显著升高,VE可能通过调控细胞周期、肿瘤转移及炎症相关基因的表达促进小鼠H-22肿瘤的发展。

基于红细胞免疫功能调节的石蒜碱体内抗肿瘤作用机制研究

目的研究石蒜碱对肝癌H22细胞荷瘤小鼠红细胞膜结构功能的影响。方法通过抑瘤率实验、生命延长率实验、流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率实验,验证石蒜碱的体内抗肿瘤活性;采用试剂盒测定红细胞膜总蛋白、胆固醇和唾液酸含量,考察石蒜碱对H22荷瘤小鼠红细胞膜主要组分的影响;采用荧光偏振法检测红细胞膜流动性,荧光染色法检测红细胞膜封闭度,验证石蒜碱对H22荷瘤小鼠红细胞膜结构功能的影响;采用三磷酸腺苷(adeno sinetripho sphate,ATP)酶活性检测试剂盒、荧光分光光度计、激光共聚焦扫描显微镜、Western blotting法,检测石蒜碱对H22荷瘤小鼠红细胞膜离子通道相关因子活性的影响;采用Western blotting法检测石蒜碱对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞内活化的半胱氨酸蛋白酶-3 (cleaved Caspase-3)、cleaved Caspase-9、B淋巴细胞瘤2 (B-cell lymphoma 2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达的影响。结果石蒜碱能够显著抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长、有效延长H22荷瘤小鼠生存时间,并且能够诱导H22荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡(P<0.05、0.01);石蒜碱能够增加H22荷瘤小鼠红细胞膜总蛋白、唾液酸和胆固醇含量,同时提高红细胞膜流动性和封闭度,增强H22荷瘤小鼠红细胞膜Na^(+),K^(+)-ATP、Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶活性,升高H22荷瘤小鼠红细胞内pH值,降低红细胞内H+、Ca^(2+)、Cl^(-)浓度,增强H_(22)荷瘤小鼠红细胞对HCO^(3-)/Cl^(-)转运活性,升高Band3蛋白表达水平(P<0.01);石蒜碱能够升高H22荷瘤小鼠肿瘤细胞内cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9蛋白表达水平,升高促凋亡蛋白Bax表达、降低抑凋亡蛋白Bcl-2表达,使Bcl-2/Bax降低(P<0.01)。结论石蒜碱对H22荷瘤小鼠具有抗肿瘤作用,能够通过调控H22荷瘤小鼠红细胞膜组成结构,提高细胞膜离子通道的活性,在离子通道之间建立联系相互促进,通过这种相互促进作用来调节胞内酸碱度、离子平衡,使红细胞膜结构功能得到改善,进而增强红细胞免疫功能,并调控肿瘤细胞内凋亡相关蛋白表达,激活肿瘤细胞凋亡相关因子,启动肿瘤细胞凋亡程序,从而发挥抗肿瘤作用。

不同转移倾向肿瘤亚株细胞内的微核观察

为了探讨恶性肿瘤转移与微核现象间的关系,本实验首次运用微核试验(MT)检测了小鼠腹水型肝癌(N_(22))及其肺转移倾向亚株(H_(22)SP_(10))、淋巴结转移倾向亚株(N_(22)SL_(10))。小鼠子宫颈癌(U_(14))及其肺转移倾向亚株(U_(14)AP_(11))瘤细胞内的微核。比较了经活体筛选的上述亚株与未经筛选的原瘤株的微核细胞率(MNF)、总微核率,结果上述两项指标H_(22)SP_(10)及H_(22)SL_(10)均显著高于H_(22)(P值分别为<0.002、<0.005;<0.005、<0.001);U_(14)AP_(11)也显著高于U_(14)(P分别为<0.001、<0.001),而H_(22)SL_(10)与H_(22)SP_(10)(P>0.05、>0.05)。它表明在异质性N_(22)及U_(14)细胞群体中具有器官倾向性转移的细胞染色体畸变较重,可能为肿瘤演进的结果。