肿瘤坏死因子联合环磷酰胺对H_（22）肝癌小鼠的抗肿瘤作用

肿瘤坏死因子（ＴｕｍｏｒＮｅｃｒｏｓｉｓＦａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）和环磷酰胺（Ｃｙｃｌｏ－ｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ，ＣＹ）联合应用对Ｈ２２肝癌小鼠具有显著协同抗肿瘤作用，这种协同作用与二者用药的先后次序有显著关系。ＴＮＦ、ＣＹ单独应用及ＣＹ先于ＴＮＦ应用的抗瘤作用差（抑瘤率２５．６０％，ＩＬＳ３２．６４％），ＴＮＦ与ＣＹ同时联合应用比单独应用的抗瘤作用略增强（抑瘤率３４．７２％，ＩＬＳ５４．７４％），但如先用ＴＮＦ后用ＣＹ抗瘤作用则显著增强，可以明显改善Ｈ２２肝癌小鼠的免疫功能（ＮＫ活性增长率４９．７０％，ＬＡＫ活性增长率４６．３０％），明显抑制实体瘤生长（抑瘤率６０．１２％），显著延长Ｈ２２肝癌小鼠（腹水型）生存期（ＩＬＳ１０４．７８％），并且有２５％Ｈ２２肝癌小鼠完全治愈。提示：联合ＴＮＦ与ＣＹ治疗肿瘤，ＴＮＦ、ＣＹ序贯用药方法为最佳方案。

醉鱼草苷Ⅳ对H_(22)肝癌小鼠的抑瘤作用（英文）

[目的]观察醉鱼草苷Ⅳ对H22肝癌小鼠的体内抑瘤作用。[方法]取H22肝癌细胞接种于小鼠右腋皮下,H22肝癌小鼠随机分为5组:模型组、醉鱼草苷Ⅳ高、中、低(1.00、0.50、0.25 mg/kg)3个剂量组和阳性药(CTX,20.0 mg/kg)对照组。每组10只,治疗期间记录各组小鼠的体重变化并观察小鼠生存状态,连续腹腔注射10天后。于第11天观测抑瘤率、脾腺指数、胸腺指数,同时进行血清中SOD、MDA、GGT和AKP含量检测。[结果]与模型组比较,醉鱼草苷Ⅳ高、中剂量组对小鼠H22移植性肝癌均有显著的抑瘤作用(P<0.01),抑瘤率分别为56.96%,50.63%。与模型组相比,醉鱼草苷Ⅳ高剂量组小鼠血清SOD活性增加(P<0.05),醉鱼草苷Ⅳ各剂量组血清MDA、GGT和AKP水平均降低(P<0.01);除SOD活性之外,环磷酰胺组与模型组比较无显著差异。[结论]醉鱼草苷Ⅳ在体内具有抗肝癌作用,其机理可能和机体的抗氧化能力有关系,有待于进一步研究。

西黄丸对H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制研究

目的:研究西黄丸对H_(22)荷瘤小鼠的抑制作用及相关作用机制。方法:采用H_(22)荷瘤小鼠模型分析西黄丸对肿瘤抑制作用;流式细胞仪测定血中CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)细胞含量;酶联免疫法测定相关因子含量。网络药理学预测其抑制肝癌的相关通路,并用蛋白免疫印迹法(Western blot)对关键蛋白靶点验证。结果:西黄丸给药组可降低H_(22)荷瘤小鼠的肿瘤重量(P<0.05);升高胸腺指数、脾脏指数(P<0.05),升高CD4^(+)/CD8^(+)水平(P<0.05);升高IL-2、IFN-γ的水平,降低IL-6、IL-10的水平(P<0.05)。网络药理学筛选得到77个重要有效成分,28个核心靶点,Western blot验证显示,西黄丸对PI3K-Akt-MMP9通路关键蛋白靶点有显著调节作用。结论:西黄丸具有抑制肝癌移植瘤的作用,纠正患瘤小鼠的免疫紊乱,其作用机制与多成分多靶点的整合调节效应有关。

青蒿琥酯纳米胶束制备及其体内药动学、抗肿瘤活性研究

目的制备青蒿琥酯纳米胶束,并考察体内药动学和抗肿瘤活性。方法以聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-聚组氨酸(mPEG-PLA-PHis)为载体制备纳米胶束,单因素试验结合Box-Behnken响应面法优化处方,测定包封率、载药量、沉降率、粒径、Zeta电位、体外释药。12只H_(22)荷瘤小鼠随机分为2组,分别尾静脉注射给予青蒿琥酯注射液和青蒿琥酯纳米胶束(1 mg/kg),于不同时间点采血,HPLC法测定青蒿琥酯血药浓度,计算主要药动学参数。36只H_(22)肝癌荷瘤小鼠随机分为6组,即模型组(生理盐水)、阳性组(20 mg/kg环磷酰胺)、青蒿琥酯注射液组(30 mg/kg)及青蒿琥酯纳米胶束低、中、高剂量组(10、20、30 mg/kg),末次给药3 d后记录体质量和瘤重,计算抑瘤率。结果最佳处方为mPEG-PLA-PHis与青蒿琥酯比例10.18∶1,青蒿琥酯质量浓度0.48 mg/mL,水化时间0.96 h,包封率、载药量、沉降率、粒径、Zeta电位分别为(94.27±1.26)%、(8.26±0.18)%、(4.19±0.20)%、(65.14±4.96)nm、-(17.64±1.06)mV。纳米胶束在弱酸性介质中的累积释放度高于在弱碱性介质中,具有pH敏感性。与注射液比较,纳米胶束t_(1/2)、MRT延长(P<0.01),CL降低(P<0.01),AUC_(0~t)升高(P<0.01);与模型组比较,青蒿琥酯纳米胶束不同剂量组小鼠体质量无明显变化(P>0.05),瘤重下降(P<0.05,P<0.01),以中剂量组更明显,抑瘤率达55.40%。结论青蒿琥酯纳米胶束包封率较高,体内抗肿瘤活性较强。

贞芪扶正颗粒联合奥沙利铂对H_(22)荷瘤小鼠的抑制效果及对MyD88、NF-κB p65的影响

目的:观察贞芪扶正颗粒联合奥沙利铂对H_(22)移植瘤的抑制效果并探讨肿瘤相关髓样分化因子(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核因子-κB(Nuclear Factor-κB p65,NF-κB p65)、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的调节机制。方法:72只KM小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、奥沙利铂10 mg/kg组、贞芪扶正颗粒0.026、0.013、0.007 g/kg+奥沙利铂10 mg/kg组,建立H_(22)荷瘤小鼠模型,经药物干预10 d后,剥取瘤体,进行瘤体测量、称重和抑瘤率分析;HE染色法观察瘤体组织形态学变化;Elisa法测定血清中TNF-α蛋白含量;WB和qPCR法分别检测瘤体中MyD88、NF-κB p65蛋白和mRNA水平。结果:与奥沙利铂10 mg/kg组相比,奥沙利铂10 mg/kg+贞芪扶正颗粒0.026、0.013、0.007 g/kg组瘤体体积和体质量均明显减小(P<0.05或P<0.01),抑瘤率上升;HE染色观察发现各治疗组坏死肿瘤细胞增多、细胞核碎裂并消失,其中0.026 g/kg组可见纤维组织增生;血清中TNF-α水平显著增高(P<0.01),瘤体组织中MyD88、NF-κB p65蛋白和mRNA水平显著下调(P<0.05),且呈现贞芪扶正颗粒浓度剂量依赖性关系。结论:贞芪扶正颗粒具有促进奥沙利铂抑制H_(22)移植瘤增长的作用,其分子机制可能与调节MyD88、NF-κB p65和TNF-α水平有关。