口腔癌中人乳头瘤病毒16型和Ha-ras癌基因点突变的研究

目的 检测口腔癌中的人乳头瘤病毒 ( HPV) 16型 DNA和 Ha- rar癌基因的点突变 ,探讨HPV16型和 Ha- ras癌基因的点突变与口腔癌之间的关系。方法 应用多聚酶链反应 ( PCR)技术扩增HPV16DNA和 Ha- ras癌基因相关片段 ,分别采用 2 %琼脂糖凝胶电泳和限制性片段长度多态性分析( RFL P) ,检测口腔癌中的 HPV16DNA和 Ha- ras癌基因第 12位密码子的点突变。结果 在 17例口腔癌组织中 ,6例 ( 35 .5 % )组织 HPV16DNA阳性 ,5例 ( 2 9.4% )组织 Ha— ras癌基因发生点突变 ,其中 2例组织 HPV16DNA和 Ha- ras癌基因点突变的检测均为阳性。结论 口腔癌的发生可能与 HPV16和Ha— ras癌基因的点突变有一定的关系。

以寡聚核苷酸为探针对癌基因Ha-ras点突变的测定

基因中一个核苷酸的改变(点突变)是原癌基因活化的途径之一。核苷酸序列分析表明,我们从胃癌细胞系中克隆出的癌基因Ha-ras,就是由于其编码区第35位核苷酸从鸟嘌呤(G)变为胸腺嘧啶(T)而被激活的。测定基因的点突变除了序列分析方法之外,还有比较简单、经济的寡聚核苷酸探针分子杂交等方法。

人Ha-ras基因中蛋白质特异结合DNA位点的鉴定

利用迁移率改变法和DNaseⅠ足纹法观察了Ha-ras癌基因5’端上游序列与特异结合蛋白的相互作用。用限制性内切酶XmaⅠ消化6.6kb Ha-ras基因得到约10个片段,进行3’-末端标记,与T24细胞核提取液反应,经低离子强度聚丙烯酰胺凝胶电泳,发现与蛋白质特异结合的416bp片段,位于Ha-ras基因5’-端上游1230—1646区域内,靠近转录起始点1660bp处(CAP位置)。另一个与蛋白质特异结合的389bp片段,位于转录起始点上游162—551处。

乳腺肿瘤组织Ha-ras基因蛋白表达与血清CA15-3水平的相关性及其临床价值

用免疫组化ＡＢＣ法和ＩＲＭＡ法分别检测了４２例乳腺癌和３０例良性乳腺病变患者组织中Ｈａ－ｒａｓ基因蛋白（ｒａｓＰ２１）的表达状况及血清ＣＡ１５－３值，结果恶性病变组织中ｒａｓＰ２１呈过度表达，ｒａｓＰ２１的表达与细胞的分化状态密切相关。不同淋巴结转移状况的乳腺癌患者，其血清ＣＡ１５－３差异呈显著性。ＣＡ１５－３水平的变化与ｒａｓＰ２１表达状况显著相关。提示血清ＣＡ１５－３水平为监测乳腺癌病情变化的良好指标，Ｈａ－ｒａｓ癌基因点突变的结果可能导致乳腺癌相关抗原的异常分泌。