毛细胞白血病经白细胞干扰素治疗后的超微结构观察

本文应用透射电镜观察1例毛细胞白血病,经用小剂量(1.5×10~4单位/日×27天)人白细胞干扰素治疗后的骨髓细胞超微结构改变,发现该药对毛细胞的损伤主要表现为核周间隙扩大,核膜崩解,糙面内质网扩大、泡状化及出现髓样结构等。对粒细胞系统及红细胞系统也有类似轻微改变。

EB病毒再激活过程中HLA优势基因型的分析

目的分析中国人群高频率的人类白细胞抗原(HLA)基因型及其所递呈EB病毒(EBV)蛋白表位序列。方法通过Net MHC软件分析预测并合成HLA能够递呈EBV蛋白表位的23种多肽,按照HLA表型HLA-A*2402、HLA-A*1101和HLA-B*4001分为3组。收集160名健康志愿者的外周血单个核细胞(PBMC),用3组多肽刺激PBMC,血液分析仪检测增殖,采用γ干扰素(IFN-γ)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测IFN-γ水平,并用流式细胞术检测CD8、白细胞介素17(IL-17)、CD40L、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、CD45RA、转录因子(Foxp3)的表达水平。结果在160例外周血样本中,对3组多肽刺激反应阳性数为61例,其中HLA-A*2402型阳性数为24例,阳性率为15%;HLA-A*1101型阳性数为34例,阳性率为21%;HLA-B*4001型阳性数为31例,阳性率为19%。阳性反应组外周血中CD8、IL-17、CD40L、TNF-α的表达水平显著高于阴性反应组,差异有统计学意义(P<0.05),而CD45RA、Foxp3的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论中国人群HLA-A*1101基因型在递呈EBV表位序列中占优势。

HLA- A0201、A1101和A2402限制性HBV抗原肽的虚拟预测与实验鉴定

目的:筛选和鉴定基因总频率>50%的3种人类白细胞抗原(HLA)(A0201、A1101和A2402)分子限制的乙型肝炎病毒(HBV)抗原T细胞表位肽。方法:利用6种在线T细胞表位肽预测数据库,针对乙肝病毒表面抗原、核心抗原、DNA多聚酶和X蛋白等4种抗原,虚拟筛选3种HLA-A分子限制的T细胞表位肽。从南京市第二医院检验科收集乙型肝炎住院患者的外周抗凝血,制备外周血单个核细胞,通过γ干扰素酶联免疫斑点法(IFN-γELISPOT)筛选出对任何一组混合多肽呈现特异T细胞反应的乙型肝炎患者;重新采集这些乙型肝炎患者的新鲜外周血,用IFN-γELISPOT法鉴定混合肽中单种抗原肽的免疫原性;并采用聚合酶链反应测序分型法对这些乙型肝炎患者进行HLA-A等位基因分型。结果:经鉴定具有免疫原性的HLA-A0201分子限制性HBV表位肽8种,A1101限制性HBV表位肽6种,A2402限制性HBV表位肽7种。结论:本研究筛选鉴定了3种HLA-A分子限制的4种HBV抗原的21种T细胞表位肽,其中11种未见报道,而且HLA-A1101分子限制性表位肽的免疫原性明显弱于HLA-A0201和A2402分子限制性表位肽。

三阴性乳腺癌人类白细胞抗原-G抑制T细胞免疫功能机制的研究

目的研究三阴性乳腺癌(TNBC)细胞中人类白细胞抗原-G(HLA-G)表达与T细胞活化发挥免疫抑制功能的机制。方法在三组乳腺癌细胞系(MDA-MB-231,HCC1937,MDA-MB-468)中,实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、Western blot检测并筛选出HLA-G高表达,纤维蛋白原样蛋白1(FGL1)、程序性死亡因子配体1(PD-L1)、唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素15(SIGLEC15)低表达的乳腺癌细胞系为HCC1937;将HCC1937细胞分为NC组(对照组)与KD组(敲减组),进行RNA干扰(RNAi)慢病毒载体构建并转染KD组细胞以敲减HLA-G基因,且进行验证。HCC1937细胞分别进行HLA-G抗体封闭/未封闭处理,Jurkat细胞分别进行CD3、CD28激活/未激活处理,两种细胞共培养分为8组:NC^(--)组、KD^(--)组、NC^(+-)组、KD^(+-)组、NC^(-+)组、KD^(-+)组、NC^(++)组和KD^(++)组;细胞划痕实验、MTT法、ELISA法分别检测各组细胞迁移率、增殖率以及细胞上清液的干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-2水平。结果RT-qPCR提示HCC1937细胞HLA-G基因敲减成功;KD^(++)组迁移率较NC^(++)组显著增高(P<0.05),但每对共培养组间细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05);KD^(++)组的IFN-γ浓度较NC^(++)组、NC^(-+)组显著降低(P<0.05),但每对共培养组间IL-2浓度差异无统计学意义(P>0.05)。结论TNBC细胞HLA-G可能促进活性T细胞分泌IFN-γ,HLA-G降低后IFN-γ抑制T细胞免疫功能,促进肿瘤转移。

国产精制人白细胞α－干扰素体外抗－HBV活性的测定

本研究利用ＨＢＶ体外细胞培养系统（２．２．１５细胞株），观察了国产精制人白细胞α－干扰素的体外抗－ＨＢＶ活性。结果显示：当精制人白细胞α－干扰素达到５Ｘ１０３单位／毫升时，能够明显降低２．２．１５细胞内及细胞培养上清中ＨＢＶＤＮＡ的含量，提示其能够抑制ＨＢＶ复制，具有一定体外抗．ＨＢＶ活性，可以在临床推广使用。但国产精制人白细胞α－干扰素对２．２．１５细胞分泌ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ未见明显抑制作用，其机理尚待进一步研究。