Digestive gland ultrastructure of the tunicate,Halocynthia roretzi(Ascidiacea:Pyuridae)in relation to function

Objective:To examine the glycogen storage and lipid digestion,as well as detoxification of the digestive gland of the tunicate,Halocynthia roretzi.Methods:Tunicates used in this study were collected from tunicate aquafarm located in Hansan Bay on the southern coast of Korea.Light and electron microscopy was performed.Results:The digestive gland was divided into the tubular and blind ampulla portions.Fine vacuolar granules were present,and lipofuscin granules were confirmed in the cytoplasm of the epithelia of the blind ampulla portion.Epithelial cells of the blind ampulla portion could be classified into three types.Conclusions:The results indicate that these three types of cells are involved in glycogen storage,lipid digestion and detoxification.

高温胁迫对真海鞘滤水、耗氧率和排氨率的影响

将在12℃条件下暂养的一、二和三龄体质量为(23.95±9.83)g、(68.95±23.84)g和(117.99±38.42)g的真海鞘(Halocynthia roretzi)分别驯化到16℃、20℃、24℃和28℃,升温幅度为1℃·h^(-1),饲养2 d后测定滤水率、耗氧率和排氨率,统计存活率。12℃为对照组。从各组中随机取6只真海鞘移入装有1 L海水的烧杯中,添加至终浓度为104 cells·mL^(-1)的三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum),保持通气,每隔30~60 min采集水样测定滤水率、耗氧率和排氨率,研究高温对真海鞘滤水率、耗氧率和排氨率的影响,并分析耗氧率/排氨率比值(O/N)。结果表明,滤水率、耗氧率、排氨率和O/N的变化范围分别为1.33~5.51 mL·g^(-1)·h^(-1)、5.32~29.24μg·g^(-1)·h^(-1)、0.04~0.41μg·g^(-1)·h^(-1)和62.50~122.93。随温度升高,真海鞘的滤水率呈倒钟形变化,25.64℃时达最大值,耗氧率和排氨率持续升高,O/N显著下降;在20℃后呈现变缓或略有提升的趋势,表明真海鞘在20~24℃极可能存在代谢的转变点。真海鞘滤水率(FR)、耗氧率(R_(O))、排氨率(R_(N))和O/N(R_(O/N))与温度(t)拟合的相关方程分别为:FR=-0.0139t^(2)+0.7128t-4.7728,r^(2)=0.5401;R_(O)=1.0492t-6.2423,r^(2)=0.8268;R_(N)=0.0169t-0.1703,r^(2)=0.8574;R_(O/N)=-69.2940ln(t)+292.9675,r^(2)=0.8900。综上所述,合理养殖真海鞘的温度上限应在24℃左右。

真海鞘根索和被囊乙醇提取物抑癌活性成分的分离及其作用机制研究

为了获得高效、毒副作用小的抗肿瘤生物活性成分,本研究以真海鞘(Halocynthia roretzi)根索及被囊为原材料,通过乙醇提取方法筛选具有抗肿瘤活性的天然产物。真海鞘根索被囊乙醇提取物采用硅胶柱层析分离后得到具有癌细胞毒性的有效组分ST-Ⅱ。随后采用制备级硅胶层析板继续分离得到9个组分,细胞增殖实验表明其中的ST-Ⅱ-Ⅱ组分能高效抑制多种人源癌细胞的增殖,而对正常细胞(L929)无明显细胞毒性。采用制备液相分离ST-Ⅱ-Ⅱ得到9个组分,其中ST-Ⅱ-Ⅱ-Ⅸ组分具有显著癌细胞毒性。^(1)H NMR谱,^(1)H-^(1)H COSY谱初步推测ST-Ⅱ-Ⅱ-Ⅸ为结构新颖的酯类化合物。为了阐释真海鞘根索被囊乙醇提取物的作用机制,本研究中发现ST-Ⅱ-Ⅱ处理后的HepG2细胞的凋亡比例较对照组显著升高,同时其活性氧水平显著提高,而线粒体膜电位则显著降低,促细胞凋亡蛋白Bax和抑癌蛋白p53表达水平显著增加,抑制细胞凋亡蛋白Bcl-2的表达水平显著降低,表明ST-Ⅱ-Ⅱ通过线粒体凋亡通路抑制HepG2细胞增殖。本研究结果表明真海鞘根索和被囊的乙醇提取物通过线粒体凋亡通路可以高效抑制癌细胞增殖,且毒副作用小,具有进一步开发为抗肿瘤药物的潜能。

真海鞘营养成分的分析与评价

对真海鞘Halocynthia roretzi可食部的基本成分以及氨基酸、矿物元素和脂肪酸含量进行了分析。结果表明:真海鞘可食部蛋白质、粗脂肪、灰分、总糖含量(均为质量分数,下同)分别为39.60%、6.53%、25.79%、9.19%;氨基酸含量为29.50%,必需氨基酸占氨基酸总量的51.40%,特别是呈味氨基酸占氨基酸总量的36.37%,各必需氨基酸的氨基酸平均得分为90.0±15.7;真海鞘可食部含有丰富的矿物元素Na、Mg、Ca、P、Fe、Zn、Cu、Co、V、Mn,特别是Zn的含量(730.7 mg/kg)远高于其它海洋动物;真海鞘可食部富含必需不饱和脂肪酸,可以作为n-3系列不饱和脂肪酸的来源。

真海鞘壳化学成分分离及其浸膏抑制人肝癌细胞HepG2活性的研究

采用硅胶柱色谱及薄层制备色谱等手段从真海鞘(Halocynthia roretzi Drasche)壳中分离纯化出了3种化合物。对所获得的化合物经过理化性质、波谱分析和文献对照的方法进行了结构鉴定。同时,采用CCK-8方法对75%EtOH浸提所获得的真海鞘壳浸膏进行了抑制人肝癌细胞HepG2生长测试。结果表明,从真海鞘壳中分离得到3种化合物分别为:Diethyl 24-[(Z)-3-methy-1-hexenyl]-heptatetracontanedioate(化合物1)、胆甾醇(化合物2)和6-(2,,3,-Dihydroxy-4,-hydroxymethyl-tetrahydro-furan-1,-yl)cyclopentadiene[c]pyrrole-1,3-diol(化合物3)。体外测试表明,75%EtOH浸提所获得的真海鞘壳浸膏具有显著抑制人肝癌细胞HepG2生长的活性,可作为潜在的抗肿瘤药物进行进一步研究。

黄海养殖真海鞘营养成分分析与评价

目的:测定黄海养殖真海鞘外皮和内囊的营养成分,对比不同季节营养成分含量的变化,并进行营养价值的评价。方法:采用国标法测定真海鞘外皮和内囊中水分、灰分、粗脂肪和蛋白质含量;采用常规方法测定总糖、氨基酸、脂肪酸和矿物质含量。结果:10月真海鞘粗脂肪、蛋白质、总糖的含量高于7月的含量。检测到17种氨基酸,内囊中谷氨酸含量最高,外皮中天冬氨酸含量最高。检测到多种不饱和脂肪酸,不同时间真海鞘中脂肪酸的种类和含量都有所不同,检测到Fe、Zn、Cu、Mn等多种微量元素,Pb、Hg等含量甚微。结论:营养评价表明真海鞘营养价值高,具有很好的开发前景。

真海鞘中胶原的提取及理化性质研究

为推动海洋生物质资源可持续开发,并探索陆生胶原蛋白的可替代来源,以野生真海鞘为原料,采用酸酶结合法提取胶原蛋白,并与以牛跟腱为原料提取的胶原进行对比,分析探讨海洋生物源胶原的应用潜力。通过凝胶电泳、紫外吸收光谱、氨基酸组成分析、Zeta电位测试、差示扫描量热分析、红外吸收光谱和扫描电镜观察等手段对其结构进行系统研究。结果表明,所提取的真海鞘胶原在120 ku左右有2条α链(α1和α2),在200 ku左右有一条β链,紫外吸收峰在230 nm处,符合Ⅰ型胶原特征且胶原三螺旋结构保留完整。真海鞘胶原与牛跟腱胶原相比含有更多的谷氨酸等呈味氨基酸,约占氨基酸总量的43.07%。真海鞘胶原等电点约为5.9,热变性温度为28.08℃。扫描电镜结果显示真海鞘胶原海绵内部呈多层聚集、疏松多孔、表面光滑的片状交织结构,与牛跟腱胶原类似。真海鞘胶原有望成为陆生胶原的特色替代来源,在食品、医药及化妆品领域有良好的应用潜力。

黄海养殖真海鞘不同部位中金属元素分布特征及评价

通过微波消解前处理技术与原子吸收光谱法结合测定黄海养殖真海鞘外壳、内囊、内脏、生殖器以及可食部中As,Pb,Cd,Se,Cr,Sn,Li,Ni,Fe,Mn,Cu,Zn,Ca和Sr共14种微量元素含量。研究结果显示:(1)不同金属元素在真海鞘不同部位的含量是不同的,其中Fe和Ca元素含量最高,其次是Zn,Cu,Mn和Sr元素,有毒重金属元素As,Pb和Cd元素含量较少,远低于国家水产品有毒有害物质的标准;(2)成人和儿童食用真海鞘,每日摄入As,Pb,Cd和Se等元素的含量均低于每日最大摄入量的参考值。