中度嗜盐菌Halobacillus sp. LY5的分离、鉴定及其胞外脂肪酶特性研究

利用吐温平板筛选法，从山西运城盐湖中分离获得一株高产胞外脂肪酶的中度嗜盐菌。通过形态学观察，生理生化特征及16SrRNA序列分析，初步鉴定并命名该菌为Halobacillus sp．LY5。酶学性质研究表明，该脂肪酶可在较宽温度范围内（30℃～90℃）保持高活力；在NaCl浓度为10％的反应缓冲体系（pH值8.0）中，温度为50℃，酶活性最佳。金属离子除Fe^3＋外，对酶活性均具有明显的抑制作用；而EDTA和SDS亦可不同程度的抑制酶活性。结果表明LY5所产脂肪酶可能存在某些特殊性质。

嗜盐脂肪酶产生菌的筛选及其粗酶性质

从内蒙古锡林浩特地区盐湖菌种样品分离获得一株嗜盐脂肪酶高产菌，结合生理生化试验和16SrDNA序列分析结果，鉴定并命名为Haloterrigena thermotoleransZ4。该菌最适生长NaCI浓度为3．5mol／L，最高生长温度为60℃，属于嗜盐耐热古生菌。粗酶性质研究表明，金属离子（Ba^2＋、Fe^2＋、Cu^2＋）对酶有激活作用，酶活不同程度的提高了20％～30％；该酶受EDTA的抑制，酶活下降了20％，受PMSF的完全抑制。该酶对NaCl有较高的依赖专一性，至少需要0．5mol／LNaCl维持活性并且高浓度NaCl可以提高其耐热水平。醇类物质对于提高酶的热稳定性有一定作用，丙三醇效果最好。该酶对短链底物对硝基苯酚丁酸酯（p—NPB）的最适水解条件为：pH8．0、70℃、3．5mol／LNaCl：而对长链底物对硝基苯酚十六酸酯协NPP）的最适水解条件为：oH8．0、80℃、2．5mol／LNaCl。

极端嗜盐古菌TRM51^T的多相分类研究

从新疆硝尔库勒盐湖分离纯化到一株极端嗜盐古菌TRM 51T,其菌落颜色为白色/粉红,细胞为杆状,能运动,革兰氏染色为阴性,生长温度范围是28～50℃(最适温度37℃),NaCl浓度生长范围是2.1～4.3 M(最适浓度为3.1 M),Mg2+生长范围是0.03～1.0 M(最适0.3 M),pH生长范围5.5～9.0(最适pH8.0)。细胞可在蒸馏水中裂解,避免细胞裂解的最低NaCl浓度为8%(w/v)。TRM 51T主要的极性脂是PG(磷脂酰甘油)、PGP-Me(磷脂酰甘油磷酸甲基酯)、TGD-2(葡糖苷甘露糖苷葡糖二醚),基于16S rDNA基因的系统发育分析显示,菌株TRM 51T与相近属Halopiger的成员相似性仅为94.2%～95.3%,与Haloterrigena类群的相似性为92.4%～94.6%,菌株TRM 51T基因组DNA的G+C mol%为63.2mol%。多相分类结果表明,菌株TRM 51T不能归入嗜盐古菌科的已描述属,建议成立新属级的新分类单元。

一株产酯酶中度嗜盐菌的筛选及酶学性质的研究

[目的]研究大庆采油厂附近盐碱地产酯酶的中度嗜盐菌菌株的形态和生理生化特点及其所产胞外酯酶的性质。[方法]利用平板筛选法分离得到一株产酯酶中度嗜盐菌,对其进行形态、生理生化和分子水平的鉴定,并对其产生的酯酶的部分酶学性质进行研究。[结果]初步判断产酯酶的菌株Z01为Gracilibacillus saliphilus strain YIM 91119;对酯酶粗酶液酶学性质的研究结果显示其最适反应温度为45℃,最适反应pH为8.5,酶反应最适NaCl浓度为10%;所产酯酶在50℃以下时稳定性好,对pH的碱耐受性好,对小于15%浓度的盐溶液耐性较好。[结论]分离得到了一株产酯酶活性较高的中度嗜盐菌。

一株产脂肪酶嗜盐菌的鉴定及耐盐机理

从采自内蒙古锡林浩特地区盐湖的样品中筛选到产脂肪酶嗜盐菌JNPH-3,该菌株可在含有1.5～5mol/L NaCl的培养基上生长,最适生长温度45℃,最适pH7～9.5.经形态学分析、生理生化实验及16SrDNA鉴定,JNPH-3菌株为Halorubrum aidingense,属于极端嗜盐菌.JNPH-3菌株在生长过程中专一性依赖Na+,对Cl-依赖性较小,K+浓度变化对菌体生长无明显影响.高效液相色谱分析表明,JNPH-3菌株在液体复合培养基中能够产生四氢嘧啶,且与环境中盐浓度呈负相关,说明JNPH-3体内除存在产生四氢嘧啶的机制来维持渗透平衡,还有其它机制来维持细胞正常生长.

产脂肪酶中度嗜盐菌ZF-03的分离鉴定与酶学性质研究

[目的]研究盐碱地产脂肪酶的中度嗜盐茵菌株的形态和生理生化特点及其所产胞外脂肪酶的性质。[方法]利用平板筛选法分离得到一株产脂肪酶中度嗜盐菌，对其进行形态、生理生化和分子水平的鉴定，并对其产生的脂肪酶的部分酶学性质进行研究。[结果]产脂肪酶的菌株命名为Nesterenkoniahalobiasp．ZF-03。对脂肪酶粗酶液酶学性质的研究结果显示该脂肪酶的最适反应温度在46～50℃之间，温度小于70℃时的稳定性较好；最适pH为8．5，在pH7．5～9．5范围内，相对酶活性较高，酶具有良好的稳定性；反应的最适NaCl浓度为0—3％，在0—5％NaCl浓度下有很好的稳定性。[结论]分离得到了一株产脂肪酶活性较高的中度嗜盐茵。