杭白菊和杭黄菊挥发油的GC-MS分析

通过气相色谱-质谱联用仪检测杭白菊和杭黄菊的挥发油化学成分,分别从杭白菊和杭黄菊挥发油中分离鉴定出59种和65种化合物,其主要成分为单萜、倍半萜及其含氧衍生物。

不同品种杭白菊中酚类物质含量和清除自由基活性的比较

4种桐乡产杭白菊及黄菊和野菊，分别用乙醇－水体系进行热回流提取，用比色法测定醇提物中总酚和总黄酮含量，并用化学发光法检测其清除活性氧自由基的能力。结果表明不同品种间含量存在较大差异，总酚和总黄酮含量（以菊花干基计）最高的是异种大白菊，分别为 9.76％和 4.46％；最低的是黄山种野菊，分别为 3.21％和 1.99％。不同菊花均显示了良好的清除活性氧自由基的活性。清· OH和 O_2·－的 IC 50分别在 0.54～ 1.98mg/ml和 24.2～ 54.5μ g/ml之间。其中清 O_2·－活性最强是大洋菊，最弱是软梗小洋菊；而清· OH能力最强为早小洋菊，最弱为异种大白菊。结果表明，菊花中酚类物质的含量高低与抗自由基活性强弱无明显的对应关系。

控释尿素与尿素配施对杭白菊栽培土壤生物学特性的影响

【目的】尿素和控释尿素是杭白菊栽培中常用氮肥,其对杭白菊产量和品质的影响已多有研究,但未见尿素与控释尿素配施对杭白菊栽培田土壤特性的影响研究。【方法】采用大田试验,以施氮量为120 kg/hm2、P5O2106kg/hm2、K2O 189 kg/hm2为基础,设:对照1不施氮肥(CK1);适量施氮肥仅施尿素,50%基施,15%7月15日追施,25%8月15日追施,10%10月15日追施(T1);尿素与控释尿素配施,基施为控释尿素(150 d)与尿素等比例混合基施,施用量占总施氮量的50%,追施为控释尿素(90 d)与尿素等比例混合8月15日追施,施用量占总施氮量的50%(R1)。减量施肥施N量为90 kg/hm2、P5O280 kg/hm2、K2O 142 kg/hm2,也设3个处理:对照不施氮肥(CK2);减量仅施尿素(T2);减量尿素与控释尿素配施(R2)。减量施肥方式同适量施肥。【结果】1)适量施肥土壤有效氮含量高于减量施肥,控释尿素与尿素适量配施、减量配施的土壤有效氮含量分别高于仅施尿素的33.55%、120.35%;2)杭白菊生育期内,适量施肥土壤细菌、真菌数量高于减量施肥。各处理土壤细菌、放线菌数量均呈单峰曲线,细菌最大值出现在7月,放线菌出现在8月。不同适量施氮方式土壤真菌数量呈单峰曲线,减量施肥呈双峰曲线。适量控释尿素与尿素配施土壤细菌、真菌数量比仅施适量尿素分别增加10.39%、39.83%,比减量施肥分别增加46.44%、51.81%;仅施尿素时适量施肥土壤放线菌数量比减量施肥增加127.84%,尿素与控释尿素不同配施量土壤放线菌数量差异不显著;3)减量施肥控释尿素与尿素配施、仅施尿素土壤过氧化物酶活性比相同施肥方式适量施肥分别增加76.79%,164.14%;相同施肥量仅施尿素土壤多酚氧化酶活性高于控释尿素与尿素配施。仅施尿素时适量施肥土壤磷酸酶活性高于减量施肥,尿素与控释尿素配施则反之;施肥方式相同减量施肥土壤脲酶活性高于适量施肥。【结论】适量施肥有利于提高土壤有效氮含量,增加土壤细菌、放线菌数量,控释尿素与尿素配施效果优于仅施尿素;施适量尿素土壤放线菌数量高于减量施肥,控释尿素与尿素配施对土壤放线菌数量影响不显著;控释尿素与尿素适量配施可降低土壤多酚氧化酶和过氧化物酶活性,因此本实验条件下,适量控释尿素与尿素配施有利于维持土壤良好的生态环境。

不同加工方法杭白菊的红外谱图分析

目的:考察不同加工方法杭白菊的红外光谱,找出红外谱图的特征,以期能够指导实际生产。方法:利用现代红外光谱技术,结合中药材红外光谱三级鉴定理论,在对谱图进行小波消噪的基础上,分析不同加工方法杭白菊的红外原谱、二阶导数谱及二维相关谱,提取红外谱图特征。结果:不同加工方法(硅胶干燥、蒸晒、微波干燥、气流微波干燥)杭白菊的红外原谱、二阶导数谱及二维相关谱谱图的特征明显。气流微波干燥与传统蒸晒法谱图特征性接近。结论:红外光谱技术可以从宏观上区别不同加工方法的杭白菊,可用来作为一种指导杭白菊加工生产的宏观分析方法。

三种菊花的表面形态比较鉴别

目的:鉴别中国著名传统中药材菊花Flos Chrysanthemi各品种。方法:以杭白菊为重点,对其各部组成的表面形态进行比较研究。结果:基本弄清了杭白菊各部表面形态,并且发现虽然各品种菊花在表面形态上基本相似,但在个别特征上仍有差别。结论:本实验结果可以作为杭白菊及其它品种菊花的鉴别依据。

河南引种杭白菊主要有效成分的比较

通过考察河南3产地杭白菊主要有效成分,明确河南引种杭白菊的内在质量。方法:分别随机采集河南3产地引种杭白菊(大洋菊)第1茬头状花序,测定其主要有效成分进行比较。结果:河南3个产地采用蒸青烘干杭白菊(大洋菊)药材中绿原酸、木犀草苷、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸、总黄酮、多糖、可溶性蛋白、微量元素含量均存在显著差异,其中绿原酸、木樨草苷、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸的含量均远高于中国药典(2015版一部)规定的标准。结论:产地对河南引种杭白菊(大洋菊)的主要有效成分含量有显著的影响。

杭白菊的横切面组织形态及与其它4种菊花的比较研究

目的:鉴别著名传统中药材菊花Flos chrysanthemi各品种。方法:以杭白菊为重点,对其各部组成的横切面进行研究,并就舌状花花瓣、总苞片的横切面与其它4(或3)种菊花进行比较研究。结果:基本弄清了杭白菊各部组成的横切面形态,并发现各品种菊花在横切面组织上有较大差异。结论:本实验结果可为杭白菊及其它几种菊花的鉴别提供较系统的依据。

基于高分辨率熔解曲线分析技术鉴别杭白菊和黄山贡菊的初步研究

杭白菊和贡菊同为药茶两用的药材,种植较多,种质相近。然而两者保健功效、药用成分各有不同,饮用或入药时需加以区分,传统鉴别方法主观性强,往往难以精确区分。文章提出一种中药材分子鉴定方法,采用高分辨率熔解曲线(High resolution melting,HRM),并结合DNA条形码ITS2序列对杭白菊和黄山贡菊进行快速鉴别。以杭白菊及黄山贡菊干燥药材为样品,ITS2序列作为DNA条形码,获得ITS2序列的高分辨率熔解曲线;建立检测鉴定杭白菊与黄山贡菊的HRM-荧光定量PCR方法和杭白菊和黄山贡菊高分辨率熔解曲线模型;在HRMPCR条件下,建立杭白菊和黄山贡菊的标准化高分辨率熔解曲线图、高分辨率熔解曲线衍生差异图,并应用该方法检测市售杭白菊和黄山贡菊共10份样品。结果表明:利用高分辨率熔解曲线技术能够有效地区分开杭白菊和黄山贡菊,为进一步应用高分辨率熔解曲线分析技术鉴定中药材提供理论基础和技术依据。

应用ISSR技术鉴定杭白菊对叶斑病的抗性

为了抗叶斑病菊花品种的筛选和鉴定,利用ISSR分子标记技术从分子水平对20个菊花(Chrysanthemum morifolium‘Hangbaiju’)材料的遗传变异程度进行分析。结果显示,从100条ISSR引物中筛选出10条引物进行PCR扩增和聚类分析,共获得168条清晰可辨谱带,其中多态性带135条,多态位点百分率为80.36%,多态性较高。POPGENE32软件计算结果显示,20个菊花材料平均有效等位基因数为1.549 1,平均Nei’s基因多样性指数为0.312 9,平均Shannon信息指数为0.458 8。UPGMA法将20个菊花材料分成3个类群。ISSR聚类情况与菊花对叶斑病的田间抗病性有明显的相关性,表明ISSR分子标记技术可用于菊花育种中作为早期筛选抗叶斑病品种的一种有效手段。

不同产地杭白菊中挥发油成分的比较

目的:比较不同产地杭白菊挥发油成分的差异。方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,用GC-MS分析5个不同产地杭白菊挥发油成分的异同。结果:浙江桐乡杭白菊的挥发油提取率最高(0.50%),其次是山西芮城(0.42%)、江苏射阳(0.40%)、湖北麻城(0.20%);5个产地杭白菊挥发油中主要成分均为烯烃、醇酚、醛酮、酯类、龙脑、樟脑和含氧衍生物;杭白菊不同栽培品种中,小白菊与湖菊挥发油成分较接近,大白菊与湖菊成分明显不同;三个不同引种产区的小白菊挥发油成分接近。结论:杭白菊栽培品种、栽培环境和加工方法的不同,都会使其挥发油成分出现差异。

明钼菊抗晶状体氧化损伤的实验研究

目的:观察明钼菊对实验性晶状体的影响,研究其抗氧化损伤作用,并探讨其作用机制。方法:将12只(24眼)新西兰白兔晶状体随机分为对照组、Fenton组、杭白菊组和明钼菊组,每组各3只(6眼)。采用Fenton反应复制兔晶状体氧化损伤模型,在显微镜下观察各组晶状体的混浊程度,用双缩脲法检测可溶性蛋白(soluble protein,SP),羟胺法检测超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD),二硫代二硝基苯甲酸法检测谷胱甘肽(glutathione,GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxi-dase,GSH-Px)。结果:显微镜下显示:明钼菊组、杭白菊组的晶状体混浊程度明显轻于Fenton组。明钼菊组、杭白菊组晶状体中酶性抗氧化剂SOD、GSH-Px的活性和非酶性抗氧化剂GSH的含量明显高于Fenton组,差异具有统计学意义(P <0.05);明钼菊组晶状体中酶性抗氧化剂SOD、GSH-Px的活性和非酶性抗氧化剂GSH的含量明显高于杭白菊组,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论:明钼菊能有效抗晶状体氧化损伤,其效用与明钼菊的"钼"含量成正相关,明钼菊通过微量元素"钼"对眼睛的营养而发挥抗晶状体氧化损伤作用。

经典恒温法预测杭白菊和贡菊的有效期

目的:研究绿原酸、木犀草苷、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸在杭白菊和贡菊中的稳定性,并预测杭白菊和贡菊的有效期。方法:采用高效液相色谱法测定绿原酸、木犀草苷、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸在杭白菊和贡菊中的含量,在恒温条件下进行加速试验,以获得恒温下的动力参数。根据Arrhenius指数定律预测杭白菊和贡菊在室温下的有效期。结果:在室温条件下杭白菊贮存期为2.25年;贡菊贮存期为4.31年。结论:高温不利于杭白菊和贡菊的稳定,需置于避光阴凉处保存。

基于EPG技术分析杭菊两主栽品种对三种菊蚜抗性及其相关抗性物质

为比较杭白菊主栽品种早、晚小洋菊对菊小长管蚜Macrosiphoniella sanborni、棉蚜Aphis gossypii、桃蚜Myzus persicae的抗性,通过刺吸电位技术(electrical penetration graph,EPG)研究菊蚜在菊顶叶上刺吸行为,并检测了菊顶叶主要化合物。结果表明:在晚小洋菊上,菊小长管蚜的E1、E2波平均持续时间4.31、3.47 min,分别短于在早小洋菊上的4.63、3.75 min;棉蚜、桃蚜的E1、E2波平均持续时间分别为4.32、4.72 min和4.92、4.64 min;3种蚜虫的平均刺探次数均大于在早小洋菊上的平均刺探次数。聚类分析结果显示,2个主栽品种之间抗性存在差异。早小洋菊顶叶平均可溶性糖和可溶性蛋白含量分别为2.71 mg/g和25.36 mg/g,均高于晚小洋菊;早小洋菊顶叶总酚含量为0.24 mg/g,显著低于晚小洋菊;早、晚小洋菊总黄酮含量分别为3.46 mg/g和3.37 mg/g。早小洋菊顶叶可溶性糖、可溶性蛋白含量基本上与每种菊蚜的E1、E2波持续时间显著正相关,总酚含量、总黄酮含量与每种菊蚜的E1或E2波持续时间显著负相关。推测早小洋菊对于菊长管蚜的抗性稍弱于晚小洋菊,2种杭白菊对棉蚜或桃蚜的抗性相当,且菊叶中的这4种物质含量与抗蚜性相关。